GRB7家族蛋白的功能及研究進(jìn)展

鞏 斌, 熊燊源, 李良遠(yuǎn), 代 蓉, 楊菊鳳, 萬鵬程, 石國慶

(1. 石河子大學(xué) 動物科技學(xué)院， 石河子 832000； 2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，石河子 832000； 3. 山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院， 濰坊 261061)

GRB7家族蛋白的功能及研究進(jìn)展

鞏 斌1， 2, 熊燊源1， 2, 李良遠(yuǎn)1, 代 蓉2, 楊菊鳳3, 萬鵬程2, 石國慶2

(1. 石河子大學(xué) 動物科技學(xué)院， 石河子 832000； 2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，石河子 832000； 3. 山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院， 濰坊 261061)

GRB7及其家族成員GRB10和GRB14都是重要的銜接蛋白，含有3種結(jié)構(gòu)區(qū)域：N端的富含脯氨酸區(qū)、中間的GM區(qū)和C端的SH2結(jié)構(gòu)域。GRB7家族蛋白通過與不同酪氨酸激酶受體及其他含磷氨基酸蛋白相互作用調(diào)控許多細(xì)胞的功能，如細(xì)胞遷移、腫瘤發(fā)生、基因表達(dá)、血管形成、胚胎發(fā)育和代謝調(diào)控等。描述了grb7、grb10和grb14的生物學(xué)功能和涉及的表達(dá)調(diào)控機(jī)制。

銜接蛋白; GRB7; GRB10; GRB14

生長因子受體結(jié)合蛋白7(GRB7)家族是由GRB7、GRB10和GRB14 3個成員組成，它們每一個成員都存在許多個剪接變體。這些銜接蛋白發(fā)現(xiàn)于哺乳動物細(xì)胞，能識別結(jié)合多個細(xì)胞表面受體及下游信號，從而與其他蛋白產(chǎn)生相互作用。GRB7家族蛋白在不同組織中差異表達(dá)，它們的激酶反應(yīng)尚未被完全證實，但它們的磷酸化位點(diǎn)在絲氨酸、蘇氨酸和絡(luò)氨酸。GRB7家族蛋白主要定位于胞漿，在質(zhì)膜、灶性接觸和部分線粒體中也有發(fā)現(xiàn)，主要通過SH2結(jié)構(gòu)域與許多受體酪氨酸激酶和其他信號分子連接。GRB7主要調(diào)節(jié)腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移和哺乳動物胚胎遷移[1-2]，GRB10主要調(diào)控哺乳動物生長發(fā)育、原腸運(yùn)動和血糖調(diào)節(jié)等，GRB14主要在胰島素信號和成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)信號調(diào)節(jié)上有重要作用[3]。

1 GRB7家族蛋白概況

GRB7家族蛋白由GRB7、GRB10和GRB14 3個成員構(gòu)成。該家族成員包含了保守的RA(Ras Associating)、PH(Pleckstrin Homology)、BPS(Between Pleckstrin and Src)和SH2(Src Homology 2)結(jié)構(gòu)域，其中RA、PH、BPS結(jié)構(gòu)域與MIG-10(mitogen inducible gene-10)具有同源性也稱為GM結(jié)構(gòu)域[4]，故結(jié)構(gòu)上具有3個保守區(qū)域[5]：氨基端的富含脯氨酸區(qū)、中間的GM區(qū)和羧基端的SH2結(jié)構(gòu)域。該蛋白家族的成員與許多信號通路有關(guān)[6]，包括：胰島素、成纖維細(xì)胞生長因子受體(Fibroblast growth factor receptor, FGFR)、局部黏著斑激酶(Focal adhesion kinase, FAK)、血小板衍生生長因子受體(Platelet-derived growth factor receptor, PDGFR)和表皮生長因子受體(Epidermal growth factor receptor, EGFR)等。作用機(jī)制是被稱為銜接(adaptor)蛋白的GRB7/10/14通過SH2結(jié)構(gòu)域直接結(jié)合磷酸化的受體酪氨酸激酶位點(diǎn)。

