嘧菌酯對(duì)馬鈴薯早疫病菌Alternaria solani的毒力及防效

肖春芳，田恒林，沈艷芬，高劍華，張遠(yuǎn)學(xué)，陳家吉

（中國南方馬鈴薯研究中心，恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，湖北 恩施 445000）

嘧菌酯對(duì)馬鈴薯早疫病菌Alternaria solani的毒力及防效

肖春芳，田恒林，沈艷芬，高劍華，張遠(yuǎn)學(xué)，陳家吉

（中國南方馬鈴薯研究中心，恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，湖北 恩施 445000）

采用組織分離法從西南北部馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)的馬鈴薯罹病葉片分離得到63株早疫病菌，并通過分生孢子萌發(fā)法測(cè)定了其中30株早疫病菌對(duì)嘧菌酯的敏感性。結(jié)果顯示，測(cè)試的30株馬鈴薯早疫病均對(duì)嘧菌酯保持高度敏感，陜西安康、湖北恩施和四川西昌馬鈴薯早疫病菌對(duì)嘧菌酯的平均EC50值分別為0.024 4、0.025 6和0.037 6 mg/L，3地總菌株的平均EC50值為0.029 0 mg/L。在田間藥效試驗(yàn)中，25%嘧菌酯懸浮劑用量為450 g/hm2，對(duì)馬鈴薯早疫病的防效為84.71%，與43%戊哇醇懸浮劑300 g /hm2的防效之間差異不顯著，但顯著高于50%多菌靈可濕性粉劑1 500 g/hm2和80%代森錳鋅可濕性粉劑3 000 g/hm2的防效，且增產(chǎn)效果顯著。以上結(jié)果表明，嘧菌酯可作為該區(qū)域內(nèi)生產(chǎn)上防治馬鈴薯早疫病的優(yōu)選藥劑。

嘧菌酯；馬鈴薯早疫?。欢玖?；防治效果

馬鈴薯早疫病是由茄鏈格孢（Alternaria solani Sorauer）侵染引起的真菌性病害，主要危害葉片和薯塊。該病發(fā)生范圍廣，被認(rèn)為是僅次于馬鈴薯晚疫病的第二大病害，一般可造成20%～30%產(chǎn)量損失[1-3]。西南北部地區(qū)是我國馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)，近年來馬鈴薯早疫病的發(fā)生呈上升趨勢(shì)。目前，在馬鈴薯生產(chǎn)中抗早疫病的品種較少，防治早疫病的主要措施是依賴化學(xué)藥劑[4]。為了尋找本區(qū)域內(nèi)防治馬鈴薯早疫病的有效藥劑，研究試用了25%嘧菌酯懸浮劑。

嘧菌酯是一種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，通過抑制病原菌線粒體的呼吸作用來阻止其能量合成，是一種較新作用機(jī)理的殺菌劑，兼具保護(hù)和治療雙重功效。該藥劑不僅能抑制菌絲生長和孢子萌發(fā)，還能顯著抑制真菌分生孢子，具有殺菌譜廣、殺菌活性高、對(duì)非靶標(biāo)作物和環(huán)境安全等特點(diǎn)[5-7]。嘧菌酯對(duì)大部分真菌都具有很好的控制作用，目前已在80余種作物的多種病害防治上獲得登記，已成為全球作物病害綜合防控的重要藥劑。該藥劑在馬鈴薯病害化學(xué)防控中具有重要的作用，既可防治由致病疫霉引起的晚疫病，又能防控由鏈格孢菌引起的早疫病[8-9]。通過測(cè)定嘧菌酯對(duì)本區(qū)域內(nèi)馬鈴薯早疫病菌毒力效果，并對(duì)比其他常規(guī)藥劑的田間防效，旨在進(jìn)一步明確嘧菌酯對(duì)馬鈴薯早疫病的防效。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試馬鈴薯品種：米拉。

供試藥劑：25%嘧菌酯懸浮劑（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司），43%戊哇醇懸浮劑（德國拜耳作物科學(xué)公司），50%多菌靈可濕性粉劑（江蘇鎮(zhèn)江建蘇農(nóng)藥化工有限公司），80%代森錳鋅可濕性粉劑（北京燕化永樂農(nóng)藥有限公司）。

