消喘飲平喘祛痰作用的實驗研究

陳伯靜 王遵瓊

（湖北省宜昌市夷陵區(qū)醫(yī)院·430000）

消喘飲是根據(jù)臨床應(yīng)用多年的經(jīng)驗方研制而成的，主要藥物組成有苦參、地龍、淫羊藿等。本方標(biāo)本兼治，具有良好的清肺化痰、止咳平喘功效，是治療支氣管哮喘的有效方劑?，F(xiàn)僅對其平喘祛痰藥理作用的初步研究報道如下。

1 實驗材料

1.1 藥物與試劑

消喘飲(苦參、地龍、蛤蚧、淫羊藿等中藥組成，經(jīng)水煎煮2次，30 min/次，合并濾液濃縮至1:4，即1ml相當(dāng)于原生藥4g備用)；海珠喘息定片(廈門中藥廠生產(chǎn)，批號000606)；磷酸組胺(上海麗珠東風(fēng)生物技術(shù)有限公司提供，批號9904060)；乙酰膽堿 (上海試劑三廠生產(chǎn)，批號881008)；氨茶堿 (湖南制藥廠生產(chǎn)，批號951017)；異丙腎上腺素（上海禾豐制藥有限公司，批號000501）；氯化胺 (汕頭化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號861101)；苯酚紅 (上海試劑三廠生產(chǎn)，批號951124)。

1.2 動物

豚鼠、小鼠由湖北省實驗動物研究中心供應(yīng)（合格證號：SCXK(鄂)2012-0005）。

1.3 儀器

電光天平MA200(上海第二天平儀器廠)；402超聲霧化器(上海四菱醫(yī)療器械廠)；LMS-2B型二道生理記錄儀(成都儀器廠)；3W-3G型恒溫平滑肌槽（正華科教儀器廠）、恒溫水浴鍋（北京市醫(yī)療儀器廠）、肌張力換能器（復(fù)旦大學(xué)傳感器工程研究室）；754型分光光度計(上海第三分析儀器廠)。

2 實驗方法及結(jié)果

2.1 平喘實驗

取經(jīng)篩選的合格雄性豚鼠28只（體重160±10g），隨機分成4組，即消喘飲(低)組、消喘飲(高)組、海珠喘息定片組、生理鹽水組。分別給予不同藥物或生理鹽水灌胃，0.5m1/只，1次/d，共給藥4d。于末次給藥后30min，將豚鼠置于玻璃鐘罩內(nèi)，以1mg: 1ml磷酸組胺超聲霧化，超聲霧化lml/次，觀察豚鼠抽搐跌倒的時間。如6min仍不跌倒，將豚鼠取出，其潛伏值以6min計算，實驗顯示兩種藥物均具較強的平喘作用。結(jié)果見表1。

表l 消喘飲對各組豚鼠平喘作用比較(±s)

表l 消喘飲對各組豚鼠平喘作用比較(±s)

*與生理鹽水組比較P＜0.01。

組別(t/s) 動物數(shù) 每只劑量 搐跌潛伏時間生理鹽水組 7 1.0 m1 54.6±9.2消喘飲高劑量組 7 3.0 g 325.3±24.5*消喘飲低劑量組 7 1.5 g 170.6±12.3*海珠喘息定片組 7 0.15片 332.9±17.6*

實驗結(jié)果表明：消喘飲灌胃給藥能有效的對磷酸組胺誘發(fā)的豚鼠哮喘，具有顯著的抑制作用（P＜0.01），其平喘的作用強度存在明顯的量效關(guān)系，即隨濃度的加大而增強。消喘飲各劑量組平喘的作用與海珠喘息定片組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 離體氣管條實驗

按文獻[1]方法，取豚鼠體重450±50g，雌雄兼用。用木棰擊其頭部致死，立即切開頸部皮膚，分離氣管，從甲狀軟骨下方至氣管分叉處將氣管全部剪下，放入經(jīng)過充分氧飽和的改良克-亨氏營養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，不斷通入氧氣。仔細剔出氣管周圍的結(jié)締組織，將氣管剪成3mm×20mm的螺旋條備用。

將氣管條標(biāo)本置于含30ml營養(yǎng)液的麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)，一端固定于麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)，另一端連于肌張力換能器上(負荷為2 g)，恒溫37℃，調(diào)節(jié)供氧旋扭(95%O2+5%CO2)，保持每分鐘40～60個氣泡，讓氣管條在營養(yǎng)液中平衡l小時后加藥，以10mm/min速度記錄正常曲線，觀察消喘飲對氣管平滑肌的直接作用。然后，加入乙酰膽堿0.5m1（使浴槽內(nèi)濃度為1.67×10-6g/ml），觀察記錄曲線變化。當(dāng)氣管條平滑肌張力達高峰時，實驗各組分別加入消喘飲0.6ml、0.3ml、0.1 ml(使浴槽內(nèi)濃度分別為80mg/ml、40mg/ml、10mg/ml)；對照組加入異丙腎上腺素0.6ml（使浴槽內(nèi)濃度為1.0×10-6g/ml）。觀察各組給藥3分鐘后對抗乙酰膽堿的作用，記錄曲線下降幅度，并按下式求出藥物的解痙百分率。

