• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    腦出血后缺氧誘導因子-1α及熱休克蛋白70作用機制的研究

    2015-04-02 21:23:06范賢敏羅永杰
    實用醫(yī)院臨床雜志 2015年3期
    關鍵詞:腦損傷腦組織血腫

    范賢敏,羅永杰

    (1.瀘州醫(yī)學院,四川 瀘州 646000;2.四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院,四川 成都 610072)

    腦出血后缺氧誘導因子-1α及熱休克蛋白70作用機制的研究

    范賢敏1,羅永杰2△

    (1.瀘州醫(yī)學院,四川 瀘州 646000;2.四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院,四川 成都 610072)

    缺氧誘導因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是缺氧誘導基因轉錄的關鍵環(huán)節(jié),并且是缺氧誘導基因轉錄過程中缺氧信息傳遞的共同通路;而熱休克蛋白70(Hsp70)具有調控細胞凋亡和參與應激等多種生物學功能,在缺氧性腦血管病的病理生理過程中起著重要的作用。目前國內外研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α、Hsp70與腦出血后腦組織的保護及損傷有密切聯(lián)系。本文就HIF-1α、Hsp70的生物學特點,在腦出血后腦組織中的表達及作用機制等方面作一綜述。

    缺氧誘導因子-1α;熱休克蛋白70;腦出血

    最近發(fā)布的全球疾病負擔研究(GBD2010)顯示腦卒中是全球第二大死因,是造成過早死亡和殘疾的第三大主要原因,在神經(jīng)系統(tǒng)疾病和腦血管疾病總的疾病負擔分類中出血性卒中比例高達35.7%[1,2]。腦出血(intracerebral hemorrhage,ICH)發(fā)病后的作用機制及治療一直都是醫(yī)學界研究的熱點,本文就缺氧誘導因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、熱休克蛋白70(Hsp70)在ICH后的作用機制研究做一綜述。

    1 HIF-1α及Hsp70的分子結構及功能

    1.1 HIF-1α的分子結構及功能 HIF-1屬于DNA結合蛋白,是一種由細胞內低氧環(huán)境所誘導表達的轉錄激活因子,主要由HIF-1α和HIF-1β兩個亞基以異二聚體復合物的形式存在。α亞基位于胞漿中,其分子大小為120 kD,受細胞內氧濃度調節(jié),其濃度水平隨著低氧水平的增加而呈指數(shù)上升。位于細胞核中的β亞基的分子大小為91~94 kD,不受氧濃度的調節(jié),因此其表達相對穩(wěn)定。其中α亞基包含有兩個重要的結構域:①氧依賴降解結構域,主要調節(jié) HIF-1 的穩(wěn)定性;②C 末端轉錄激活結構域和內在激活結構域,則主要調節(jié) HIF-1的轉錄活性。然而β亞基的作用尚不清楚,目前多數(shù)認為可能與促進 HIF-1α的磷酸化,維持其穩(wěn)定性以及二聚體化后引起的活性構象改變有關[3]。故HIF-1α是HIF-1 的調節(jié)亞基和活性亞基,在缺氧誘導下HIF-1 的作用主要體現(xiàn)在 HIF-1α亞基的調節(jié)上,并可根據(jù)氧濃度水平而動態(tài)表達,可與許多靶基因的缺氧反應元件結合,在缺氧誘導的基因表達中起關鍵作用。

    1.2 Hsp70的分子結構及功能 Hsp是一個龐大的糖蛋白超基因家族,具有分子伴侶、調控細胞凋亡周期和參與應激等廣泛的生物學功能,對缺血性損傷有保護作用[4]。根據(jù)相對分子質量大小、抗原性的差異和產(chǎn)物的同源性,通常將哺乳動物HsPs家族分為6類:Hsp100、Hsp90、Hsp70、Hsp60、Hsp40以及相對小分子質量 HsPs(15~30 kU)[5]。其中Hsp70是一種在缺氧缺血等腦損傷后產(chǎn)生的應激蛋白,在應激條件下合成最為迅速,具有高度保守性,是各種腦損傷的敏感標志物[6]。Hsp70作為應激保護蛋白,除了發(fā)揮其分子伴侶作用抑制蛋白激酶的激活,還可抑制神經(jīng)細胞的凋亡,從而起到腦保護作用。Hsp70可能通過多種方式對節(jié)細胞凋亡:一是Hsp70能干擾應激所啟動的凋亡程序;另外升高的Hsp70水平可能通過對變性細胞的凋亡抑制蛋白Bcl-2加以修復或防止其被降解,下調有關細胞凋亡的基因、蛋白和蛋白酶活性,抑制細胞凋亡,從而增強受損細胞抗凋亡能力[7],也可通過抑制JNK /BIM 途徑來抑制 Bax 的激活,從而發(fā)揮抗凋亡作用[8]。

