支氣管哮喘患者外周血T細(xì)胞亞群Th1、Th2及其相關(guān)細(xì)胞因子水平變化及意義

黃偉強，李惠，袁梅，陳小丹(深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院，廣東深圳58;深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院)

支氣管哮喘患者外周血T細(xì)胞亞群Th1、Th2及其相關(guān)細(xì)胞因子水平變化及意義

黃偉強1，李惠2，袁梅2，陳小丹2
(1深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院，廣東深圳518122;2深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院)

摘要:目的觀察支氣管哮喘患者外周血輔助性T細(xì)胞(Th)亞群Th1、Th2及其相關(guān)細(xì)胞因子水平，探討其在支氣管哮喘發(fā)生、發(fā)展中的作用。方法支氣管哮喘患者(支氣管哮喘組) 80例，均處于急性發(fā)作期，治療后均處于臨床緩解期;健康體檢者40例作為對照組。檢測兩組外周血Th1、Th2、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ;以支氣管哮喘病情為因變量，以IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ為自變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析。結(jié)果與對照組比較，支氣管哮喘組外周血Th1/Th2降低，血清IL-2、IFN-γ降低，血清IL-6、TNF-α升高，P均＜0.01;急性發(fā)作期患者較臨床緩解期患者上述指標(biāo)改變更為顯著，P均＜0.01。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均是影響支氣管哮喘病情的危險因素(P均＜0.05)。結(jié)論Th1/Th2平衡失調(diào)及其介導(dǎo)的細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ分泌減少，IL-6、TNF-α分泌增加，可能參與了支氣管哮喘的發(fā)生、發(fā)展。

關(guān)鍵詞:支氣管哮喘; CD+4輔助性T細(xì)胞;細(xì)胞因子;白細(xì)胞介素;腫瘤壞死因子α;γ干擾素

研究證實，細(xì)胞因子IL-6、IL-10、TGF-β表達(dá)增加或異常表達(dá)與支氣管哮喘發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切［1～3］。CD+4輔助性T細(xì)胞(Th)亞群包括Th1、Th2、Th3亞群，各亞群功能及分泌的主要細(xì)胞因子不同。其中Th1亞群主要分泌IL-2、IFN-α、IFN-γ等，Th2亞群主要分泌IL-6、TNF-α等［4，5］。本研究觀察支氣管哮喘患者外周血Th1、Th2及其相關(guān)細(xì)胞因子IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平變化，并探討其意義。

1　資料與方法

1.1臨床資料納入標(biāo)準(zhǔn):①符合中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘學(xué)組和中華醫(yī)學(xué)會全科醫(yī)學(xué)分會制定的《中國支氣管哮喘防治指南(基層版)》支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］;②年齡15～80歲;③研究前1個月內(nèi)未使用免疫抑制劑，未口服或靜脈應(yīng)用糖皮質(zhì)激素。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他臟器急性感染或嚴(yán)重臟器器質(zhì)性病變者;②合并其他自身免疫系統(tǒng)疾病或結(jié)締組織疾病者;③妊娠期婦女。選擇2012年9月～2014年4月在深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院和深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院明確診斷為支氣管哮喘患者(支氣管哮喘組) 80例。其中，男43例、女37例，年齡15～72(50.1±15.1)歲;均處于急性發(fā)作期，治療后均處于臨床緩解期。選擇同時期健康體檢者40例作為對照組，男21例、女19例，年齡16～79(49.7±15.8)歲。兩組年齡、性別具有可比性。

1.2外周血Th1、Th2及其相關(guān)細(xì)胞因子水平檢測 分別取支氣管哮喘組急性發(fā)作期、臨床緩解期及對照組空腹靜脈血6 mL，分為2份，每份3 mL。一份采用流式細(xì)胞術(shù)檢測Th1、Th2，計算Th1/Th2，步驟參照陶國華等［6］方法。另一份以3 000 r/min離心15 min，取上清液，采用ELISA法檢測血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ;試劑盒均購于上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司，操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。計量資料以珋x±s表示，組間比較采用t檢驗。以支氣管哮喘病情為因變量，以IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ為自變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

與對照組比較，支氣管哮喘組外周血Th1亞群比例、Th1/Th2降低，而Th2亞群比例升高，血清IL-2、IFN-γ降低，血清IL-6、TNF-α升高，P均＜0.01;急性發(fā)作期患者較臨床緩解期患者上述指標(biāo)改變更為顯著，P均＜0.01。見表1。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均是影響支氣管哮喘病情的危險因素(P均＜0.05)。見表2。

