鹽酸他噴他多緩釋片的研制及體外釋放考察

劉阿敏，丁 斌，王 磊，李德剛，李曉祥

(1．安徽中醫(yī)藥大學(xué)，安徽合肥 230012;2．安徽省新星藥物開發(fā)有限責(zé)任公司，安徽合肥 230088)

鹽酸他噴他多(tapentadol hydrochloride)是一類同時(shí)具有μ-阿片受體激動作用和去甲腎上腺素再攝取抑制作用的雙重作用機(jī)制的新型中樞止痛劑，對急性、慢性和神經(jīng)性疼痛均具有較好的鎮(zhèn)痛療效［1]。與其他阿片類藥物和非甾體類抗炎藥(NSAIDs)相比，其副作用方面得到改善，提高了阿片類藥物的安全性和耐受性［2]。慢性疼痛患者需長期服藥，用普通制劑治療時(shí)往往依從性較差，且血藥濃度波動大，安全指數(shù)低［3]。將鹽酸他噴他多開發(fā)為緩釋制劑可減少病人服藥次數(shù)，增加病人的順應(yīng)性，能最大限度的降低藥物的毒副作用，提高藥物的臨床治療效果，增加藥物的安全性和穩(wěn)定性。鹽酸他噴他多緩釋片于2011年8月獲得美國FDA批準(zhǔn)上市，國內(nèi)目前還沒有鹽酸他噴他多緩釋片相關(guān)研究報(bào)道和產(chǎn)品上市，將其制成12 h緩釋片，將為臨床提供一種更加長效、安全的鎮(zhèn)痛緩釋制劑。

鹽酸他噴他多在水中極易溶解，主要在胃和小腸吸收，制備為12 h親水凝膠骨架片的研究重點(diǎn)是控制其前期突釋效應(yīng)，且保證后期釋放完全，本研究以HPMC與CMC-Na為凝膠混合骨架材料制備了鹽酸他噴他多緩釋片，并采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化處方，且將最佳處方制備的緩釋片的體外釋放數(shù)據(jù)與參比制劑釋放參數(shù)進(jìn)行比較。

1 儀器與試藥

1．1 儀器 ZRS-8GD型智能溶出試驗(yàn)儀(天津天大天發(fā)科技有限公司);AB135-S型電子天平(德國梅特勒公司);FA1104N電子天平(上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司);DP30型單沖壓片機(jī)(北京國藥龍立科技有限公司);片劑硬度測定儀(上海黃海藥檢儀器廠);UV-2450型紫外可見分光光度計(jì)(日本島津)。

1．2 試藥 鹽酸他噴他多原料(安徽省新星藥物開發(fā)有限責(zé)任公司制備，批號:20140101，含量:99．91%，純度:99．84%);鹽酸他噴他多對照品(安徽省新星藥物開發(fā)有限責(zé)任公司制備，批號:20140103，含量:99．90%，純度:99．92%)。磷酸二氫鉀(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);氫氧化鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);羥丙基甲基纖維素(規(guī)格K4M、K15M、K100M，上海昌為醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司);羧甲基纖維素鈉、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、乳糖、微粉硅膠、硬脂酸鎂(安徽山河藥用輔料股份有限公司)，試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 鹽酸他噴他多緩釋片的制備 原料、骨架材料及填充劑分別過100目篩，按處方量稱取、混勻，濕法制粒，以5%PVP(K30)85%的乙醇溶液制軟材，過20目篩制粒，(60±5)℃干燥約2 h，干燥后顆粒過14目篩整粒，加入處方量的硬脂酸鎂和微粉硅膠，混勻，采用直徑9 mm淺凹沖模壓片，壓力控制在9～10 kg左右。

2．2 鹽酸他噴他多緩釋片釋放度測定方法

2．2．1 測定波長的選擇 精密量取鹽酸他噴他多適量，以pH6．8磷酸鹽緩沖液為溶劑，配制成質(zhì)量濃度為56 mg·L－1的溶液，以pH6．8磷酸鹽緩沖液為空白，按紫外分光光度法在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描。紫外掃描圖譜如圖1。