    2 HIF-1α、Hsp70的動態(tài)表達及機制

    2.1 HIF-1α表達的動態(tài)變化及機制 有動物實驗研究表明,HIF-1α在正常腦組織中基本不表達,小鼠腦出血成功造模4 h后,出血灶周圍腦組織HIF-1α蛋白表達就開始出現(xiàn),并逐漸增多,1~2 d 達到高峰,7 d后又下降至第1天水平以下[9]。國內臨床研究結果證實此觀點,患者在腦出血后 4 h 血腫周圍腦組織可見散在 HIF-1α表達,1~2 d 達到高峰,2~3 d仍繼續(xù)保持高表達狀態(tài)并維持到第7 d,從第7 d開始逐漸衰減,但在21 d時血腫周邊腦組織中尚可見到HIF-1α蛋白的表達[10]。由于HIF-1α是一種參與調節(jié)氧穩(wěn)態(tài)的對低氧敏感的核轉錄因子,并且在腦出血后不同時期呈動態(tài)表達,其表達機制目前認為主要有以下幾種:①細胞內缺氧是 HIF-1 α 表達最主要的誘導調節(jié)因子,其表達增強的機制可能與細胞線粒體在低氧狀態(tài)下產(chǎn)生大量的活性氧基以及與腦組織缺血/再灌注后產(chǎn)生的羥基有關[11],它們能 HIF-1α免于被迅速降解。②國內研究卻發(fā)現(xiàn)缺氧并不是誘導HIF-1α表達增加的唯一機制,有研究發(fā)現(xiàn)腦出血早期在血腫周邊腦組織中HIF-1α蛋白表達的陽性率較低,隨著病程的延長HIF-1α表達逐漸增加,分別將凝血酶及紅細胞注入腦組織后,HIF-1α表達均能升高,說明血腫內的凝血酶、血紅蛋白等血液成分也可促進 HIF-1α的表達上調[12]。③隨著出血時間的延長,血腫周圍腦組織水腫及血腫中破碎的紅細胞以及逐漸釋放出來的IL-1β、TNF-α等炎性介質亦可通過其他信號途徑上調HIF-1α的表達[13]。

    2.2 Hsp70表達的動態(tài)變化及機制 正常情況下Hsp70在細胞內有穩(wěn)定的表達,但降解迅速,所以正常腦組織 Hsp70 蛋白質的含量極少[14]。但在腦出血等急性應激狀態(tài)下,當其他蛋白質合成受到抑制時,Hsp70 的表達反而增加,它能夠保護大腦防止各種應激刺激,使細胞對損害的耐受能力增強[15]。在我們前期的實驗中觀察到在腦出血后6 h時Hsp70開始在血腫周圍組織中表達,隨著出血時間的延長,其表達逐漸增加,在3 d時達高峰并在7 d時表達明顯減少。在缺氧可顯著上調HIF-1α表達的理論基礎上,有學者通過使用HepG2細胞進行研究探討,實驗采用HIF-1α抑制劑YC-1抑制HIF-1α的表達,結果顯示隨著YC-1濃度的增加,HIF-1α表達明顯受到抑制,Hsp70-2表達隨之減弱。實驗還從另一角度設計合成針對HIF-1α表達的特異小干擾RNA(siRNA),用以轉染HepG2細胞,結果同樣顯示在HIF-1α siRNA顯著降低HIF-1α表達的同時Hsp70-2表達減少[16]。根據(jù)實驗結果,我們可以得出在HepG2細胞HIF-1α是促進Hsp70表達的誘導劑,但是在缺血缺氧性腦病中這種誘導關系仍待驗證。

