• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水產(chǎn)疫苗研究開發(fā)現(xiàn)狀與趨勢分析

    2015-04-09 04:42:56王忠良王蓓魯義善吳灶和
    生物技術通報 2015年6期
    關鍵詞:研究

    王忠良王蓓魯義善吳灶和

    (1.廣東海洋大學水產(chǎn)學院,湛江 524088;2.仲愷農(nóng)業(yè)工程學院,廣州 510225)

    水產(chǎn)疫苗研究開發(fā)現(xiàn)狀與趨勢分析

    王忠良1王蓓1魯義善1吳灶和2

    (1.廣東海洋大學水產(chǎn)學院,湛江 524088;2.仲愷農(nóng)業(yè)工程學院,廣州 510225)

    水產(chǎn)疫苗不僅能夠增強水產(chǎn)動物的免疫力,預防水產(chǎn)病害發(fā)生,還能減少各類藥物的使用,降低生殖生產(chǎn)成本,解決各種藥物殘留帶來的食品安全和環(huán)境污染等問題,使水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)向綠色、可持續(xù)方向發(fā)展。因此,水產(chǎn)疫苗已成為水產(chǎn)動物病害防治領域的研究熱點。綜述了水產(chǎn)疫苗的發(fā)展歷程、水產(chǎn)疫苗種類與接種方式,并介紹了水產(chǎn)疫苗關鍵技術發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢。

    水產(chǎn)疫苗;種類;接種方式;現(xiàn)狀與趨勢

    在人們對水產(chǎn)品質(zhì)量安全和環(huán)境污染問題日益關注的今天,采用各種化學藥物防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物病害的方式越來越多地受到質(zhì)疑。疫苗不僅能提高水產(chǎn)養(yǎng)殖動物機體的特異性免疫水平、有效預防疫病發(fā)生,且符合不污染環(huán)境、水產(chǎn)品無藥物殘留的要求,因此,疫苗已成為水生動物疾病防治領域研究與開發(fā)的主流產(chǎn)品,而接種疫苗也已成為國際現(xiàn)代水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)范性生產(chǎn)標準。目前,針對鮭鱒魚類、歐洲鱸魚(Perca fluviatilis)、大西洋鱈魚(Gadus morhua)等國際上主要水產(chǎn)養(yǎng)殖品種均已開發(fā)出相應的商品化疫苗,并已成為國外以鮭鱒魚類為代表的重要經(jīng)濟魚類養(yǎng)殖業(yè)成功的關鍵因素之一。在我國,水產(chǎn)疫苗的開發(fā)與應用步履蹣跚,與世界第一水產(chǎn)養(yǎng)殖大國的稱號極不相稱,更與水產(chǎn)養(yǎng)殖強國的發(fā)展目標相距甚遠。為此,本文綜述了水產(chǎn)疫苗的發(fā)展歷程、種類與接種方式,并介紹了水產(chǎn)疫苗關鍵技術發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢,以期為我國水產(chǎn)疫苗開發(fā)與應用提供參考。

    1 水產(chǎn)疫苗的發(fā)展歷程

    水產(chǎn)疫苗的研究工作始于20世紀40年代。加拿大學者Duff[1]首次將滅活的鮭魚產(chǎn)氣單胞菌口服免疫應用于鱒魚(Salmo gairdneri)獲得成功,開創(chuàng)了水產(chǎn)疫苗的新紀元。20世紀70年代,北歐和北美鮭魚工業(yè)化養(yǎng)殖初期日益嚴重的病害促進了歐美等國積極開展水產(chǎn)疫苗的研制,由荷蘭Intervet公司率先推出的首例防治鮭魚弧菌?。╒ibriosis)和腸型紅嘴?。‥nteric redmouth disease)的福爾馬林細菌性滅活疫苗在北美鮭魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中取得了巨大的商業(yè)成功,開啟了世界水產(chǎn)疫苗的商業(yè)化進程[2]。1988年,挪威法瑪克公司開發(fā)出抗冷水弧菌病的細菌滅活疫苗,并因此拯救了挪威的三文魚(Oncorhynchus keta)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)。此后,世界首例癤點病細菌滅活魚疫苗、世界首例傳染性鮭魚貧血?。↖nfectious salmon anaemia,ISA)病毒疫苗和傳染性造血壞死(Infectious haematopoietic necrosis,IHN)病毒病疫苗相繼開發(fā),使得歐洲的鮭魚養(yǎng)殖業(yè)的重大傳染性病害得到有效控制,并顯著減少了抗生素在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的使用[2]。進入21世紀后,隨著基因工程技術的發(fā)展和人們對疫苗安全性認知的深入,以基因工程疫苗為主要特征的水產(chǎn)疫苗陸續(xù)被商業(yè)許可,如荷蘭英特威公司開發(fā)的鯰魚腸敗血病減毒活菌疫苗和鯰魚柱形病減毒活疫苗等。至2012年,據(jù)不完全統(tǒng)計,全球商業(yè)化生產(chǎn)的水產(chǎn)疫苗已超過140種[3]。

