中藥對樹突狀細(xì)胞功能影響的研究

羅珊 余海濱 王海峰 李亞

[摘要] 樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）是目前已知的功能最強(qiáng)且唯一能激活初始型T細(xì)胞、激發(fā)初次免疫應(yīng)答的抗原呈遞細(xì)胞（antigen-presenting cell，APC），在機(jī)體疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮極為重要的作用。近年來，關(guān)于中藥對免疫功能的影響越來越受到重視，研究中藥對DC功能的影響，有助于進(jìn)一步揭示中藥治療疾病的機(jī)制和新藥的研發(fā)。本文就近幾年中藥對DC影響的研究進(jìn)行綜述。

[關(guān)鍵詞] 樹突狀細(xì)胞；中藥；免疫調(diào)控

[中圖分類號] R392 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701（2015）02-0157-04

樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）作為機(jī)體功能最為強(qiáng)大的抗原呈遞細(xì)胞（antigen-presenting cell，APC），能夠激活初始型T細(xì)胞，激發(fā)初次免疫應(yīng)答[1]，處于啟動、調(diào)控并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)，在機(jī)體疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮極為重要的作用。大量研究顯示，DC在抗腫瘤、抗病毒、腫瘤監(jiān)視、移植排斥反應(yīng)及自身免疫等過程中均起到重要作用。采用藥物干預(yù)DC成熟或誘導(dǎo)DC免疫耐受治療自身免疫性疾病、移植排斥[2]，或促進(jìn)DC成熟分化和抗原提呈能力治療癌癥，為新藥研發(fā)及新的治療手段的開展提供了思路。中藥作為免疫調(diào)節(jié)劑和促進(jìn)劑，在提高機(jī)體免疫功能、抗病等方面起到不可忽視的作用。近年來，關(guān)于中藥對免疫功能的影響越來越受到重視。因此，研究中藥對DC功能的影響，將有助于進(jìn)一步揭示中藥治療疾病的作用機(jī)制和新藥的研發(fā)。本文就近幾年中藥對DC功能影響的研究進(jìn)行綜述。

1 概述

1973年，Steinman和Cohn首次在鼠周圍淋巴器官（脾臟）的體外單細(xì)胞懸液中發(fā)現(xiàn)這種細(xì)胞，因其生長過程中會長出樹枝狀的突起，故而稱為樹突狀細(xì)胞[3]。它是目前已知的功能最為強(qiáng)大且唯一能夠激活初始型T細(xì)胞的APC，具有激發(fā)初次免疫應(yīng)答的功效。

根據(jù)其發(fā)育程度不同分為3個(gè)階段：前體階段、未成熟DC（immature DC，iDC）和成熟DC（mature DC，mDC）。DC起源于多能造血干細(xì)胞，這些前體細(xì)胞由骨髓進(jìn)入外周血，廣泛分布于全身各組織，分化發(fā)育成為iDC，主要分布在實(shí)體器官和非淋巴組織，iDC在攝取抗原或接受某些外來刺激（如炎癥因子等）時(shí)，遷移到局部淋巴結(jié)，分化發(fā)育成mDC[4]。不同分化階段的DC功能不同。組織中DC多以未成熟的狀態(tài)存在，iDC低表達(dá)協(xié)同刺激分子CD80、CD86、CD40等和粘附分子，可誘導(dǎo)T細(xì)胞的免疫耐受，具有較強(qiáng)的抗原吞噬和加工處理能力，它們可攝取、處理抗原并合成MHC-Ⅱ類分子，形成多肽MHC-Ⅱ分子復(fù)合物，并表達(dá)于細(xì)胞表面[5]。iDC在攝取抗原后開始逐步成熟，mDC攝取抗原的能力降低，但抗原提呈能力明顯增強(qiáng)，與iDC相反，DC成熟后可表達(dá)高水平抗原肽類分子復(fù)合物MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、協(xié)同刺激分子CD80、CD86、CD40等、粘附分子等[6]，分泌IL-12、IL-6、IL-10、IL-8、TNF-α等細(xì)胞因子，并迅速激活抗原特異性T細(xì)胞[7]，在激活T細(xì)胞后DC開始凋亡。DC也是體內(nèi)重要的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞，可通過分泌不同的細(xì)胞因子參與固有免疫和適應(yīng)性免疫，從而決定免疫應(yīng)答的結(jié)果（激活或耐受）及強(qiáng)度。