    3 HIF-1α、Hsp70在腦出血后的作用機制

    腦出血后腦組織損傷包括原發(fā)性和繼發(fā)性兩個方面,原發(fā)性腦損傷主要是指血腫直接對腦組織造成機械性的壓迫損傷。由于顱內血腫引起局部循環(huán)障礙,造成的血腫周邊腦組織缺血缺氧、炎性反應及補體介導的免疫損傷、血紅蛋白及其降解產(chǎn)物的毒性反應及機體的應激反應,上述損傷因素之間相互作用,共同參與導致繼發(fā)腦損傷[17,18]。

    3.1 HIF-1α的作用機制 腦出血后血腫周圍組織由于缺血缺氧、腦水腫的形成和血液成分及炎性物質的釋放等因素誘導腦細胞HIF-1α的表達。HIF-1α能介導相關靶基因的表達調控,從而在出血性腦損傷中發(fā)揮重要作用。HIF-1α及相關靶基因可能通過多種機制對腦組織發(fā)揮保護作用:①促進血管生成和神經(jīng)再生:血腫周圍腦組織在低氧條件下HIF-1α表達的增多,進而誘導血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受體表達增加,當血管內皮細胞和神經(jīng)干細胞中的VEGF被激活后,可促進血管內皮細胞增殖以及神經(jīng)干細胞分化、移行,從而促進血管生成和神經(jīng)細胞再生,恢復出血灶周邊缺血缺氧組織的血供和氧供[19]。②提高攜氧能力:缺氧時HIF-1α表達可誘導促紅細胞生成素(Erythropoietin,EPO)以及促紅細胞生成素受體(Erythropoietin receptor,EPOR)等調節(jié)氧運輸基因的表達增加,從而促進紅細胞生成,提高其攜氧能力,增加缺血區(qū)域的氧運輸,降低神經(jīng)細胞的缺氧敏感性,增強神經(jīng)細胞的存活能力,發(fā)揮神經(jīng)保護作用[20]。③抑制細胞凋亡:在HIF-1α的調節(jié)下VEGF轉錄表達并與受體結合,進而激活 PI-3K/AKT信號途徑,降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,并活化 NF-κB,同時抑制 p53 的活化,促進多種生長因子的表達[21]。由此可見,HIF-1α主要是通過誘導靶基因的表達以及調控細胞凋亡途徑來實現(xiàn)腦的保護作用。

    3.2 Hsp70的作用機制 Hsp70作為一種內源性保護因子,在腦卒中進程中發(fā)揮保護作用,關于Hsp70保護作用機制目前已有較多的研究,總結起來主要有以下4種:①抗氧化應激作用:Hsp70可提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)等抗氧化酶的活性,可能在轉錄水平或通過轉錄后的修飾調節(jié)SOD的表達,加快氧自由基的清除,增強細胞的抗氧化應激能力;②抗炎及免疫增強作用:近來許多研究表明,炎癥在缺血性腦損傷的發(fā)生和發(fā)展中起了重要作用;③分子伴侶作用:當細胞在應激源刺激下產(chǎn)生大量未折疊、錯折疊的蛋白質時,Hsp70的分子伴侶作用可幫助需要折疊的蛋白質正確折疊,維持細胞的正常生理功能,實現(xiàn)對腦細胞的保護;④抑制細胞凋亡作用:Hsp70 能干擾應激所啟動的凋亡程序;另外升高的Hsp70水平可能通過下調有關細胞凋亡的基因、蛋白和蛋白酶活性,抑制細胞凋亡,從而增強受損細胞抗凋亡能力,故Hsp70也被視為一種抗凋亡蛋白。上述Hsp70在腦出血后缺血缺氧的應激狀態(tài)下可發(fā)揮神經(jīng)保護作用。因此給予適當預刺激從而誘導Hsp70的表達,增強腦細胞對缺血缺氧等損害的耐受力,這可能成為減輕腦血管疾病后繼發(fā)性腦損傷的新方法。