表1　兩組外周血Th1、Th2、Th1/Th2、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ比較(±s)

注:與對照組比較，*P＜0.01;與臨床緩解期比較，△P＜0.01。

組別　n　Th1(%)　Th2(%)　Th1/Th2　IL-2(pg/mL)　IL-6(mg/L)　TNF-α(μg/L)　IFN-γ(pg/mL)支氣管哮喘組急性發(fā)作期　80　6.54±1.57＊△8.18±1.86＊△0.72±0.05＊△15.34±1.29＊△79.43±4.54＊△1.83±0.43＊△112.23±10.21＊△臨床緩解期　80　8.23±1.92*　9.94±2.06*　0.83±0.06*　29.34±1.38*63.43±4.21*　1.34±0.32*　154.32±13.21*對照組　40　10.24±2.15　10.39±2.23　0.99±0.07　38.52±1.32　56.31±3.54　0.56±0.23　183.41±14.21

3　討論

正常機體內(nèi)Th1、Th2亞群處于相對平衡狀態(tài)，共同發(fā)揮免疫效應(yīng)，同時互相調(diào)節(jié)亞群功能，保持免疫平衡，使機體免疫能力處于正常狀態(tài)。但是，在外界刺激或體內(nèi)不良因素誘導(dǎo)下，Th1、Th2比例失去平衡，進(jìn)而影響免疫應(yīng)答，誘發(fā)疾病［7，8］。本研究中支氣管哮喘組患者急性發(fā)作期及臨床緩解期外周血Th1亞群比例均低于對照組，而Th2亞群比例均高于對照組，說明哮喘的發(fā)作可能與Th1亞群功能低下、Th2亞群功能亢進(jìn)有關(guān)。對照組Th1/Th2比例接近1，說明機體處于免疫平衡狀態(tài);支氣管哮喘急性發(fā)作期及臨床緩解期患者Th1/Th2均較對照組低，急性發(fā)作期患者比臨床緩解期患者比值更低，提示Th1/Th2比例失調(diào)參與支氣管哮喘的發(fā)生、發(fā)展過程。

研究表明，Th1亞群分泌IL-2、IFN-γ等細(xì)胞因子，Th2亞群分泌IL-6、TNF-α等［9～11］。IFN-γ是一種氣道炎性介質(zhì)，其免疫調(diào)節(jié)活性比較強，在哮喘發(fā)作時可引發(fā)氣道上皮細(xì)胞脫落。唐玉紅等［12］研究發(fā)現(xiàn)，Th1細(xì)胞可通過分泌IL-2、IFN-γ促進(jìn)細(xì)胞免疫應(yīng)答，對哮喘發(fā)生、發(fā)展有一定抑制作用。體內(nèi)IFN-γ水平與白三烯水平呈正相關(guān)，即IFN-γ致敏可促進(jìn)肥大細(xì)胞或嗜酸粒細(xì)胞釋放白細(xì)胞三烯，促進(jìn)IL-2分泌，共同參與哮喘發(fā)作［13］。TNF-α主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，參與機體的免疫病理損傷; TNF-α分泌增加可引起局部炎性反應(yīng)，嚴(yán)重時導(dǎo)致多器官受損［14］。IL-6是目前發(fā)現(xiàn)的生物學(xué)活性最廣泛的細(xì)胞因子，可以調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，促進(jìn)B細(xì)胞的增殖和分化［15，16］。本研究結(jié)果表明，與對照組比較，支氣管哮喘組血清IL-2、IFN-γ水平降低，血清IL-6、TNF-α水平升高;急性發(fā)作期患者較臨床緩解期患者上述指標(biāo)改變更為顯著。多因素Logistic回歸分析結(jié)果提示，血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均是影響支氣管哮喘病情的危險因素。綜上所述，我們推測Th1/Th2平衡失調(diào)及其介導(dǎo)的細(xì)胞因子IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ異常分泌可能參與支氣管哮喘的發(fā)生、發(fā)展。

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(收稿日期:2014-10-19)

通信作者:李惠，E-mail: 280483807@ qq.com

基金項目:廣東省深圳市龍崗區(qū)科技計劃醫(yī)療衛(wèi)生項目(YS2012087)。

文章編號:1002-266X(2015) 20-0040-02

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B

中圖分類號:R562.2

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.20.014