2 DC與疾病的關(guān)系

2.1 腫瘤

機(jī)體發(fā)生腫瘤往往是由于機(jī)體存在免疫功能異常、腫瘤細(xì)胞逃避免疫攻擊所致。DC作為功能最強(qiáng)大的APC，在免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。研究表明，腫瘤的原發(fā)病灶、轉(zhuǎn)移病灶及周圍組織中都有不同程度的DC浸潤，而DC的數(shù)量多少與腫瘤的浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)。大量研究顯示，實(shí)體瘤內(nèi)浸潤性DC的數(shù)量，與患者遠(yuǎn)處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病情惡化程度呈負(fù)相關(guān)，且浸潤性DC數(shù)量越多，患者預(yù)后越好，反之亦然[8]。

2.2 自身免疫性疾病

自身免疫性疾病是指對自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致自身組織損害所引起的疾病。大多數(shù)原因不明，以與免疫反應(yīng)有關(guān)的病理變化為主要表現(xiàn)。DC能夠激發(fā)初次免疫應(yīng)答，處于啟動、調(diào)控并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)，與多種自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。局部的炎癥反應(yīng)可誘導(dǎo)DC耐受性功能異常，啟動對自身抗原的免疫應(yīng)答[9]，當(dāng)機(jī)體喪失了對自身結(jié)構(gòu)免疫的耐受，就會導(dǎo)致針對某些特定器官的破壞過程。

2.3 心血管系統(tǒng)疾病

二十世紀(jì)以來，心血管系統(tǒng)疾病已成為人類健康與生命安全的嚴(yán)重威脅，動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是多種心血管疾病的病理基礎(chǔ)。眾多研究認(rèn)為，AS的本質(zhì)是免疫反應(yīng)介導(dǎo)的慢性炎癥病變，病變斑塊區(qū)域可見大量免疫炎癥細(xì)胞浸潤[10]?；贏S的病理本質(zhì)，有研究顯示，在AS初始階段，大量mDC聚集于病變部位并激活初始型T細(xì)胞，啟動AS發(fā)生初次免疫應(yīng)答，且在隨后的病變過程中持續(xù)參與[11]。

2.4 呼吸系統(tǒng)疾病

常見的呼吸系統(tǒng)疾病，如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）等的病機(jī)多與免疫相關(guān)的氣道慢性炎癥有關(guān)。DC作為唯一能夠激活初始型T細(xì)胞的APC，廣泛分布于呼吸道和支氣管黏膜上皮細(xì)胞，在呼吸道免疫系統(tǒng)中起著“哨兵”樣防御作用[12]。目前已知，DC對CD4+T細(xì)胞具有誘導(dǎo)分化作用，而其誘導(dǎo)分化輔助性T細(xì)胞異常所引起的對無害抗原的免疫應(yīng)答，以及DC成熟后分泌的多種炎性細(xì)胞因子，是引起呼吸道炎癥反應(yīng)的重要機(jī)制[13]。

3 中藥對DC功能的影響

通過長期的臨床總結(jié)及實(shí)驗(yàn)研究表明，很多中藥可作為免疫調(diào)節(jié)劑使用，其可通過對DC成熟度、細(xì)胞表面分子的表達(dá)、細(xì)胞因子的分泌、細(xì)胞吞噬功能及對T細(xì)胞誘導(dǎo)活化功能等途徑影響DC的生理功能，從而參與疾病的發(fā)生、發(fā)展過程。