2 GRB7家族蛋白的功能與機(jī)理

2.1 GRB7蛋白

GRB7蛋白是一個含535個氨基酸殘基的蛋白,結(jié)構(gòu)中SH2結(jié)構(gòu)域是識別胞膜酪氨酸激酶受體參與級聯(lián)酶促反應(yīng)的位點(diǎn)。GRB7的分布具有明顯的組織特異性，人體內(nèi)在胰腺表達(dá)較高，腎、胎盤、前列腺及小腸表達(dá)適中，結(jié)腸、肝臟、肺及睪丸表達(dá)較低。GRB7是重要的銜接蛋白，主要調(diào)節(jié)腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移和哺乳動物胚胎遷移[2-3]。

2.1.1 腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移 人體上GRB7定位17號染色體17q12～21區(qū)，研究表明在許多乳腺癌細(xì)胞grb7與her2表現(xiàn)共同高表達(dá)[7]。關(guān)于GRB7腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移方面的研究，證實GRB7高表達(dá)病例的侵襲轉(zhuǎn)移能力顯著強(qiáng)于低表達(dá)病例。有研究表明，GRB7、ERK和FOXM1的異常上調(diào)和激活與人類腫瘤細(xì)胞的攻擊性有密切聯(lián)系[8]，主要依靠羧基端的SH2結(jié)構(gòu)域,GRB7參與介導(dǎo)FAK受體和EPHB1受體的信號通路,調(diào)控腫瘤的發(fā)生與轉(zhuǎn)移。在人胃癌和食管癌細(xì)胞系，包括原發(fā)性胃癌和食道癌，尤其在食道下段，grb7和erbb2共同擴(kuò)增或過表達(dá)。部分食道癌患者中，檢測不到grb7擴(kuò)增，但其mRNA同erbb2或egfr一起過表達(dá)或共表達(dá)[9]。已知ERBB2陽性的腫瘤細(xì)胞，細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，惡性程度高，GRB7和ERBB2共高表達(dá)的乳腺癌患者易發(fā)生腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移[10-11]。有研究發(fā)現(xiàn)，外周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的N1期胰腺癌細(xì)胞在非磷酸化肽段作用下可以抑制GRB7與FAK結(jié)合，癌細(xì)胞在纖黏蛋白中的轉(zhuǎn)移能力明顯下降，體外實驗證實了GRB7可以抑制癌細(xì)胞的遷移和轉(zhuǎn)移，但不影響癌細(xì)胞的增殖。腫瘤領(lǐng)域研究證實，GRB7高表達(dá)會引起其侵襲與轉(zhuǎn)移的活性改善。

2.1.2 哺乳動物胚胎遷移 GRB7通過其PH結(jié)構(gòu)域與磷脂如磷酸肌醇相互作用，可能涉及哺乳動物早期胚胎的運(yùn)動。GRB7還可以通過其RA結(jié)構(gòu)域與RAS蛋白產(chǎn)生相互作用，影響細(xì)胞的生長、分化和蛋白的分泌、運(yùn)輸。體外實驗發(fā)現(xiàn)GRB7通過與FAK或EPHB1受體的直接相互作用，參與整聯(lián)蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞遷移[12]。研究發(fā)現(xiàn)，GRB7的GM區(qū)跟胚胎發(fā)育中參與神經(jīng)細(xì)胞遷移的MIG-10蛋白具有高度同源性[4]，推測GRB7可能涉及動物胚胎發(fā)育遷移。GRB7對細(xì)胞遷移和腫瘤轉(zhuǎn)移具有調(diào)控作用[13]，早期胚胎附植與腫瘤侵襲過程具有極大的相似性。湯軍等[2]在早孕小鼠的研究表明，經(jīng)熒光定量PCR分別檢測未孕(d0)和懷孕早期(d1-7)小鼠子宮內(nèi)膜組織發(fā)現(xiàn)均有GRB7 mRNA表達(dá)，且懷孕第5天達(dá)到峰值，免疫組化和蛋白印跡顯示GRB7蛋白表達(dá)規(guī)律與熒光定量PCR基本一致，提示它可能涉及子宮內(nèi)膜細(xì)胞分化、蛻膜化和維持妊娠等相關(guān)內(nèi)容。前期預(yù)實驗，經(jīng)組織表達(dá)譜檢測綿羊胚胎附植期grb7表達(dá)具有組織特異性，GRB7的mRNA在脾臟、垂體、腎臟、輸卵管、卵巢、膀胱及子宮體等組織出現(xiàn)表達(dá)，且子宮體、輸卵管及腎臟呈現(xiàn)較高含量。利用熒光定量PCR檢測GRB7的mRNA在綿羊胚胎附植期子宮內(nèi)膜組織的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)mRNA表達(dá)呈動態(tài)變化,推測GRB7可能在綿羊胚胎附植中發(fā)揮一定作用。