    我國水產(chǎn)疫苗研究起步較晚,始于20世紀70年代[4]。早期研究的草魚出血病組織漿滅活疫苗(即土法疫苗)取得了一定的效果,從此拉開了我國水產(chǎn)疫苗研制的序幕[5]。1986年,通過草魚腎細胞(CIK)培養(yǎng)的草魚出血病病毒滅活疫苗取得了較好的免疫效果和較高的中和抗體效價,此后對草魚細菌性疫苗,如斑點氣單胞菌苗、草魚爛鰓病菌苗、腸炎菌苗等的研制也取得了較大的成果[5,6]。20世紀90年代初,對中華鱉嗜水氣單胞菌滅活菌苗以及海水鱸魚鰻弧菌口服微膠囊疫苗的研制進一步推動了我國漁用疫苗研制的進程[7,8]。近年來,隨著分子生物學、基因工程等學科的發(fā)展和國家科技投入的增加,我國水產(chǎn)疫苗研究掀開了嶄新的一頁,邁出了新的步伐。據(jù)統(tǒng)計,全國現(xiàn)有近30家科研單位開展水產(chǎn)疫苗相關研究,涉及包括病毒、細菌和寄生蟲等病原27種(類)[3]。到目前為止,有4個疫苗獲得國家新獸藥證書,分別為草魚出血病細胞滅活疫苗、魚用嗜水氣單胞菌滅活疫苗和牙鲆溶藻弧菌、鰻弧菌、遲緩愛德華菌病多聯(lián)抗獨特型抗體疫苗以及草魚出血病活疫苗;2011年初草魚出血病活疫苗生產(chǎn)使用的批準(農(nóng)業(yè)部公告1525號)正式開啟了我國水產(chǎn)疫苗產(chǎn)業(yè)化進程。

    2 水產(chǎn)疫苗的種類

    水產(chǎn)疫苗按抗病原的種類可分為細菌疫苗、病毒疫苗和寄生蟲疫苗;按組成成分可分為單價疫苗、多價疫苗和混合疫苗(多聯(lián)疫苗);按疫苗制備方式可分為活疫苗、滅活疫苗(包含土法疫苗)、亞單位疫苗及生物技術疫苗等。

    2.1 活疫苗

    在獸醫(yī)臨床中有強毒苗、弱毒苗和異源苗3種,目前水產(chǎn)活疫苗中應用較多的是用致病性已大為減弱的病毒減毒株或變異的弱毒株制備的疫苗,稱為弱毒疫苗,包括VHSV的F25(2 1)抗熱株苗、CCV減毒疫苗、癤瘡減毒疫苗、IHNV減毒疫苗和草魚出血癥細胞培養(yǎng)的弱毒疫苗[9,10]。弱毒疫苗接種后接近于自然感染,能夠有效激發(fā)魚體細胞免疫,并能在體內(nèi)繁殖,因而疫苗用量少,免疫持續(xù)時間較長,且不必添加佐劑。但其不足之處主要是活疫苗在自然條件下安全性差,可能會導致病毒的轉(zhuǎn)變而在生態(tài)環(huán)境中失去控制;同時,活疫苗貯存運輸不方便,且保存期短。

    2.2 滅活疫苗

    滅活疫苗是經(jīng)理化方法將病原微生物滅活,但其仍保持免疫原性,接種后使水生動物產(chǎn)生特異性抵抗力的疫苗。滅活疫苗研制周期短,使用安全,易于保存,但其接種后不能在體內(nèi)繁殖,因此需要接種劑量較大,免疫持續(xù)時間短,且需要加入適當?shù)淖魟┮栽鰪娒庖咝Ч?/p>

    此類疫苗包含多種組織漿滅活疫苗、弧菌滅活苗、嗜水氣單胞菌疫苗、鏈球菌疫苗,以及歐美國家鮭鱒魚養(yǎng)殖中常用的冷水病疫苗、VHS疫苗、PHV疫苗等。

    2.3 亞單位疫苗

    亞單位疫苗是去除病原體中與激發(fā)機體保護性免疫無關甚至有害的成分,但保留有效免疫原成分制作的疫苗。亞單位疫苗較全病毒疫苗除去了產(chǎn)生不良反應的物質(zhì),副作用減少。目前,水產(chǎn)上研究較多的是建立在細菌外膜蛋白、脂多糖等保護性抗原免疫原性成分基礎上的亞單位疫苗制備,但大部分還在試驗階段,沒有商業(yè)化生產(chǎn)。如利用細胞腫大虹彩病毒(Red sea bream iridovirus,RSIV)衣殼蛋白351R基因轉(zhuǎn)化大腸桿菌,經(jīng)滅活處理后注射真鯛(Pagrosomus major)可對RSIV感染產(chǎn)生很好的免疫保護作用[11]。

    亞單位疫苗以直接被合成或通過重組DNA技術生產(chǎn),不含有病原的毒力因子,并且由基因工程菌表達,安全性好,生產(chǎn)簡單易控;使用時通常需添加佐劑,或與載體偶聯(lián),以增強其免疫保護性。

    2.4 基因工程疫苗

    基因工程疫苗指應用重組DNA技術,將病原的保護性抗原基因在細菌、酵母或細胞等基因表達系統(tǒng)中體外表達,生產(chǎn)能誘導機體產(chǎn)生保護性免疫反應的病原蛋白質(zhì),再經(jīng)過分離純化而制備的疫苗。應用基因工程技術能制備不含感染性物質(zhì)的亞單位疫苗、穩(wěn)定的減毒疫苗以及多價疫苗,其兼具亞單位疫苗的安全性和活疫苗的免疫效力。