圖1 pH6．8介質(zhì)中對照品和空白輔料波長掃描圖

由圖1可知鹽酸他噴他多在272與214、203 nm處有最大吸收，由于在214 nm與203 nm處為末端吸收，固選擇272 nm作為檢測波長。按處方比例稱取輔料，同法操作，在此波長下輔料無吸收干擾。

2．2．2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密稱取鹽酸他噴他多對照品約64．7 mg，置于100 mL容量瓶內(nèi)，加 pH 6．8磷酸鹽緩沖液適量溶解，稀釋至刻度，搖勻，從中精密量取1 mL定容至10 mL得濃度為55．56 mg·L－1的對照品溶液。精密量取 0．5、2．5、5、10、20 mL置5個(gè)100 mL量瓶中，加釋放介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液。照紫外—可見分光光度法(2010版中國藥典二部附錄Ⅳ A)，取上述溶液在272 nm處測定吸光度，以質(zhì)量濃度C與吸光度A進(jìn)行線性回歸，得回歸方程:A=0．007 8C+0．014 2

(R2=0．999 2，r=0．999 5)，表明鹽酸他噴他多濃度在 2．78 ～111．12 mg·L－1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2．2．3 精密度實(shí)驗(yàn) 取上述對照品溶液(55．56 mg·L－1)，于272 nm波長處重復(fù)測定6次，結(jié)果RSD=0．35%(n=6)，表明儀器精密度良好。

2．2．4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取上述對照品溶液(55．56 mg·L－1)，室溫放置，分別于 0、2、4、6、8、10、12、16、20、24 h取樣，在272 nm處重復(fù)測定吸光度，結(jié)果RSD=0．55%，表明溶液穩(wěn)定性良好。

2．2．5 準(zhǔn)確度試驗(yàn) 精密量取鹽酸他噴他多對照品11．65、29．12、46．59、58．24 mg(以他噴他多計(jì)，分別相當(dāng)于他噴他多 10、25、40、50 mg)各3 份，分別置100 mL容量瓶中，再按處方比例加入空白輔料，加pH 6．8的磷酸鹽緩沖溶液稀釋至刻度，精密量取續(xù)濾液1 mL置10 mL的容量瓶，加釋放介質(zhì)稀釋至刻度，平行配置3份，在272 nm處測定吸光度。結(jié)果平均回收率為100．43%，RSD為0．81%，表明回收率符合要求。

2．3 鹽酸他噴他多緩釋片體外釋放度測定方法［4]

取本品，照釋放度測定法(2010版中國藥典二部附錄ⅩD第一法)，采用溶出度測定法第二法裝置(加沉降裝置)，以磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀6．805 g，加1 mol·L－1氫氧化鈉溶液22．4 mL，加水使成1 000 mL，pH值為6．8)900 mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為 100 r·min－1，依法操作，于 0．5、3、6 和 10 h時(shí)，分別取溶液10 mL，濾過，并即時(shí)補(bǔ)充相同體積、相同溫度的釋放介質(zhì)，取續(xù)濾液，照紫外－可見分光光度法(2010版中國藥典二部附錄Ⅳ A)，在272 nm處分別測定吸光度;另取鹽酸他噴他多對照品適量，精密稱定，加釋放介質(zhì)溶解并稀釋制成每1 mL中約含他噴他多55．56μg的溶液，同法測定。分別計(jì)算每片在不同時(shí)間的累積釋放量。

2．4 鹽酸他噴他多緩釋片單因素考察 本研究采用相似因子法評價(jià)藥物釋放曲線間的差異，相似因子系數(shù)f2可反映釋放度差異，f2在50～100之間說明兩曲線相似，f2=100說明兩條曲線釋放完全相同［5]，相似因子系數(shù)f2越小，釋放曲線間差異越大，相似因子系數(shù)計(jì)算公式:

2．4．1 不同規(guī)格HPMC對釋放度的影響 分別取相同粒度不同規(guī)格的 HPMC(K4M、K15M與K100M)，用量均占總質(zhì)量35%，乳糖為致孔劑占15%，微晶纖維素用于調(diào)節(jié)片重，分別制備緩釋片，取6片測定釋放度，采用相似因子法對釋放曲線之間進(jìn)行相似性判定，釋放曲線如圖2。