2.2 GRB10蛋白

GRB10含有600個氨基酸殘基，廣泛存在哺乳動物各組織中，但表達(dá)不均勻。GRB10在小鼠上是在11號染色體，人和黑猩猩上定位7號染色體。目前，GRB10蛋白主要與胰島素/胰島素樣信號通路相關(guān)聯(lián)，主要參與配體誘導(dǎo)的受體泛素化和內(nèi)吞過程。grb10轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)生長障礙，而小鼠grb10的敲除實驗發(fā)現(xiàn)胚胎和胎盤大量增生，表明GRB10可能參與胚胎細(xì)胞生長調(diào)控和胰島素信號通路調(diào)節(jié)[14-15]。

GRB7、GRB10、GRB14家族蛋白與許多信號通路相關(guān)聯(lián)，GRB10主要與胰島素信號調(diào)控的細(xì)胞生長有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，小鼠胚胎e14.5，GRB10在響應(yīng)胰島素的組織如肌肉和肝臟廣泛表達(dá)。有報道稱，GRB10在小鼠胚胎前期和中期表達(dá)量較高[14]。張凌波等[16]研究顯示，晚神經(jīng)胚和尾芽時期的爪蟾胚胎中，GRB10廣泛表達(dá)于肌肉和肝臟，原腸胚時期表達(dá)于中胚層和內(nèi)胚層。

2.2.1 哺乳動物生長發(fā)育調(diào)控 GRB10蛋白是一種強(qiáng)效的生長抑制劑，涉及配體誘導(dǎo)的受體泛素化和內(nèi)吞過程。細(xì)胞中不能被NEDD4泛素化，而是以GRB10/ NEDD4復(fù)合物的形式在NEDD4與IGF-IR之間發(fā)揮橋梁作用，調(diào)控泛素化和IGF-IR。GRB10蛋白能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖，與NEDD4結(jié)合后負(fù)調(diào)控IGF-IR依賴性細(xì)胞增殖，增強(qiáng)IGF-I內(nèi)源化、泛素化和IGF-IR的降解以及信號長期衰減。反之，利用NEDD4促進(jìn)泛素化和內(nèi)源化的作用與GRB10共同負(fù)調(diào)控IGF-I型依賴性細(xì)胞增殖[17]。利用GRB10對IGF-I的特異抑制性可以調(diào)控細(xì)胞信號和DNA合成。GRB10是重要的銜接蛋白，體外實驗證實MEG1/GRB10是IR和IGF1R信號通路的接頭蛋白。有報道，體內(nèi)MEG1/GRB10同胰島素和IGF-IR共同作用負(fù)調(diào)控IGFs[18]。出生3～4周斷奶的MEG1、GRB10轉(zhuǎn)基因小鼠生長遲緩，表示MEG1、GRB10異位表達(dá)對產(chǎn)后IGF-I的抑制是通過IGF1R介導(dǎo)實現(xiàn)的[19]。grb10轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)生長障礙,而基因敲除處理后會引起過度生長和骨骼肌肥大等不良發(fā)育，說明GRBl0與生長發(fā)育異常有關(guān)。最新報道發(fā)現(xiàn)GRB10是一種促進(jìn)有絲分裂的銜接蛋白[20]。

2.2.2 原腸運(yùn)動的調(diào)控 張凌波等[16]通過過表達(dá)和敲減實驗證實GRB10涉及調(diào)節(jié)原腸運(yùn)動中細(xì)胞運(yùn)動。目前，WNT/PCP信號通路主要調(diào)節(jié)原腸運(yùn)動，主要靶點(diǎn)是細(xì)胞骨架[21]，利用Frizzled-Dishevelled復(fù)合物向下游呈遞信號，激活JNK和小G蛋白RHO。細(xì)胞骨架重組能夠構(gòu)建細(xì)胞極性和調(diào)節(jié)細(xì)胞運(yùn)動。作為中心分子的Dishevelled是激活JNK和小G蛋白RHO的必要條件。張凌波等[16]研究顯示，GRB10的過表達(dá)能夠激活JNK，而且GRB10還是WNT11、FZ7和DSH激活JNK的必要條件。以上結(jié)果說明GRB10通過影響DSH或DSH下游組分參與傳導(dǎo)了WNT、PCP信號。

