主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)暗紋東方鲀生長(zhǎng)、消化吸收和水環(huán)境的效應(yīng)

王曉晨 , 李 勇 , 張 靜 , 趙寧寧 , 秦巍侖,秦桂祥 , 高婷婷

(1.中國(guó)科學(xué)院 海洋研究所, 山東 青島266071; 2.中國(guó)科學(xué)院大學(xué), 北京100049; 3.中國(guó)科學(xué)院 實(shí)驗(yàn)海洋生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 山東 青島 266071; 4.江蘇中洋集團(tuán)有限公司, 江蘇 南通226600; 5.海洋生態(tài)養(yǎng)殖技術(shù)國(guó)家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室, 山東 青島266071)

暗紋東方 鲀 (Takifugu obscures), 俗稱(chēng)氣泡魚(yú), 隸屬于 鲀 形目(Tetraodontiformes)、鲀科(Tetraodontidae)、東方 鲀 屬(Fugu), 分布于日本、朝鮮以及中國(guó)渤海、黃海、東海等海域, 屬近海暖溫水性底棲魚(yú)類(lèi)[1]。與鰣魚(yú)(Tenualosa reevesii)、刀魚(yú)(Coilia ectenesJordan)同為江海洄游性魚(yú)類(lèi), 因過(guò)度捕撈、水環(huán)境惡化, 數(shù)量急劇減少, 已成為海江珍稀魚(yú)類(lèi)之一[2]。

目前, 東方鲀屬(Fugu)魚(yú)類(lèi)已實(shí)現(xiàn)設(shè)施無(wú)毒化養(yǎng)殖, 但其營(yíng)養(yǎng)飼料研究滯后, 如何研發(fā)出高效、低污染、低成本(一高二低型)專(zhuān)用配合飼料, 成為制約產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展、實(shí)現(xiàn)健康高效養(yǎng)殖的技術(shù)瓶頸。東方 鲀 屬 魚(yú) 類(lèi)營(yíng)養(yǎng)需求研究多見(jiàn)于紅鰭東方鲀(Takifugu rubripes)[3-11], 暗 紋東方 鲀 僅見(jiàn)蛋白質(zhì)和淀粉需求[12-13]。探求適宜營(yíng)養(yǎng)素及營(yíng)養(yǎng)源組合、獲得暗紋東方 鲀 一高二低型專(zhuān)用配合飼料等研究尚屬空白。

本研究在設(shè)施養(yǎng)殖條件下, 以現(xiàn)代動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)強(qiáng)調(diào)的組合效應(yīng)、營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)調(diào)控等新理念為指導(dǎo), 采用新穎的生態(tài)營(yíng)養(yǎng)學(xué)原理和方法, 通過(guò)將兩種營(yíng)養(yǎng)素蛋白質(zhì)和脂肪的不同水平與蛋白營(yíng)養(yǎng)源魚(yú)粉不同水平進(jìn)行組配, 探 尋對(duì)暗紋東方 鲀 生長(zhǎng)、消化吸收和水環(huán)境的影響, 初步確定主要營(yíng)養(yǎng)素源的適宜組合水平, 為 開(kāi)發(fā)暗紋東方 鲀 生態(tài)專(zhuān)用配合飼料提供理論和應(yīng)用依據(jù), 對(duì)珍稀魚(yú)類(lèi)優(yōu)良遺傳潛力發(fā)揮和規(guī)模化健康養(yǎng)殖具有重要價(jià)值和意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和分組

試驗(yàn)采用3×2×2三因素設(shè)計(jì)(表1), 2個(gè)營(yíng)養(yǎng)素因素:蛋白質(zhì)水平為43%、40%、37%分別表示為P43、P40、P37; 脂肪水平為10%、7%, 分別表示為L(zhǎng)10、L7), 1個(gè)營(yíng)養(yǎng)源因素: 魚(yú)粉水平為高(49%～55%)、低(39%～ 45%),分別表示為 FH、FL。共 12個(gè)不同組合處理組:1#(P43L10FH)、 2#(P43L7FH)、 3#(P40L10FH)、4#(P40L7FH)、5#(P37L10FH)、6#(P37L7FH)、7#(P43L10FL)、8#(P43L7FL)、9#(P40L10FL)、10#(P40L7FL)、11#(P37L10FL)、12#(P37L7FL), 每處理3重復(fù)。

