來(lái)曲唑和脫氫表雄酮建立腎虛痰濕特征信息肥胖PCOS大鼠動(dòng)物模型的對(duì)比研究?

徐曉娟，黃映紅，姚莉娟，鄧琳雯，李宛靜，王秋香，何蘊(yùn)良

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)，成都610075;2.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，成都610072)

來(lái)曲唑和脫氫表雄酮建立腎虛痰濕特征信息肥胖PCOS大鼠動(dòng)物模型的對(duì)比研究?

徐曉娟1，黃映紅1，姚莉娟1，鄧琳雯2，李宛靜1，王秋香1，何蘊(yùn)良1

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)，成都610075;2.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，成都610072)

目的:對(duì)比來(lái)曲唑和脫氫表雄酮(Polycystic ovarian syndrome，DHEA)分別加高脂乳劑制作SD雌性大鼠腎虛痰濕特征信息肥胖PCOS動(dòng)物模型的優(yōu)缺點(diǎn)。方法:觀察大鼠動(dòng)情周期、體質(zhì)量增加幅度，測(cè)定血清性激素、血脂、相關(guān)臟器指數(shù)水平和卵巢HE染色。結(jié)果:來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠體質(zhì)量增加幅度、FSH、LH均極顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組，LDL、TC、TG均顯著高于余3組;DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠E2、T均極顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組，TC、TG、LDL均極顯著高于其余3組;來(lái)曲唑模型組、來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組、DHEA模型組、DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠卵巢HE染色均呈現(xiàn)多囊樣改變。結(jié)論:來(lái)曲唑加高脂乳劑誘導(dǎo)是研究符合腎虛痰濕特征信息肥胖PCOS發(fā)病機(jī)制較理想的動(dòng)物模型，DHEA加高脂乳劑誘導(dǎo)適用于血脂異常、雄激素和雌激素升高的不肥胖PCOS模型。

肥胖多囊卵巢綜合征;來(lái)曲唑;脫氫表雄酮;高脂乳劑;動(dòng)物模型

多囊卵巢綜合征(Polycystic ovarian syndrome，PCOS)是以排卵障礙、高雄激素血癥和(或)胰島素抵抗(IR)為特征的臨床證候群，常始于青春期，其發(fā)病率高、發(fā)病原因多樣、制作該模型方法眾多，但至今尚無(wú)針對(duì)該病表現(xiàn)的相關(guān)特征萬(wàn)能模型［1］。李琴華等［2］認(rèn)為，38%～88%的PCOS患者合并體質(zhì)量超標(biāo)或肥胖，肥胖型PCOS患者的代謝綜合征發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)明顯增加。肥胖型PCOS以其高發(fā)性、異質(zhì)性、難治性及終身性成為世界各國(guó)婦科臨床和實(shí)驗(yàn)亟待研究的難題和熱點(diǎn)。中醫(yī)婦科臨床對(duì)肥胖PCOS辨證為腎虛痰濕證型，其臨床特征為月經(jīng)延后或不潮、形體肥胖、多毛、舌苔白膩;現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢查有B超示不排卵和多個(gè)小卵泡，血清性激素指標(biāo)中T、LH均升高，血脂指標(biāo)多項(xiàng)升高，或伴有胰島素抵抗、不孕癥等特點(diǎn)。探索符合中醫(yī)臨床辨證腎虛痰濕型特征的肥胖PCOS動(dòng)物造模方法，為中醫(yī)臨床治療該病提供了實(shí)驗(yàn)研究的動(dòng)物模型，對(duì)進(jìn)一步深入探討肥胖PCOS的發(fā)生發(fā)展和治療具有深遠(yuǎn)意義。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