原腸運(yùn)動時期的細(xì)胞遷移和細(xì)胞運(yùn)動均涉及細(xì)胞骨架重排和偽足形成。有研究發(fā)現(xiàn)IGF信號通路通過抑制XBRA的表達(dá)，可以間接調(diào)節(jié)原腸運(yùn)動。有文獻(xiàn)報道GRB10沒有直接參與原腸運(yùn)動中細(xì)胞遷移，但GRB10與EPHB1可以產(chǎn)生相互作用[22]，通過EPHRIN/EPH受體調(diào)節(jié)細(xì)胞運(yùn)動。此外，有報道稱GRB10能夠與許多受體酪氨酸激酶(RTKs)相互作用參與調(diào)節(jié)原腸運(yùn)動，比如ERB和ROR激酶[23-24]。綜上所述，GRB10通過其包含的不同結(jié)構(gòu)域與多種蛋白相互作用可能作為一種由受體向下游組分呈遞信號的銜接蛋白。

2.2.3 血糖調(diào)控 GRB10與GRB14是聯(lián)系密切的效應(yīng)蛋白，能直接與胰島素受體結(jié)合，調(diào)控胰島素受體磷酸化，并向下游轉(zhuǎn)導(dǎo)信號，最終引起血糖調(diào)控。grb10或grb14單一基因缺陷的小鼠均可隨胰島素信號上調(diào)呈現(xiàn)改善的血糖平衡，引起對應(yīng)身體組成變化。小鼠基因敲除試驗證實，敲除兩個基因的復(fù)合體與缺失grb10相比呈現(xiàn)瘦肉量增加；其中某個基因缺失仍可使IRS-1的磷酸化水平和AKT活性水平上調(diào)，但兩個基因同時缺失時胰島素信號停止增強(qiáng)[18]，grb10的敲除提高了胰島素信號和敏感性，GRB10過表達(dá)則涉及與胰島素調(diào)控有關(guān)聯(lián)的血糖運(yùn)輸[25]，以上說明GRB10和GRB14通過參與胰島素信號調(diào)控共同調(diào)節(jié)糖代謝的同時還存在相對獨(dú)立性調(diào)控。糖耐量的受損可能是II型糖尿病患者的病因?？挂葝u素的轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)高胰島素水平，說明MEG1、GRB10與胰島素存在級聯(lián)負(fù)調(diào)節(jié)[19]，胰腺腺泡細(xì)胞表現(xiàn)嚴(yán)重萎縮可能與胰腺中MEG1/GRB10信號高表達(dá)有關(guān)。這種結(jié)果同樣出現(xiàn)在if和igflr雙敲除的小鼠，表示MEG1/GRB10對胰島素和IGF-I受體的活性具有抑制作用。體內(nèi)MEG1、GRB10信號與胰島素和IGF-IR相互作用對IGFs增長途徑負(fù)調(diào)控[18]。此外，GRB10構(gòu)筑了自胚胎期至成體階段葡萄糖代謝調(diào)控系統(tǒng)。

2.3 GRB14蛋白

人體上GRB14定位2號染色體2q22-24區(qū)[26]，含540個氨基酸殘基，其mRNA表達(dá)具有組織特異性，心臟、肝臟、腎臟、胰臟、骨骼肌、卵巢和睪丸高表達(dá)，腎胚胎細(xì)胞、前列腺癌細(xì)胞系以及乳癌細(xì)胞中也大量存在。研究發(fā)現(xiàn)，GRB14主要在胰島素信號和FGF信號調(diào)節(jié)上發(fā)揮重要功能[3]。

