太湖鵝與皖西白鵝胸肌IGF-I 和MSTN的表達(dá)及其與屠宰性狀相關(guān)性分析

湯青萍，宋 遲，胡 艷，章雙杰，趙東偉，鄒劍敏

(江蘇省家禽科學(xué)研究所，江蘇省家禽遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，揚(yáng)州 225125)

太湖鵝與皖西白鵝胸肌IGF-I 和MSTN的表達(dá)及其與屠宰性狀相關(guān)性分析

湯青萍，宋 遲，胡 艷，章雙杰，趙東偉，鄒劍敏*

(江蘇省家禽科學(xué)研究所，江蘇省家禽遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，揚(yáng)州 225125)

本研究旨在探討IGF-I、MSTN對(duì)鵝骨骼肌生長(zhǎng)的影響。以太湖鵝和皖西白鵝為研究素材，采用多重?zé)晒飧?jìng)爭(zhēng)性PCR和酶聯(lián)免疫方法，測(cè)定鵝70日齡胸肌中IGF-I、MSTN的mRNA和蛋白表達(dá)情況，并與屠宰性能做相關(guān)性分析。結(jié)果證實(shí)，70日齡時(shí)太湖鵝體重、胸肌重極顯著小于皖西白鵝，但是胸肌率沒有差異，并且品種間在體重和胸肌重上存在性別差異；胸肌IGF-I和MSTN的mRNA、蛋白表達(dá)均無(wú)品種差異，并且在品種間也不存在性別差異；同一品種的公母鵝相比較，太湖鵝公鵝胸肌IGF-I mRNA表達(dá)顯著高于母鵝；除了胸肌IGF-I的含量與MSTN的mRNA表達(dá)和蛋白含量呈顯著正相關(guān)，胸肌IGF-I、MSTN的mRNA表達(dá)和蛋白含量相互之間均無(wú)顯著相關(guān)性，鵝胸肌IGF-I mRNA表達(dá)量和胸肌率、胸肌重、體重呈顯著負(fù)相關(guān),皖西白鵝胸肌中MSTN的表達(dá)與體重呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)。結(jié)果提示，70日齡時(shí)鵝胸肌生長(zhǎng)正負(fù)調(diào)節(jié)基因IGF-I與MSTN的表達(dá)無(wú)品種特異性，二者表達(dá)水平處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡之中，特別參與了70日齡皖西白鵝的生長(zhǎng)調(diào)控。

鵝；肌肉；IGF-I ；MSTN；屠宰

我國(guó)是世界第一養(yǎng)鵝大國(guó)，年出欄肉鵝6億多只，占世界鵝出欄總量90%以上。鵝養(yǎng)殖業(yè)作為朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)，飼養(yǎng)量以年7%的速度在遞增[1]。肉鵝胸肌和腿肌發(fā)育的快慢直接決定了其產(chǎn)肉性能的高低和養(yǎng)殖效益的多少。太湖鵝與皖西白鵝是我國(guó)著名的地方鵝種資源，分布區(qū)域較近，生長(zhǎng)環(huán)境類似。小型地方鵝種太湖鵝，產(chǎn)蛋高、肉質(zhì)優(yōu)良，但早期生長(zhǎng)速度較慢；中型鵝種皖西白鵝體型較大，早期生長(zhǎng)速度快[2-4]，是研究鵝骨骼肌生長(zhǎng)分子調(diào)控機(jī)制的理想素材。

動(dòng)物生長(zhǎng)調(diào)控最為關(guān)鍵的是下丘腦-垂體-肌肉生長(zhǎng)軸。禽類生長(zhǎng)激素可以通過(guò)胰島素樣生長(zhǎng)因子(Insulin-like growth factors，IGFs)發(fā)揮作用。已有研究證實(shí)，IGF-I可通過(guò)靶器官上IGFs受體( Insulin- like growth factor receptor，IGFR)，促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化以及蛋白合成、抑制蛋白降解，從而促進(jìn)骨骼肌發(fā)育[5-6]。肌肉生成抑制素(Myostatin，MSTN)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)重要肌細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)控因子，屬TGF-β超家族成員之一，主要分布在骨骼肌，對(duì)肌肉生長(zhǎng)起負(fù)調(diào)控作用[7]。敲除此基因小鼠肌肉量比正常小鼠肌肉量多2～3倍[8-10]。有研究者認(rèn)為IGF-1[11-12]和MSTN[13-14]的表達(dá)強(qiáng)弱可以表征骨骼肌的生長(zhǎng)狀況。研究發(fā)現(xiàn)，骨骼肌生長(zhǎng)速度存在較大差異的肉雞和蛋雞MSTNmRNA表達(dá)水平具有較大差異[15]，不同品系鵝骨骼肌中IGF-1 mRNA表達(dá)量也存在差異[16]。目前對(duì)IGF-I和MSTN的研究在豬、雞上較多，也多集中在發(fā)育性變化，對(duì)基因表達(dá)與屠宰性狀相關(guān)分析尚未見報(bào)道。