解痙百分率 =（給藥前曲線的高度-給藥后曲線的高度）/給藥前曲線的高度×100%結(jié)果見表2

表2 消喘飲對各組豚鼠離體氣管平滑肌的影響比較(±s)

表2 消喘飲對各組豚鼠離體氣管平滑肌的影響比較(±s)

注：與生理鹽水組比較，*P＜0.01。

組 別 例 數(shù)（n） 劑量(mg/ml) 解痙百分率(%)生 理 鹽 水 組 7 - 0消喘飲高劑量組 7 80 77.76±13.68*消喘飲低劑量組 7 10 21.19±16.50*異丙腎上腺素組 7 1.0×10-6 100.00±0.00*

實驗結(jié)果表明：消喘飲各劑量組對正常氣管平滑肌均有不同程度的直接松弛作用，并能拮抗乙酰膽堿所致的離體豚鼠氣管平滑肌收縮，與生理鹽水組比較，差別均有高度顯著性意義(P＜0.01)，其作用強度有明顯的量效關(guān)系，即隨濃度的加大而增強。消喘飲各劑量組對平滑肌的直接松弛作用與異丙腎上腺素組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

2.3 祛痰實驗(小鼠氣管段酚紅法)

按文獻[2]方法，取禁食12h健康小鼠，體重22±3g，雌雄兼用，稱重標(biāo)記后，按體重性別隨機分為5組：生理鹽水組(給等容積生理鹽水)、氯化胺組(給氯化胺lg/kg)、消喘飲高、中、低3個劑量組(分別給消喘飲24g/kg、12g/kg、6g/kg)。按0.2m1/l0g體重容積灌胃。灌胃后30min，腹腔注射苯酚紅生理鹽水溶液0.1ml(5mg)/10g體重，注射苯酚紅后0.5h，將小鼠頸椎脫臼法處死，剪下自甲狀軟骨至氣管分叉處的一段氣管，放入盛有2ml生理鹽水的試管中，再加lmol/L的氫氧化鈉溶液0.1ml，搖勻后，用754型分光光度計波長546nm測吸光度(OD值)，用苯酚紅作一標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)曲線計算苯酚紅含量(μg/m1)。結(jié)果見表3。

表3 消喘飲對各組小鼠祛痰作用比較(±s)

表3 消喘飲對各組小鼠祛痰作用比較(±s)

注：與生理鹽水組比較：*P＜0.01。

組別 動物數(shù)（n） 劑量（g/kg） 氣管條酚紅排泌量(μg/m1)生理鹽水組 7 1 0消喘飲高劑量組 7 24 1.82±0.45*消喘飲低劑量組 7 6 0.75±0.48*氯化銨組 7 1 1.75±0.51*

實驗結(jié)果表明：氯化銨、消喘飲各劑量組均能增加小鼠氣管內(nèi)苯酚紅排泌量，與生理鹽水組比較，差別均有高度顯著性意義(P＜0.01)。消喘飲的祛痰作用強度存在明顯的量效關(guān)系，即隨濃度的加大而增強。消喘飲各劑量組對平滑肌的直接松弛作用與氯化銨組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

3 討論

支氣管哮喘是一種常見病、多發(fā)病，資料表明我國支氣管哮喘患者達一千萬人以上，已成為較嚴(yán)重的社會衛(wèi)生問題[3]。大量的臨床證實，中醫(yī)藥通過對機本免疫系統(tǒng)進行調(diào)節(jié)，既能減少哮喘的急性發(fā)作，也可達到長期緩解的治療目的，在治療支氣管哮喘中具有獨特優(yōu)勢。本實驗的研究目的在于尋求中藥治療哮喘的有效方劑。

消喘飲經(jīng)大量臨床證實對哮喘具有良好的作用，且用量安全。其藥物組成中，除具有止咳平喘的藥物外，大多還具有拮抗炎癥細胞釋放炎性介質(zhì)或具有免疫調(diào)節(jié)作用。本實驗結(jié)果表明，消喘飲對豚鼠磷酸組胺超聲霧化而致的喘、咳有顯著抑制作用；對正常氣管平滑肌均有不同程度的直接松弛作用，并能拮抗酰膽堿所致的離體豚鼠氣管平滑肌收縮；能增加小鼠氣管內(nèi)苯酚紅排泌量。以上作用度存在明顯的量效關(guān)系，即隨濃度的加大而增強。以上結(jié)果提示，消喘飲對支氣管哮喘的療效是肯定的，值得進一步深入研究。

[1]魏偉，吳希美，李元建. 藥理實驗方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010．

[2]陳奇．中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011．

[3]李明華，殷凱生，蔡映云. 哮喘病學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005．