42 d齡清潔級(jí)SD雌性大鼠40只，體質(zhì)量100～120 g，購(gòu)于成都達(dá)碩生物科技有限公司(生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(川)2013-24，生產(chǎn)批號(hào)0018284)。采用隨機(jī)數(shù)字表分為空白對(duì)照組、高脂模型組、來(lái)曲唑模型組和來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑模型組每組各10只;選23 d齡清潔級(jí)SD雌性大鼠40只，體質(zhì)量60～80 g，購(gòu)于成都達(dá)碩生物科技有限公司(生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(川)2013-24，生產(chǎn)批號(hào)0018284)。采用隨機(jī)數(shù)字表分為空白對(duì)照組、高脂模型組、DHEA模型組和DHEA聯(lián)合高脂乳劑模型組每組各10只。分籠喂養(yǎng)，環(huán)境溫度20～24℃，濕度40%～70%，每天光照10 h，自由飲水，喂以顆粒飼料。

1.2 試劑與儀器

來(lái)曲唑由江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司提供(生產(chǎn)批號(hào)14030657 No.427)，DHEA購(gòu)自美國(guó)IL公司，注射用油購(gòu)自天津市北辰方正試劑廠(生產(chǎn)批號(hào)201407)、血清雌二醇(E2)(生產(chǎn)批號(hào)RG61407S)、睪酮(T)(生產(chǎn)批號(hào)RG41407)、促卵泡生成素(FSH)(生產(chǎn)批號(hào)GR61323)及促黃體生成素(LH)(生產(chǎn)批號(hào)RG63528)、放射免疫法檢驗(yàn)試劑盒購(gòu)自上海麗晶試劑股份有限公司。膽固醇購(gòu)于河南興源化工產(chǎn)品有限公司(20140524)，GC-1200放射免疫分析器購(gòu)自科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司，由成都中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科執(zhí)行質(zhì)控。

1.3 肥胖型PCOS動(dòng)物模型的建立

1.3.1 來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法將來(lái)曲唑溶于10 g/L羧甲基纖維素(CMC)中，空白對(duì)照組大鼠灌胃10 g/L CMC，給予體積為15 ml/kg/d;高脂模型組大鼠灌胃高脂乳劑(豬油+膽固醇，豬油∶膽固醇=10∶3)，給予體積為15 mg/(kg·d);來(lái)曲唑模型組大鼠灌胃來(lái)曲唑1 mg/(kg·d)，來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠灌胃來(lái)曲唑1 mg/(kg·d)及灌胃高脂乳劑(豬油+膽固醇，豬油∶膽固醇=10∶3)，給予體積為15 ml/kg/d。大鼠均正常飲水，顆粒飼料喂養(yǎng)，于上午9時(shí)連續(xù)灌胃21 d。

1.3.2DHEA聯(lián)合高脂乳劑造模法將DHEA溶于0.2 mL甘油中，空白對(duì)照組大鼠皮下注射生理鹽水0.2 ml，同時(shí)灌胃羥甲基纖維素溶液(CMC，濃度為10 mg/ml)，給予體積為13 mg/(kg· d);高脂模型組大鼠灌胃高脂乳劑(豬油+膽固醇，豬油∶膽固醇=10∶3)，給予體積為15 mg/(kg·d); DHEA組大鼠皮下注射DHEA60 mg/(kg·d);DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠皮下注射DHEA 60 mg/(kg· d)及灌胃高脂乳劑(豬油+膽固醇，豬油∶膽固醇= 10∶3)，給予體積為15 ml/kg/d。大鼠均正常飲水，顆粒飼料喂養(yǎng)，于上午10時(shí)連續(xù)灌胃21 d。

1.4 大鼠動(dòng)情周期及體質(zhì)量檢測(cè)

各造模組均在造模處理第10天起每天進(jìn)行陰道涂片，巴氏染色后觀察動(dòng)情周期的變化，1個(gè)動(dòng)情周期為5 d，連續(xù)2個(gè)周期;每5 d測(cè)量大鼠的體質(zhì)量并記錄、繪制大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)變化曲線。