1.2 試驗(yàn)飼料

12種試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。 在江蘇中洋集團(tuán)河豚莊園營(yíng)養(yǎng)中心飼料車(chē)間, 按照配方組成和比例, 將飼料原料進(jìn)行一次混合, 超微粉碎, 再經(jīng)二次混合, 制成粉狀全價(jià)配合飼料, 包裝備用。為適應(yīng)設(shè)施養(yǎng)殖 暗 紋東方 鲀 的特殊采食習(xí)性, 飼喂前將粉狀料、水以1.25/1的重量比例混合, 拌成黏性團(tuán)狀飼料, 進(jìn)行投喂。

表1 試驗(yàn)處理與飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì))Tab.1 Treatments, composition, and nutrient levels of the experimental diet (DM)

1.3 試驗(yàn)用魚(yú)和飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在江蘇中洋集團(tuán)河豚莊園養(yǎng)殖溫室進(jìn)行,試驗(yàn)魚(yú)由河豚莊園提供。正式試驗(yàn)前, 將同一養(yǎng)殖溫室同源同批 暗 紋東方 鲀 在試驗(yàn)條件下喂食同一種商品飼料, 使之逐漸適應(yīng)環(huán)境和配合飼料。馴養(yǎng) 25 d后, 禁食 24 h, 挑選健康無(wú)病、規(guī)格整齊(172.87g±6.71g)的試驗(yàn)魚(yú)1 080尾, 隨機(jī)分到 36個(gè)圓形桶(直徑1.5 m、水深0.6 m)中, 每桶30尾。

試驗(yàn)養(yǎng)殖密度為 4.89 kg/m3, 水溫為 22～26℃,鹽度為8～12, DO≥5.0 mg/L, pH為8.06～8.46。養(yǎng)殖期為77 d。試驗(yàn)期間, 每天7: 30、16: 00投喂, 將飼糧放食臺(tái)上, 放入養(yǎng)殖桶, 半小時(shí)后取出食臺(tái), 將殘餌風(fēng)干稱(chēng)質(zhì)量, 以剩少許殘餌視為飽食。每天換水1/3, 添加一定比例的海水和淡水, 保持水體的穩(wěn)定鹽度。每天記錄投喂量、殘餌量, 根據(jù)攝食情況及時(shí)調(diào)整投喂量。發(fā)現(xiàn)死魚(yú)及時(shí)撈出并稱(chēng)質(zhì)量記錄。

1.4 樣品采集和指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 樣品采集

試驗(yàn)結(jié)束后, 禁食24 h, 稱(chēng)質(zhì)量。 每桶隨機(jī)選取6尾中等體質(zhì)量的試魚(yú), 用20～30 mg/L的MS-222做快速深度麻醉, 冰盤(pán)中解剖剝離腸和肝胰臟, 迅速將樣品分裝入封口袋, -20℃保存待測(cè)。取飼糧樣品用四分法縮減至 200 g, 分裝入封口袋, 進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分分析。

1.4.2 飼糧營(yíng)養(yǎng)成分

干物質(zhì)采用失重法, 105℃烘箱干燥至恒質(zhì)量;粗蛋白采用凱氏定氮法; 粗脂肪采用油重法, 即石油醚為浸提溶劑, 利用索氏抽提法抽提脂肪; 粗灰分采用焚燒法, 即樣品炭化至無(wú)煙, 移至馬福爐 550℃焚燒至恒重; 鈣采用高錳酸鉀法; 總磷采用鉬黃比色法。

1.4.3 生長(zhǎng)指標(biāo)

存活率(%)=(終末尾數(shù)/初始尾數(shù))×100; 日增質(zhì)量(g/尾/日)=(終末均質(zhì)量-初始均質(zhì)量)/試驗(yàn)天數(shù);增質(zhì)量率(%)=[(終末體質(zhì)量-初始體質(zhì)量)/初始體質(zhì)量]×100; 飼料系數(shù)=(總投喂量-總殘餌量)/(終末體質(zhì)量-初始體質(zhì)量)。