2.3.1 胰島素信號調(diào)節(jié) GRB10和GRB14是功能密切相關(guān)的效應(yīng)蛋白，可以直接跟胰島素受體作用，調(diào)控胰島素受體磷酸化，grb10或grb14單一基因缺陷的小鼠均可隨胰島素信號上調(diào)呈現(xiàn)改善的血糖平衡，引起對應(yīng)身體組成的改變。GRB14蛋白對胰島素受體的功能活性具有抑制作用，在小鼠肝臟與胰島素受體作用引起胰島素受體催化活性改變和胰島素強(qiáng)烈興奮[27]。關(guān)于酪氨酸激酶的體外分析實驗證實，GRB14通過影響受體的自磷酸化直接抑制胰島素受體對底物的催化活性。有研究發(fā)現(xiàn)GRB14中PIR結(jié)構(gòu)域涉及抑制胰島素受體的催化活性。GRB14蛋白能調(diào)控胞內(nèi)胰島素活性，胰島素與受體完成結(jié)合，胞內(nèi)胰島素活性首先呈現(xiàn)誘導(dǎo)其受體酪氨酸殘基自磷酸化。這些殘基位于胰島素受體家族或含SH2結(jié)構(gòu)域的蛋白，可以傳遞胰島素信號，是細(xì)胞內(nèi)特異性效應(yīng)器的結(jié)合位點(diǎn)。

2.3.2 FGF信號調(diào)節(jié) 成纖維細(xì)胞生長因子家族(FGFs)總共由20多個生長因子組成, 是哺乳動物生長發(fā)育的決定性調(diào)節(jié)器。Grose等[28]認(rèn)為FGFs的突變、表達(dá)和活性的失調(diào)都可能引起發(fā)育異常和腫瘤發(fā)生。趙志超等[29]利用組織表達(dá)譜對grb14進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，mRNA在肝臟、腎臟、輸卵管、卵巢、黃體、垂體等組織高表達(dá)，經(jīng)熒光定量PCR檢測分析發(fā)現(xiàn)grb14在各級卵泡杜洛克豬和梅山豬表達(dá)量差異顯著，由此推測GRB14可能與哺乳動物產(chǎn)仔數(shù)和胚胎生長發(fā)育有關(guān)。Cariou等[3]指出, FGFR是一種受體酪氨酸激酶，同胰島素受體一樣可以跟GRB14產(chǎn)生相互作用。有研究發(fā)現(xiàn)GRB14的mRNA在許多人乳腺和前列腺癌患者中高表達(dá)，表明GRB14可能正向調(diào)控細(xì)胞增生。有研究表明GRB14能夠與活化的FGF受體結(jié)合，而在小鼠胚胎的成纖維細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，敲除grb14處理使FGF誘導(dǎo)的AKT磷酸化水平增強(qiáng)[30]。

3 展望

目前對人、豬、小鼠、爪蟾、綿羊等研究發(fā)現(xiàn)，GRB7主要調(diào)節(jié)腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移和哺乳動物胚胎遷移[1-2]，GRB10主要調(diào)控哺乳動物生長發(fā)育、原腸運(yùn)動和血糖調(diào)節(jié)等，GRB14主要在胰島素信號和FGF信號調(diào)節(jié)上有重要作用[3]。故認(rèn)為GRB7家族蛋白成員可能在哺乳動物胚胎期和個體生長發(fā)育過程中發(fā)揮一定作用，也可能在反芻動物生長發(fā)育發(fā)揮重要影響，經(jīng)前期預(yù)實驗發(fā)現(xiàn)GRB7家族基因?qū)d羊胚胎附植可能產(chǎn)生一定影響，但未見此類報道，后期計劃開展GRB7家族基因?qū)Ψ雌c動物生長發(fā)育的基礎(chǔ)研究。

反芻動物養(yǎng)殖是新疆畜牧業(yè)的支柱，對人民生活水平提高和社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展意義重大。隨著人口持續(xù)增長，當(dāng)今社會的人地矛盾和糧食危機(jī)越來越嚴(yán)峻，大舉發(fā)展反芻動物養(yǎng)殖成為養(yǎng)殖新方向，具有廣闊的前景。因此，我們可以把grb7、grb10、grb14作為候選基因，對反芻動物生長發(fā)育調(diào)控機(jī)制進(jìn)行研究，通過實時熒光定量RT-PCR、免疫組化和Western blot等方法研究基因在胚胎生長發(fā)育過程的時空表達(dá)調(diào)控機(jī)制，利用相應(yīng)分子遺傳標(biāo)記研究基因的突變性對家畜經(jīng)濟(jì)性狀的影響和在動物繁育的作用，以便為反芻動物后續(xù)品種改良和選育工作提供理論基礎(chǔ)。

[1]Nencioni A, Cea M, Garuti A, et al. Grb7 upregulation is a molecular adaptation to HER2 signaling inhibition due to removal of Akt-mediated gene repression [J]. PLoS One, 2010, 5(2):1-10.

