離子色譜法測(cè)定美司鈉注射中2-巰基磺酸鈉的含量

楊柳明, 彭園珍, 孫 杰, 林燕語(yǔ)

(1. 福建師范大學(xué) 濕潤(rùn)亞熱帶生態(tài)-地理過(guò)程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 福建 福州 350007;2. 福建師范大學(xué) 地理科學(xué)學(xué)院, 福建 福州 350007)

離子色譜法測(cè)定美司鈉注射中2-巰基磺酸鈉的含量

楊柳明1,2, 彭園珍1,2, 孫 杰1,2, 林燕語(yǔ)1,2

(1. 福建師范大學(xué) 濕潤(rùn)亞熱帶生態(tài)-地理過(guò)程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 福建 福州 350007;2. 福建師范大學(xué) 地理科學(xué)學(xué)院, 福建 福州 350007)

基于2-巰基磺酸鈉的離子性,首次建立了離子色譜法測(cè)定美司鈉注射液中2-巰基磺酸鈉含量的新方法。采用陰離子色譜柱IonPac AS19(4 mm×250 mm)以60 mmol/L的KOH為淋洗液,進(jìn)樣量為25 μL、流速為1.0 mL/min的條件下,測(cè)定美司鈉注射液中2-巰基磺酸鈉的含量,結(jié)果在0.5～20.0 mg/L 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)為0.999 6,檢出限為0.065 3 mg/L,加標(biāo)回收率在95.4%～101.0%之間,方法準(zhǔn)確可靠。

美司鈉注射液； 2-巰基磺酸鈉； 離子色譜

2-巰基磺酸鈉(HS—CH2—CH2—SO3-Na+)也稱美司鈉,是一類重要的巰基化合物。在醫(yī)學(xué)上美司鈉作為泌尿系統(tǒng)的保護(hù)劑,常與抗腫瘤藥物(磷酰胺或異環(huán)磷酰胺)聯(lián)合使用預(yù)防腫瘤化療時(shí)引起的出血性膀胱炎等泌尿系統(tǒng)上皮毒性[1-3]，但過(guò)量注射亦可能帶來(lái)一定副作用[4]。因此,建立高效、靈敏的美司鈉分析方法對(duì)于相關(guān)藥物的純度檢驗(yàn)及藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究有重要的意義。

文獻(xiàn)報(bào)道的測(cè)定美司鈉含量的方法有容量法、比色法、高效液相色譜法、熒光光譜法、電化學(xué)方法以及拉曼光譜法[5-13]。這些測(cè)定方法,在檢測(cè)限及靈敏度方面都取得較好的結(jié)果。然而,也存在操作繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)、環(huán)境不友好等缺點(diǎn)。離子色譜以其較高的準(zhǔn)確性、高靈敏度及環(huán)境友好等特點(diǎn)被廣泛用于陰離子、陽(yáng)離子、有機(jī)酸的測(cè)定[14-16]。2-巰基磺酸鈉具有磺酸基團(tuán)在堿性條件下以磺酸根的形式存在,通過(guò)離子交換機(jī)制在陰離子色譜柱上具有保留能力。基于此機(jī)制,本文首次建立了一種快速、簡(jiǎn)單、環(huán)境友好的2-巰基磺酸鈉測(cè)定方法,并將其用于美司鈉注射液中2-巰基磺酸鈉含量的測(cè)定。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 儀器與試劑

Dionex ICS-2100型離子色譜儀:配備KOH自動(dòng)淋洗液發(fā)生裝置,ASRS 300 4 mm抑制器,電導(dǎo)檢測(cè)器;2-巰基磺酸鈉購(gòu)于Sigma (M1511; CAS:19767-45-4),美司鈉注射液國(guó)內(nèi)一家制藥公司生產(chǎn);實(shí)驗(yàn)用水為Milipore制備超純水(電阻率≥18.2 MΩ.cm)。