1.4.4 消化吸收酶活力

使用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒,按說(shuō)明書(shū)測(cè)定暗紋東方 鲀 腸中(胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、堿性磷酸酶、Na+-K+-ATP酶)和肝胰臟中(脂肪酶、淀粉酶)的活性。測(cè)定前首先樣品預(yù)處理, 加入生理鹽水制備組織勻漿, 2 500 r/min離心10 min,通過(guò)預(yù)試驗(yàn)確定稀釋倍數(shù)后, 進(jìn)行正式指標(biāo)測(cè)定。酶活性用比活力( U/mg蛋白或U/g蛋白) 表示。

1.4.5 水環(huán)境指標(biāo)

試驗(yàn)結(jié)束前一周, 早上7: 30投喂結(jié)束, 將殘餌稱(chēng)質(zhì)量后, 換水2/3。次日 7: 30投喂前, 依次從 36個(gè)桶中取水樣100 mL, 進(jìn)行水環(huán)境指標(biāo)測(cè)定。氨氮和亞硝酸氮在2 h內(nèi)完成測(cè)定; 磷酸鹽和COD在48 h內(nèi)完成測(cè)定。氨氮采用納氏試劑比色法; 亞硝酸氮采用鹽酸萘乙二胺法; COD采用重鉻酸鉀法; 磷酸鹽采用總磷總氮聯(lián)合消化法。

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用 SPSS 21.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì), 采用 3因素方差分析和Duncan檢驗(yàn)法統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果均用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean ± SE)”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能

12種營(yíng)養(yǎng)素源組合飼糧下, 暗 紋東方 鲀 的生長(zhǎng)性能結(jié)果見(jiàn)表2。

2.1.1 存活率、末質(zhì)量、日增質(zhì)量

生長(zhǎng)結(jié)果(表2)表明: 各組存活率基本在90%以上, 且差異不顯著(P＞0.05)。蛋白質(zhì)、脂肪單因素均對(duì)日增質(zhì)量有顯著或極顯著影響(P＜0.05或0.01)。雙因素蛋白質(zhì)和脂肪、魚(yú)粉分別互作對(duì)日增質(zhì)量有顯著或極顯著影響。3因素互作對(duì)日增質(zhì)量有極顯著影響(P＜0.01)。單因素和因素互作對(duì)末質(zhì)量的顯著性影響與日增質(zhì)量具有相似特征。

2.1.2 增質(zhì)量率

表2中增質(zhì)量率結(jié)果表明, 單因素脂肪、魚(yú)粉均影響極顯著(P＜0.01), 蛋白質(zhì)影響不顯著(P＞0.05);雙因素蛋白質(zhì)和魚(yú)粉互作有顯著影響。值得注意的是, P40和FH、FL分別互作, 效應(yīng)均與P43FH差異不顯著(圖1)。3因素互作有顯著影響(P＜0.05), 最高的1#、9#分別較8#提高79.98%、54.32%; 低魚(yú)粉組11#與高魚(yú)粉組4#、5#均無(wú)顯著差異。

圖1 蛋白質(zhì)和魚(yú)粉互作對(duì)增質(zhì)量率的效應(yīng)Fig.1 Effects of protein and fish meal interactions on WGR

2.1.3 飼料系數(shù)

表2中飼料系數(shù)結(jié)果表明, 單因素蛋白質(zhì)、脂肪均有極顯著影響(P＜0.01)。雙因素蛋白質(zhì)和脂肪、魚(yú)粉分別互作均差異極顯著(P＜0.01)。值得注意的是,P43L10和 P40L10, P43FH和P40FL分別差異不顯著(圖2, 圖3)。3因素互作差異顯著(P＜0.05), 最低的1#和 9#分別較 8#降低 76.35%、64.15%; 較低的 3#和 7#差異不顯著; 低魚(yú)粉組 11#和高魚(yú)粉組 2#、6#也無(wú)顯著差異。

圖2 蛋白質(zhì)和脂肪互作對(duì)飼料系數(shù)的效應(yīng)Fig.2 Effects of protein and lipid interactions on FCR

圖3 蛋白質(zhì)和魚(yú)粉互作對(duì)飼料系數(shù)的效應(yīng)Fig.3 Effects of protein and fish meal interactions on FCR

表2 主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)暗紋東方鲀生長(zhǎng)和飼料利用的影響Tab.2 Effects of the main nutritional element and source combination on the growth and feed utilization in Takifugu puffer