    目前,水產(chǎn)養(yǎng)殖上在研究應用的基因工程疫苗有IHNV、IPNV、FRV、鰻魚病毒和文蛤病毒等疫苗,其中傳染性胰臟壞死病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)VP2重組亞單位疫苗是目前唯一商品化的魚用重組蛋白疫苗[9]。

    2.5 DNA疫苗

    DNA疫苗是將編碼某種蛋白質(zhì)抗原的重組真核表達載體直接注射到動物體內(nèi),被宿主細胞攝取后并轉(zhuǎn)錄和翻譯表達抗原蛋白,誘導機體產(chǎn)生非特異性和特異性免疫應答,從而起到免疫保護作用。DNA疫苗有別于其他疫苗之處在于它利用載體持續(xù)表達抗原,而不是直接使用抗原。與傳統(tǒng)疫苗相比,DNA疫苗具有可誘導更全面的免疫反應、穩(wěn)定性更高、生產(chǎn)成本低、易于大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點,且既具有減毒疫苗的優(yōu)點,又無返毒的危險,被看作是繼傳統(tǒng)疫苗及基因工程亞單位疫苗之后的第三代疫苗,已成為水產(chǎn)疫苗研究和開發(fā)的熱點。

    有關水產(chǎn)DNA疫苗的研究,最早見于1996年Anderson 等和Gomdz-Chiari 等[12,13]的實驗研究。雖然DNA 疫苗的研究工作起步較晚,但已取得了令人鼓舞的成就[14]。目前DNA疫苗主要集中在鮭鱒魚類IHNV、VHSV、桿狀病毒(SVCV)、鯉春病毒(SHRV)等傳染性病毒病的防治上,而挪威已批準使用一種可注射的、用病毒蛋白VP3 制作的抗IPN疫苗。

    3 水產(chǎn)疫苗的接種方式

    現(xiàn)階段,水產(chǎn)疫苗的接種主要有注射、口服、浸泡(或噴霧)3種方式。每種接種方式在疫病預防的實用性和成本與效益方面各有利弊,而開發(fā)疫苗的高效、合理的接種方式一直是水產(chǎn)疫苗研究的重要內(nèi)容。

    3.1 注射法

    國內(nèi)外水產(chǎn)疫苗以注射接種免疫為主。根據(jù)注射接種部位的不同可分為皮下注射、肌肉注射和腹腔(胸腔)注射3種,其中腹腔(胸腔)注射接種是疫苗接種的最常用方法。注射免疫能有效刺激機體產(chǎn)生相應抗體,具有用量少、抗體滴度高、免疫持續(xù)時間長等特點,但只適合較大規(guī)格個體,易引起機體的應激反應,而且費時費力。目前,國外已開發(fā)出專門的機器用于注射免疫,但國內(nèi)尚未見相關報道。

    3.2 浸泡(噴霧)法

    繼Amend等[15]首次采用浸泡法進行魚類疫苗的免疫接種并獲得成功后,弧菌疫苗在大馬哈魚、日本鰻鱺和虹鱒的浸泡免疫中均獲得了成功。浸泡(噴霧)免疫方法操作簡單,適用于魚苗的大規(guī)模接種,且應激作用小。但直到目前為止,浸泡免疫中疫苗進入機體的路徑及作用機制尚不清晰,如疫苗是通過皮膚、鰓、側(cè)線還是其他部位進入機體、疫苗誘導的免疫是通過血液循環(huán)系統(tǒng)還是黏膜系統(tǒng)起作用等。此外,多種因素影響機體對浸泡免疫抗原的攝取,包括疫苗濃度、浸泡時間、水生動物大小、佐劑、抗原形態(tài)及水溫等[16,17]。

    3.3 口服法

    疫苗的口服免疫不受水產(chǎn)動物大小的限制,對其無任何應激作用,且方便、省時、省力。與其他免疫接種方法相比,口服法免疫更適合大規(guī)模養(yǎng)殖或分散養(yǎng)殖水產(chǎn)動物的免疫,尤其適合于多次重復免疫操作。

    然而,口服疫苗在實際應用中易受胃腸道消化酶的消化,破壞其免疫原性。因此,目前有關口服疫苗的研究主要集中在探索一種有效的載體投遞系統(tǒng),避免疫苗受消化酶及酸環(huán)境的影響。如采用海藻酸鹽、PLGA、PELA等可降解生物高分子材料包裹全菌疫苗等研究取得了良好的免疫效果;致力于建立一種能在飼料和水生動物胃腸道中保持疫苗抗原穩(wěn)定性系統(tǒng)的口服微球緩釋疫苗研究也已取得重要進展。

    4 水產(chǎn)疫苗關鍵技術發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢

    4.1 水產(chǎn)疫苗制備技術

    自1942年殺鮭氣單胞菌滅活疫苗問世以來,目前世界上商品化的水產(chǎn)疫苗仍以滅活疫苗為主,而通過理化方法將強毒野生型病原滅活仍是疫苗制備的主要技術。隨著分子生物學技術的發(fā)展進步,水產(chǎn)疫苗的研制有了更多的技術手段,如重組亞單位制備技術、基因缺失減毒技術、基因工程活載體技術和DNA疫苗制備技術等。應用分子生物學技術制備的疫苗具有諸多優(yōu)點:化學性質(zhì)更為確定,免疫特性穩(wěn)定;化學結(jié)構可知,可以進行工程設計和改造以激發(fā)特定的免疫反應;除去感染成分,不存在殘余毒性或毒性回復的隱患;可直接合成或通過重組DNA技術生產(chǎn),便于工廠化生產(chǎn),且可以朝多價疫苗研制方向發(fā)展。20多年來,水產(chǎn)疫苗基因工程制備技術發(fā)展迅速,但依然存在諸如疫苗安全、作用機理不清晰等問題和不足之處,隨著免疫學和基因工程技術的研究深入,這將是水產(chǎn)疫苗制備技術的重要發(fā)展方向和研究熱點。