    4 展望

    由于腦組織對缺血缺氧十分敏感,而機體的缺氧應答反應涉及缺氧反應基因表達、調控、轉錄因子激活、細胞因子及眾多信號通路的參與,其中HIF-1α在缺氧應答中處于關鍵核心位置。HIF-1α對于缺血缺氧性腦損傷的治療研究還僅限于動物實驗。目前關于HIF-1α在腦出血中表達上調的機制尚不十分明確,并且HIF-1α下游基因的轉錄及其參與的低氧信號轉錄在發(fā)揮保護作用的同時,其所具有的損傷作用及相關風險尚未完全明確,仍需我們做更進一步的探索研究。

    [1] Chin JH,Vora N.The global burden of neurologic diseases[J].Neurology,2014,83(4):349-351.

    [2] 王曉平,羅永杰,馬思文,等.Bcl-2、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶在SD大鼠腦梗死急性期的動態(tài)表達研究[J].實用醫(yī)院臨床雜志,2013,10(5):53-56.

    [3] Schofield C,Ratcliffe PJ.Oxygen sensing by HIF hydroxylases[J].Nat Rev Moi Cell Biol,2004,5(5):353-354.

    [4] Manaenko A,F(xiàn)athali N,Chen H,et al.Heat shock protein70 up regulation by geldanamycin reduces brain injury in a mouse model of intracerebral hemorrhage[J].Neurochemint,2010,57(7):844-850.

    [5] Khalil AA,Kabapy NF,Deraz SF,et al.Heat shock proteins in oncology:diagnostic biomarkers or therapeutic targets[J].Biochim Biophys Acta,2011,1816(2):89-104.

    [6] Manaenko A,F(xiàn)athali N,Chen H,et al.Heat shock protein70 up regulation by geldanamycin reduces brain injury in a mouse model of intracerebral hemorrhage[J].Neurochemint,2010,57(7):844-850.

    [7] Li H,Liu L,Xing D,et al.Inhibition of the JNK/Bimpathway by Hsp70 prevents Bax activation in UV-induced apoptosis[J].FEBS Lett,2010,584(22):4672-4678.

    [8] Nagashima M,F(xiàn)ujikawa C,Mawatari K,et al.HSP70,the earliest-induced gene in the zebrafish retina during optic nerve regeneration:Its role in cell survival[J].Neurochem Int,2011,58(8):888-895.

    [9] Zhang Y,Shao Z,Zhai Z,et al.The HIF-1 hypoxia-inducible factor modulates life span in C.elegant[J].PLoS One,2009,4(7):e6348.

    [10]王愛岳,李強,周治平.HIF-1α、VEGF在腦出血灶周的表達意義[J].中國實用神經(jīng)疾病雜志,2009,1(12):1-3.

    [11]Chandel NS,McClintock DS,F(xiàn)eliciano CE,et al.Reactive oxygenspecies generated at mitochondrial complex Ⅲ stabilize hypoxia-in-duced factor 1α during hypoxia[J].J Biol Chem,2000,275(33):25130-25138.

    [12]婁季宇,王愛岳,李強.低氧誘導因子-lα在大鼠腦出血灶周的表達[J].實用神經(jīng)疾病雜志,2005,8(4):1-2.

    [13]Sharp FR,Bernaudin M.HIF-1 and oxygen sensing in the brain[J].Nat Rev Neurosci,2004,5(6):437-448.

    [14]Fang HY,Ko WJ,Lin CY.Inducible heat shock protein70,interleukin-18,and tumor necrosis factor alpha correlate with outcomes in spontaneous intracerebral hemorrhage[J].Clin Neurosci,2007,14(5):435-441.

    [15]劉玉婷,王國英,牛小媛.腦缺血再灌注大鼠外周血熱休克蛋白70的表達與神經(jīng)功能缺損的相關性研究[J].中國現(xiàn)代藥物應用,2008,2(5):90-91.

    [16]夏麗敏,田德安,張瓊,等.缺氧誘導熱休克蛋白70-2表達的分子機制[J].中華肝臟病雜志,2009,17(3):207-212.

    [17]Keep RF,Hua Y,Xi G.Intracerebral haemorrhage:mechanisms of injury and therapeutic targets[J].Lancet Neurol,2012,11(8):720-731.