[2]湯 軍,李 榮,耿艷清,等.GRB7基因在早孕小鼠子宮內(nèi)膜中的表達(dá)[J]. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2013,38(10)：1149-1153.

[3]Cariou B, Bereziat V, Moncoq K, et al. Regulation and functional roles of GRB14[J]. Front Biosci, 2004, 9: 1626-1636.

[4]Sharareh S R, Tabitha A P, Andrew M B, et al. Grb7 binds to Hax-1 and undergoes an intramolecular domain association that offers a model for Grb7 regulation[J]. J Mol Recognit, 2011, 24(2): 314-321.

[5]張 丹,高友鶴.生長因子受體結(jié)合蛋白7(Grb7)研究進(jìn)展[J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床, 2011,31(4):467-470.

[6]Zhang D, Shao C, Hu S, et al. Novel nonphosphorylated peptides with conserved sequences selectively bind to Grb7 SH2 domain with affinity comparable to its phosphorylated ligand[J]. PLoS One, 2012, 7(11):1-8.

[7]Glynn R W, Miller N, Kerin M J.17q12-21-the pursuit of targeted therapy in breast cancer[J].Cancer Treat Rev, 2010, 36(3): 224-229.

[8]David W C, Winnie W Y, Patty C H, et al. Targeting GRB7/ERK/FOXM1 signaling pathway impairs aggressiveness of ovarian cancer cells[J]. PLoS One, 2012, 7(12): 1-10.

[9]Dahlberg P S, Jacobson B A, Dahal G, et al. ERBB2 amplifications in esophageal adenocarcinoma[J]. Ann Thoracic Surg. 2004, 78(5):1790-1800.

[10]Staaf J, Jensson G, Ringner M, et al. High-resolution genomic and expression analyses of copy number alterations in HER2-amplified breast cancer[J].Breast Cancer Res, 2010, 12(3): R25.doi: 10.1186/bcr2568.

[11]Bai T, Luoh S W. GRB-7 facilitates HER-2/Neu-mediated signal transduction and tumor formation[J]. Carcinogenesis, 2008, 29(3):473-479.

[12]Shen T L. Guan J L. Grb7 in intracellular signaling and its role in cell regulation[J]. Front Biosci, 2004, 9: 192-200.

[13]Sally C P, Tabitha A P, Dennis L J, et al. The intertwining of structure and function: proposed helix swapping of the SH2 domain of Grb7, A regulatory protein implicated in cancer progression and inflammation[J]. Crit Rev Immunol, 2010, 30(3):299-304.

[14]Charalambous M, Smith F M, Bennett W R, et al. Disruption of the imprinted Grb10 gene leads to disproportionate overgrowth by an Igf2-independent mechanism[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2003, 100: 8292-8297.

[15]Wang L, Balas B, Christ-Roberts C Y, et al. Peripheral disruption of the Grb10 gene enhances insulin signaling and sensitivity in vivo[J].Mol Cell Biol, 2007, 27: 6497-6505.

[16]張凌波.GRB10在爪蟾早期胚胎發(fā)育中的功能研究[D]. 北京:清華大學(xué), 2008.

[17]Monami G, Emiliozzi V, Morrione A, et al. Grb10/Nedd4-mediated multiubiquitination of the insulin-like growth factor receptor regulates receptor internalization[J]. J Cell Physiol, 2008, 216: 426-437.

[18]劉 齊. Grb10基因在小鼠胚胎及胎盤的表達(dá)譜分析[D]. 哈爾濱:哈爾濱工業(yè)大學(xué), 2010.

[19]Shiura H, Miyoshi N, Konishi A, et al. Meg1/Grb10 overexpression causes postnatal growth retardation and insulin resistance via negative modulation of the IGF1R and IR cascades[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2005, 329: 909-916.

[20]Deng Y, Zhang M, Riedel H. Mitogenic roles of Gab1 and Grb10 as direct cellular partners in the regulation of MAP kinase signaling[J]. J Cell Biochem, 2008, 105: 1172-1182.