    4.2 水產(chǎn)疫苗佐劑的應用

    疫苗佐劑是指與抗原同時或預先應用,能增強機體針對抗原的免疫應答能力,或改變免疫反應類型的物質(zhì)。佐劑在增加疫苗抗原的表面積,延長其在體內(nèi)的存留時間,增強巨噬細胞和免疫相關細胞的活性,提高細胞介導的致敏反應能力,加快抗體產(chǎn)生和提高抗體水平等方面均起到了重要作用。

    佐劑是伴隨著疫苗的研制而被發(fā)現(xiàn)和發(fā)展的,而最早、最廣泛應用于商品化疫苗的佐劑是礦物油佐劑和礦物鹽佐劑[3]。20世紀80年代以來,生物來源的佐劑得到了較好發(fā)展,如植物來源佐劑、細菌來源佐劑(脂多糖、霍亂毒素、鞭毛蛋白等)、細胞因子佐劑和核酸佐劑等[18-22]。20世紀90年代,隨著納米技術和材料的發(fā)展,納米微球佐劑研究取得了飛速發(fā)展,其具有副作用少、緩釋、長效、避免胃腸道消化水解等優(yōu)點[23-25]。近年來,殼聚糖、海藻酸鈉微球佐劑制備工藝日趨成熟,并得到了較好的應用。

    基于疫苗佐劑在疫苗免疫中的重要作用,新型疫苗佐劑的開發(fā)和應用將是水產(chǎn)疫苗研究的重要課題,其重點研究方向包括:新型疫苗佐劑的開發(fā)與效果探討;疫苗佐劑的作用機理;合適疫苗佐劑的選擇;疫苗佐劑安全性及其評價方法等。

    4.3 水產(chǎn)疫苗免疫基礎理論研究

    水產(chǎn)動物基礎免疫學研究的不完善,加之水產(chǎn)動物跨越的物種范圍大、種類多;同時,疫苗的免疫時機、免疫方式、免疫次數(shù)和加強免疫的時間等免疫機理還缺乏大量的實驗數(shù)據(jù)和資料支持。以上因素均嚴重制約了水產(chǎn)疫苗的研制和應用。因此,加強水產(chǎn)疫苗學基礎理論研究尤為重要。開展水產(chǎn)動物的免疫系統(tǒng)及其功能、抗原分子誘導水產(chǎn)動物機體產(chǎn)生反應的過程和免疫應答規(guī)律、病原體結(jié)構、功能、生物學性質(zhì)、水產(chǎn)疫苗設計、制作的技術基礎及方法學、漁用疫苗的免疫效果與環(huán)境、機體之間的關系等研究將是水產(chǎn)疫苗研究的又一重要方向。

    5 結(jié)語

    綜上所述,水產(chǎn)疫苗的研究開發(fā)工作正在全世界范圍內(nèi)蓬勃發(fā)展,隨著生物技術的不斷進步,水產(chǎn)疫苗的使用也呈快速發(fā)展勢頭,并將有效解決因化學藥物濫用而導致的水產(chǎn)品質(zhì)量安全和環(huán)境污染問題。在我國,水產(chǎn)疫苗的研制是個新興產(chǎn)業(yè),面臨的問題依然很多,但是,充分利用水產(chǎn)動物免疫防御系統(tǒng)機能,開發(fā)出高效、實用及多樣化的水產(chǎn)疫苗,是今后水產(chǎn)養(yǎng)殖動物病害防治的必由之路。未來,我國疫苗研發(fā)工作應緊跟國際前沿,結(jié)合現(xiàn)階段的基礎,面向水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)實際,從多方面開展相關技術研究,促進我國水產(chǎn)養(yǎng)殖的健康和可持續(xù)發(fā)展。

    [1] Duff DCB. The oral immunization of trout against bacterium Salmonicida[J]. J Immunol, 1942, 44:87-94.

    [2] 馬悅, 張元興. 國外魚類疫苗之路[J]. 海洋與漁業(yè), 2012(1):80-83.

    [3] 吳淑勤, 陶家發(fā), 鞏華, 等. 漁用疫苗發(fā)展現(xiàn)狀及趨勢[J]. 中國漁業(yè)質(zhì)量與標準, 2014, 4(1):1-13.

    [4] 楊先樂, 曹海鵬. 我國漁用疫苗的研制[J]. 水產(chǎn)學報, 2006,30(2):264-271.

    [5] 倪達書, 汪建國. 草魚生物學與疾?。跰]. 北京:科學出版社,1992:2-6, 78-86, 334-348.

    [6] 楊先樂, 陳遠新. 漁用疫苗的研究現(xiàn)狀及其發(fā)展趨勢[J]. 水產(chǎn)學報, 1996, 20(2):159-165.

    [7] 楊先樂, 柯福恩, 周劍光, 等. 中華鱉嗜水氣單胞菌滅活的研究[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學學報, 1998, 17(4):389-394.