    [18]Joice SL,Mydeena F,Couraud PO,et al.Modulation of blood-brain barrier permeability by neutrophils:in vitro and in vivo studies[J].Brain Res,2009,1298:13-23.

    [19]Zacchigna S,Lambrechts D,Carmeliet P.Neurovascular signalling defects in neurodegeneration[J].Nat Rev Neurosci,2008,9(3):169-181.

    [20]Freret T,Valable S,Chazalviel L,et al.Delayed administration of deferoxamine reduces brain damage and promotes functional recovery after transient focal cerebral ischemia in the rat[J].Eur J Neurosci,2006,23(7):1757-1765.

    [21]Maddika S,Ande SR,Panigrahi S,et al.Cell survival,cell death and cell cycle pathways are interconnected:implications for cancer therapy[J].Drug Resist Update,2007,10(1-2):13-29.

    The research progress on the mechanism of HIF-1α and Hsp70 after intracerebral hemorrhage

    FAN Xian-min,LUO Yong-jie

    R743.34

    B

    1672-6170(2015)03-0187-03

    2015-01-07;

    2015-03-05)

    △通訊作者,碩士生導師

    猜你喜歡
    腦損傷腦組織血腫
    頭皮血腫不妨貼敷治
    腦損傷 與其逃避不如面對
    幸福(2019年21期)2019-08-20 05:39:10
    小腦組織壓片快速制作在組織學實驗教學中的應用
    芒果苷對自發(fā)性高血壓大鼠腦組織炎癥損傷的保護作用
    中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:35
    慢性硬膜下血腫術后血腫復發(fā)的相關因素研究
    DNA雙加氧酶TET2在老年癡呆動物模型腦組織中的表達及其對氧化應激中神經(jīng)元的保護作用
    認知行為療法治療創(chuàng)傷性腦損傷后抑郁
    中國康復(2015年4期)2015-04-10 13:00:47
    2,4-二氯苯氧乙酸對子代大鼠發(fā)育及腦組織的氧化損傷作用
    問題2:老年患者中硬膜外血腫的手術指征?
    新生兒腦損傷的早期診治干預探析
    免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 日本黄色视频三级网站网址| 69av精品久久久久久| 草草在线视频免费看| 亚洲真实伦在线观看| 婷婷亚洲欧美| 精品久久久久久久久久久久久 | 免费电影在线观看免费观看| 熟女电影av网| 女警被强在线播放| 麻豆av在线久日| 亚洲人成77777在线视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 中文亚洲av片在线观看爽| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产成人精品久久二区二区91| 久久久精品欧美日韩精品| 免费在线观看完整版高清| 亚洲真实伦在线观看| 国产单亲对白刺激| 90打野战视频偷拍视频| 香蕉av资源在线| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 岛国在线观看网站| 麻豆一二三区av精品| 欧美中文日本在线观看视频| 精品久久蜜臀av无| 在线观看日韩欧美| 99热只有精品国产| 日本在线视频免费播放| 亚洲男人的天堂狠狠| av在线天堂中文字幕| 亚洲精品色激情综合| 哪里可以看免费的av片| 亚洲精品色激情综合| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲av成人av| 18禁国产床啪视频网站| 免费在线观看完整版高清| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 免费观看人在逋| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产黄色小视频在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 国产精华一区二区三区| 精品免费久久久久久久清纯| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 亚洲av日韩精品久久久久久密| 午夜福利一区二区在线看| 国产不卡一卡二| 99re在线观看精品视频| 免费看a级黄色片| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 日韩精品青青久久久久久| 身体一侧抽搐| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 一级黄色大片毛片| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产成人欧美在线观看| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 免费在线观看成人毛片| 免费高清在线观看日韩| av有码第一页| 精品免费久久久久久久清纯| 久久久国产欧美日韩av| 午夜福利欧美成人| 男女下面进入的视频免费午夜 | 色综合亚洲欧美另类图片| 午夜免费观看网址| 国产一卡二卡三卡精品| 欧美黑人精品巨大| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产私拍福利视频在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 99热只有精品国产| 亚洲,欧美精品.