本試驗(yàn)以在生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)性狀上存在明顯表型差異的太湖鵝和皖西白鵝為研究對(duì)象，應(yīng)用多重?zé)晒飧?jìng)爭(zhēng)性PCR(Multiplex competitive fluorescent-PCR，MCF-PCR)和ELISA技術(shù)，研究鵝胸肌中IGF-I和MSTN表達(dá)的品種、性別特異性，并分析其與屠宰性狀的相關(guān)性，為鵝骨骼肌生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)制研究提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)鵝選自太湖鵝資源國(guó)家級(jí)保種場(chǎng)同批飼養(yǎng)的太湖鵝和皖西白鵝，70日齡，每個(gè)品種6只(公母各半)。采取胸肌組織，立即置于液氮中，然后轉(zhuǎn)入-70 ℃待用。

1.2 屠宰測(cè)定

參照NY/T 823-2004規(guī)定的要求進(jìn)行屠宰性狀的測(cè)定[17]。

1.3 主要試劑和儀器

TRNzol-A+總RNA提取試劑(DP421)、SuperReal PreMix(SYBR Green)(FP204-01)、Quant cDNA 第一鏈合成試劑盒(QuantScript RT Kit，KR103-04)、質(zhì)粒小提試劑盒(TIANprep Mini Plasmid Kit，DP103-02)、DNA產(chǎn)物純化回收試劑盒(TIANquick Midi Purification Kit，DP204-02)購(gòu)自北京天根生化科技有限公司；限制性內(nèi)切酶EcoRⅠ和pMD18-T Vector購(gòu)自TaKaRa公司；分子量?jī)?nèi)標(biāo)ROX500購(gòu)自Applied Biosystems公司。鵝IGF-I (MSTN)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成科技有限公司。

9700PCR儀、凝膠成像系統(tǒng)(Tanon 2500)、紫外分光光度計(jì)(GeneQuant II，Pharmacia Biotech)、Rayto RT-600酶標(biāo)分析儀。

1.4 總RNA提取和內(nèi)參選取

肌肉總RNA 提取按TRNzol-A+總RNA提取試劑說(shuō)明書進(jìn)行。RNA 樣品經(jīng)1.4%瓊脂糖-甲醛變性凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，保證RNA 樣品質(zhì)量可靠，計(jì)算樣品總RNA濃度。取2 μg總RNA，cDNA 第1鏈合成按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒使用說(shuō)明書進(jìn)行。

熒光定量試驗(yàn)選取β-actin作為內(nèi)參基因。

1.5 引物設(shè)計(jì)，熒光實(shí)時(shí)定量PCR

引物經(jīng)熒光定量PCR擴(kuò)增，目的基因與內(nèi)參基因均獲得單一尖銳熔解曲線峰，PCR 擴(kuò)增特異性較好(引物見表1)。

每個(gè)樣本用內(nèi)參基因β-actin做實(shí)時(shí)熒光定量PCR，所有樣本與內(nèi)參基因Ct值為15～25，每次試驗(yàn)陰性對(duì)照均干凈，符合MCF-PCR試驗(yàn)要求。