    [8] 余俊紅, 沈繼紅, 王祥紅, 等. 鰻弧菌口服微膠囊疫苗的制備及其對鱸魚的免疫效果[J]. 中國水產(chǎn)科學, 2001, 8(2):76-79.

    [9] 鞏華, 黃志斌. 水產(chǎn)疫苗研究開發(fā)現(xiàn)狀與展望[J]. 海洋與漁業(yè),2010(1):43-47.

    [10] Strom BM, Mustamaki N, Heinikainen S, et al. Introduction of Yersinia ruckeri biotype 2 into Finnish fish farms[J]. Aquaculture, 2012(308):1-5.

    [11]Shimmoto H, Kawai K, Ikawa T, Oshima S. Protection of red sea bream Pagrus major against red sea bream iridovirus infection by vaccination with a recombinant viral protein[J]. Microbiology and Immunology, 2010, 54(3):135-142.

    [12]Anderson ED, Mourich DV, Fahrenkrug SC, et al. Genetic immunization of rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)against infectious hematopoietic necrosis virus[J]. Molecular Marine Biology and Biotechnology, 1996, 5(2):114-122.

    [13]Gomez-Chiarri M, Livingston SK, Muro-Cacho C, et al. Introduction of foreign genes into the tissue of live fish by direct injection and particle bombardment[J]. Diseases of Aquatic Organisims,1996, 27:5-12.

    [14] Kim CH, Johnson MC, Drennan JD, et al. DNA Vaccines encoding viral glycoproteins induce nonspecific immunity and Mx protein synthesis in fish[J]. J Virol, 2000, 74(15):7048-7054.

    [15]Amend DF, Fender DC. Uptake of bovine serum albumin by rainbow trout from hypersmotic solutions:a model for vaccinating fish[J]. Science, 1976:192(4241):793-794.

    [16]王玉堂. 疫苗在水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治中的作用及應用前景[J].中國水產(chǎn), 2013, 6:51-53.

    [17]Tatner MF, Horne MT. Factors influencing the uptake of 14C-labelled Vibrio anguillarum vaccine in direct immersion experiments with rainbow trout, Salmo gairdneri Richardson[J]. Journal of Fish Biology, 1998:22(5):585-591.

    [18] Sun HX, Xie Y, Ye YP. Advances in saponin-based adjuvants[J]. Vaccine, 2009, 27:1787-1796.

    [19]龔暉, 林天龍, 張曉佩, 等. 含嗜水氣單胞菌氣溶素的免疫刺激復合物的制備及其對歐洲鰻的免疫效果[J]. 水產(chǎn)學報,2009, 33(1):303-310.

    [20]許斌福, 龔暉, 陳秀錦, 等. 創(chuàng)傷弧菌外膜蛋白免疫刺激復合物最小免疫劑量測定[J]. 福建農(nóng)業(yè)學報, 2012, 27(12):1280-1282.

    [21]Díaz-Rosalesa P, Birda S, Wang TH, et al. Rainbow trout interleukin-2:cloning, expression and bioactivity analysis[J]. Fish & Shellfish Immunology, 2009, 27(3):414-422.

    [22]Oh M, Takami I, Nishizawa T, et al. Field tests of Poly(I:C)immunization with nervous necrosis virus(NNV)in sevenband grouper, Epinephelus septemfasciatus(Thunberg)[J]. Journal of Fish Diseases, 2012, 35(3):187-191.

    [23]Adomako M, St-Hilaire S, Zheng Y, et al. Oral DNA vaccination of rainbow trout, Oncorhynchus mykiss(Walbaum), against infectious haematopoietic necrosis virus using PLGA[Poly(D,L-Lactic-Co-Glycolic Acid)]nanoparticles[J]. Journal of Fish Diseases, 2012, 35(3):203-214.

    [24]Tian J, Yu J. Poly(lactic-co-glycolic acid)nanoparticles as candidate DNA vaccine carrier for oral immunization of Japanese flounder(Paralichthys olivaceus)against lymphocystis disease virus[J]. Fish & Shellfish Immunology, 2011, 30(1):109-117.

    [25]Shoemaker CA, Vandenberg GW, Désormeaux A, et al. Efficacy of a Streptococcus iniae modified bacterin delivered using OraljectTMtechnology in Nile tilapia(Oreochromis niloticus)[J]. Aquaculture, 2006, 255(1-4):151-156.

    (責任編輯 狄艷紅)

    Development Status and Trend Analysis in Aquaculture Vaccines

    Wang Zhongliang1Wang Bei1Lu Yishan1Wu Zaohe2
    (1. Fishery College,Guangdong Ocean University,Zhanjiang 524088;2. Zhongkai University of Agriculture and Engineering,Guangzhou 510225)

    Aquaculture vaccines not only boost immunity of aquatic animals and prevent aquaculture diseases, but also reduce the use of drugs, lower the cost of aquaculture reproduction and solve problems of food safety and environment pollutions caused by drug residues, and finally lead aquaculture to develop in the green and sustainable direction. As thus, aquaculture vaccines become one of the research hotspots in the diseases control for aquatic animals. In this paper, the history of vaccine development, vaccine types, and vaccine delivery methods are summarized. The status and trend of key technologies in aquaculture vaccines are introduced.

