新鮮全血在不同血液分析儀比對(duì)試驗(yàn)中的應(yīng)用

陳立松，周芹

(阜寧縣溝墩醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 阜寧 224433)

血液分析儀廣泛運(yùn)用在各級(jí)醫(yī)院的臨床檢驗(yàn)中，伴隨著工作量的增加，同一實(shí)驗(yàn)室同時(shí)使用不同品牌或同一品牌不同型號(hào)的血液分析儀的現(xiàn)象已很普遍。由于不同型號(hào)的血液分析儀因檢測(cè)方法和檢測(cè)原理不盡相同，對(duì)同一標(biāo)本的測(cè)定結(jié)果必然存在著系統(tǒng)誤差[1]，所以關(guān)注檢驗(yàn)結(jié)果的溯源性和可比性，提高血細(xì)胞分析系統(tǒng)的可比性非常重要[2]。我們自2008年以來(lái)試用新鮮抗凝全血在兩臺(tái)血液分析儀之間進(jìn)行結(jié)果比對(duì)，經(jīng)過幾年的改進(jìn)和完善，現(xiàn)已形成了一套較為規(guī)范的科內(nèi)血液分析儀比對(duì)操作程序，取得了較為滿意的臨床效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1 .1儀器與試劑 血液分析儀2臺(tái)，分別為Sysmex XS-800i(日本希森美康公司)和BC-5300(深圳邁瑞公司)。所用試劑均為儀器配套試劑。

1.1 .2校準(zhǔn)品和質(zhì)控物 儀器均使用各自配套的校準(zhǔn)品和質(zhì)控物。

1.1 .3比對(duì)物 EDTA-K2抗凝的新鮮全血。為了避免抗凝劑、溫度等各方面的影響[3，4]，每次所有標(biāo)本的檢測(cè)均在2h內(nèi)完成。

1.2 方法

1.2 .1比對(duì)前的儀器準(zhǔn)備 為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，要求室溫20～250C，濕度小于80%。試驗(yàn)前每臺(tái)血液分析儀進(jìn)行日保養(yǎng)，以去除管道中殘留的血液、吸附的蛋白纖維等，確保管路通暢和清潔，然后做空白計(jì)數(shù)和攜帶污染率測(cè)定，本底和攜帶污染率必須符合要求。

1.2 .2精密度測(cè)定 取新鮮抗凝全血2份，分別在兩臺(tái)儀器上重復(fù)檢測(cè)11次，計(jì)算第2~11次結(jié)果的白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、平均紅細(xì)胞體積和血小板的均值(x)、標(biāo)準(zhǔn)差(s)及變異系數(shù)(CV%)。

1.2 .3參比儀器的確定與校準(zhǔn) 我們以多年參加室間質(zhì)評(píng)且成績(jī)優(yōu)秀的Sysmex XS-800i血液分析儀作為參比儀器，并用配套的校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)。

1.2 .4比對(duì)方法 取5份新鮮抗凝全血標(biāo)本(低值1份，正常參考范圍內(nèi)2份，較高1份，高值1份)，按照儀器的操作規(guī)程在試驗(yàn)儀器和參比儀器上平行測(cè)定，每份標(biāo)本測(cè)定兩次(順序1,2,3,4,5,5,4,3,2,1)，結(jié)果取兩次的均值，第二天以同樣的方式再測(cè)5份標(biāo)本，計(jì)算10份標(biāo)本在試驗(yàn)儀器和參比儀器上各參數(shù)測(cè)定結(jié)果的平均相對(duì)偏差。相對(duì)偏差=(試驗(yàn)儀器測(cè)定值-參比儀器測(cè)定值)/參比儀器測(cè)定值。

1.2 .5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果求出回歸方程，分析試驗(yàn)儀器和參比儀器的相關(guān)性。

1.2 .6評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 儀器精密度評(píng)價(jià)參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案(CLIA’88)規(guī)定的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)允許誤差的1/4作為判定規(guī)則，即CV值滿足：WBC≤3.75%、RBC≤1.5%、Hb≤1.75%、MCV≤1.5%、PLT≤6.25%；儀器比對(duì)的相關(guān)系數(shù)參照ICSH和NCCLS制定的標(biāo)準(zhǔn)作為判定規(guī)則：r>0.95；不同血液分析儀之間各指標(biāo)的評(píng)價(jià)依據(jù)CLIA，88規(guī)定的允許誤差的1/2作為判定規(guī)則：采用 WBC≤±7.5%、RBC≤±3.0%、Hb≤±3.5%、MCV≤±3.0%、PLT≤±12.5%。