圖2 不同規(guī)格HPMC釋放曲線比較(n=6)

三組釋放曲線計(jì)算得相似因子值為fAB=54．89，fAC=40．25，fBC=54．47，表明不同規(guī)格的HPMC對釋放影響較大，低黏度HPMC前期釋放較快，易造成前期突釋，高黏度HPMC釋放不完全，10 h 為78．2%。

2．4．2 HPMC用量對釋放度的影響 取 HPMC K15M，使其用量分別占總質(zhì)量的30%、40%和50%，乳糖為致孔劑占15%，微晶纖維素用于調(diào)節(jié)片重，分別制備緩釋片，取6片測定釋放度，采用相似因子法對釋放曲線之間進(jìn)行相似性判定，釋放曲線如圖3。

圖3 不同用量HPMC K15M釋放曲線比較(n=6)

三組釋放曲線計(jì)算得相似因子值為fAB=70．57，fAC=55．08，fBC，=67．36，隨著 HPMC K15M用量增加，片劑表面凝膠層增厚，藥物釋放逐漸減慢，但前期控釋仍不理想，總體對釋放度的影響并不顯著。

2．4．3 CMC-Na用量對釋放度的影響 聯(lián)合應(yīng)用羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)為骨架材料可以顯著減慢藥物體外前期的釋放，綜合考慮，為進(jìn)一步控制藥物前期釋放，取CMC-Na，使其用量分別占總質(zhì)量的5%，12%和20%，固定處方中HPMC K15M用量為40%，乳糖為致孔劑占15%，微晶纖維素用于調(diào)節(jié)片重，分別制備緩釋片，取6片測定釋放度，采用相似因子法對釋放曲線之間進(jìn)行相似性判定，釋放曲線如圖4。

圖4 不同用量CMC-Na釋放曲線比較(n=6)

三組釋放曲線計(jì)算得相似因子值為fAB=58．13，fAC=47．40，fBC=66．34，表明 CMC-Na 用量對緩釋片釋放度影響顯著，用量為5%整體釋放較快，隨著CMC-Na用量增大釋放逐漸減慢。

2．4．4 乳糖用量對釋放度的影響 固定處方HPMC K15M用量為40%，CMC-Na用量為12%，使乳糖用量分別占總質(zhì)量的5%，12%和20%，微晶纖維素用于調(diào)節(jié)片重，分別制備緩釋片，取6片測定釋放度，釋放曲線如圖5。

結(jié)果表明，隨著乳糖用量增加，緩釋片釋放度逐漸增加，三組釋放曲線計(jì)算得相似因子值為fAB=67．82，fAC=58．03，fBC=76．66，f2值均在 50 以上，乳糖用量在5% ～20%內(nèi)對釋放度影響并不顯著，其用量以12%效果最佳。

圖5 不同用量乳糖釋放曲線比較(n=6)

2．4．5 填充劑種類對釋放度影響 固定處方其他因素用量，分別選用微晶纖維素(11%)、預(yù)膠化淀粉(11%)、微晶纖維素與預(yù)膠化淀粉混合物(質(zhì)量各占總質(zhì)量5．5%)為填充劑，分別制備緩釋片，取6片測定釋放度，釋放曲線如圖6。

圖6 不同填充劑釋放曲線比較(n=6)

三組釋放曲線計(jì)算得相似因子值為fAB=86．74，fAC=87．61，fBC=85．62，三組釋放曲線接近，而預(yù)膠化淀粉組輔料蓬松，可壓性較差，制得的片劑壓力小，前期釋放稍快。故綜合考慮，選用微晶纖維素作為填充劑。

2．4．6 壓力對釋放度的影響 選用HPMC與CMCNa為混合骨架材料，乳糖為致孔劑，微晶纖維素作為填充劑，考察壓力對釋放度影響，分別使壓力為6 kg，8 kg和10 kg，測定釋放度釋放曲線如圖7。

圖7 不同壓力釋放曲線比較(n=6)