1.5 大鼠血清中性激素、血脂檢測(cè)及臟器指數(shù)計(jì)算

各造模組均在造模處理第21天的晚上8時(shí)開(kāi)始禁食，次日上午8時(shí)按3 g葡萄糖/kg體質(zhì)量的劑量灌服50%葡萄糖液，灌糖后分別在0、120 min大鼠眼眶取血1 ml測(cè)定血糖。血糖測(cè)定采用GOPPOD終點(diǎn)法，在M10自動(dòng)分析儀中測(cè)定。處死大鼠前，股動(dòng)脈取血，室溫下放置1 h，以2000 r/min速度離心10 min，分離血清。采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三酯(TG)和膽固醇(TC)。取血清置-20℃凍存?zhèn)溆?，采用放射免疫分析器測(cè)定E2、T、LH、FSH。取子宮、卵巢組織稱(chēng)重(剝離周?chē)M織，迅速用電子天平稱(chēng)濕重并換算成臟器指數(shù))，并選取雙側(cè)卵巢置10%中性甲醛中固定，最后處死。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用《中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)·醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)》統(tǒng)計(jì)軟件PEMS3.1進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

造模前，各組大鼠均發(fā)育良好，體毛潤(rùn)澤，行為、體征無(wú)明顯差異，反應(yīng)靈活。造模后，造模組與空白對(duì)照組比較皮毛顯凌亂骯臟，尤其是高脂模型組。來(lái)曲唑模型組和來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的體質(zhì)量增加幅度均極顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組，來(lái)曲唑模型組和來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的子宮質(zhì)量均顯著低于空白對(duì)照組和高脂模型組。表1顯示，高脂模型組、來(lái)曲唑模型組、來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的垂體質(zhì)量均顯著高于空白對(duì)照組。表2顯示，DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的體質(zhì)量增加幅度顯著低于DHEA模型組。高脂模型組大鼠的子宮質(zhì)量極顯著低于空白對(duì)照組，DHEA模型組大鼠子宮質(zhì)量顯著高于空白對(duì)照組，極顯著高于高脂模型組，DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的子宮質(zhì)量顯著低于DHEA模型組，極顯著高于高脂模型組。

2.2 動(dòng)情周期變化

表3、4顯示，來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法和DHEA聯(lián)合高脂乳劑造模法中空白對(duì)照組大鼠均保持規(guī)律的4 d動(dòng)情周期陰道涂片變化。來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法中高脂模型組大鼠動(dòng)情前期、動(dòng)情期及間期交替出現(xiàn)。來(lái)曲唑模型組大鼠持續(xù)4 d處于動(dòng)情間期。來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠動(dòng)情周期紊亂，持續(xù)處于動(dòng)情間期，這點(diǎn)符合肥胖PCOS中醫(yī)辨證腎虛的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)特征。DHEA聯(lián)合高脂乳劑造模法中高脂模型組大鼠間期和動(dòng)情期延長(zhǎng)，DHEA模型組和DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠失去正常動(dòng)情周期，持續(xù)處于動(dòng)情前期和動(dòng)情期。這點(diǎn)也符合肥胖PCOS中醫(yī)辨證腎虛痰濕證型的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)特?征。

表1 來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法大鼠體質(zhì)量增加幅度和臟器指數(shù)水平

表2 DHEA聯(lián)合高脂乳劑造模法大鼠體質(zhì)量增加幅度和臟器指數(shù)水平

表3 來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法大鼠動(dòng)情周期及排卵情況

表4 DHEA聯(lián)合高脂乳劑造模法大鼠動(dòng)情周期及排卵情況

表5 來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法大鼠血清性激素水平

表6 DHEA造模法大鼠血清性激素水平

2.4 血脂測(cè)定

來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的TC、LDL均極顯著高于空白對(duì)照組、高脂模型組和來(lái)曲唑模型組，來(lái)曲唑模型組大鼠的LDL極顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組。表7顯示，來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的TG顯著高于空白對(duì)照組、來(lái)曲唑模型組和高脂模型組。來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的HDL顯著低于空白對(duì)照組和高脂模型組，極顯著高于來(lái)曲