表1 目的基因MCF-PCR引物序列

Table 1 Primers of target genes used in the MCF-PCR

基因符號(hào)Symbol引物序列(5'-3')Primersequence長(zhǎng)度/bpLengthβ-actinL:FAM-AGGTCGTCCATCGTAGTCCTGTCCACCTTCCAGCAGATGTR:ACAGCGTCGTTATCGTTCCTATAAAGCCAACTCG209IGF-IL:AM-AGGTCGTCCATCGTAGTCCTTGCACTTTTAAGAAGCAATGGAR:ACAGCGTCGTTATCGTTCCTGCAAACACAGGCCAAGGTAG175MSTNL:FAM-AGGTCGTCCATCGTAGTCCTAGTAGCGATGGCTCTTTGGAR:ACAGCGTCGTTATCGTTCCTGGTTTTTGGACTTGCCTCAA237

1.6 多重?zé)晒飧?jìng)爭(zhēng)性PCR

優(yōu)化多重PCR反應(yīng)體系，調(diào)節(jié)反應(yīng)程序使測(cè)序儀可獲得一個(gè)好峰形圖。熒光定量PCR 擴(kuò)增體系為15 μL：其中10×GT Buffer(含34 mmol·L-1Mg2+) 1.5 μL，100 mmol·L-1Mg2+0.09 μL，dNTP mix(各2.5 mmol·L-1)3 μL，Primers 1.5 μL，TaqDNA Polymerase(5 U·μL-1) 0.75 μL，Templates (cDNA) 1.5 μL，BSA(10 mg·mL-1) 0.21 μL，質(zhì)粒mix 0.5 μL，ddH2O 補(bǔ)足15 μL。PCR反應(yīng)程序：95 °C預(yù)變性 1 min；85 °C變性5 min；94 °C 30 s，59 °C 30 s，68 °C 1 min，共30 個(gè)循環(huán)；68 °C 延伸20 min。

挑選若干個(gè)PCR產(chǎn)物進(jìn)行2%瓊脂糖凝膠電泳，觀察產(chǎn)物是否存在、查看陽(yáng)性樣本片段大小、陰性有無(wú)污染，依據(jù)瓊脂糖電泳條帶亮度確定PCR產(chǎn)物電泳時(shí)上樣量。最后通過(guò)ABI 3730測(cè)序儀進(jìn)行電泳分離檢測(cè)。

1.7 蛋白測(cè)定

總蛋白提?。喝∵m量肌肉組織，盡量避免脂肪、筋膜。冰上生理鹽水勻漿，震蕩，離心后取上清。

IGF-I和MSTN蛋白檢測(cè)：按照鵝IGF-I (MSTN)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書操作。

1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

運(yùn)用SPSS軟件中Univarinate、One-way ANOVA和Bivariate Correlation分析品種、性別對(duì)基因表達(dá)影響及其與屠宰性狀相關(guān)性。所有數(shù)據(jù)以“Mean±SE”表示。

2 結(jié) 果

2.1 70日齡太湖鵝和皖西白鵝屠宰性狀

70日齡時(shí)不同品種和性別鵝的體重、胸肌重和胸肌率比較如表2所示，太湖鵝的體重和胸肌重均極顯著低于皖西白鵝，而兩個(gè)品種鵝胸肌率沒有顯著差異。兩個(gè)品種鵝不同性別進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，雄性太湖鵝的體重和胸肌重也均顯著低于雄性皖西白鵝；雌性太湖鵝的體重雖然和雌性皖西白鵝沒有差異，但其胸肌重極顯著低于雌性皖西白鵝。同一品種的公母鵝相比較，體重、胸肌重和胸肌率在兩個(gè)品種鵝中均無(wú)性別差異。

2.2 70日齡鵝胸肌中IGF-I 和MSTN表達(dá)

70日齡太湖鵝和皖西白鵝胸肌中IGF-I 和MSTN表達(dá)如表3所示，胸肌中IGF-I和MSTNmRNA表達(dá)、蛋白含量都沒有品種差異。兩個(gè)品種鵝不同性別進(jìn)行比較，胸肌中IGF-I和MSTNmRNA表達(dá)、蛋白含量也均無(wú)品種差異。同一品種的公母鵝相比較，除了太湖鵝公鵝胸肌IGF-I mRNA表達(dá)顯著高于母鵝，其余指標(biāo)在兩個(gè)品種鵝中均無(wú)性別差異。2.3 鵝胸肌IGF-I 和MSTN表達(dá)與屠宰性狀相關(guān)性