供試培養(yǎng)基：PCA培養(yǎng)基：馬鈴薯100 g/L，胡蘿卜100 g/L，蔗糖10 g/L，瓊脂15 g/L。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 病原菌的分離、純化與鑒定 在發(fā)病季節(jié)采集具有典型早疫病癥狀的馬鈴薯葉片，采用單病斑組織分離方法，對(duì)所得菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定，并采用科赫氏法則進(jìn)行回接驗(yàn)證，最終得到試驗(yàn)所需菌株[9]。

1.2.2 病原菌對(duì)嘧菌酯的敏感性測(cè)定 采用分生孢子萌發(fā)法測(cè)定嘧菌酯敏感性[9]。嘧菌酯濃度分別為0、0.001、0.01、0.10、1.00和10.00 mg/L，每個(gè)濃度3次重復(fù)。利用軟件DPS 7.05計(jì)算EC50值。嘧菌酯的敏感性用相對(duì)抑制分生孢子萌發(fā)率50%的有效濃度（EC50）表示。

1.2.3 嘧菌酯對(duì)馬鈴薯早疫病的田間防治試驗(yàn) 試驗(yàn)地設(shè)在恩施市三岔鄉(xiāng)，其海拔1 000 m，肥力中等，所有試驗(yàn)小區(qū)的栽培條件基本一致。試驗(yàn)播種時(shí)間為2014年2月27日，第1次施藥于5月28日，第2次施藥于6月4日，第3次施藥于6月11日，6月30日收獲測(cè)產(chǎn)。試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理，分別是25%嘧菌酯懸浮劑450 g/hm2，43%戊哇醇懸浮劑300 g/hm2，50%多菌靈可濕性粉劑1 500 g/ hm2，80%代森錳鋅可濕性粉劑3 000 g/hm2，清水處理作對(duì)照。每處理4次重復(fù)，采用隨機(jī)區(qū)組排列，共計(jì)20個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積13.34 m2，每小區(qū)設(shè)5行，共80株，走道0.4 m。在馬鈴薯早疫病發(fā)病初期進(jìn)行施藥，施藥方法為常規(guī)噴霧，每個(gè)小區(qū)用藥液量為1.2 kg。施藥器械為“金原野”3WBD-20背負(fù)式電動(dòng)噴霧器。

調(diào)查各試驗(yàn)小區(qū)馬鈴薯早疫病發(fā)病情況，藥前調(diào)查病情級(jí)別，并于第1次藥后7 d、第2次藥后7 d、第3次藥后7 d和14 d，共調(diào)查5次。采用每個(gè)小區(qū)5點(diǎn)取樣法，每個(gè)點(diǎn)調(diào)查10株，計(jì)算病情指數(shù)和防治效果，對(duì)防效進(jìn)行顯著性分析（新復(fù)極差法）。收獲時(shí)各小區(qū)計(jì)產(chǎn)，并進(jìn)行產(chǎn)量比較。病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)采用《田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則》[10]。

病情指數(shù)=[∑（各級(jí)病葉數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值）（/調(diào)查總?cè)~數(shù)×9）]×100；

防治效果（%）=[1-（對(duì)照區(qū)藥前病情指數(shù)×處理區(qū)藥后病情指數(shù)）/（對(duì)照區(qū)藥后病情指數(shù)×處理區(qū)藥前病情指數(shù)）]×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 病原菌的分離與鑒定