1.2 樣品處理

移取一定量的美司鈉注射液并用超純水稀釋至10 000～100 000倍,過(guò)0.22 μm濾膜待測(cè)。

1.3 色譜條件

AS19陰離子分析柱(4×250 mm),AG19(4×50 mm)保護(hù)柱,柱箱溫度30 ℃,60 mmol/L的溶液等濃度淋洗,流速1 mL/min,進(jìn)樣量25 μL。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件選擇

實(shí)驗(yàn)考察了不同濃度的KOH溶液(淋洗液)對(duì)2-巰基磺酸鈉分離的影響,結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖1可知，隨著淋洗液濃度增加,2-巰基磺酸鈉出峰時(shí)間不斷變小,柱效也不斷提高,當(dāng)淋洗液濃度從60 mmol/L變?yōu)?0 mmol/L時(shí),出峰時(shí)間變化相對(duì)較小。因此,本方法最終選擇淋洗液濃度60 mmol/L、流速為1.0 mL/min的離子色譜測(cè)定2-巰基磺酸鈉的分離條件。

圖1 不同淋洗液濃度分離2-巰基磺酸鈉色譜圖

2.2 線性范圍和檢出限

在優(yōu)化的色譜條件下,得到不同濃度(濃度分別為0、0.5、1、2、5、10、20 mg/L)的2-巰基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖，如圖2所示,2-巰基磺酸鈉濃度在0.5～20.0 mg/L范圍內(nèi)線性良好(r=0.999 6),其線性回歸方程為y=0.0455x-0.0109,以3信噪比求得檢出限為0.0653 mg/L。

圖2 不同濃度的2-巰基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖

2.3 實(shí)際樣品分析及加標(biāo)回收率

采用本方法對(duì)購(gòu)置同一個(gè)產(chǎn)家的2個(gè)樣品進(jìn)行重復(fù)測(cè)定6次,測(cè)得2-巰基磺酸鈉含量分別為98.6 g/L和98.2 g/L,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.47%和1.68%,將稀釋不同倍數(shù)的樣品溶液進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn),結(jié)果如表1所示(表1中樣品量是指樣品中2-巰基磺酸鈉的含量),加標(biāo)回收率在95.4%～101.0%之間,表明該方法測(cè)定的數(shù)據(jù)是準(zhǔn)確可靠的。

表1 2-巰基磺酸鈉回收率測(cè)定(n=6)

3 結(jié)論

針對(duì)當(dāng)前美司鈉注射液中2-巰基磺酸鈉含量的測(cè)定方法相對(duì)繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)等不足,本文基于2-巰基磺酸鈉的離子性,建立了操作簡(jiǎn)便、環(huán)境友好的離子色譜法，并用于2-巰基磺酸鈉的測(cè)定,另將其用于美司納注射液的分析,加標(biāo)回收率在95.4%～101.0%之間,表明此方法準(zhǔn)確可靠。

)

[1]CoxPJ.Cyclophosphamidecystitis：identificationofacroleinasthecausativeagent[J].Biochemicalpharmacology,1979,28(13):2045-2049.

[2]CoxPJ.Cyclophosphamidecystitisandbladdercancer.Ahypothesis[J].EuropeanJournalofCancer,1979,15(8):1071-1072.

[3]BrockN,PohlJ,StekarJ.Detoxificationofurotoxicoxazaphosphorinesbysulfhydrylcompounds[J].Journalofcancerresearchandclinicaloncology,1981,100(3):311-320.

[4]ThackeryE.TheGaleencyclopediaofcancer[M].ThomsonDelmarLearning,2002.

[5] 中國(guó)藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[J].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.

[6]El-YazigiA,YusufA.Al-RawithiS.Liquidchromatographicanalysisofmesnaanddimesnainplasmaandurineofpatientstreatedwithmesna[J].Therapeutic.DrugMonitoring,1995,17(2):153-158.

