人類表皮生長因子受體2(HER2)在食管癌中的表達(dá)及意義

方航榮 劉冰 徐銳 尋萌 溫玉婷 石國英

食管癌在我國是發(fā)病率和病死率居第四位的惡性腫瘤，其術(shù)后5年生存率僅為20% ～25%［1］，預(yù)后較差。在食管癌的各種組織學(xué)類型中，鱗狀細(xì)胞癌是發(fā)生率最高的。食管癌的高發(fā)病率和病死率提示當(dāng)前以手術(shù)為主的多種治療方法療效有限，因此需要新的治療手段如靶向治療來提高其療效及預(yù)后，而靶向治療有賴于靶基因位點的評估［2，3］。作為表皮生長因子受體家族的成員之一，人類表皮生長因子受體2(HER2)已經(jīng)成為一些腫瘤的治療靶點而備受關(guān)注，HER2是乳腺癌對化療和激素治療反應(yīng)的一個重要的預(yù)后因素［4，5］，有研究顯示，HER2 也是食管鱗狀細(xì)胞癌的重要預(yù)后因素［6］。然而，在這方面的文獻(xiàn)也不盡相同，并不是所有的文獻(xiàn)都表明HER2的過表達(dá)與預(yù)后差之間有關(guān)聯(lián)［7］。本實驗對HER2在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)進(jìn)行研究，探討其與食管鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)系，闡明其表達(dá)的臨床意義是否同HER2在乳腺癌中一樣，預(yù)示著患者的預(yù)后差，如果結(jié)果同設(shè)想的一樣，注射用曲妥珠單抗(商品名赫賽汀，上海羅氏公司)將有望成為食管鱗狀細(xì)胞癌患者的靶向治療藥物，從而使患者受益。

1 材料與方法

1.1 材料 120例原發(fā)食管鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本取自2009至2014年西安醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院治療的患者，均經(jīng)外科手術(shù)切除、組織病理學(xué)確診，未經(jīng)放射和化療治療，且無淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。遠(yuǎn)癌組織取自同標(biāo)本。

1.2 試劑與方法 所有組織經(jīng)10%中性緩沖甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，4 μm厚切片。所有病例均分別做HE染色和免疫組織化學(xué)染色。免疫組織化學(xué)染色方法為S-P法。HER2抗體為兔抗人單克隆即用型抗體，福州邁新公司生產(chǎn)，PBS液代替一抗作為空白對照，陽性對照按照說明書為乳腺癌標(biāo)本。

1.3 結(jié)果判定 根據(jù)《乳腺HER2檢測指南》，要求根據(jù)癌細(xì)胞膜著色的完整性、是否均勻、著色強度及比例分為四級，判讀使用 HER2 0、1+、2+、3+、HER2蛋白2+的病例為不確定病例，需重復(fù)免疫組化(IHC)做進(jìn)一步檢測;HER2蛋白3+者可作為臨床醫(yī)生建議患者接受赫賽汀治療的依據(jù);HER2陽性結(jié)果定義為免疫組化(IHC)3+(＞30%的浸潤性癌細(xì)胞的胞膜呈現(xiàn)完整的強著色)，或熒光原位雜交(FISH)結(jié)果顯示HER2基因擴增。HER2可疑:IHC結(jié)果為2+(指至少10%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中度完整的胞膜染色)。HER2陰性:指IHC 0或1+(任何比例的腫瘤細(xì)胞有微弱的、不完整的胞膜染色或無著色)。

2 結(jié)果

120例食管癌組織中HER2表達(dá)大部分呈陰性，其中 HER2 0為 19.2%，HER 1+為 70.8%，HER2 2+為10.0%(根據(jù)指南要求重復(fù)實驗)，未見到HER2 3+的病例。見表1、圖1～4。

表1 食管癌組織與遠(yuǎn)癌組織HER2的表達(dá)n=120，例(%)