3.1 細(xì)胞形態(tài)、成熟度

DC成熟與否是其發(fā)揮不同生理功能的先決條件。研究發(fā)現(xiàn)，一些中藥成分如人參皂苷Rg3[14]、枸杞多糖[15]、靈芝多糖[16]、靈芝孢子粉[17]、甘草多糖[18]、車前子多糖[19]、豬苓多糖[20]、香菇多糖[21]、南蛇藤提取物COE[22]、附子多糖[23]等都可以誘導(dǎo)DC的生成，使其形態(tài)典型，并促進(jìn)其分化成熟，在一定程度上呈劑量依賴性。另有研究發(fā)現(xiàn)，小檗堿[24]、雷公藤內(nèi)酯醇[25]可促進(jìn)DC凋亡，且成熟DC較未成熟DC促凋亡作用更敏感。

3.2 細(xì)胞表面分子的表達(dá)

DC在不同的生長階段表面分子的表達(dá)不同是判斷DC成熟與否的標(biāo)志，也是其功能發(fā)揮的保障。適當(dāng)濃度的附子多糖[23]可使DC高表達(dá)CD80、CD83、CD86等表面分子。人參皂苷Rg1[26]能促進(jìn)成熟DC高表達(dá)I-A/I-E分子。枸杞多糖誘導(dǎo)DC表面分子MHC-Ⅱ、CD86、CD83表達(dá)增高[27]。靈芝孢子粉能夠促進(jìn)荷瘤小鼠骨髓來源DC高表達(dá)細(xì)胞表面分子CD11a、CD86[17]。丹參酚酸B可以顯著降低人單核細(xì)胞源DC細(xì)胞表面分子的表達(dá)[28]。公藤內(nèi)酯醇對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者外周血DC表面分子的表達(dá)較健康對照者有顯著的降低作用[25]。昆布多糖也能夠下調(diào)DC表面分子CD1a、CD86的表達(dá)[29]。紫草素可以促進(jìn)CD83的表達(dá)，抑制CD80及CD86的表達(dá)[30]。

3.3 細(xì)胞因子的分泌

細(xì)胞因子在DC的成熟過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，同時(shí)，DC成熟后可分泌多種細(xì)胞因子，它們對免疫反應(yīng)有一定的調(diào)控作用。

豬苓多糖[20]、香菇多糖[21]、黃芪多糖[31]中藥成分可誘導(dǎo)DC分泌IL-12、IFN-γ顯著增多。此外，黃芪多糖還可促使單核細(xì)胞分泌TNF-α，從而誘導(dǎo)單核細(xì)胞向DC分化，并促進(jìn)DC成熟[32]。雷公藤內(nèi)酯醇[25]、昆布多糖[29]可降低DC細(xì)胞因子IL-12、IL-6、TNF-α等的分泌水平。小劑量紫草素可抑制DC分泌IL-23的水平，大劑量紫草素作用于DC則檢測不到IL-23的分泌[30]。

3.4 細(xì)胞吞噬功能

DC的吞噬功能主要表現(xiàn)在對抗原的吞噬處理，是iDC的主要功能體現(xiàn)。經(jīng)車前子多糖[19]、黃芪多糖[31]處理后的DC，吞噬功能明顯下降。而人參皂苷Rg1能增強(qiáng)未成熟DC的抗原吞噬能力，促進(jìn)成熟DC的抗原提呈能力[26]。

3.5 對T淋巴細(xì)胞增殖及其功能的影響

誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞活化與增殖是DC特有的生物功能，是啟動免疫、發(fā)揮其功能的關(guān)鍵步驟。研究顯示，人參皂苷Rg3[14]、靈芝多糖[16]、甘草多糖[18]、豬苓多糖[20]、香菇多糖[21]、枸杞多糖[15，27]、黃芪多糖[31]中藥活性成分能夠增強(qiáng)DC對T淋巴細(xì)胞的刺激能力，并促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖。而雷公藤內(nèi)酯醇可抑制SLE患者DC刺激T細(xì)胞增殖，并呈劑量依賴性[25]。紫草素可明顯抑制DC刺激淋巴細(xì)胞增殖能力[30]。