三組釋放曲線計(jì)算得相似因子值為fAB=52．07，fAC=45．73，fBC，=72．85，說明壓力對釋放度影響顯著，壓力為6 kg時(shí)整體釋放較快，前期0．5 h釋放度為33%，隨著壓力增大對釋放速率影響逐漸減小。

2．5 處方工藝優(yōu)化 在前期單因素考察的基礎(chǔ)上確定了進(jìn)行正交試驗(yàn)的影響因素及水平，選擇對藥物釋放影響較大的3個(gè)因素，即HPMC的規(guī)格、CMC-Na用量以及壓力作為影響因素A、B、C，每個(gè)因素分別取3個(gè)水平，以12%乳糖為致孔劑，微晶纖維素為填充劑使片重保持恒定。根據(jù)L9(34)正交表確定處方組成，按照制備工藝制備緩釋片。正交試驗(yàn)的因素水平見表1。

表1 因素水平表

參考中國藥典2010版二部附錄XIXD緩控釋制劑指導(dǎo)原則的規(guī)定，采用綜合評分法在0．5 h、3 h、6 h、10 h確定四個(gè)點(diǎn)釋放標(biāo)準(zhǔn):0．5 h累計(jì)釋放百分率為15%;3 h累計(jì)釋放百分率為50%;6 h累計(jì)釋放百分率為70%;10 h累計(jì)釋放百分率應(yīng)該大于85%，故總分的計(jì)算公式為:Y=Q10h－［(Q0．5h－15)2+(Q3h－50)2+(Q6h－70)2]1/2，以綜合評分Y值與釋放度指標(biāo)共同描述其體外釋放情況，Y值越大，藥物緩釋越接近理想(表2)。

表2 正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果

表3 方差分析

由表3極差和方差分析表中F值可得到三因素的影響程度為:A＞C＞B，即HPMC規(guī)格＞壓力＞CMC－Na用量，HPMC不同規(guī)格對鹽酸他噴他多緩釋片釋放度的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由綜合評分Y值大小得知KA2＞KA3＞KA1，A因素優(yōu)劣順序?yàn)锳2＞A3＞A1;KB2＞KB3＞KB1，B 因素優(yōu)劣順序?yàn)?B2＞

圖8 優(yōu)化處方制備的3批次鹽酸他噴他多緩釋片釋放曲線(n=6)

結(jié)果表明，制備的3批次鹽酸他噴他多緩釋片具有明顯的12 h緩釋效果，以第1批次樣品作為參比制劑、第2、3批樣品為受試制劑而計(jì)算得到的 f2值分別為93．63和95．75，而第2批、第3批樣品的釋放曲線間f2值為89．18，說明樣品批間差異小，重現(xiàn)性良好。

2．7 自制制劑與參比制劑釋放參數(shù)比較 將自制的一批鹽酸他噴他多緩釋片與參比制劑FDA官方釋放參數(shù)進(jìn)行比較，自制制劑與參比制劑釋放曲線基本一致(圖9)，自制制劑后期10 h釋放度略低于參比制劑，兩條釋放曲線計(jì)算得到的f2值為83．47，

說明自制制劑釋放曲線接近參比制劑。B3＞B1;KC3＞KC2＞KC1，C因素優(yōu)劣順序?yàn)?C3＞C2＞C1，因此，各因素最佳組合為A2B2C3，鹽酸他噴他多緩釋片最佳處方工藝為以HPMCK15M與CMCNa為混合骨架材料，用量分別為40%和12%，以微晶纖維素為填充劑，乳糖為致孔劑，用量為12%，采用濕法制粒，控制壓力在10 kg左右。

2．6 緩釋片制備工藝重現(xiàn)性 按正交實(shí)驗(yàn)所得的最佳處方制備3批次鹽酸他噴他多骨架緩釋片，釋放曲線見圖8。

圖9 自制制劑與參比制劑釋放曲線比較(n=6)

2．8 鹽酸他噴他多骨架緩釋片釋藥模型擬合 采用零級釋藥方程、一級釋藥方程、Higuchi、Ritger-Peppas釋藥方程［6]對自制的鹽酸他噴他多緩釋片累積釋放率進(jìn)行數(shù)學(xué)擬合，根據(jù)擬合方程各時(shí)間點(diǎn)的累積釋放率與實(shí)測值進(jìn)行比較，計(jì)算相關(guān)系數(shù)r，相關(guān)系數(shù)r越接近1越佳，擬合結(jié)果見表4。

