嚴(yán)重少精子癥患者親子鑒定1例分析

陳 沖 石 妍 任 賀 劉 瑩

1.北京通達(dá)首誠司法鑒定所（100192）；2.北京警察學(xué)院 ；3.北京市公安局法醫(yī)檢驗鑒定中心

1 資料

某男子（以下稱被控父）因撫養(yǎng)糾紛不承認(rèn)與孩子存在親子關(guān)系，且被診斷為嚴(yán)重少精子癥患者。受某法院委托，來本機構(gòu)對其與孩子進(jìn)行親子鑒定，以確認(rèn)其是否為孩子的生物學(xué)父親。采集被控父、孩子及孩子母親指血，DNA IQ快速法提取DNA。分別用GoldeneyeTM20A試劑盒（北京基點認(rèn)知公司）、AGCU 21＋1試劑盒（無錫中德美聯(lián)公司）進(jìn)行39個常染色體短串聯(lián)重復(fù)（STR）基因座復(fù)合擴增，被控父用AGCU Y24試劑盒（無錫中德美聯(lián)公司）擴增；運用3130XL遺傳分析儀進(jìn)行毛細(xì)管電泳分離，GeneMapper ID v3.2軟件進(jìn)行基因座分型。采用北京地區(qū)人群調(diào)查數(shù)據(jù)，按《法庭科學(xué)DNA親子鑒定規(guī)范》（GA／T965－2011）中的方法計算累計非父排除率（CPE）和親權(quán)指數(shù)（PI）。檢測的39個STR基因座分型結(jié)果見表1。孩子每個基因座中的兩個等位基因其中一個可在母親的基因型中找到來源，另一個等位基因均可在被控父的基因型中找到來源，符合遺傳規(guī)律。根據(jù)上述39個STR基因座分型結(jié)果，被控父為孩子的生物學(xué)父親的父權(quán)指數(shù)為7.41×1017。被控父24個Y－STR基因座分型見圖1。

表1 被控父與孩子及孩子母親39個STR基因座分型結(jié)果與親權(quán)指數(shù)（PI）

圖1 被控父24個Y－STR基因座分型

2 討論

如果男性精液中精子濃度＜40×106／ml，其生育能力就會隨精子濃度減少而相應(yīng)下降。2010年出版的《世界衛(wèi)生組織人類精液分析實驗室技術(shù)手冊》［1］將正常精子濃度的下限值從原來的20×106／ml降低到15×106／ml，嚴(yán)重少精子癥患者精子濃度應(yīng)＜5×106／ml。本資料中被控父精子濃度為0.91×106／ml，診斷為嚴(yán)重少精子癥。

目前全世界大約有15%的育齡夫婦不育，不育夫婦中大約有50%與各種因素導(dǎo)致的男性精子發(fā)生障礙有關(guān)，其中30%的男性精子發(fā)生障礙是由染色體異常和基因突變、缺失等遺傳因素造成的［2］。人類基因組序列及大片段功能遺傳序列檢測證實人類Y染色體上存在許多精子發(fā)生相關(guān)基因，這些基因缺失或突變是導(dǎo)致男性原發(fā)性不育的遺傳病因［3］。Tiepolo等［4］首次發(fā)現(xiàn)了Y染色體長臂1區(qū)1帶存在精子發(fā)生相關(guān)基因，稱為無精子因子（AZF）。Vogt等［5］又將 AZF區(qū)域劃分為 AZFa、AZFb與AZFc三個亞區(qū)，分別對應(yīng)臨床無精子與嚴(yán)重少精子癥。葉峻杰等［6］對236例不育男性進(jìn)行17個Y－STR基因座的研究，發(fā)現(xiàn)在AZF無精子區(qū)域9個Y－STR基因座（DYS438、DYS439、DYS437、DYS389Ⅰ、DYS389 Ⅱ、DYS392、DYS385a／b、DYS448）均有不同程度的缺失。在AZFa、AZFb與AZFc三亞型中缺失率分別為5%、5%與75%，無精子主要在AZFc區(qū)，其對應(yīng)基因座為DYS448。本資料中被控父24個Y－STR基因座均有分型，無等位基因的缺失，并未出現(xiàn)上述研究類似結(jié)果。

本例被控父診斷為嚴(yán)重少精子癥，自然生育概率很小。通過遺傳學(xué)分析與統(tǒng)計學(xué)計算確認(rèn)其為孩子的生物學(xué)父親，但在Y染色體無精子因子AZF區(qū)域的Y－STR又全部檢出分型，進(jìn)行初篩并未檢測出Y染色體缺失，故提示即使臨床診斷嚴(yán)重少精子癥，也不排除具有生育能力。

［1］ World Health Organization.WHO Laboratory Manual for the examination and processing of human semen［M］.5th ed.Geneva：World Health Organization，2010：10－56.

［2］ Akgul M，Ozkinay F，Ereal D，et al.Cytogenetic abnormalities in 179cases with infertility in Western Region of Turkey：report and review ［J］.J Assist Reprod Genet，2009，26（2－3）：119－122.

［3］ Ferlin A，Raicu F，Gatta V，et al.Male infertility：role of genetic background［J］.Reprod Biomed Online，2007，14（6）：734－735.

［4］ Tiepolo L，Zuffardi O.Localization of factors controlling spermatogenesis in the nonfluorescent Portion of the human Y chromosome long arm ［J］.Hum Genet，1976，34（2）：119－124.

［5］ Vogt PH，Edelmann A，Kirsch S，et al.Human Y chromosome azoospermia factors（AZF）mapped to different subregions in Yq11.Hum Mol Genet，1996，5：933－943.

［6］ 葉峻杰，李宗芳，陳燕祥，等.男性不育人群17個Y染色體短串聯(lián)重復(fù)基因座無效等位基因分析［J］.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2013，30：330－334.