4 總結(jié)與展望

中醫(yī)藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的寶庫，歷史悠久。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，對中醫(yī)藥的研究也進(jìn)一步發(fā)展。經(jīng)過多年的臨床經(jīng)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥在疾病的預(yù)防、治療及提高機(jī)體免疫力方面具有顯著療效，尤其在自身免疫性疾病的治療方面擁有獨(dú)特的優(yōu)勢。DC作為機(jī)體最重要的專職抗原呈遞免疫細(xì)胞，在機(jī)體多種生理病理過程中起著至關(guān)重要的作用。隨著研究中藥對DC免疫功能調(diào)控的不斷深入，一方面可以更加全面地闡明中藥發(fā)揮藥效的作用機(jī)制，為新藥的研發(fā)及其臨床應(yīng)用提供新視角，同時(shí)另一方面也為新的治療手段的開發(fā)提供了思路，為免疫相關(guān)性疾病的治療帶來新的希望。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Aarntzen EH，F(xiàn)igdor CG，adema GJ，ed al. Dendritic cell vaccination and immune monitoring[J]. Cancer Immunol Immunother，2008，57（10）：1559-1568.

[2] Morelli AE，Thomson AW. Tolerogenic dendritic cells and the quest for transplant tolerance[J]. Nat Rev Immunol，2007，7（8）：610-621.

[3] Steinman RM，Lusting DS，Cohn ZA. Identification of a novel cell type in peripheral lymphoid organs of mice：Functional properties in vivo[J]. J Exp Med，1974，139（6）：1431-1445.

[4] Tsoumakidou M，Koutsopoulos AV，Tzanakis N，et al. Decreased small airway and alveolar CD83+ dendritic cells in COPD[J]. Chest，2009，136（3）：726-733.

[5] Pierre P，Turley SJ，Gatti E，et al. Developmental regulation of MHC class Ⅱ transport in mouse dendritic cells[J]. Nature，1997，388（6644）：787-792.

[6] Dilioglous S，Cruse JM，Lewis RE. Function of CD80 and CD86 on monocyte and stem cell derived dendritic cells[J].Exp Mol Pathol，2003，75（3）：217-227.

[7] Fong L，Engleman EG. Dendritic cells in cancer immunotherapy[J]. Annu Rev Immunol， 2000，18：245-273.

[8] Nakayama Y，Inoue Y，Minagawa N. Relationships between S-100 Protein-positive cells and clinicopathological factors in patients with colorectal cancer[J]. Anticancer Res，2003， 23（6）：4423-4426.

[9] Torres-Aguilar H，Blank M，Jara LJ，et al. Tolerogenic dendritic cells in autoimmune diseases：Crucial players in induction and prevention of autoimmunity[J]. Autoimmun Rev，2010，10（1）：8-17.

[10] Galkina E，Ley K. Immune and inflammatory mechanisms of atherosclerosis[J]. Annu Rev Immunol，2009，27：165-197.

[11] Tedgui A，Owens AP，Mackman N. 2011 Nobel Prize in physiology or medicine：Toll-like receptors，dendritic cells and their roles in atherosclerosis[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2011，31：2767-2768.

[12] KleinJan A，Willart M，van Rijt LS，et al. An essential role for dendritic cells in human and experimental allergic rhinitis[J]. J Allergy Clin Immunol，2006，118（5）：1117-1125.

[13] 張婷，王海洋，馬瑩，等. 樹突狀細(xì)胞與上下呼吸道炎癥反應(yīng)一致性研究進(jìn)展[J]. 醫(yī)學(xué)綜述，2012，18（4）：484-487.

[14] 宋洋，方美云，姜鳳，等. 人參皂苷Rg3促樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志，2012，6（8）：2120-2123.