| 国产一卡二卡三卡精品| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲精品中文字幕在线视频| 在线观看www视频免费| www日本在线高清视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产精品永久免费网站| 最新美女视频免费是黄的| 日本三级黄在线观看| 亚洲avbb在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 国产成人欧美在线观看| 91麻豆av在线| 成人三级做爰电影| 免费看日本二区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 成年人黄色毛片网站| 成年人黄色毛片网站| 精品欧美国产一区二区三| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 久久久国产精品麻豆| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产av不卡久久| 国产亚洲欧美在线一区二区| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲熟妇熟女久久| 1024香蕉在线观看| 天堂动漫精品| 免费高清在线观看日韩| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产一区二区三区视频了| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久99久视频精品免费| 日韩有码中文字幕| 国产亚洲av嫩草精品影院| 制服丝袜大香蕉在线| 精品国产乱码久久久久久男人| 韩国精品一区二区三区| 亚洲一区二区三区色噜噜| 欧美激情久久久久久爽电影| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 搡老熟女国产l中国老女人| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲男人的天堂狠狠| 女警被强在线播放| 夜夜爽天天搞| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 18禁美女被吸乳视频| 国产精品九九99| 制服丝袜大香蕉在线| 久久久久久久午夜电影| 亚洲美女黄片视频| 欧美黑人精品巨大| 国产精品综合久久久久久久免费| 美女午夜性视频免费| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 亚洲成人精品中文字幕电影| 欧美三级亚洲精品| 午夜福利高清视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 欧美不卡视频在线免费观看 | 后天国语完整版免费观看| 国产成人av教育| 欧美成狂野欧美在线观看| 一级作爱视频免费观看| 国产日本99.免费观看| 99久久国产精品久久久| 亚洲成国产人片在线观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产亚洲精品久久久久5区| 精品久久久久久久末码| 性色av乱码一区二区三区2| av视频在线观看入口| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲 国产 在线| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 日韩中文字幕欧美一区二区| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 99国产精品一区二区三区| 婷婷亚洲欧美| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲精品一区av在线观看| avwww免费| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 动漫黄色视频在线观看| 久热爱精品视频在线9| 欧美成人午夜精品| 亚洲专区中文字幕在线| 国产亚洲精品第一综合不卡| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲,欧美精品.| 国产精品一区二区三区四区久久 | 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲成人精品中文字幕电影| 久热这里只有精品99| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久久久九九精品影院| 99久久国产精品久久久| 成年女人毛片免费观看观看9| 黑人欧美特级aaaaaa片| 一级毛片女人18水好多| 国产单亲对白刺激| 午夜免费鲁丝| 欧美日本视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 动漫黄色视频在线观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 99re在线观看精品视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 欧美日韩乱码在线| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 韩国av一区二区三区四区| 久热爱精品视频在线9| 18禁观看日本| 久热这里只有精品99| 精品乱码久久久久久99久播| 国产一区二区在线av高清观看| 欧美日韩乱码在线| 久久久国产成人免费| 国产激情久久老熟女| 国产精品野战在线观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲精品一区av在线观看| 最好的美女福利视频网| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲男人天堂网一区| 久久中文字幕人妻熟女| 日本a在线网址| 亚洲精品久久国产高清桃花| 免费在线观看成人毛片| www.熟女人妻精品国产| 久久国产亚洲av麻豆专区| 欧美日韩精品网址| 无遮挡黄片免费观看| 99国产综合亚洲精品| 免费在线观看亚洲国产| 丁香六月欧美| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产在线观看jvid| 精品国产乱码久久久久久男人| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 最新美女视频免费是黄的| 久久久久久久久中文| 欧美日韩精品网址| 色哟哟哟哟哟哟| 在线视频色国产色| 亚洲激情在线av| 成人免费观看视频高清| 免费观看人在逋| 这个男人来自地球电影免费观看| 黄片大片在线免费观看| a级毛片在线看网站| 久久久久九九精品影院| 成年免费大片在线观看| 精品国产乱子伦一区二区三区| 美女国产高潮福利片在线看| 久久久久亚洲av毛片大全| 亚洲激情在线av| 极品教师在线免费播放| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 免费无遮挡裸体视频| 日韩精品青青久久久久久| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 欧美大码av| 手机成人av网站| 亚洲国产看品久久| a级毛片在线看网站| ponron亚洲| 午夜福利一区二区在线看| 久久久久国内视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 