乙型肝炎e抗原與HBV-DNA定量及肝功能的相關性分析

盧兆蓮 陳世敏 陳英劍 胡成進

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染呈全世界流行，對人類的健康造成了嚴重危害，是一個全世界的健康問題。據(jù)WHO統(tǒng)計，全球超過20億人感染過乙型肝炎病毒，3.5億人成為慢性感染者，其中75%是亞洲人［1］。每年大約100萬人死于HBV感染引起的相關慢性活動性肝炎肝硬化和肝癌，我國是HBV感染的高發(fā)區(qū)，占總人口7.18%的人群感染HBV，每年死亡30萬人［2，3］。因此，對HBV的防治是我國健康與傳染病控制中的首要問題。乙型肝炎e抗原陽性是乙肝病毒復制活躍的標志，當其轉變?yōu)橐倚透窝譭抗體時，說明病毒已經(jīng)被清除或者停止。但部分慢性乙型肝炎患者在HBeAg轉陰后血清中仍可以檢測到HBVDNA，而且還存在部分HBeAg和 HBeAb同時存在的患者。HBV-DNA是血清中HBV存在與復制的直接標志。而血清中丙氨酸氨基轉移酶(ALT)和天冬氨酸氨基轉移酶(AST)的水平能夠反映乙型肝炎患者肝細胞的損傷程度。本文檢測乙型肝炎e抗原和血清中病毒的含量及肝功能，從而為臨床更好診斷疾病、判斷預后及合理用藥提供幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料 385例乙型肝炎患者為2012年1月至2013年9月我院門診收治的患者，其中男258例，女127例;年齡13～68歲，平均年齡(35±4)歲。診斷符合中華醫(yī)學會感染學分會、中華醫(yī)學會肝病學分會2010年聯(lián)合制定的《中國慢性乙型肝炎防治指南》。清晨空腹靜脈抽血，待血液自然凝固后2 500 r/min離心15 min分離血清。

1.2 試劑與方法 (1)HBeAg定量采用Rochee 601電化學發(fā)光儀分析，試劑由羅氏公司提供;(2)ALT、AST采用AU5831分析儀檢測，試劑由中生北控生物科技有限公司提供;(3)HBV-DNA采用熒光定量聚合酶鏈反應進行測定，試劑由上?？迫A試劑公司提供;(4)結果判讀:HBeAg＞1.0 S/CO 為陽性，HBV-DNA定量≥103拷貝/ml為陽性。均嚴格按照試劑說明書操作。

1.3 主要儀器 Rochee 601電化學發(fā)光儀分析;貝克曼的AU5831分析儀，Roche Light cycler480Ⅱ熒光定量PCR檢測儀。

1.4 統(tǒng)計學分析 應用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料以±s表示，正態(tài)分布比較采用t檢驗，非正態(tài)分布用Wilcoxon秩和檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 HBeAg與HBV-DNA定性關系 385例患者中，HBeAg陽性204例，其中HBV-DNA陽性162例，陽性率79.41%;HBeAg陰性181例，其中HBV-DNA陽性48例，陽性率26.52%。HBeAg陽性患者 HBV-DNA陽性率顯著高于HBeAg陰性患者，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。見表1。

表1HBeAg與HBV-DNA定性結果比較 例(%)

2.2 HBeAg與HBV-DNA定量關系 隨著HBeAg光放射強度的逐漸增加，HBV-DNA的拷貝數(shù)也逐漸增加，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。見表2。

表2HBeAg與HBV-DNA定量結果比較±s

表2HBeAg與HBV-DNA定量結果比較±s

注:HBV-DNA含量以對數(shù)值表示

光放射強度 HBV-DNA F值 P值1～100(n=37)5.19 ±1.6 101 ～1 000(n=46) 6.4 ±1.9 15.80 ＜0.01＞1 000(n=79)7.1 ±1.2 7.70 ＜0.01

2.3 HBeAg與肝功能結果關系 隨著HBV-DNA含量的逐漸增加，ALT和AST也逐漸增大，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05 或 ＜0.01)。見表3。

表3 HBV-DNA與肝功能定量結果比較 U/L

3 討論

隨著檢驗醫(yī)學的快速發(fā)展，實驗室對HBV感染診斷的技術越來越多，目前主要的技術有血清標志物檢測、核酸檢測、HBV基因型和變異檢測以及顯微鏡檢查等［4，5］。多指標的聯(lián)合運用，對HBV感染的診斷、臨床治療及療效觀察有重要意義。