2.1.4 增質(zhì)量率和飼料系數(shù)的對(duì)應(yīng)關(guān)系

12種營(yíng)養(yǎng)素源組合飼糧下, 暗 紋東方 鲀 的增質(zhì)量率和飼料系數(shù)的對(duì)應(yīng)關(guān)系(圖4)表明, 增質(zhì)量率和飼料系數(shù)呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系, 即增質(zhì)量率越低,相應(yīng)的飼料系數(shù)越高, 符合常規(guī), 表明生長(zhǎng)試驗(yàn)數(shù)據(jù)客觀而可信。

圖4 主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)增質(zhì)量率和飼料系數(shù)的影響對(duì)應(yīng)趨勢(shì)Fig.4 Trend of the main nutrient element and source combination effects on WGR and FCR

2.2 消化酶活性

12種不同營(yíng)養(yǎng)素源組合飼糧下, 暗 紋東方 鲀 的消化酶活性結(jié)果見(jiàn)表3。

2.2.1 胰蛋白酶

表3中胰蛋白酶活性結(jié)果表明, 單、雙、3因素互作均有顯著或極顯著影響(P＜0.05或0.01)。P43、P40分別與魚(yú)粉互作效應(yīng)顯著(圖5)。L10FL互作效應(yīng)顯著優(yōu)于 L7FL、L10FH、L7FH(圖6)。3因素互作差異極顯著(P＜0.01), 9#活性最高, 8#、7#次之。

圖5 蛋白質(zhì)和魚(yú)粉互作對(duì)胰蛋白酶活性的效應(yīng)Fig.5 Effects of protein and fish meal interactions on trypsin activity

圖6 脂肪和魚(yú)粉互作對(duì)胰蛋白酶活性的效應(yīng)Fig.6 Effects of lipid and fish meal interactions on trypsin activity

2.2.2 腸脂肪酶、淀粉酶

表3中腸脂肪酶和淀粉酶活性結(jié)果表明, 脂肪、魚(yú)粉單因素對(duì)二者活性均有顯著或極顯著影響(P＜0.05或0.01)。雙因素蛋白質(zhì)和脂肪互作對(duì)腸淀粉酶活性, 蛋白質(zhì)和魚(yú)粉互作對(duì)二者活性, 均有顯著影響 (P＜0.05), P40L10互作和 P43FH 互作效應(yīng)顯著。3因素互作差異極顯著(P＜0.01), 9#腸脂肪酶活性最高、11#、7#、1#次之; 3#腸淀粉酶活性最高, 1#、9#次之。

2.2.3 肝胰脂肪酶、淀粉酶

表3中肝胰臟脂肪酶和淀粉酶結(jié)果表明, 單因素均有極顯著影響(P＜0.01)。雙因素蛋白質(zhì)和脂肪互作對(duì)二者活性均有極顯著影響(P＜0.01); 蛋白質(zhì)和魚(yú)粉互作對(duì)脂肪酶活性, 脂肪和魚(yú)粉互作對(duì)淀粉酶活性均影響極顯著(P＜0.01)。3因素互作均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

表3 主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)消化酶活性的影響Tab.3 Effects of the main nutritional element and source combination on digestive enzymes activities

2.3 吸收酶活性

12種不同營(yíng)養(yǎng)素源組合飼糧下, 暗 紋東方 鲀 的吸收酶活性結(jié)果見(jiàn)表4。表4中吸收酶活性結(jié)果表明,單因素脂肪水平對(duì)二者活性均有極顯著影響(P＜0.01), 蛋白質(zhì)水平僅對(duì) Na+-K+-ATP酶活性影響極顯著。其他單、雙、3因素互作均差異不顯著(P＞ 0.05),仍看出1#活性最高, 3#、9#次之, 7#、2#、11#較高。

表4 主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)吸收酶活性的影響Tab.4 Effects of the main nutritional element and source combination on absorption enzymes activities

2.4 水環(huán)境指標(biāo)

12種不同營(yíng)養(yǎng)素源組合飼糧下, 暗紋東方鲀的養(yǎng)殖水環(huán)境指標(biāo)結(jié)果見(jiàn)表5。

2.4.1 氨氮

表5中氨氮濃度結(jié)果表明, 蛋白質(zhì)、魚(yú)粉單因素均影響極顯著(P＜0.01)。雙因素蛋白質(zhì)和脂肪互作差異極顯著(圖7)。3因素互作差異不顯著(P＜0.05), 仍看出12#濃度最低, 7#、11#次之。