    aquaculture vaccines;vaccine types;delivery methods;status and trend

    10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.06.008

    2014-11-26

    國家自然科學基金項目(31202023),國家海洋局公益性行業(yè)科研專項(201205028-2),廣東海洋大學優(yōu)秀青年骨干教師特別資助計劃(2014001)

    王忠良,男,博士研究生,講師,研究方向:水產(chǎn)動物生物學;E-mail:leong2006@126.com

    吳灶和,教授,博士生導師,研究方向:水產(chǎn)動物病害防治;E-mail:wuzaohe@163.com

    猜你喜歡
    研究
    FMS與YBT相關性的實證研究
    2020年國內(nèi)翻譯研究述評
    遼代千人邑研究述論
    視錯覺在平面設計中的應用與研究
    科技傳播(2019年22期)2020-01-14 03:06:54
    關于遼朝“一國兩制”研究的回顧與思考
    EMA伺服控制系統(tǒng)研究
    基于聲、光、磁、觸摸多功能控制的研究
    電子制作(2018年11期)2018-08-04 03:26:04
    新版C-NCAP側(cè)面碰撞假人損傷研究
    關于反傾銷會計研究的思考
    焊接膜層脫落的攻關研究
    電子制作(2017年23期)2017-02-02 07:17:19
    黑丝袜美女国产一区| 国产免费现黄频在线看| 伊人久久国产一区二区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 七月丁香在线播放| 少妇被粗大猛烈的视频| 美女主播在线视频| av免费观看日本| 只有这里有精品99| 国产精品 国内视频| 久久久亚洲精品成人影院| 男的添女的下面高潮视频| 美女大奶头黄色视频| 男女免费视频国产| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 伊人亚洲综合成人网| 午夜日本视频在线| 又大又爽又粗| 日韩大码丰满熟妇| 亚洲精品,欧美精品| 波多野结衣一区麻豆| 操出白浆在线播放| 精品久久久久久电影网| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲国产av影院在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 最新在线观看一区二区三区 | 亚洲国产精品一区二区三区在线| 51午夜福利影视在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲七黄色美女视频| 伊人亚洲综合成人网| 丝袜人妻中文字幕| 日本色播在线视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 中国三级夫妇交换| 国产男人的电影天堂91| 亚洲国产精品一区三区| 久久精品久久精品一区二区三区| 好男人视频免费观看在线| 一区二区三区乱码不卡18| 老司机深夜福利视频在线观看 | 18在线观看网站| 国产黄频视频在线观看| 免费高清在线观看视频在线观看| 一区二区三区精品91| 制服诱惑二区| 少妇人妻久久综合中文| 爱豆传媒免费全集在线观看| 一级毛片 在线播放| 亚洲欧洲国产日韩| 又大又黄又爽视频免费| 日本一区二区免费在线视频| 国产麻豆69| 狂野欧美激情性xxxx| 国产精品人妻久久久影院| 大片电影免费在线观看免费| 午夜久久久在线观看| 搡老乐熟女国产| 我的亚洲天堂| 亚洲色图综合在线观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 五月天丁香电影| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 在线观看www视频免费| 97在线人人人人妻| 青春草视频在线免费观看| 日本欧美视频一区| 精品人妻在线不人妻| 亚洲男人天堂网一区| 国产精品.久久久| 中文字幕人妻丝袜制服| 欧美在线一区亚洲| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品无大码| 精品免费久久久久久久清纯 | 亚洲五月色婷婷综合| 国产日韩欧美视频二区| 国产精品久久久久久精品古装| 久久久久久久大尺度免费视频| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 男女午夜视频在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲av电影在线进入| 亚洲七黄色美女视频| 超色免费av| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲国产欧美在线一区| 成人漫画全彩无遮挡| 国产成人免费无遮挡视频| 精品国产国语对白av| 日本欧美国产在线视频| 999精品在线视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 两个人免费观看高清视频| 90打野战视频偷拍视频| 成人毛片60女人毛片免费| 街头女战士在线观看网站| 性少妇av在线| 国产高清国产精品国产三级| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲熟女毛片儿| 99久久人妻综合| 日韩视频在线欧美| 亚洲,欧美精品.| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 制服丝袜香蕉在线| 婷婷色麻豆天堂久久| 日本wwww免费看| 久久久精品94久久精品| 啦啦啦在线免费观看视频4| 五月天丁香电影| 久久久久久人人人人人| 日本欧美视频一区| 九草在线视频观看| 男女下面插进去视频免费观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 看免费av毛片| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 18禁观看日本| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 久久免费观看电影| 又大又黄又爽视频免费| 中文字幕色久视频| 人人澡人人妻人| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产深夜福利视频在线观看| 久久av网站| 天天操日日干夜夜撸| 国产欧美日韩综合在线一区二区| www.精华液| 国产1区2区3区精品| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 日日爽夜夜爽网站| 欧美日韩av久久| 国产野战对白在线观看| 秋霞伦理黄片| 亚洲国产日韩一区二区| 国产成人精品久久久久久| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 成人三级做爰电影| 午夜91福利影院| 久久久久国产精品人妻一区二区| 中文字幕亚洲精品专区| 赤兔流量卡办理| 久久国产精品大桥未久av| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲av男天堂| 久久ye,这里只有精品| 午夜91福利影院| 蜜桃国产av成人99| 日韩视频在线欧美| 99精国产麻豆久久婷婷| 欧美精品一区二区免费开放| 大片电影免费在线观看免费| 嫩草影院入口| 国产精品国产三级国产专区5o| 久久婷婷青草| 看十八女毛片水多多多| 国产 一区精品| 一边亲一边摸免费视频| 国产在视频线精品| 超碰97精品在线观看| 国产淫语在线视频| 午夜福利免费观看在线| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久97久久精品| av不卡在线播放| 999久久久国产精品视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 欧美最新免费一区二区三区| 丝袜人妻中文字幕| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲色图综合在线观看| 男人舔女人的私密视频| 搡老岳熟女国产| 捣出白浆h1v1| 亚洲国产欧美一区二区综合| 免费不卡黄色视频| 9色porny在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 男女午夜视频在线观看| 不卡视频在线观看欧美| a级毛片在线看网站| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲精品中文字幕在线视频| 两个人免费观看高清视频| 国产伦人伦偷精品视频| 只有这里有精品99| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 人妻人人澡人人爽人人| www.