由于鵝胸肌IGF-I 和MSTN表達(dá)沒有品種差異性，將兩個(gè)鵝種作為一個(gè)群體，分析相關(guān)性。

本試驗(yàn)將70日齡鵝胸肌中IGF-I和MSTN表達(dá)之間，以及基因與屠宰性狀的相關(guān)性進(jìn)行了分析(表4)，發(fā)現(xiàn)除了鵝的體重與胸肌重(P=0.000)和

表2 70日齡太湖鵝和皖西白鵝屠宰性狀比較

Table 2 Carcass traits of Wanxi White goose and Taihu goose at the age of 70 days

品 種Breed性別Gender活重/gBodyweight胸肌重/gBreastmuscleweight胸肌率/%Breastmusclepercentage太湖鵝Taihugoose公(♂)Male2263.1±98.459.6±9.85.0±0.6母(♀)Female2213.4±116.378.0±3.26.2±0.1平均(♀+♂)Average2238.3±88.267.0±7.15.5±0.5皖西白鵝WanxiWhitegoose公(♂)Male3093.0±201.3**164.0±21.6*8.4±0.6母(♀)Female2822.0±258.2136.8±9.0**7.9±0.4平均(♀+♂)Average2987.5±153.8**150.4±12.1**8.1±0.4

*和**表示不同品種鵝間相應(yīng)平均值差異顯著(P<0.05)和極顯著(P<0.01)，n=3～6

Superscript*and**indicate significantly difference between the two different goose breeds at the level of 0.05 and 0.01，respectively.n=3-6

表3 70日齡太湖鵝和皖西白鵝胸肌中IGF-I 和MSTN表達(dá)

Table 3 Expression of IGF-I and MSTN in breast muscle of Wanxi white goose and Taihu at the age of 70 days

品 種Breed性別Gender胸肌IGF-ImRNAIGF-ImRNAexpressioninbreastmuscle胸肌IGF-I含量/(ng·g-1)IGF-Icontentinbreastmuscle胸肌MSTNmRNAMSTNmRNAexpressioninbreastmuscle胸肌MSTN含量/(ng·g-1)MSTNcontentinbreastmuscle太湖鵝Taihugoose公(♂)Male2.11±0.600.43±0.081.49±0.180.78±0.04母(♀)Female0.98±0.31a0.36±0.071.30±0.210.61±0.07平均(♀+♂)Average1.54±0.400.40±0.051.39±0.140.70±0.05皖西白鵝WanxiWhitegoose公(♂)Male0.96±0.460.50±0.081.34±0.380.72±0.05母(♀)Female0.69±0.280.47±0.171.37±0.930.76±0.11平均(♀+♂)Average0.82±0.250.48±0.081.36±0.450.74±0.06

小寫字母表示品種內(nèi)不同性別比較差異顯著，P<0.05

The significant differences of the mean datas between sexes within breeds are noted with lower-case letters,P<0.05

胸肌率(P=0.008)呈正相關(guān)，胸肌重和胸肌率(P=0.007)之間呈正相關(guān)；胸肌IGF-I 蛋白含量與MSTNmRNA表達(dá)量(P=0.041)和蛋白含量(P=0.032)呈顯著正相關(guān)外，胸肌IGF-I和/或MSTN的mRNA和/或蛋白含量相互之間沒有顯著相關(guān)性；胸肌IGF-I mRNA表達(dá)量與體重(P=0.036)、胸肌重(P=0.019)和胸肌率(P=0.011)呈顯著負(fù)相關(guān)，但是胸肌IGF-I蛋白含量、MSTN的mRNA水平和蛋白含量與3個(gè)屠宰性狀均無(wú)相關(guān)性。

本試驗(yàn)將70日齡時(shí)太湖鵝和皖西白鵝胸肌中IGF-I和MSTN表達(dá)之間，以及基因與屠宰性狀的相關(guān)性進(jìn)行了分析(數(shù)據(jù)未顯示)，除了皖西白鵝胸肌中MSTN的mRNA水平與體重呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)(r=-0.832，P=0.040)，雌性皖西白鵝胸肌中MSTN的蛋白含量與體重呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)(r=-1.000，P=0.006)，皖西白鵝胸肌中MSTN蛋白水平與IGF-I的蛋白水平呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)(r=-0.926，P=0.006)，雄性皖西白鵝胸肌中MSTNmRNA水平與其蛋白水平呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)(r=-0.997，P=0.047)，其余的指標(biāo)間不存在相關(guān)性。