從西南北部3個(gè)調(diào)查地區(qū)共采集樣品經(jīng)分離純化后最終得到63株分離物，其中陜西安康地區(qū)16株、湖北恩施地區(qū)20株，四川西昌地區(qū)27株。所有分離物經(jīng)25℃光照培養(yǎng)10 d后，顯微鏡下觀察均能發(fā)現(xiàn)分生孢子。觀察發(fā)現(xiàn)分生孢子形態(tài)及大小，與《中國真菌志》[11]所記載特征相吻合。分生孢子梗單生或簇生，分生孢子單生，暗褐色，倒棍棒形至長橢圓形，大小為85～180 μm×15～19 μm，有多個(gè)縱橫隔膜，有長喙。采用科赫氏法則進(jìn)行回接驗(yàn)證，均能使葉片發(fā)病，初呈深褐色或黑色小斑點(diǎn)，逐漸擴(kuò)大，7～10 d后能觀察到典型的同心輪紋狀病斑，且能從發(fā)病葉片上再次分離到早疫病菌。

2.2 嘧菌酯對(duì)馬鈴薯早疫病菌的毒力測(cè)定

測(cè)定了嘧菌酯對(duì)陜西安康10株、湖北恩施10株和四川西昌10株馬鈴薯早疫病菌的毒力（圖1），結(jié)果顯示：所有測(cè)試菌株對(duì)嘧菌酯均表現(xiàn)高度敏感，沒有抗性菌株出現(xiàn)。在測(cè)定陜西安康菌株毒力測(cè)定中，嘧菌酯EC50介于0.007 6～0.049 8 mg/L之間，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的6.6倍；在湖北恩施菌株毒力測(cè)定中，嘧菌酯EC50介于0.009 3～0.056 3 mg/L之間，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的6.1倍；在四川西昌菌株毒力測(cè)定中，嘧菌酯EC50介于0.011 9～0.062 6 mg/L之間，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的5.3倍。

來源于3個(gè)地點(diǎn)的馬鈴薯早疫病菌對(duì)嘧菌酯的敏感性水平基本相同，均沒有檢測(cè)到抗性菌株。陜西安康、湖北恩施和四川西昌馬鈴薯早疫病菌對(duì)嘧菌酯的平均EC50值分別為0.024 4、0.025 6和0.037 6 mg/L，3地總菌株的平均EC50值為0.029 0 mg/L。其中，EC50在平均值以下的菌株有18株，占總數(shù)的60%。嘧菌酯對(duì)不同地區(qū)馬鈴薯早疫病菌各10株敏感性測(cè)定EC50值的分布依次按＜0.02 mg/L、（0.02～0.04）mg/L、＞0.04 mg/L 3個(gè)區(qū)域劃分，陜西安康和湖北恩施早疫病菌株的比例均為50%、30%和20%，四川西昌早疫病菌株的比例分別是40%、20%和40%（表1）。

2.3 嘧菌酯對(duì)馬鈴薯早疫病的防治效果

田間藥效試驗(yàn)結(jié)果表明，在噴施25%嘧菌酯懸浮劑后對(duì)馬鈴薯早疫病具有良好的防治效果，增產(chǎn)效果明顯。末次調(diào)查，25%嘧菌酯懸浮劑對(duì)早疫病的防效為84.61%，與藥劑43%戊哇醇懸浮劑防效間差異不顯著，但與80%代森錳鋅可濕性粉劑、50%多菌靈可濕性粉劑防效間差異都達(dá)到顯著水平。測(cè)產(chǎn)結(jié)果（表2）表明，在施用25%嘧菌酯懸浮劑防治馬鈴薯早疫病后，馬鈴薯產(chǎn)量達(dá)到31 087.5 kg/hm2，增產(chǎn)效果顯著，比清水對(duì)照增產(chǎn)9.84%，但與其他藥劑處理后對(duì)馬鈴薯的增產(chǎn)效果相互之間無顯著性差異。