[15] 單鐵英，宋永江，李梅杰，等. 枸杞多糖增強(qiáng)人樹突狀細(xì)胞抗腫瘤的機(jī)制[J]. 腫瘤防治研究，2010，37（1）：20-22.

[16] 王斌，萱垣昇，李杰芬. 靈芝多糖對小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞的增殖作用[J]. 免疫學(xué)雜志， 2006，16（5）：291-292.

[17] 孫麗華，趙明耀，黃幼田，等. 靈芝孢子粉對荷瘤小鼠樹突狀細(xì)胞的影響及其抗瘤效應(yīng)[J]. 山西醫(yī)藥雜志，2006，35（8）：698-700.

[18] 唐中生，羅亞飛，謝高宇，等. 不同濃度甘草多糖促進(jìn)臍血源樹突狀細(xì)胞分化與成熟的研究[J]. 現(xiàn)代免疫學(xué)，2013，33（6）：488-493.

[19] 唐永富，黃丹菲，殷軍藝，等. 車前子多糖對骨髓來源樹突狀細(xì)胞表型和吞噬功能的影響[J]. 食品科學(xué)，2007， 28（10）：517-520.

[20] 許文，李心群. 豬苓多糖經(jīng)TLR4刺激小鼠骨髓來源的樹突狀細(xì)胞成熟[J]. 溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，40（3）：269-272.

[21] 榮微，井歡，劉春英. 香菇多糖對荷瘤小鼠樹突狀細(xì)胞功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中醫(yī)藥學(xué)刊，2006，24（4）：681-682.

[22] 錢亞云. 南蛇藤提取物抑制肝癌血管生成及增強(qiáng)樹突狀細(xì)胞功能的研究[D]. 揚(yáng)州大學(xué)，2011.

[23] 高林林，曾升平，潘力弢. 附子多糖誘導(dǎo)肝癌患者外周血樹突狀細(xì)胞分化成熟的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國腫瘤臨床，2012，13（39）：882-885.

[24] 焦晴晴. 小檗堿對小水骨髓來源樹突狀細(xì)胞的促凋亡作用[D]. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2010.

[25] 劉冬舟，劉翠蓮，洪小平，等. 雷公藤內(nèi)酯醇對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者樹突狀細(xì)胞Toll樣受體-9表達(dá)的影響[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2011，27（11）：1911-1913.

[26] 周英武. 人參皂苷Rg1對樹突狀細(xì)胞效應(yīng)與分子機(jī)制的研究[D]. 北京中醫(yī)藥大學(xué)，2011.

[27] 張純清，單鐵英，楊書良，等. 枸杞多糖對誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟和增強(qiáng)T細(xì)胞增殖的影響[J]. 重慶醫(yī)學(xué)，2010， 39（19）：2117-2118.

[28] 劉紅櫻，孫愛軍，王時(shí)俊，等. 丹參酚酸B通過激活過氧化體增殖物激活性受體γ抑制樹突狀細(xì)胞免疫成熟的作用及其機(jī)制[J]. 中國動脈硬化雜志，2011，3（19）：265.

[29] 陳露雨. 昆布多糖對單核細(xì)胞源性樹突狀細(xì)胞成熟和功能的影響[D]. 廣州醫(yī)學(xué)院，2010.

[30] 王燕，趙京霞，林燕，等. 紫草素對人外周血單核細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞表型及功能的影響[J]. 免疫學(xué)雜志，2014，8（8）：667-676.

[31] 荊雪寧，邱 熟，王金鳳，等. 黃芪多糖誘導(dǎo)成熟的樹突狀細(xì)胞腫瘤疫苗體外抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2014，9：1103-1107.

[32] 鄧旻，陳志明，朱仕兵，等. 黃芪多糖誘導(dǎo)臍血單個(gè)核細(xì)胞向樹突狀細(xì)胞分化的免疫機(jī)制研究[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2011，29（7）：1561-1564.

（收稿日期：2014-10-24）