2.3 血清性激素測(cè)定

來(lái)曲唑模型組大鼠的血清T濃度顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組，來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的血清T濃度顯著高于來(lái)曲唑模型組和高脂模型組。表5顯示，來(lái)曲唑模型組和來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的LH和FSH濃度均顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組。表6顯示，DHEA模型組和DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的血清T、E2濃度均極顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組，DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的血清T、E2濃度均極顯著高于DHEA模型組。來(lái)曲唑模型組、來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組、DHEA模型組及DHEA聯(lián)合高脂模型組的T、LH均升高，符合肥胖PCOS中醫(yī)腎虛痰濕證型的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)血清性激素T、LH指標(biāo)升高特征。唑模型組。DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的TC極顯著高于空白對(duì)照組、高脂模型組和DHEA模型組。高脂模型組大鼠的TG顯著高于空白對(duì)照組，DHEA模型組和DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的TG均極顯著高于空白對(duì)照組，DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的TG極顯著高于高脂模型組，顯著高于DHEA模型組。DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的HDL極顯著高于空白對(duì)照組，顯著高于高脂模型組。表8顯示，DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的LDL極顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組，顯著高于DHEA模型組。來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組和DHEA聯(lián)合高脂模型組血脂明顯升高，符合肥胖PCOS中醫(yī)腎虛痰濕證型現(xiàn)代醫(yī)學(xué)肥胖指標(biāo)變化特征。

表7 來(lái)曲唑造模法血脂水平

表8 DHEA造模法血脂水平

2.5 大鼠卵巢HE染色

2造模法空白對(duì)照組大鼠卵巢表面較紅，其余各造模組大鼠卵巢表面蒼白。HE染色光鏡下，空白對(duì)照組大鼠卵巢可見(jiàn)不同發(fā)育時(shí)期的初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡、成熟卵泡、黃體和白體。2造模法高脂模型組大鼠可見(jiàn)少量的黃體和白體，閉鎖卵泡和囊狀卵泡較空白對(duì)照組增多。來(lái)曲唑模型組和DHEA模型組大鼠卵巢可見(jiàn)次級(jí)卵泡減少，囊狀卵泡和閉鎖卵泡增多，無(wú)排卵前的成熟卵泡、黃體和白體明顯減少。來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組(圖C2)和DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠卵巢(圖D 2)可見(jiàn)次級(jí)卵泡明顯減少，無(wú)成熟卵泡，無(wú)黃體和白體。而來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的卵巢多囊性改變較DHEA聯(lián)合高脂模型組更加明顯(如圖A、B、C1、C2、D1、D2)。來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠(圖C2)的典型卵巢多囊性改變，符合肥胖PCOS中醫(yī)腎虛痰濕證型現(xiàn)代醫(yī)學(xué)肥胖B超的卵巢影響學(xué)指標(biāo)變化特征。

3 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腎虛痰濕是多囊卵巢綜合征的常見(jiàn)證型［3-4］。腎虛痰濕型肥胖PCOS主要特征如前述持續(xù)無(wú)排卵、T和LH增高及脂代謝紊亂等。肥胖型PCOS可導(dǎo)致患者的生殖內(nèi)分泌及脂代謝發(fā)生紊亂，針對(duì)這些異常的特征指標(biāo)對(duì)制作相應(yīng)的模型大鼠為筆者課題組深入研究補(bǔ)腎化痰中藥對(duì)腎虛痰濕肥胖大鼠調(diào)控機(jī)制［5］奠定了較理想的模型。

目前對(duì)PCOS的研究多借助于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，常見(jiàn)方法有雄激素造模、芳香化酶抑制劑造模、孕激素聯(lián)合HCG造模、胰島素聯(lián)合HCG造模和雌激素造模等10余種之多。姚莉娟等通過(guò)收集1979年以來(lái)公開(kāi)發(fā)表的關(guān)于建立PCOS動(dòng)物模型中文文獻(xiàn)77篇，發(fā)現(xiàn)DHEA造模法E2、P、T、升高，F(xiàn)SH有升高有降低，LH降低。