自偷自拍.com| 看免费成人av毛片| 午夜av观看不卡| 免费av中文字幕在线| 无限看片的www在线观看| 国产精品久久久久久久久免| 美女中出高潮动态图| 香蕉丝袜av| 亚洲国产av影院在线观看| 丁香六月欧美| 国产亚洲一区二区精品| 精品一品国产午夜福利视频| 久久女婷五月综合色啪小说| 在线观看免费日韩欧美大片| www.精华液| a级毛片黄视频| 亚洲成人免费av在线播放| 波野结衣二区三区在线| 久久99精品国语久久久| 啦啦啦在线观看免费高清www| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 亚洲图色成人| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲av国产av综合av卡| 美女扒开内裤让男人捅视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 亚洲国产精品999| 久久久国产精品麻豆| 国产一区二区三区av在线| 久久久精品94久久精品| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 无遮挡黄片免费观看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产一区二区三区av在线| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲成人一二三区av| 99国产精品免费福利视频| 欧美日韩成人在线一区二区| www.熟女人妻精品国产| 热99国产精品久久久久久7| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 捣出白浆h1v1| 男人操女人黄网站| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产日韩欧美视频二区| 午夜福利乱码中文字幕| 精品福利永久在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 精品人妻一区二区三区麻豆| 免费高清在线观看日韩| 少妇人妻 视频| netflix在线观看网站| 久久精品国产a三级三级三级| 成人亚洲精品一区在线观看| 香蕉国产在线看| 久久综合国产亚洲精品| 韩国av在线不卡| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品欧美亚洲77777| 欧美日韩精品网址| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲精品自拍成人| www.熟女人妻精品国产| 少妇 在线观看| kizo精华| 91aial.com中文字幕在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日韩一区二区三区影片| 欧美激情 高清一区二区三区| 一级片免费观看大全| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 9热在线视频观看99| 一区福利在线观看| 1024视频免费在线观看| 久久久精品94久久精品| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 久久狼人影院| 日韩一本色道免费dvd| 激情五月婷婷亚洲| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 久久ye,这里只有精品| 蜜桃国产av成人99| 国产欧美亚洲国产| 国产麻豆69| 国产精品久久久久成人av| 欧美在线黄色| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲五月色婷婷综合| 午夜福利免费观看在线| 亚洲伊人久久精品综合| 看免费av毛片| 久久久久久人妻| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 中国三级夫妇交换| 丝袜脚勾引网站| 高清视频免费观看一区二区| 成人手机av| 国产av国产精品国产| 美女视频免费永久观看网站| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产极品粉嫩免费观看在线| 99九九在线精品视频| videos熟女内射| 叶爱在线成人免费视频播放| 99久久精品国产亚洲精品| www日本在线高清视频| 久热这里只有精品99| 两性夫妻黄色片| netflix在线观看网站| 搡老岳熟女国产| 1024视频免费在线观看| 91老司机精品| 99久久人妻综合| 色网站视频免费| 精品久久蜜臀av无| 久久久久精品性色| 亚洲人成网站在线观看播放| 又大又爽又粗| 国产成人av激情在线播放| 国产一级毛片在线| 国产精品一区二区在线观看99| 精品久久蜜臀av无| 亚洲五月色婷婷综合| 欧美黑人欧美精品刺激| 香蕉国产在线看| 午夜日韩欧美国产| 日本91视频免费播放| 一级片免费观看大全| 欧美久久黑人一区二区| 飞空精品影院首页| 99国产综合亚洲精品| 国产激情久久老熟女| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产毛片在线视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产在视频线精品| 男人添女人高潮全过程视频| 一级,二级,三级黄色视频| 国产一区二区 视频在线| 亚洲av综合色区一区| 亚洲中文av在线| 中国三级夫妇交换| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 搡老岳熟女国产| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲国产成人一精品久久久| 女性生殖器流出的白浆| 日韩大片免费观看网站| 我要看黄色一级片免费的| 久热这里只有精品99| 日本午夜av视频| 超碰成人久久| 精品一区二区三卡| 最新的欧美精品一区二区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲精品视频女| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久精品国产a三级三级三级| 久久国产精品大桥未久av| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲成人一二三区av| 岛国毛片在线播放| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 国产一区二区激情短视频 | 国产精品蜜桃在线观看| 啦啦啦 在线观看视频| 国产一区二区在线观看av| 我的亚洲天堂| 亚洲av综合色区一区| 色网站视频免费| 国产精品 欧美亚洲| 国产精品一二三区在线看| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 在线观看免费午夜福利视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 一级爰片在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产精品免费大片| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲,欧美,日韩| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 中国三级夫妇交换| 免费日韩欧美在线观看| 美女中出高潮动态图| 免费观看a级毛片全部| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产在视频线精品| 