表4 70日齡時(shí)太湖鵝和皖西白鵝胸肌中IGF-I 和MSTN表達(dá)與屠宰性狀相關(guān)性

Table 4 Correlation between carcass traits and the expression of IGF-I and MSTN of Wanxi White goose and Taihu goose at the age of 70 days

參 數(shù)ParameterIGF-IMSTNIGF-ImRNAMSTNmRNA胸肌率Breastmusclepercentage胸肌重BreastmuscleweightMSTN0.620*IGF-ImRNA0.0070.289MSTNmRNA0.595*0.5380.470胸肌率Breastmusclepercentage0.3380.078-0.699*0.034胸肌重Breastmuscleweight0.2880.051-0.651*-0.1850.945**體重Bodyweight0.105-0.086-0.609*-0.3620.724**0.958**

本表中顯示的數(shù)據(jù)為相關(guān)系數(shù)，*和**表示相關(guān)性達(dá)到顯著水平(P<0.05)和極顯著水平(P<0.01)

The datas indicate correlation coefficients.Superscript*and**indicate significantly difference in correlation analysis at the level of 0.05 and 0.01，respectively

3 討 論

本試驗(yàn)比較了70日齡太湖鵝與皖西白鵝屠宰性能，測(cè)定結(jié)果與前人研究結(jié)果基本相同[18]。鵝的體重與胸肌重和胸肌率呈正相關(guān)，胸肌重和胸肌率之間呈正相關(guān)；品種間，太湖鵝體重、胸肌重極顯著小于皖西白鵝，胸肌率沒有品種差異，且存在性別特異性；品種內(nèi)則無(wú)性別差異。

胥清富對(duì)大白豬和二花臉豬研究發(fā)現(xiàn)，兩個(gè)品種背最長(zhǎng)肌IGF-I mRNA水平無(wú)明顯差異，但大白豬IGF-I含量明顯高于二花臉；二花臉豬背最長(zhǎng)肌IGF-I mRNA水平均無(wú)明顯的性別差異[19]。郝哲等研究發(fā)現(xiàn)，90日齡時(shí)霍爾多巴吉白鵝腿肌IGF-I mRNA表達(dá)量顯著高于吉林白鵝肉用品系、蛋用品系，肉用品系亦高于蛋用品系[16]。本研究中，鵝胸肌IGF-I mRNA 和蛋白表達(dá)沒有品種差異；胸肌IGF-I mRNA皖西白鵝沒有性別差異，但太湖鵝公鵝顯著高于母鵝。胸肌MSTNmRNA和蛋白表達(dá)水平?jīng)]有品種、性別的差異，這與湯青萍等[20]對(duì)太湖鵝、羅曼鵝研究結(jié)果一致。

胸肌IGF-I mRNA表達(dá)在皖西白鵝沒有性別差異，在太湖鵝公鵝顯著高于母鵝?？赡苁怯捎谕钗靼座Z作為長(zhǎng)速較快的中型鵝種，70日齡快速生長(zhǎng)期已結(jié)束，達(dá)到上市體重，公母鵝胸肌IGF-I mRNA沒有差異；而太湖鵝作為小型鵝種，70日齡時(shí)仍處于一個(gè)快速生長(zhǎng)期，公鵝胸肌生長(zhǎng)速度大于母鵝，到90日齡達(dá)上市體重。唐修君等[21]對(duì)太湖鵝屠宰性能研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，70日齡公鵝胸肌重(262 g)顯著小于母鵝(277 g)，91日齡公鵝胸肌重(454 g)與母鵝(460 g)差異不顯著；湯青萍等[22]對(duì)0～12周齡太湖鵝、皖西白鵝生長(zhǎng)測(cè)定發(fā)現(xiàn)，表示生長(zhǎng)強(qiáng)度的相對(duì)生長(zhǎng)10～12周齡皖西白鵝(0.1)低于太湖鵝(0.19)。