又黄又粗又硬又大视频| 99re在线观看精品视频| 久久久久国内视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 日韩精品青青久久久久久| 精品久久久久久久毛片微露脸| 国产麻豆成人av免费视频| 色综合婷婷激情| 村上凉子中文字幕在线| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 黄色成人免费大全| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产成人精品无人区| 午夜福利成人在线免费观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 妹子高潮喷水视频| 天堂动漫精品| cao死你这个sao货| av片东京热男人的天堂| 99国产精品一区二区三区| 麻豆成人av在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 91国产中文字幕| 很黄的视频免费| svipshipincom国产片| 99久久99久久久精品蜜桃| 在线观看免费视频日本深夜| 日韩欧美国产一区二区入口| 久久久水蜜桃国产精品网| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 级片在线观看| 精品福利观看| 一级a爱片免费观看的视频| 美女午夜性视频免费| 日韩欧美免费精品| 久久香蕉激情| 伦理电影免费视频| 又黄又粗又硬又大视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 国产视频一区二区在线看| 亚洲真实伦在线观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 精品久久久久久久久久免费视频| 久久香蕉精品热| 丰满的人妻完整版| 一边摸一边抽搐一进一小说| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 不卡av一区二区三区| 午夜影院日韩av| 久久久国产精品麻豆| 国内精品久久久久久久电影| 9191精品国产免费久久| 嫩草影视91久久| 亚洲中文av在线| 日本一区二区免费在线视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲精品av麻豆狂野| 欧美激情久久久久久爽电影| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲av成人一区二区三| 国产爱豆传媒在线观看 | 亚洲熟女毛片儿| 久久亚洲精品不卡| 亚洲黑人精品在线| 午夜老司机福利片| 成人18禁在线播放| 午夜激情av网站| 免费av毛片视频| 老鸭窝网址在线观看| 人妻久久中文字幕网| 美女国产高潮福利片在线看| 男女下面进入的视频免费午夜 | 久久久久久久精品吃奶| 午夜福利成人在线免费观看| 日韩精品中文字幕看吧| av在线播放免费不卡| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产精品野战在线观看| 久久精品91蜜桃| 国产精品二区激情视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 后天国语完整版免费观看| 国产激情久久老熟女| 国产97色在线日韩免费| 国产1区2区3区精品| 日韩免费av在线播放| or卡值多少钱| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 香蕉久久夜色| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲av第一区精品v没综合| 性欧美人与动物交配| av电影中文网址| 精品久久久久久,| а√天堂www在线а√下载| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产精品久久久人人做人人爽| 十八禁网站免费在线| 黄色片一级片一级黄色片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲欧美日韩无卡精品| 黑丝袜美女国产一区| 成年人黄色毛片网站| 窝窝影院91人妻| 精品电影一区二区在线| 女性生殖器流出的白浆| 中文字幕人妻熟女乱码| 免费一级毛片在线播放高清视频| 日韩欧美三级三区| 男人舔女人下体高潮全视频| 母亲3免费完整高清在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 久久久久亚洲av毛片大全| 母亲3免费完整高清在线观看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| www日本黄色视频网| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲一区中文字幕在线| 国产欧美日韩精品亚洲av| 在线av久久热| 成人特级黄色片久久久久久久| 制服丝袜大香蕉在线| 国产99久久九九免费精品| 国产高清激情床上av| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 曰老女人黄片| 久久久久久国产a免费观看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 18禁观看日本| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久 成人 亚洲| 国产精品久久久人人做人人爽| 香蕉丝袜av| 男人操女人黄网站| 又黄又粗又硬又大视频| 黄片小视频在线播放| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 婷婷亚洲欧美| 国产不卡一卡二| 在线观看免费午夜福利视频| 99国产精品一区二区三区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲成人久久性| 淫秽高清视频在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产高清视频在线播放一区| 久久中文字幕一级| 我的亚洲天堂| 一a级毛片在线观看| 三级毛片av免费| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲国产看品久久| 免费在线观看成人毛片| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 村上凉子中文字幕在线| 国产成人影院久久av| 韩国av一区二区三区四区| 国产一卡二卡三卡精品| 国产成人欧美在线观看| 999久久久国产精品视频| 久久精品91无色码中文字幕| av电影中文网址| 天堂√8在线中文| 精品欧美一区二区三区在线| 欧美一区二区精品小视频在线| 中国美女看黄片| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 