圖1 HER2在食管癌組織細(xì)胞胞膜中呈陽性表達(dá)(HE×10)

圖2 HZER2在食管癌組織細(xì)胞胞膜中呈陽性表達(dá)(HE×10)

圖3 HER2在食管癌組織細(xì)胞胞膜中呈陽性表達(dá)(HE×20)

圖4 HER2在食管癌組織細(xì)胞胞膜中呈陽性表達(dá)(HE×20)

3 討論

食管癌是常見的惡性腫瘤之一，在世界上是第8位導(dǎo)致死亡的惡性腫瘤，全球每年30萬死于食管癌的患者中我國占1/2以上。近些年在食管癌的治療方面已取得了很大進(jìn)展，但是其發(fā)病率和病死率仍居高不下，雖然手術(shù)治療是食管癌的標(biāo)準(zhǔn)治療方法，但術(shù)后5年生存率低、預(yù)后較差，腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移依然是其治療失敗的主要原因。食管癌的高發(fā)病率和病死率提示當(dāng)前以手術(shù)為主的多種治療方法療效有限，因此需要新的治療手段來提高其療效及預(yù)后，靶向治療已經(jīng)在食管癌中開始應(yīng)用。

作為表皮生長因子受體家族的成員之一，HER2已經(jīng)成為一些腫瘤的治療靶點而備受關(guān)注，它在乳腺癌中的陽性表達(dá)與赫賽汀關(guān)系已經(jīng)闡明，并已經(jīng)應(yīng)用于臨床，這在乳腺癌的治療中早已經(jīng)達(dá)成共識。目前，HER2表達(dá)的研究范圍也在不斷擴大，如胃癌及食管鱗狀細(xì)胞癌，而食管鱗狀細(xì)胞癌與HER2的關(guān)系正在研究中，只是結(jié)論并未達(dá)成共識，許多研究分析了食管癌中HER2的過表達(dá)，但結(jié)果不盡相同［8］。本實驗結(jié)果表明，120例食管鱗狀細(xì)胞癌的患者中，按照HER2結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，HER2 0 為19.2%，HER 1+為70.8%，HER2 2+為10.0%(根據(jù)指南要求重復(fù)實驗)，未見HER2 3+的病例，與文獻(xiàn)報道的31.0%2+及10.4%3+［8］不盡相同。根據(jù)指南要求，HER 2+視為可疑，需重復(fù)實驗，我們進(jìn)行了重復(fù)實驗后，結(jié)果同前。分析實驗結(jié)果為陰性的原因:(1)可能是我們的病例數(shù)不夠多，所以結(jié)果與文獻(xiàn)報道有差異;(2)食管鱗狀細(xì)胞癌的靶向治療與HER2的關(guān)系不大，并非像乳腺癌那樣明確，因此，還需要尋找新的靶點。

目前，HER2與食管鱗狀癌的關(guān)系尚不明確，赫賽汀是否能成為食管鱗狀細(xì)胞癌的靶向治療藥物還是未知數(shù)，相信隨著更多的實驗研究的發(fā)展，這個問題終將明確得到解決，為患者的治療帶來福音。

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5 Reichelt U，Duesedau P，Tsourlakis MC，et al.Frequent homogeneous HER-2 amplification in primary and metastatic adenocarcinoma of the esophagus.J Mod Pathol，2007，20:120-129.

6 Huang JX，Zhao K，Lin M，et al.HER2 gene amplification in esophageal squamous cell carcinoma is less than in gastroesophageal junction and gastric adenocarcinoma.J Oncol Lett，2013，6:13-18.

7 Kono KI，Mimura K，F(xiàn)ujii H，et al.Potential therapeutic significance of HER-family in esophageal squamous cell carcinoma.J Ann Thorac Cardiovasc Surg，2012，18:506-513.

8 Zhan N，Dong WG，Tang YF.Analysis of HER2 gene amplification and protein expression in esophageal squamous cell carcinoma.J Med Oncol，2012，29:933-940.