圖7 蛋白質(zhì)和脂肪互作對(duì)氨氮濃度的效應(yīng)Fig.7 Effects of protein and lipid interactions on ammonia nitrogen concentrations

2.4.2 磷酸鹽

由表5中磷酸鹽濃度結(jié)果可見(jiàn), 脂肪、魚(yú)粉單因素分別影響顯著或極顯著(P＜0.05或0.01)。雙因素脂肪和魚(yú)粉互作影響顯著(圖8)。3因素互作有極顯著影響(P＜0.01), 11#濃度最低, 與1#、9#無(wú)顯著差異。

圖8 脂肪和魚(yú)粉互作對(duì)磷酸鹽濃度的效應(yīng)Fig.8 Effects of lipid and fish meal interactions on phosphate concentrations

2.4.3 亞硝酸氮、COD

由表5可以看出, 僅魚(yú)粉單因素對(duì)COD有極顯著影響(P＜0.01)。雙因素脂肪和魚(yú)粉互作、3因素互作顯著或極顯著影響亞硝酸氮(P＜0.05或0.01)。

表5 主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)水環(huán)境指標(biāo)的影響Tab.5 Effects of the main nutritional element and source combination on water environmental indicators

3 討論

3.1 主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)生長(zhǎng)和飼料利用的影響

紅鰭東方 鲀 的研究表明, 幼稚魚(yú)生長(zhǎng)和生理機(jī)能最佳時(shí), 蛋白質(zhì)含量為 50%±3.7%[4]、41.08%[5]和41%[6]。當(dāng)脂肪含量為 8.93%時(shí), 幼魚(yú)生長(zhǎng)代謝機(jī)能最佳[8], 且含量小于11%時(shí), 脂肪含量的提高才會(huì)增強(qiáng)其生長(zhǎng)性能[7]。 暗紋東方 鲀 研究?jī)H見(jiàn)蛋白質(zhì)含量為46%～49%時(shí), 幼魚(yú)生長(zhǎng)和飼料利用最佳[12]。適宜脂肪、魚(yú)粉需求的研究仍未見(jiàn)有。主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)暗紋東方 鲀 的生長(zhǎng)效應(yīng)研究尚屬空白。

本研究表明, 1#生長(zhǎng)效果最佳, 其增質(zhì)量率最高,飼料系數(shù)最低; 9#次之, 且與1#差異不顯著; 3#、11#和7#相對(duì)表現(xiàn)也較佳。1#和3#分別顯著或極顯著改善生長(zhǎng)性能, 符合常規(guī), 因其營(yíng)養(yǎng)素源組合高優(yōu)。而值得討論的新發(fā)現(xiàn)是, 低魚(yú)粉組9#和11#、7#分別顯著或明顯改善生長(zhǎng)和飼料利用, 營(yíng)養(yǎng)素源組合正效應(yīng)突出, 更加節(jié)約魚(yú)粉資源和降低飼糧成本, 具有重要理論機(jī)制探討意義和難得經(jīng)濟(jì)實(shí)用推廣價(jià)值。

由試驗(yàn) 3因素方差分析知, 單因素蛋白水平對(duì)增質(zhì)量率、魚(yú)粉水平對(duì)飼料系數(shù)均無(wú)顯著影響(P＞0.05),高脂肪顯著改善增重和飼料利用, 中蛋白顯著降低飼料系數(shù); 雙因素 P40FL改善增質(zhì)量率和飼料系數(shù)的效應(yīng)均與 P43FH差異不顯著, P40L10顯著降低飼料系數(shù)。故 9#中蛋白高脂肪低魚(yú)粉組合顯著改善生長(zhǎng)性能的原因包含其中。11#由于替換為低蛋白, 效果顯著低于 9#, 但與高魚(yú)粉組 3#無(wú)顯著差異, 也包含上述單雙因素效應(yīng)的原由。