本研究中，鵝胸肌IGF-I 蛋白含量與MSTNmRNA表達(dá)量和MSTN蛋白含量顯著相關(guān)。結(jié)果提示，當(dāng)促進(jìn)肌肉生長(zhǎng)的IGF-I 蛋白表達(dá)量上調(diào)時(shí)，為避免肌肉細(xì)胞過(guò)分肥大，抑制肌肉生長(zhǎng)的MSTN 蛋白表達(dá)也同時(shí)上調(diào)，協(xié)同調(diào)節(jié)生長(zhǎng)，這與胡蘭等[23]、A.Tokuhisa等[24]研究結(jié)果一致。大量的研究表明，IGF-I基因可以促進(jìn)骨骼肌發(fā)育[5-6]，但本研究中胸肌IGF-I mRNA表達(dá)量和胸肌率(P=0.011)、胸肌重(P=0.019)、體重(P=0.036)顯著負(fù)相關(guān)；太湖鵝與皖西白鵝體重、胸肌重存在明顯品種差異，但胸肌IGF-I mRNA表達(dá)卻沒有品種差異；太湖鵝胸肌重沒有性別差異，但太湖鵝胸肌IGF-I mRNA表達(dá)公鵝顯著高于母鵝。皖西白鵝胸肌中MSTN蛋白水平與IGF-I的蛋白水平呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)，皖西白鵝胸肌中MSTNmRNA的水平與體重呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)，特別是雌性皖西白鵝胸肌中MSTN的蛋白含量與體重呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)，而雄性皖西白鵝胸肌中MSTNmRNA水平與其蛋白水平呈強(qiáng)的負(fù)相關(guān)。以上幾點(diǎn)提示，對(duì)鵝胸肌生長(zhǎng)具有重要促進(jìn)作用的IGF-I mRNA主要還是肝分泌的，肌肉組織自分泌的IGF-I mRNA可能作用極微。胸肌生長(zhǎng)正負(fù)調(diào)節(jié)基因IGF-I與MSTN的表達(dá)無(wú)品種特異性，但是二者表達(dá)水平處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡之中，特別參與了70日齡皖西白鵝的生長(zhǎng)調(diào)控。另胥清富認(rèn)為，肌肉IGF-I基因表達(dá)存在翻譯后調(diào)節(jié)，這種轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)可能對(duì)肌肉發(fā)育有重要影響[19]，本研究中IGF-I 蛋白表達(dá)量與胸肌率、胸肌重、體重的相關(guān)性雖沒有達(dá)到顯著水平，但都呈正相關(guān)，也驗(yàn)證了這種說(shuō)法。

綜上所述，本試驗(yàn)以在生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)性狀上存在明顯表型差異的太湖鵝和皖西白鵝為研究對(duì)象，分析70日齡不同品種鵝胸肌中IGF-I和MSTN表達(dá)的品種、性別特異性，并探討了基因之間、基因與屠宰性狀之間的相關(guān)性。試驗(yàn)證實(shí)，70日齡時(shí)，太湖鵝和皖西白鵝體重、胸肌重存在極顯著品種差異，并且品種間在體重和胸肌重上存在性別差異。70日齡時(shí)，鵝胸肌生長(zhǎng)正負(fù)調(diào)節(jié)基因IGF-I與MSTN的表達(dá)無(wú)品種特異性，二者表達(dá)水平處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡之中，特別參與了70日齡皖西白鵝的生長(zhǎng)調(diào)控；參與其體重的調(diào)節(jié)。

[1] 沈 廣，宮桂芬，呂淑艷，等.我國(guó)水禽業(yè)發(fā)展?fàn)顩r及趨勢(shì)展望[J].水禽世界，2009,(增刊):3-17. SHEN G，GONG G F，Lü S Y，et al.Industry development status of waterfowl in China[J].WaterfomlWorld, 2009，(Suppl):3-17.(in Chinese)

[2] 國(guó)家畜禽遺傳資源委員會(huì).中國(guó)畜禽遺傳資源志-家禽志[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2011. China National Commission of Animal Genetic Resources.Animal genetic resources in China-Poultry[M].Beijing：China Agriculture Press，2011.(in Chinese)

[3] KIM H，BARTON E，MUJA N，et al.Intact insulin and insulin-like growth factor-I receptor signaling is required for growth hormone effects on skeletal muscle growth and functioninvivo[J].Endocrinology，2005，146(4):1772-1779.