表4 鹽酸他噴他多緩釋片釋藥模型擬合結(jié)果

綜合分析表4中幾種模型擬合的r值，除了零級釋放模型擬合度相對較差(r=0．945 1)外，其余幾種模型均能較好地?cái)M合鹽酸他噴他多的體外釋藥行為，其中又以一級模型為最佳釋藥模型(r=0．999 1)，表明藥物的釋放符合一級動力學(xué)過程。Ritger-Peppas模型擬合得到的釋藥指數(shù)n可以進(jìn)一步顯示藥物的釋放機(jī)制，當(dāng)0．45＜n＜0．89時(shí)，藥物釋放機(jī)制為非Fick擴(kuò)散(即藥物擴(kuò)散和骨架溶蝕協(xié)同作用)，當(dāng) n＜0．45時(shí)，為 Fick擴(kuò)散;當(dāng) n＞0．89時(shí)，為骨架溶蝕機(jī)制［7]。本實(shí)驗(yàn)得到的 n=0．5360，介于0．45與0．89之間，表明藥物以擴(kuò)散和溶蝕相結(jié)合的方式釋放。

3 討論

HPMC是制備親水凝膠骨架型緩釋片最為常用的骨架材料，對于水溶性藥物，其釋藥機(jī)制為擴(kuò)散和凝膠骨架溶蝕綜合作用。研究表明［8]，增加HPMC的黏度可有效減慢藥物釋放，但具有一定的限度，且存在前期突釋現(xiàn)象，聯(lián)合應(yīng)用CMC-Na可產(chǎn)生較好的協(xié)同作用，減慢藥物擴(kuò)散，有效地抑制前期突釋。乳糖為水溶性填充劑，具有致孔作用，可加大凝膠的孔隙率，從而減小藥物的擴(kuò)散阻力并增大擴(kuò)散途徑，可促進(jìn)藥物的后期釋放［9]。本研究單獨(dú)使用HPMC時(shí)藥物前期突釋明顯，且后期釋放不完全，故本研究采用HPMC K15M和CMC-Na作為混合骨架材料，有效地控制了藥物釋放初期的突釋現(xiàn)象，乳糖作為致孔劑促進(jìn)了藥物后期釋放，達(dá)到了理想釋放行為。

HPMC骨架片的釋藥速率隨著HPMC用量增加而逐漸減小，HPMC用量增加，片劑水化速率加快，快速于片劑表面形成凝膠層，且凝膠層增厚、凝膠強(qiáng)度增大對藥物釋放也具有一定影響［10]。但HPMC用量增至一定程度時(shí)，骨架片釋藥速率會出現(xiàn)一個(gè)突變，即藥物的釋放速率曲線會存在一個(gè)拐點(diǎn)，進(jìn)一步增大 HPMC用量藥物的釋放速率趨緩［11]。本研究HPMC用量對藥物釋放影響并不顯著，這是因?yàn)閱我蛩乜疾熘?0%的HPMC用量即可使片劑表明形成連續(xù)的凝膠層，達(dá)到均一的水合作用，實(shí)現(xiàn)藥物的緩釋，本研究40%HPMC用量可達(dá)到理想釋放。

壓力對藥物釋放也具有一定的影響，隨著壓力增加，骨架的松密度增大，孔隙度減小，HPMC分子受束縛而無法伸展形成凝膠層，導(dǎo)致釋放減慢［12]。壓力增至一定程度，這種影響會變得有限，本研究壓力為6 kg藥物釋放較快，增至10 kg左右可達(dá)到理想釋放。本研究通過優(yōu)化HPMC規(guī)格，CMC-Na用量，壓力3個(gè)因素使鹽酸他噴他多緩釋片體外藥物釋放達(dá)到了緩釋設(shè)計(jì)要求，自制的3批次鹽酸他噴他多緩釋片批間差異小，重現(xiàn)性良好，制備工藝可行。從體外釋放曲線來看，自制緩釋片的緩釋效果與參比制劑接近。

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