來(lái)曲唑造模法可使體質(zhì)量、卵巢質(zhì)量、T、FSH、LH升高，黃體數(shù)、E2下降。文獻(xiàn)［6-7］通過(guò)給予雌性大鼠持續(xù)應(yīng)用來(lái)曲唑，導(dǎo)致大鼠出現(xiàn)排卵障礙、卵巢多囊樣變。Akamine等［8］給予成年大鼠高脂飼料，持續(xù)120 d或180 d，2種模型組腹膜后及性腺周?chē)?、INS、HOMA指數(shù)均明顯升高。杜丹峰等［9］認(rèn)為，單獨(dú)應(yīng)用高脂飼料或高脂乳劑構(gòu)建的PCOS模型在血清性激素及卵巢形態(tài)改變方面不典型，因此常與激素誘導(dǎo)法聯(lián)合應(yīng)用。以上3個(gè)模型指標(biāo)較接近中醫(yī)辨證腎虛痰濕特征信息，所以選擇在來(lái)曲唑造模法和DHEA造模法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改良，加用高脂乳劑造模，以期在2種近似腎虛痰濕特征信息肥胖PCOS中找到一種較佳的動(dòng)物模型，從而為本課題組深入該病的實(shí)驗(yàn)研究奠定模型基礎(chǔ)。

本研究結(jié)果表明，來(lái)曲唑模型組和來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的體質(zhì)量增加幅度均顯著高于空白對(duì)照組和高脂模型組，DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的體質(zhì)量增加幅度低于DHEA模型組。因此，來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法建立的動(dòng)物模型符合PCOS肥胖的特點(diǎn)。2種造模方法中除外空白對(duì)照組維持正常動(dòng)情周期外，其余各組均呈現(xiàn)不同的動(dòng)情周期紊亂，如持續(xù)處于動(dòng)情期、動(dòng)情間期、無(wú)明顯動(dòng)情周期、動(dòng)情周期延長(zhǎng)大于6 d。來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組中血清LH、FSH、T均升高，DHEA聯(lián)合高脂模型組中血清T、E2升高。2種造模法大鼠血清性激素均有改變，但來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法大鼠血清性激素水平改變更加全面，且DHEA聯(lián)合高脂乳劑造模法大鼠血清T顯著升高。但由于持續(xù)給予雄激素(DHEA)而難以區(qū)分內(nèi)源性和外源性雄激素，使一些研究體內(nèi)雄激素變化的實(shí)驗(yàn)受到干擾［10］。因此，來(lái)曲唑聯(lián)合高脂乳劑造模法更適合用于研究PCOS血清性激素變化。來(lái)曲唑聯(lián)合高脂模型組大鼠的TC、TG、LDL均升高、HDL降低，DHEA聯(lián)合高脂模型組大鼠的TC、TG、HDL、LDL均升高。在PCOS造模的基礎(chǔ)上加用高脂乳劑，能夠更加明顯地改變大鼠的血脂代謝，形成高脂血癥，2種造模改良法均可用于研究TC、TG、LDL升高的PCOS。2造模大改良法大鼠卵巢HE染色均出現(xiàn)次級(jí)卵泡減少，無(wú)排卵前的成熟卵泡、囊狀卵泡和閉鎖卵泡增多，黃體和白體減少或不存在黃體和白體。

綜上所述，這2種造模法均存在持續(xù)不排卵、高雄激素血癥、高脂血癥的特點(diǎn)，所以均可作為PCOS實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模方法，且造模持續(xù)時(shí)間短、實(shí)驗(yàn)耗材少、能節(jié)約實(shí)驗(yàn)費(fèi)用，可用于肥胖PCOS短期研究。來(lái)曲唑加高脂乳劑造模法大鼠體質(zhì)量增加幅度、LH、FSH、T、TC、TG、LDL均升高，卵巢呈多囊樣改變典型，大量的囊狀卵泡和閉鎖卵泡形成，與肥胖PCOS有較多相似之處，初步認(rèn)為該法較適合用于研究具有中醫(yī)腎虛痰濕特征信息肥胖PCOS動(dòng)物模型。DHEA加高脂乳劑造模法T、E2、TC、TG、LDL、HDL均升高，卵巢呈多囊樣改變，適合于雌激素、雄激素水平較高、血脂異常的不肥胖PCOS動(dòng)物模型。

［1］Szukiewicz D，Vilenbroek JT.Polycystic ovary syndrome searching for an animal model［J］.J Med，1998，29(5-6):259.