1.2 .7試驗(yàn)儀器的調(diào)整 如果試驗(yàn)儀器和參比儀器參數(shù)的相關(guān)系數(shù)或平均相對(duì)偏差超過質(zhì)量控制范圍，需要對(duì)試驗(yàn)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。(1)采集同一健康人新鮮抗凝血2份，分別在參比儀器和試驗(yàn)儀器上連續(xù)測(cè)定11次，計(jì)算2~11次各參數(shù)測(cè)定結(jié)果的均值，并以參比儀器的結(jié)果作為試驗(yàn)儀器各參數(shù)的靶值。(2)調(diào)整系數(shù)=靶值/測(cè)定值×原系數(shù)。如果靶值/測(cè)定值大于1.1或小于0.9，需工程師進(jìn)行儀器維護(hù)或維修。(3)系數(shù)調(diào)整后應(yīng)重新做比對(duì)試驗(yàn)，保證質(zhì)量控制指標(biāo)在允許范圍之內(nèi)。

2 結(jié)果

2.1 兩臺(tái)儀器的精密度測(cè)定結(jié)果 見表1。

表1 儀器精密度測(cè)試的變異系數(shù)(CV%)

2.2 兩臺(tái)儀器相關(guān)性及平均相對(duì)偏差 見表2。

表2 實(shí)驗(yàn)儀器與參比儀器相關(guān)性比較及平均相對(duì)偏差(%)

3 討論

血液分析儀比對(duì)結(jié)果的評(píng)價(jià)應(yīng)包括儀器的日保養(yǎng)、空白計(jì)數(shù)、攜帶污染率、準(zhǔn)確度和精密度、可測(cè)定范圍以及比對(duì)期間室內(nèi)質(zhì)量控制的監(jiān)測(cè)等，在保證儀器運(yùn)行正常的情況下,綜合評(píng)價(jià)各儀器質(zhì)量控制指標(biāo)，對(duì)質(zhì)量指標(biāo)超過控制范圍,應(yīng)查找原因,必要時(shí)對(duì)儀器進(jìn)行檢修或校準(zhǔn)，特別是參比儀器應(yīng)溯源至國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)或使用溯源至國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)[5]。從表1可以看出,在儀器的本底及攜帶污染率均符合要求的前提下，兩臺(tái)儀器測(cè)定的WBC、RBC、Hb、HCT和PLT的精密度均在CLIA’88規(guī)定的1/4允許誤差的可接受范圍內(nèi),最大CV值為BC-5300的PLT 3.48%,各儀器測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性好，具備儀器比對(duì)的前提條件。從儀器角度分析XS-800i的精密度稍好于BC-5300。

實(shí)驗(yàn)方面，我們采用不同水平的全血標(biāo)本、連續(xù)兩天的均值作為靶值進(jìn)行比對(duì)，增加試驗(yàn)的客觀性。表2的結(jié)果顯示，本次比對(duì)(2013.09.21-22)試驗(yàn)儀器的各項(xiàng)參數(shù)與參比儀器具有良好的相關(guān)性，r值均>0.98,各參數(shù)與參比儀器的平均相對(duì)偏差均在CLIA’88規(guī)定允許誤差的1/2范圍內(nèi)，最高為PLT 3.60%。試驗(yàn)儀器與參比儀器檢測(cè)結(jié)果的相對(duì)偏差在允許范圍內(nèi)，各參數(shù)的系數(shù)無(wú)需調(diào)整。綜合以上結(jié)果還可以發(fā)現(xiàn)，血小板計(jì)數(shù)結(jié)果在兩臺(tái)儀器上的差異較大,這是由于血小板在自動(dòng)化分析過程中可能受多種因素的影響所致。日本臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì) (JCCLS)規(guī)定不同血液分析儀血小板測(cè)定的最大誤差為10%,這也從另一側(cè)面說明不同血液分析儀在保證血小板測(cè)定結(jié)果的一致性具有一定難度。隨著新技術(shù)原理的血液分析儀相繼問世，此問題會(huì)有良好的解決辦法。

血液分析儀檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響患者疾病的診斷和療效監(jiān)測(cè)，不同檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)同一份標(biāo)本的同一項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)具有溯源性和可比性[6]，而不同的血液分析儀不可避免的均存在系統(tǒng)誤差，因此，同一實(shí)驗(yàn)室同時(shí)使用多臺(tái)血液分析儀，除了有完整的質(zhì)量控制體系，還應(yīng)定期用可溯源的血液檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)其他儀器進(jìn)行比對(duì)，保證不同檢測(cè)系統(tǒng)間結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性[7]。新鮮抗凝全血為儀器間的比對(duì)提供了簡(jiǎn)便可行的途徑，特別是小型實(shí)驗(yàn)室更可以用周邊大型實(shí)驗(yàn)室“定值”的新鮮抗凝全血校準(zhǔn)或比對(duì)儀器，既方便又經(jīng)濟(jì)，也有利于實(shí)現(xiàn)溯源標(biāo)準(zhǔn)的傳遞以及不同級(jí)別實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果互認(rèn)。

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