對比HBeAg與HBV-DNA的關系，一般認為兩者水平常一致［6］。本文研究結果顯示，385例乙型肝炎患者中，HBeAg陽性患者 HBV-DNA陽性率為79.41%，這與 Craxi等［7］報道的基本一致。HBeAg 陰性患者HBV-DNA陽性率26.52%，HBeAg陽性患者HBV-DNA陽性率顯著高于HBeAg陰性者。在HBeAg陽性患者中，隨著HBeAg光放射強度的增加，HBVDNA的含量也逐漸增大，說明HBeAg表達情況與HBV-DNA水平存在一定的一致性。即HBeAg陽性者病毒復制活躍，傳染性強，此論點與公認的論點一致。由此可見，慢性乙型肝炎患者血清HBeAg和HBVDNA水平均可以評估HBV-DNA復制活躍程度，血清HBeAg滴度在一定程度上可以推測HBV-DNA水平，但HBeAg在評估慢性乙型肝炎進展程度上優(yōu)于HBVDNA復制水平［8］，所以，聯(lián)合檢測血清 HBeAg和HBV-DNA含量可直接了解乙肝患者體內(nèi)HBV復制活躍程度，監(jiān)測病毒的進展情況。

有報道指出，血清HBV-DNA含量水平與ALT水平成正比［9］，也有資料報道血清HBV-DNA含量水平與肝功能指標均無相關性［10］。本文研究結果顯示，血清HBV-DNA的含量與ALT及AST的含量存在一定的關系，即隨著HBV-DNA含量的增加，ALT和AST的含量也升高，肝細胞的損傷程度越嚴重。而現(xiàn)在要想準確了解肝組織損害程度，必須進行活檢。由于肝活檢是一種創(chuàng)傷性檢查，操作難度大，且操作上有一定風險，所以對乙型肝炎患者開展肝活檢不現(xiàn)實。而血清ALT水平是反應肝組織炎性壞死較為可靠的敏感指標［11］，所以定期監(jiān)測血清ALT及AST的水平，可實時掌握肝組織炎性壞死程度，及時采取有效抗病毒治療等措施，減輕肝細胞炎性壞死，延緩和減少肝臟失代償、肝硬化、肝癌及并發(fā)癥。

綜上所述，聯(lián)合定量檢測可以監(jiān)測患者體內(nèi)病毒的復制、肝炎活動的發(fā)作、抗病毒治療的時機，抗病毒藥物的治療療程和判斷是否復發(fā)具有較大的臨床意義。

1 William M.hepatitis B virus infection.Nejm，2009，337:1733-1743.

2 Wang Y，Jia J.Control of hepatitis B in China:prevention and treatment.Expert Rev Anti infect Ther，2011，9:21-25.

3 蘇立穩(wěn)，劉宇，楊萱.中西藥聯(lián)合治療失代償期乙型肝炎肝硬化30例.解放軍醫(yī)藥，2013，25:63-64.

4 王蘭蘭，秦莉主編.醫(yī)學檢驗項目選擇與臨床應用.第1版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2010.

5 周俊卿，程欣.乙型肝炎病毒表面抗原定量檢測的臨床意義及研究進展.臨床誤診誤治，2013，26:101-103.

6 駱抗先主編.乙型肝炎基礎和臨床.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2001.

7 Craxi A，Weller IV，Bassendine MF，et al.relationship between HBV-specific DNA polymerase and HBe antigen/antibody system in chronic HBV infection:factors determining selection of patients and outcome of antiviral therapy.Gut，1983，24:143-147.

8 Yang HI，Lu SN，Liaw YF，et al.Hepatitis B e antigen and the risk of heaptocellular carcinoma.N Engl J Med，2002，347:168-174.

9 繆曉輝，孔憲濤.HBV-DNA基因定量分析技術的應用價值、存在問題及展望.肝臟雜志，1999，4:172-174.

10 蔡衛(wèi)平，唐小平，陳勁峰，等.慢性乙型肝炎HBV-DNA檢測與病原學標志和肝損害程度的關系.中國實用內(nèi)科雜志，1998，18:149-150.

11 Kim WR，F(xiàn)lamm SL，Di Bisceglie AM，et al.Serum activity of alanine aminotransferase(ALT)as an indicator of health and disease.Hepatology，2008，47:1363-1370.