再?gòu)臓I(yíng)養(yǎng)學(xué)機(jī)制和前人研究結(jié)果分析, 9#、11#飼糧魚(yú)粉比例較低, 但均為高脂肪水平, 加之補(bǔ)充優(yōu)質(zhì)動(dòng)植物蛋白源(美國(guó)肉骨粉、酵母蛋白、大豆蛋白、玉米蛋白等)間及與魚(yú)粉組合后的總體交互作用(氨基酸、脂肪酸、活性物等互補(bǔ)互作)正效應(yīng)較強(qiáng),使總體生產(chǎn)性能結(jié)果不同程度分別接近 1#、3#; 當(dāng)提供適量脂肪作為能源時(shí), 蛋白質(zhì)的需要量可以降低或被節(jié)約[14], 也是9#、11#顯著改善生長(zhǎng)效果的主要原因所在。已有研究表明, 高脂肪有助于紅鰭東方鲀幼魚(yú)的生長(zhǎng), 對(duì)降低飼料系數(shù)有一定影響, 同時(shí)可促進(jìn)魚(yú)體代謝[8]。低魚(yú)粉水平時(shí), 可通過(guò)增加油脂使用量, 提高代謝能, 使消化過(guò)程中能量消耗減少,熱增耗降低, 凈能增加, 充分體現(xiàn)脂肪增效作用[15]。

3.2 主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)消化吸收的影響

東方 鲀 消化酶研究, 多見(jiàn)環(huán)境因子[16-17]和無(wú)機(jī)離子[18]對(duì)蛋白酶活性的影響, 而脂肪酶、淀粉酶研究甚少。堿性磷酸酶可以協(xié)助魚(yú)體腸上皮細(xì)胞吸收脂類(lèi)、葡萄糖、氨基酸等[19], Na+-K+-ATP 酶活性可間接反映小腸黏膜的吸收功能[20], 二者活性研究曾見(jiàn)建鯉幼魚(yú)飼糧蛋白質(zhì)的影響[21], 而主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)暗紋東方 鲀 的消化吸收性能研究仍屬空白。

由本研究消化吸收性能結(jié)果可知, 低魚(yú)粉組9#、11#、7#顯著或明顯提高胰蛋白酶和腸脂肪酶活性,而對(duì)堿性磷酸酶和 Na+-K+-ATP 酶活性無(wú)顯著影響,同時(shí)高脂肪具有增強(qiáng)多數(shù)消化吸收酶活力的作用。此結(jié)果特征與本試驗(yàn)生產(chǎn)性能結(jié)果相一致, 可視為低魚(yú)粉組9#、11#、7#和高脂肪因素顯著改善生長(zhǎng)性能的消化生理原因。

由試驗(yàn) 3因素方差分析得, 單因素高脂肪極顯著提高多數(shù)消化吸收酶活性; 低魚(yú)粉顯著提高胰蛋白酶和腸脂肪酶活性; 高、中蛋白顯著提高胰蛋白酶和Na+-K+-ATP酶活性。雙因素P40L10顯著提高胰蛋白酶活性(且與P43L10無(wú)顯著差異)和腸、肝胰淀粉酶活性; P40FL顯著提高腸脂肪酶活性。兩種吸收酶的雙因素互作效應(yīng)不顯著, 但高脂肪單因素提高二者活性的效應(yīng)仍較明顯。9#多數(shù)消化酶活性強(qiáng)、吸收酶活性改善的原因從而得以解釋。7#、11#酶活較高的原因也包含在單雙因素效應(yīng)之中。

增加飼糧脂肪可提高魚(yú)體脂肪酶活力, 反之降低[22]; 低魚(yú)粉組適宜的動(dòng)植物蛋白比例一定程度的刺激消化酶分泌, 提高各種營(yíng)養(yǎng)的消化率和蛋白質(zhì)利用率[23-24]; 且玉米蛋白粉對(duì)魚(yú)體消化道生理環(huán)境及消化吸收率的干擾較少[24], 加之脂肪的節(jié)約效應(yīng),表現(xiàn)為低魚(yú)粉組9#消化酶活性顯著提高。飼糧蛋白可誘導(dǎo)魚(yú)體蛋白酶分泌, 促進(jìn)蛋白質(zhì)的消化與吸收[25],故7#、9#的高、中蛋白水平使得胰蛋白酶活性較高。高、中蛋白水平下Na+-K+-ATP酶活性也較高, 有利于腸道內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化后吸收。這一結(jié)果特征在豹紋鰓棘鱸(Plectropomus leopardus)也有發(fā)現(xiàn)[26]。大菱鲆(Psetta maxima)為適應(yīng)植物性蛋白源豆粕含量的增加, 蛋白酶活力有增大趨勢(shì)[27], 也與本研究結(jié)果相符。研究還發(fā)現(xiàn), 高魚(yú)粉組其淀粉酶活性較高, 但肉食性魚(yú)類(lèi)淀粉酶對(duì)消化性能的作用微弱[28]。

