眼分泌物細(xì)菌培養(yǎng)及藥物敏感性分析

南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山市博愛(ài)醫(yī)院（528403）林愛(ài)心 譚南 汪偉山 楊曉華 李麗蓮

為了解我院嬰幼兒眼疾的細(xì)菌分布及藥物敏感試驗(yàn)情況，對(duì)1505例嬰幼兒眼分泌物標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)及藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 1505例標(biāo)本來(lái)自中山市博愛(ài)醫(yī)院2013年4月～2014年9月眼科門(mén)診的患兒，診斷為結(jié)膜炎、淚囊炎或淚道阻塞合并感染，年齡從出生3天至6歲5月，其中3天至3月齡嬰兒共1021例。

1.2 儀器與試劑 采用法國(guó)梅里埃生物公司VITEK 2全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀，其配套相關(guān)鑒定卡及藥敏卡由廣州華鑫公司提供，二氧化碳培養(yǎng)箱為美國(guó)Forma 3111，血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板、血M-H平板、腦心浸液培養(yǎng)基及HTM平板均購(gòu)于廣州迪景公司，K-B法藥敏紙片由OXOID公司提供。使用金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸桿菌ATCC25922、肺炎鏈球菌ATCC49619質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株購(gòu)于衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第三版要求，把標(biāo)本接種于麥康凱平板、血平板及巧克力平板，置35℃，6%CO2經(jīng)24～48小時(shí)培養(yǎng)，分離到純菌落后于法國(guó)梅里埃生物公司VITEK 2全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀進(jìn)行鑒定及藥敏試驗(yàn)。流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)用K-B法。判斷標(biāo)準(zhǔn)遵循美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）規(guī)定的法規(guī)。

2 結(jié)果

2.1 致病菌種類構(gòu)成 1505例眼分泌物細(xì)菌培養(yǎng)中，無(wú)菌生長(zhǎng)149例，占9.9%，有正常菌群（如：草綠色鏈球菌、棒狀桿菌、凝固酶陰性葡萄球菌等）生長(zhǎng)為840例，占55.8%，有致病菌生長(zhǎng)占34.3%。檢出致病菌549株，以流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌為主，分別占25.9%，25.3%，20.2%。其中有35標(biāo)本存在混合感染，主要以流感嗜血桿菌混合其他細(xì)菌如肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌或陰溝腸桿菌為主，各17例、6例、4例和1例。其余金黃色葡萄球菌混合肺炎鏈球菌2例；肺炎克雷伯氏菌混合化膿鏈球菌、大腸埃希氏菌或真菌，大腸埃希氏菌混合金黃色葡萄球菌，肺炎鏈球菌混合植生拉烏爾菌各1例。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 主要革蘭陰性桿菌為流感嗜血桿菌，對(duì)氨芐西林及氨芐西林/舒巴坦的耐藥率分別為33.1%和16.9%，對(duì)環(huán)丙沙星、頭孢曲松、阿奇霉素耐藥率均為時(shí)0%。而肺炎克雷伯氏菌、大腸埃希氏菌等腸桿菌科細(xì)菌對(duì)氨芐西林及氨芐西林/舒巴坦的耐藥率分別為84.3%和21.9%，對(duì)頭孢曲松，復(fù)方新諾明的耐藥率分別為14.1%和7.8%，對(duì)環(huán)丙沙星及左氧氟沙星均為3.1%，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)阿米卡星未見(jiàn)耐藥。主要革蘭陽(yáng)性球菌為金黃色葡萄球菌及肺炎鏈球菌，對(duì)青霉素耐藥率分別為97.1%和29.7%、對(duì)紅霉素耐藥率分別為41.0%和89.2%，對(duì)克林霉素耐藥率分別為40.3%和85.6%、對(duì)復(fù)方新諾明耐藥率分別為2.9%和69.4%、兩者對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥率均為0%，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）檢出率為21.6%。

3 討論

正常人的淚囊、結(jié)膜、鞏膜、角膜和前房等是無(wú)菌的，然而人的眼睛常年暴露于空氣中，以極易受到外界細(xì)菌的侵害。當(dāng)遇到毒株和（或）人體抵抗力減弱時(shí)，外界進(jìn)入的病原菌就會(huì)在眼內(nèi)大量繁殖，引起感染[1]。草綠色鏈球菌是人體正常菌群的組成部分[2]，也非眼部主要致病菌。大多數(shù)棒狀桿菌存在于人體各部位及環(huán)境中，如果采樣過(guò)程不正確，就有可能會(huì)分離到這些菌株[1]。干燥棒狀桿菌、表皮葡萄球菌、微球菌等是結(jié)膜上的正常菌群。故本研究對(duì)以上幾種細(xì)菌列為非致病菌未作報(bào)告，注意勿將其誤作病原菌報(bào)告。莫拉菌屬存在于正常人皮膚和黏膜表面，是正常寄生菌，很少致病，是機(jī)會(huì)致病菌，也可引起眼結(jié)膜炎[1]，故對(duì)于大量?jī)?yōu)勢(shì)生長(zhǎng)的卡他莫拉菌也作為致病菌統(tǒng)計(jì)在內(nèi)。兒童細(xì)菌性眼結(jié)膜炎的主要致病菌為流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌、灰色奈瑟菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌等[1]。本組數(shù)據(jù)顯示，我院眼科患兒主要致病菌為流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯氏菌、銅綠假單胞菌等，與其一致。金黃色葡萄球菌是革蘭陽(yáng)性菌中的主要致病菌，占致病菌檢出率25.3%，與各文獻(xiàn)報(bào)道相符。而流感嗜血桿菌25.9%和肺炎鏈球菌20.2%的檢出率遠(yuǎn)比其高，這可能與其檢測(cè)條件有關(guān)。因該兩種細(xì)菌的培養(yǎng)條件較為苛刻，有時(shí)實(shí)驗(yàn)室又不能做到及時(shí)處理標(biāo)本，從而造成分離率較低。而20株真菌均為年齡3月內(nèi)嬰兒標(biāo)本中檢出，可能與其在分娩過(guò)程中由產(chǎn)道感染所致。

藥敏結(jié)果顯示流感嗜血桿菌除對(duì)氨芐西林和氨芐西林/舒巴坦一般耐藥外，對(duì)環(huán)丙沙星、頭孢曲松、阿奇霉素均高度敏感。金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素耐藥性最高，對(duì)紅霉素及克林霉素次之，而對(duì)復(fù)方新諾明、左氧氟沙星、利福平則較為敏感，對(duì)萬(wàn)古霉素則未見(jiàn)耐藥。MRSA約占五分之一。肺炎鏈球菌對(duì)紅霉素及克林霉素耐藥率最高，復(fù)方新諾明次之，青霉素相對(duì)敏感，而頭孢曲松和利福平則較為敏感，對(duì)萬(wàn)古霉素也未見(jiàn)耐藥。腸桿菌科細(xì)菌則對(duì)氨芐西林較為耐藥，對(duì)氨芐西林/舒巴坦及頭孢曲松輕度耐藥，而對(duì)環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明等均較為敏感。結(jié)合本組數(shù)據(jù)，綜合分析，諾酮類藥滴眼液可作為首選外用藥用于經(jīng)驗(yàn)治療細(xì)菌性眼部感染。因不同的細(xì)菌對(duì)各種藥物的敏感性有較大差異，治療感染性眼疾，特別是嬰幼兒患者，一定要根據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選用抗生素，減少藥物耐藥性的產(chǎn)生及對(duì)兒童的毒副作用，以達(dá)到最佳治療效果。