国产成人午夜福利电影在线观看| 人人妻人人澡人人看| 日韩欧美精品免费久久| 久久久精品免费免费高清| 成人国产麻豆网| 一级a爱视频在线免费观看| av有码第一页| 国产一区二区在线观看av| 在现免费观看毛片| 国产又色又爽无遮挡免| 国产一区二区在线观看av| 国产精品一区二区精品视频观看| 黄色一级大片看看| 大码成人一级视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 男女之事视频高清在线观看 | 久久免费观看电影| 热re99久久国产66热| 尾随美女入室| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲熟女毛片儿| 精品国产乱码久久久久久男人| 激情五月婷婷亚洲| 中文字幕制服av| 久久精品国产亚洲av高清一级| 观看美女的网站| 国产成人系列免费观看| 国产精品一国产av| 亚洲精品日本国产第一区| 成人亚洲精品一区在线观看| 精品午夜福利在线看| 热re99久久精品国产66热6| 国产成人精品在线电影| 国产亚洲欧美精品永久| 性色av一级| 免费高清在线观看日韩| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 美女视频免费永久观看网站| 国产福利在线免费观看视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 男人添女人高潮全过程视频| 99热国产这里只有精品6| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产av精品麻豆| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 两性夫妻黄色片| 热99国产精品久久久久久7| 欧美黑人欧美精品刺激| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 精品国产露脸久久av麻豆| 91国产中文字幕| 亚洲精品国产av成人精品| www.av在线官网国产| 黑人猛操日本美女一级片| 久久久国产欧美日韩av| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲精品第二区| av.在线天堂| 中文字幕av电影在线播放| 国产一卡二卡三卡精品 | 一本久久精品| 国产一区二区激情短视频 | 色94色欧美一区二区| 人人澡人人妻人| 亚洲视频免费观看视频| 亚洲av福利一区| 国产在线一区二区三区精| 中文欧美无线码| 久久久久国产精品人妻一区二区| 欧美最新免费一区二区三区| 日本av手机在线免费观看| 久久久欧美国产精品| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 精品人妻在线不人妻| 国产成人免费观看mmmm| 韩国av在线不卡| 美女大奶头黄色视频| 无限看片的www在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| xxxhd国产人妻xxx| 另类亚洲欧美激情| 色综合欧美亚洲国产小说| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 日本色播在线视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产1区2区3区精品| 免费在线观看完整版高清| 国产精品免费大片| 国产成人系列免费观看| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲精品在线美女| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 色94色欧美一区二区| 一区二区三区四区激情视频| 尾随美女入室| 精品一区在线观看国产| 午夜免费观看性视频| 最近最新中文字幕免费大全7| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 成人亚洲欧美一区二区av| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 久久鲁丝午夜福利片| 精品一区在线观看国产| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 中国三级夫妇交换| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 在线观看免费午夜福利视频| 丝袜在线中文字幕| 国产 一区精品| 欧美亚洲日本最大视频资源| 一区二区三区精品91| 亚洲五月色婷婷综合| 1024视频免费在线观看| 老司机在亚洲福利影院| 满18在线观看网站| 国产精品嫩草影院av在线观看| 在线天堂最新版资源| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产精品一区二区在线观看99| 美女福利国产在线| 成人免费观看视频高清| 中文字幕av电影在线播放| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲国产精品999| 人人澡人人妻人| 久久久久精品人妻al黑| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 精品一区二区三区av网在线观看 | 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 性少妇av在线| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 女人精品久久久久毛片| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产精品人妻久久久影院| 欧美精品高潮呻吟av久久| 久久久久视频综合| 美女午夜性视频免费| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲国产看品久久| 国产男女内射视频| 久久久精品免费免费高清| 国产激情久久老熟女| 秋霞伦理黄片| 久久久精品94久久精品| 国产av一区二区精品久久| 制服人妻中文乱码| 国产毛片在线视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 美女福利国产在线| 国产av精品麻豆| av卡一久久| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲国产精品成人久久小说| 男女免费视频国产| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 大话2 男鬼变身卡| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 1024视频免费在线观看| 国产乱来视频区| 国产精品一国产av| 亚洲美女搞黄在线观看| 极品人妻少妇av视频| 午夜福利视频在线观看免费| 精品午夜福利在线看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲,欧美精品.| 激情视频va一区二区三区| 久久久精品免费免费高清| av一本久久久久| 人妻一区二区av| 久久国产亚洲av麻豆专区| 大陆偷拍与自拍| 日本欧美国产在线视频| 国产精品 国内视频| 久久人人爽人人片av| 国产精品无大码| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 久久这里只有精品19| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲欧洲日产国产| 人妻一区二区av| 中文字幕av电影在线播放| 国产在线免费精品| 日韩欧美精品免费久久| 午夜福利网站1000一区二区三区| 亚洲精品第二区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 韩国精品一区二区三区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产免费又黄又爽又色| 欧美国产精品一级二级三级| 午夜福利,免费看| 一二三四中文在线观看免费高清| 免费高清在线观看日韩| 无限看片的www在线观看| 麻豆av在线久日|