3.3 主要營(yíng)養(yǎng)素源組合對(duì)養(yǎng)殖水環(huán)境的影響

本研究中, 除 COD外, 氨氮、亞硝酸氮、磷酸鹽三指標(biāo)的相對(duì)濃度變化呈現(xiàn)出相似趨勢(shì)或特征,即高魚(yú)粉組及低魚(yú)粉高蛋白組的含量普遍高于其他低魚(yú)粉組, 以11#、9#、7#、1#相對(duì)較低; 亞硝酸氮、磷酸鹽二指標(biāo)相對(duì)濃度變化出現(xiàn)組間顯著差異,9#、11#、1#不同程度顯著降低; 另外發(fā)現(xiàn), 高脂肪具有降低水體磷酸鹽和COD 的趨勢(shì)。

由試驗(yàn) 3因素方差分析結(jié)果可知, 單因素低魚(yú)粉極顯著降低氨氮、磷酸鹽、COD濃度, 也有明顯降低亞硝酸氮濃度的趨勢(shì); 高脂肪顯著降低磷酸鹽濃度, 且有明顯降低 COD的趨勢(shì); 高、中蛋白極顯著提高氨氮濃度。雙因素L10FL顯著降低亞硝酸氮濃度, L10與FH、FL互作均降低磷酸鹽濃度; P43L10可顯著降低氨氮濃度。由此說(shuō)明11#、9#、7#高脂肪低魚(yú)粉組合顯著改善水環(huán)境的原因。1#因互作效應(yīng)顯著降低氨氮、磷酸鹽濃度, 也使水質(zhì)明顯改善。

由于不同營(yíng)養(yǎng)水平組合的不同互作產(chǎn)生的正負(fù)效應(yīng), 導(dǎo)致不同處理組試魚(yú)生長(zhǎng)和飼料利用的差異,使除 1#外的其他高魚(yú)粉組的增質(zhì)量率、飼料系數(shù)與低魚(yú)粉組相近, 而前者飼糧均不同程度含有較高質(zhì)量和數(shù)量的氮磷營(yíng)養(yǎng)(蛋白質(zhì)、氨基酸、有效磷等), 造成氮磷食入多、消化吸收少、排泄多, 從而導(dǎo)致氨氮、亞硝酸氮、磷酸鹽相對(duì)濃度較高。已有研究表明[23], 提高飼糧脂肪一定程度降低氮排泄率, 低蛋白水平可顯著降低氨氮濃度, 低蛋白和高脂肪互作可有效降低大西洋鮭(Salmo salar)的氨氮排泄量。另有研究證實(shí), 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉可降低歐洲狼鱸的總磷排放, 增加磷儲(chǔ)留[29]; 多種蛋白源混合飼料在不影響?hù)~(yú)生長(zhǎng)性能的情況下, 具有較低磷排泄[30], 均與本研究相符;同時(shí), 本試驗(yàn)低魚(yú)粉組飼糧的總磷含量偏低, 也是水體磷酸鹽含量低的原因之一。

4 結(jié)論

主要營(yíng)養(yǎng)素源及其互作顯著影響暗紋東方 鲀 的生長(zhǎng)、消化吸收和水環(huán)境。1#、9#生長(zhǎng)性能顯著提高, 3#、11#和 7#明顯提高; 低魚(yú)粉組 9#、11#、7#顯著提高胰蛋白酶和腸脂肪酶活性, 高脂肪極顯著提高吸收酶活力; 低魚(yú)粉中低蛋白組的氨氮、亞硝酸氮、磷酸鹽相對(duì)濃度變化呈現(xiàn)普遍低于其他處理組的特征。值得關(guān)注的新發(fā)現(xiàn)是, 低魚(yú)粉組9#、11#、7#營(yíng)養(yǎng)素源組合正效應(yīng)突出, 節(jié)約魚(yú)粉資源且降低飼糧成本, 具有重要理論和應(yīng)用價(jià)值。下一步工作需在本研究基礎(chǔ)上, 進(jìn)行效應(yīng)顯著低魚(yú)粉組(9#、11#、7#)的重復(fù)試驗(yàn), 以最終確定其顯著效果, 及早應(yīng)用到生產(chǎn)實(shí)踐中。

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