[7]ApostolidesZ,VermeulenNMJ,PotgieterDJJ.High-performanceliquidchromatographyofsomecoenzymeM(2-mercaptoethanesulphonicacid)derivativesbyionpairingonreversed-phasecolumns[J].Journalofchromatography,1982,246(2):304-307.

[8]GlowackiR,WojcikK,BaldE.Facileandsensitivemethodforthedeterminationofmesnainplasmabyhigh-performanceliquidchromatographywithultravioletdetection[J].JournalofChromatographyA,2001,914(1):914,29-35.

[9]VerschraagenM,ZwiersTHU,KoningPD,etal.QuantificationofBNP7787 (dimesna)anditsmetabolitemesnainhumanplasmaandurinebyhighperformanceliquidchromatographywithelectrochemicaldetection[J].JournalofChromatographyB,2001,753(2):293-302.

[10]SidauB,ShawIC.Determinationofsodium2-mercaptoethanesulphonatebyhigh-performanceliquidchromatographyusingpost-columnreactioncolorimetryorelectrochemicaldetection[J].JournalofChromatographyB,1984,311:234-238.

[11]JamesCA,RogersHJ.Estimationofmesnaanddimesnainplasmaandurinebyhigh-performanceliquidchromatographywithelectrochemicaldetection[J].JournalofChromatographyB,1986,382:394-398.

[12]VerschraagenM,BosmaM,ZwiersTHU,etal.Quantificationofmesnaandtotalmesnainkidneytissuebyhigh-performanceliquidchromatographywithelectrochemicaldetection[J].JournalofChromatographyB,2003,783(1):33-42.

[13]ZhengX,ChenY,BiN,etal.Determinationofthesodium2-mercaptoethanesulfonatebasedonsurface-enhancedRamanscattering[J].SpectrochimicaActaPartA:MolecularandBiomolecularSpectroscopy,2011,81(1):578-582.

[14] 胡靜,趙瑞峰,施文莊,等.煙草中 9 種有機(jī)酸的梯度離子色譜法測(cè)定研究[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào),2011,30(10):1171-1174.

[15] 劉靜,李靜,聶黎行,等.離子色譜法同時(shí)測(cè)定注射用丹參 (凍干)中有機(jī)酸和無(wú)機(jī)陰離子[J].藥物分析雜志,2012,32(10):1774-1777.

[16] 曹家興,杭義萍,陸建平,等.固相萃取-離子色譜法測(cè)定甘蔗糖蜜及糖蜜酒精廢液中的非氮有機(jī)酸和無(wú)機(jī)陰離子[J].色譜,2010,28(9):893-897.

Determination of sodium 2-mercaptoethanesulfonate in mesna injection by using ion chromatography

Yang Liuming1,2, Peng Yuanzhen1,2, Sun Jie1,2, Lin Yan yu1,2

(1. Key Laboratory of Humid Subtroical Eco-geographical Processes,School of Geographical Science,Fujian Normal University,Fuzhou 350007, China; 2. School of Geographical Sciences,Fujian Normal University, Fuzhou 350007, China)

A new ion chromatography method is established for determination of sodium 2-mercaptoethanesulfonate base on its ionic.The ion chromatography separation is performed on an IonPac CS19 ( 4 mm×250 mm)column with 60 mmol/LKOH as the elution at the flow rate of 1.0 mL/min.The linear range of 2-mercaptoethanesulfonate is 0.5-20.0 mg/L (r=0.999 6).The detection limit is 0.065 3 mg/L. The average recovery rate is 95.4-101.0%.The method is accurate and reliable.

mesna injection; sodium 2-mercaptoethanesulfonate; ion chromatography

2014- 10- 27

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31300523)

楊柳明(1984—),男,福建福州,碩士,實(shí)驗(yàn)師,主要從事實(shí)驗(yàn)室儀器管理和生態(tài)環(huán)境方面的研究.

E-mail：yanglm2007@aliyun.com

R927.2

B

1002-4956(2015)6- 0059- 02