3 討 論

研究結(jié)果表明，嘧菌酯表現(xiàn)出對(duì)馬鈴薯早疫病較好的室內(nèi)抑菌效果和田間防效。試驗(yàn)中選擇陜西安康、湖北恩施、四川西昌等西南北部馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)的30株馬鈴薯早疫病菌菌株，未出現(xiàn)對(duì)嘧菌酯產(chǎn)生抗性的菌株，嘧菌酯對(duì)該區(qū)域內(nèi)早疫病菌群體的毒力EC50為0.007 6～0.062 6 mg/L，與周園、Pasche等報(bào)道的早疫病菌對(duì)嘧菌酯的敏感性基線EC50范圍（0.01～0.13 mg/L）接近[8,12]。從田間防效來看，25%嘧菌酯懸浮劑對(duì)馬鈴薯早疫病的防治效果顯著，能有效地控制馬鈴薯早疫病的發(fā)生與危害，除了與43%戊哇醇懸浮劑的防效之間差異不顯著以外，與其他兩種藥劑50%多菌靈可濕性粉劑、80%代森錳鋅可濕性粉劑防效間差異均達(dá)到顯著水平。與清水對(duì)照相比，25%嘧菌酯懸浮劑增產(chǎn)效果顯著，其增產(chǎn)率也高于其他常規(guī)殺菌劑，這與嘧菌酯對(duì)早疫病菌表現(xiàn)出較高的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果一致。因此，嘧菌酯可作為該區(qū)域內(nèi)防治馬鈴薯早疫病的優(yōu)選藥劑。

嘧菌酯作為一種防治馬鈴薯早疫病的新型殺菌劑，雖然具有殺菌范圍廣、對(duì)非靶標(biāo)作物和環(huán)境安全、促進(jìn)植物生長等優(yōu)點(diǎn)，但也屬于高抗性風(fēng)險(xiǎn)藥劑，且單一藥劑的頻繁使用會(huì)導(dǎo)致病菌抗藥性的產(chǎn)生，如番茄葉霉病菌、小麥白粉病、黃瓜霜霉病和瓜類灰霉病等都發(fā)現(xiàn)了抗藥性菌株[6-7,13-15]。為了減少抗藥性的產(chǎn)生，建議將嘧菌酯與其他作用機(jī)制不同的殺菌劑輪換或混合使用。受采樣地點(diǎn)、樣本數(shù)量的限制，選擇的馬鈴薯早疫病菌數(shù)量基數(shù)較小，田間藥效試驗(yàn)為一年一點(diǎn)試驗(yàn)，嘧菌酯對(duì)西南北部地區(qū)馬鈴薯早疫病的長期防效有待進(jìn)一步研究。

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（責(zé)任編輯：夏亞男）

Toxicity and Control Efficacy of Azoxystrobin against Potato Early Blight Alternaria solani

XIAO Chun-fang，SHEN Yan-fen，TIAN Heng-lin，GAO Jian-hua，ZHANG Yuan-xue，CHEN Jia-ji

（Enshi South-China Potato Research Center, Enshi Academy of Agricultural Sciences, Enshi 445000, PRC）

Sixty-three strains of Alternaria solani, a causal agent of potato early blight, were isolated from leaves of potato plants growing in major regions of potato production in northern southwest China with tissue isolation method. The sensitivity of thirty isolates among them to azoxystrobin was detected by conidial germination method. The results showed that all of them were highly sensitive to azoxystrobin, mean EC50values of A. solani strains from Ankang in Shaanxi, Enshi in Hubei, Xichang in Sichuan to azoxystrobin were 0.024 4, 0.025 6 and 0.037 6 mg/L respectively, and the average EC50value of all these strains was 0.029 0mg/L. In the feld trial, the control effcacy of azoxystrobin 25% SC applied at the rate of 450 g/hm2against potato early blight was 84.71% and compared with that of tebuconazole 43% SC applied at the rate of 300g/hm2, the difference was not signifcant; however, its control effcacy was signifcantly higher than those of the fungicides carbendazim 50% WP applied at the rate of 1500 g /hm2and mancozeb 80% WP applied at the rate of 3000 g /hm2. Moreover, its application increased the yield markedly. So azoxystrobin could be used as a preferred pharmaceutical for controlling potato early blight in the region.

azoxystrobin; potato early blight; toxicity; control effcacy

S435.32

A

1006-060X（2015）08-0046-03

10.16498/j.cnki.hnnykx.2015.08.015

2015-07-03

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)資金資助（CARS-10）

肖春芳（1986-），女，湖南岳陽市人，農(nóng)藝師，主要從事馬鈴薯遺傳育種及病蟲害綜合防控工作。

田恒林