[4] MCFARLAND D C.Influence of growth factors on poultry myogenic satellite cells[J].PoultSci，1999，78(5):747-758.

[5] OTTO A，PATEL K.Signalling and the control of skeletal muscle size[J].ExpCellRes，2010，316 (18)：3059-3066.

[6] AWEDE B L，THISSEN J P，LEBACQ J.Role of IGF-I and IGFBPs in the changes of mass and phenotype induced in rat soleus muscle by clenbuterol[J].AmJPhysiolEndocrinolMetab，2002，282:31-37.

[7] GONZALEZ-CADAVID N F，BHASIN S.Role of myostatin in metabolism[J].CurrOpinClinNutrMetabCare，2004，7(4)，451-457.

[8] MCPHERRON A C,LAWLERR A M，LEE S J.Regulation of skeletal mucle mass in mice by a new TGF-beta superfamily member[J].Nature,1997,387:83-90.

[9] JOULIA D，BERNARDI H，GARANDEL V，et al.Mechaniams involved in the blockion of myoblast proliferation and differentiation by myostatin[J].ExpCellRes，2003,286(2):263-275.

[10] LANGLEY B，THOMAS M，BISHOP A，et al.Myostatin blocks myoblast differentiation by down-regulating MyoD expression[J].JBiolChem，2002,277(51):49831-49840.

[11] ROMMEL C，BODINE S C，CLARKE B A，et al.Mediation of IGF-1-induced skeletal myotube hypertrophy by PI(3)K/Akt/mTOR and PI(3)K/Akt/GSK3 pathways[J].NatCellBiol，2001，3(11)：1009-1013.

[12] QUINN L S，ANDERSON B G，PLYMATE S R.Muscle-specific overexpression of the type 1 IGF receptor results in myoblast-independent muscle hypertrophy via PI3K，and not calcineurin，signaling[J].AmJPhysiolEndocrinolMetab，2007，293(6)：1538-1551.

[13] LIPIAN C，KENDALL H，MCPHERRON A C， et al.Mechanisms involved in the enhancement of mammalian target of rapamycin signalling and hypertrophy in skeletal muscle of myostatin-deficient mice[J].FEBSLett，2010，584(11)，2403-2408.

[14] MACHIDA M，TAKEDA K，YOKONO H，et al.Reduction of ribosome biogenesis with activation of the mTOR pathway in denervated atrophic muscle[J].JCellPhysiol，2012，227(4)：1569-1576.

[15] 鄭 云，龔道清，吳 偉，等.鵝 Myostatin基因單核苷酸多態(tài)性檢測(cè)及群體遺傳分析[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2008，39(10)：1320-1328. ZHENG Y,GONG D Q,WU W，et al.Identification and genetic analyses of single nucleotide polymorphisms in goose Myostatin gene[J].ActaVeterinariaetZootechnicaSinica，2008，39(10):1320-1328.(in Chinese)

[16] 郝 哲，孫永峰，隋玉健，等.鵝肌肉IGF-1基因 m R N A的表達(dá)[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012， 34(2)：184-188. HAO Z，SUN Y F，SUI Y J,et al.Study on the changes of IGF-I mRNA expression levels in the deve1opmental muscles of the geese[J].JournalofJilinAgriculturalUniversity，2012，34(2):184-188.(in Chinese)

[17] 陳寬維，高玉時(shí)，王志躍，等．NY/T8 23-2004 家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語(yǔ)和度量統(tǒng)計(jì)方法[S].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2005. CHEN K W,GAO Y S,WANG Z Y,et al.Performance ferms and measurement for poultry[S].Beijing：China Agriculture Press,2005.(in Chinese)

[18] 董 飆，段修軍，王 建，等.3個(gè)品種鵝屠宰性能與肉品質(zhì)比較研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，(6)：279-281. DONG B，DUAN X J,WANG J，et al.The comparion of slaughter performance and meat quality among three varieties of geese[J].JiangsuAgriculturalSciences,2009，(6)：279-281.(in Chinese)

[19] 胥清富.生長(zhǎng)激素作用的靶基因在豬肝臟和肌肉上的表達(dá)及調(diào)控[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2002. XU Q F.Regulation and expression of target genes for growth hormone actionin liver and musele of pigs[D].Nanjing：Nanjing Agricultural University,2002.(in Chinese)