亚洲无线在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲国产精品sss在线观看| 三级毛片av免费| 亚洲电影在线观看av| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产成人av激情在线播放| 一区福利在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| 午夜视频精品福利| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 国产熟女xx| 国产av不卡久久| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 三级毛片av免费| 久久精品91蜜桃| cao死你这个sao货| 搡老熟女国产l中国老女人| 变态另类丝袜制服| 中文字幕最新亚洲高清| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 日韩欧美三级三区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 两性夫妻黄色片| 黄色成人免费大全| 两个人视频免费观看高清| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 在线免费观看的www视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 在线视频色国产色| 精品一区二区三区四区五区乱码| 不卡一级毛片| 高清毛片免费观看视频网站| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产精品电影一区二区三区| 99精品欧美一区二区三区四区| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲自拍偷在线| 欧美色欧美亚洲另类二区| 欧美一区二区精品小视频在线| 午夜精品在线福利| 中文亚洲av片在线观看爽| 啪啪无遮挡十八禁网站| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 麻豆一二三区av精品| 亚洲男人天堂网一区| 级片在线观看| 亚洲片人在线观看| 热99re8久久精品国产| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 久久九九热精品免费| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产精品一区二区三区四区久久 | 搞女人的毛片| 淫秽高清视频在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产亚洲欧美98| 亚洲一区二区三区色噜噜| 成年人黄色毛片网站| 亚洲电影在线观看av| 国产成人影院久久av| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 精品久久久久久久末码| 黄色成人免费大全| 久久久久九九精品影院| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产1区2区3区精品| 免费高清视频大片| 高潮久久久久久久久久久不卡| 99热只有精品国产| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产精品,欧美在线| 级片在线观看| 香蕉av资源在线| 国产av一区在线观看免费| 国产精品1区2区在线观看.| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产在线精品亚洲第一网站| 黄色女人牲交| 午夜久久久久精精品| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲第一电影网av| 宅男免费午夜| 精品第一国产精品| 国产精品,欧美在线| 国产人伦9x9x在线观看| 1024香蕉在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产成人啪精品午夜网站| 男人舔女人下体高潮全视频| 中出人妻视频一区二区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 2021天堂中文幕一二区在线观 | 少妇 在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 国产精品1区2区在线观看.| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久国产精品影院| 俺也久久电影网| 国产午夜福利久久久久久| 一边摸一边抽搐一进一小说| 熟女电影av网| 后天国语完整版免费观看| 身体一侧抽搐| 国产真实乱freesex| 欧美一区二区精品小视频在线| 久久久久国内视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 俺也久久电影网| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 日韩高清综合在线| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 老司机靠b影院| 1024手机看黄色片| 欧美+亚洲+日韩+国产| 最新在线观看一区二区三区| 美女午夜性视频免费| 亚洲欧美精品综合久久99| 99re在线观看精品视频| 美女扒开内裤让男人捅视频| 久久天堂一区二区三区四区| 中文字幕久久专区| 视频区欧美日本亚洲| av电影中文网址| 免费观看人在逋| 成人国产综合亚洲| 日韩高清综合在线| 亚洲电影在线观看av| 国产熟女午夜一区二区三区| 成人国产一区最新在线观看| av片东京热男人的天堂| 亚洲自拍偷在线| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 精品国产一区二区三区四区第35| 高清在线国产一区| 亚洲久久久国产精品| 久久 成人 亚洲| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲国产精品合色在线| 俺也久久电影网| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国产成人av教育| 波多野结衣av一区二区av| 国产精品永久免费网站| 变态另类丝袜制服| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲五月天丁香| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 精品国产乱码久久久久久男人| 日韩精品中文字幕看吧| 91国产中文字幕| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产私拍福利视频在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲国产精品合色在线|