[21]曾照輝. WNT6在骨肉瘤組織中的表達(dá)及臨床意義及其對骨肉瘤細(xì)胞增殖侵襲的影響[D]. 西安:第四軍醫(yī)大學(xué), 2013.

[22]Stein E, Cerretti D P, Daniel T O. Ligand activation of ELK receptor tyrosine kinase promotes its association with Grb10 and Grb2 in vascular endothelial cells[J]. J Biol Chem, 1996, 271: 23588-23593.

[23]Nie S, Chang C. Regulation ofXenopusgastrulation by ErbB signaling[J]. Dev Biol, 2007, 303: 93-107.

[24]Schambony A, Wedlich D. Wnt-5A/Ror2 regulate expression of XPAPC through an alternative noncanonical signaling pathway[J]. Dev Cell, 2007, 12:779-792.

[25]Ishizaki Y Y, Kayashima T, Mapendano C K, et al. Role of DNA methylation and histone H3 lysine 27 methylation in tissue-specific imprinting of mouseGrb10[J]. Mol Cell Biol, 2007(1): 732-742.

[26]Fernandez E L, Palmero I G, Villalobo A. Genomic, organization and control of the Grb7 gene family[J]. Current Genomics, 2008(9):60-68.

[27]高曉猛,張春雷,房興堂,等.grbl4基因的功能及其研究進(jìn)展[J].中國牛業(yè)科學(xué),2012, 38(2):36-39.

[28]Grose R, Dickson C. Fibroblast growth factor signaling in tumorigenesis[J]. Cytokine Growth Factor Rev, 2005, 16:179-186.

[29]趙志超,孫敬禮,黃 濤，等.杜洛克與梅山豬卵泡中Grb14、eIF4E和SNRPE基因的差異表達(dá)研究[J]. 石河子大學(xué)學(xué)報，2012, 30(6):704-708.

[30]Browaeys-Poly E, Blanquart C, Perdereau D, et al. Grb14 inhibits FGF receptor signal through the regulation of PLCγ recruitment and activation[J]. FEBS Letters, 2010, 584:4383-4388.

Progress in research on GRB7 protein family gene

GONG Bin1， 2, XIONG Shen-yuan1， 2, LI Liang-yuan1, DAI Rong2,YANG Ju-feng3, WAN Peng-cheng2, SHI Guo-qing2

(1. College of Animal Science and Technology, Shihezi University，Shihezi 832000； 2. Animal Husbandry and Veterinary Institute, Xinjiang Academy of Agricultural and Reclamation Science, Shihezi 832000；3. Shandong Animal Husbandry and Veterinary College, Weifang 261061, China)

The growth factor receptor bound 7(GRB7), 10(GRB10) and 14(GRB14) are very important adaptors. They have three distinct functional regions such as a lot of proline in their N terminal, the GM domain in the mesial district and a SH2 domain in their C terminal. The GRB7 protein family regulates multiple cellular functions such as cell migration, tumorigenesis, gene expression, angiogenesis, embryonic development and metabolism regulation, etc, by interacting with different tyrosine kinase receptors and other phosphor-tyrosine proteins. This article summarized the biological functions and the genetic variation of the gene of the growth factor receptor bound 7(GRB7), the growth factor receptor bound 10(GRB10) and the growth factor receptor bound 14(GRB14).

adaptor; GRB7; GRB10; GRB14

2014-11-24；

2015-01-13

國家自然科學(xué)基金(31160460)；國家科技支撐計劃(2011BAD28B05-1-1)；863計劃(2011AA100307)；新疆兵團(tuán)綿羊繁育生物技術(shù)重點(diǎn)實驗室開放課題(2013KLS02)

鞏斌，碩士研究生，研究方向為動物遺傳育種與繁殖，E-mail：1156199957@qq.com；

萬鵬程，副研究員，碩士生導(dǎo)師，研究方向為綿羊繁育與家畜胚胎生物技術(shù)研究，E-mail：pengcheng.wan@gmail.com；石國慶，研究員, 博士生導(dǎo)師，研究方向為綿羊繁育與家畜胚胎生物技術(shù)研究，E-mail：nkkxyxms@163.com。

Q75

A

2095-1736(2015)05-0080-04

doi∶10.3969/j.issn.2095-1736.2015.05.080