[20] 湯青萍，章雙杰，宋 遲，等.不同鵝種肌肉生長(zhǎng)抑制素基因表達(dá)差異研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2012，(23):257-259. TANG Q P，ZHANG S J，SONG C，et al.Analysis of MSTN gene expression in different goose breeds[J].XiandaiNongyeKeji，2012，23:257-259.(in Chinese)

[21] 唐修君，郭 軍，高玉時(shí)，等.太湖鵝屠宰性能研究[J].家禽科學(xué)，2008，12:11-12. TANG X J，GUO J,GAO Y S，et al.Studies on the slaughter performance of Taihu goose[J].PoultryScience,2008,12:11-12.(in Chinese)

[22] 湯青萍，宋 遲，章雙杰，等.不同鵝種MSTN mRNA的表達(dá)特異性及其與體重的相關(guān)性分析[J].青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，30(1)：29-33. TANG Q P，SONG C，ZHANG S J，et al .The gene expression profile of MSTN mRNA and its correlation with body weight in different breeds of goose[J].JournalofQingdaoAgriculturalCollege，2013，30(1):29-33.(in Chinese)

[23] 胡 蘭，胡 銳，郭東新，等.IGF-I和MSTN基因在大骨雞孵化前后的表達(dá)[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2004，31(4):26-28. HU L，HU R，GUO D X，et al.The expression of IGF-I and MSTN before and after hatch in Dagu chickens [J].ChinaAnimalHusbandry&VeterinaryMedicine，2004，31(4):26-28.(in Chinese)

[24] TOKUHISA A，RYO-HEI I， SYUHEI K，et al.IGF and myostatin pathways are respectively induced during the earlierand the later stages of skeletal muscle hypertrophy induced by clenbuterol，a β2-adrenergic agonist[J].CellBiochemFunct,2012，30：671-676.

(編輯 郭云雁)

Expression ofIGF-I andMSTNin Taihu and Wanxi White Goose Breast Muscle and Their Correlation with Carcass Traits

TANG Qing-ping，SONG Chi，HU Yan，ZHANG Shuang-jie，ZHAO Dong-wei，ZOU Jian-min*

(KeyLaboratoryofPoultryHeredity&Breeding，JiangsuInstituteofPoultryScience，Yangzhou225125，China)

The aim of this study was to investigate the effects ofIGF-I andMSTNon goose skeletal muscle growth.In this study，the expression of IGF-I and MSTN in breast muscle of Taihu and Wanxi White goose at the age of 70 days were detected with Multiplex Competitive Fluorescent-PCR and Enzyme-linked immunoassay (ELISA) methods，and the correlations between gene expression levels and carcass traits were investigated.The result showed that the body weight and breast muscle weight of Taihu goose were significantly lower than those of Wanxi White goose at the age of 70 days，there was no significant gender difference in breast muscle percentage between the two breeds and there was significant gender difference in body weight and breast muscle weight between the two breeds.There was no breed and gender difference at the mRNA and protein levels of IGF-I and MSTN，and but in Taihu goose,IGF-I mRNA expression in male breast muscle was significantly higher than that of females.There was no significant correlation between mRNA expression and protein content of the two genes.There was a positive correlation betweenIGF-I andMSTNat the protein level of breast muscle.There was a negative correlation betweenIGF-I mRNA expression and body weight，breast muscle weight and breast muscle percentage in goose，and a negative correlation between the expression of MSTN and body weight had been detected in Wanxi White goose.The results suggested that the expression levels of genes involving in positive and negative regulation to muscle growth may be in a dynamic balance，special participated in the growth regulation on Wanxi White goose at the age of 70 days.

goose；muscle；IGF-I；MSTN；slaughter trait

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.02.005

2013-11-29

國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2012BAD39B04)；蘇州市支撐計(jì)劃(SNG201415)；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金(nycytx-42-G1)

湯青萍(1976-)，女，河南人，碩士，副研究員，主要從事水禽遺傳資源及育種研究，E-mail：tqp0979@163.com

*通信作者：鄒劍敏，研究員，主要從事家禽育種及信息研究，E-mail:yzzjm@163.com

S835.2

A

0366-6964(2015)02-0204-07