［2］李琴華，吳效科，侯麗輝.肥胖與多囊卵巢綜合征相關(guān)性的研究進(jìn)展［J］.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2008，3(3):117.

［3］王穎，侯麗輝.肥胖型多囊卵巢綜合征與痰濕因素關(guān)系中醫(yī)淺析［J］.天津中醫(yī)藥，2010，27(2):130-131.

［4］黎小斌，蘭小玉，歐愛(ài)華，等.多囊卵巢綜合征的中醫(yī)證候分布及其規(guī)律探討［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，201l，31 (3):323-326.

［5］徐曉娟，鐘艷梅，黃立華.“補(bǔ)腎化痰”論治肥胖型多囊卵巢綜合征［J］.中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2013，19(7):748-749.

［6］Manneras L，Cajander S，Holmang A，et al.A new rat model exhibiting both ovarian and metabolic characteristics of polycystic ovary syndrome［J］.Endocrinology，2007，148(8):3781.

［7］Zurvarra FM，Salvetti NR，Mason JI，et al.Disruption in the expression andimmunolocalisationofsteroidreceptorsand steroidogenic enzymes in letrozole-induced polycystic ovaries in rat［J］.Reprod Fertil Dev，2009，21(7):827.

［8］Pines A，Sturdee DW，et al.IMS updated recommendations on postmenopausal hormone therapy［J］.Climacteric，2007，10 (3):181-194.

［9］杜丹峰，李雪蓮.多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型的胰島素抵抗表現(xiàn)［J］.國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2013，40(1):24-26.

［10］李軼，梁曉燕.多囊卵巢動(dòng)物模型的研究進(jìn)展［J］.國(guó)外生殖健康:計(jì)劃生育雜志，2008，27(6):380-383.

Comparative Study of the Establishment of Kidney Deficiency and Phlegm Characteristic Information of Obese PCOS Rat Animal Model by Using the Triazole and DHEA

XU Xiao-juan1，HUANG Ying-hong1，YAO Li-juan1，DENG Lin-wen2，LI Wan-jing1，WANG Qiu-xiang1，HE Yun-liang1
(1．Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 610075，China; 2．Affiliated Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 610072，China)

Objective:To establish two kinds of obese PCOS rats models which have the characteristics of the deficiency of kidney and phlegm-dampness with Letrozole and DHEA(Dehydroepiandrosterone)combined high fat emulsion respectively，and comparing with the advantages and disadvantages of the two models.Method:Observing the estrous cycle and the weight increasing rate of rats，and determine the serum sex hormone levels，blood lipid and related viscera index and ovaries HE staining.Results:The weight increasing rate of rats、FSH、LH in Letrozole combined high fat emulsion group was significantly higher than the blank control group and high fat emulsion group LDL、TC and TG were significantly higher than the other three groups;E2、T of DHEA combined high fat emulsion group were significantly higher than the blank control group and high fat emulsion group.TC、TG and LDL were significantly higher than the other three groups;The ovaries HE staining in Letrozole group、Letrozole combined high fat emulsion group、DEHA group and DHEA combined high fat emulsion group all showed polycystic syndrome.Conclusions:Letrozole combined high fat emulsion model is one of the ideal animal models to study obese PCOS with the pathogenesis of the deficiency of kidney and phlegm-dampness.DHEA combined high fat emulsion model fits for non-obese PCOS with the dyslipidemia，high testosterone and estrogen.

Obese PCOS;Letrozole;DHEA;High fat emulsion;Animal models

R285.5

:B

:1006-3250(2015)05-0511-04

2015-02-15

成都中醫(yī)藥大學(xué)科技發(fā)展基金(ZRMS201307)-PCOS動(dòng)物模型中腎虛痰濕型診斷要素的信息挖掘研究

徐曉娟(1969-)，女，江蘇鎮(zhèn)江人，副研究員，醫(yī)學(xué)博士，碩士研究生導(dǎo)師，從事補(bǔ)腎中藥對(duì)女性生殖內(nèi)分泌調(diào)控研究，Tel:028-61800160，13980971928，E-mail:847956379 @qq.com。