卵巢癌納米靶向藥物治療的研究進(jìn)展

鮑圣芳，李佳蕊

卵巢癌病死率高，根據(jù)其病理及分期，常采用手術(shù)、化療聯(lián)合治療[1]。目前卵巢癌的一線治療方案為卵巢癌腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)及紫杉醇和鉑類聯(lián)合化療。而傳統(tǒng)化療藥物對(duì)腫瘤缺乏靶向性，殺滅腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也殺滅了正常細(xì)胞，骨髓抑制、電解質(zhì)紊亂、肝腎功能損害、神經(jīng)毒性等藥物不良反應(yīng)常見，有時(shí)甚至致命，嚴(yán)重影響患者的預(yù)后和生活質(zhì)量，遠(yuǎn)期生存率堪憂。隨著對(duì)納米材料的深入研究，國內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)納米靶向藥物抗腫瘤效果明顯，能克服腫瘤耐藥，藥物不良反應(yīng)顯著減輕，已成為卵巢癌研究的新熱點(diǎn)。現(xiàn)就納米靶向技術(shù)在卵巢癌治療中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 納米靶向藥物

納米靶向藥物是直徑約100 nm的載藥顆粒。由于腫瘤組織血管內(nèi)皮間隙為400～800 nm，相對(duì)于正常組織其內(nèi)皮間隙大，納米靶向藥物能到達(dá)特定的腫瘤部位，并因?qū)嶓w瘤區(qū)別于正常組織的高通透性和滯留效應(yīng)（enhanced permeability and retention effect，EPR），納米靶向藥物可以選擇性聚集于腫瘤組織[2]。經(jīng)過進(jìn)一步修飾納米顆粒表面、制備磁性納米顆粒、遞送基因片段、結(jié)合免疫療法、聯(lián)合超聲技術(shù)，納米靶向技術(shù)可分為被動(dòng)靶向、主動(dòng)靶向、磁靶向、基因靶向、免疫靶向和超聲靶向。

納米靶向藥物具有以下優(yōu)勢(shì)。首先，納米載體在遞送定量藥物的同時(shí)，藥物不被降解，其動(dòng)力學(xué)和生物學(xué)分布不改變，納米載體結(jié)構(gòu)及其對(duì)腫瘤的功能穩(wěn)定；其次，被載藥物釋放速度可控；再次，納米載體能利用EPR定位腫瘤組織，并能與細(xì)胞表面蛋白結(jié)合，如P-糖蛋白（P-gp），通過受體介導(dǎo)的胞吞靶向進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，克服了腫瘤多重耐藥（multidrug resistance，MDR）[2]。其靶向性很大程度上減輕了傳統(tǒng)化療藥物的不良反應(yīng)。

2 卵巢癌中納米靶向技術(shù)

2.1 被動(dòng)靶向 被動(dòng)靶向是通過對(duì)納米載體的修飾和理化調(diào)整，利用EPR，使藥物聚集于腫瘤組織，以延長藥物在腫瘤組織中的分布及滯留時(shí)間，降低耐藥發(fā)生。

目前有關(guān)卵巢癌被動(dòng)納米靶向藥物的研究層出不窮。Wang等[3]采用聚乙二醇（PEG）、聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA），制備遞送血管生成抑制劑夫馬吉欣的納米顆粒，發(fā)現(xiàn)其血管靶向性和抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系（HUVECs）及人卵巢癌細(xì)胞系（SKOV3）增殖轉(zhuǎn)移的能力優(yōu)于單純的夫馬吉欣，毒副反應(yīng)也顯著降低，對(duì)卵巢癌等依賴血管生長的惡性腫瘤治療有進(jìn)一步研究價(jià)值。同樣采用PEG、PLGA材料，Amoozgar等[4]以雙層PEG包裹的PLGA，制備球形納米粒遞送紫杉醇。相對(duì)于線性結(jié)構(gòu)的PEG、PLGA共聚體，其載藥量提高，藥物釋放曲線延長。低劑量腹腔內(nèi)給藥于耐紫杉醇荷瘤鼠后發(fā)現(xiàn)其壽命延長，未見毒副反應(yīng)，這一低劑量、局部化療的實(shí)現(xiàn)將有助于減少卵巢癌耐藥的發(fā)生，改善預(yù)后。此外，金納米粒（AuNPs）目前也被廣泛應(yīng)用于納米藥物的研究。Xiong等[5]用AuNPs搭載順鉑，明顯提高了腫瘤鼠對(duì)低劑量順鉑敏感性，考慮是AuNPs遞送順鉑能起到抗上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化、抗腫瘤干細(xì)胞、防耐藥的作用。相對(duì)于用納米顆粒遞送單一的化療藥物，分層介孔二氧化硅納米微球具備疏水親脂性的碳核和親水性的二氧化硅殼，其特有的疏水親脂和親水兩親性和分層介孔結(jié)構(gòu)為多藥聯(lián)合治療提供了條件，將其搭載親水性的順鉑和疏水性的紫杉醇后，能顯著殺滅卵巢癌順鉑耐藥的SKOV3細(xì)胞[6]。

臨床試驗(yàn)方面，美國食品和藥物管理局（FDA）已批準(zhǔn)白蛋白結(jié)合型紫杉醇（nab-PTX）用于卵巢癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤的臨床試驗(yàn)。一項(xiàng)nab-PTX 3周方案治療鉑類抵抗或鉑類難治的復(fù)發(fā)性卵巢癌、腹膜癌和輸卵管癌的Ⅱ期臨床研究[7-8]和一項(xiàng)nab-PTX聯(lián)合貝伐單抗治療鉑類抵抗或鉑類難治的復(fù)發(fā)性卵巢癌、腹膜癌和輸卵管癌的Ⅱ期臨床研究[7，9]都提示了nab-PTX在具有較好緩解率的同時(shí)，沒有出現(xiàn)不可耐受的不良反應(yīng)，對(duì)治療復(fù)發(fā)性卵巢癌具有一定優(yōu)勢(shì)，但這兩項(xiàng)臨床試驗(yàn)存在樣本量小的問題，需進(jìn)一步進(jìn)行大樣本隨機(jī)試驗(yàn)評(píng)估。

2.2 主動(dòng)靶向 主動(dòng)靶向是指用特異配體（如抗體、肽鏈、適配體）修飾納米載體表面，使之識(shí)別腫瘤細(xì)胞及其微環(huán)境，通過靶向分子與細(xì)胞表面的受體特異性結(jié)合，完成藥物的定向運(yùn)送，達(dá)到降低藥物毒副反應(yīng)的目的。

針對(duì)卵巢癌腫瘤細(xì)胞過度表達(dá)的表皮生長因子受體（EGFR），Wang等[10]以EGF修飾特異性順鉑納米脂質(zhì)體，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)提示其藥物靶向性強(qiáng)，與單純的順鉑比較，抑制細(xì)胞增長、轉(zhuǎn)移和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡能力更強(qiáng)，毒副反應(yīng)明顯減輕。Mir等[11]也采取主動(dòng)靶向EGFR，制備了負(fù)載西妥昔單抗的激光免疫脂質(zhì)體，結(jié)果提示該激光免疫脂質(zhì)體能有效靶向殺滅人卵巢癌細(xì)胞系（OVCAR-5）。EGFR主動(dòng)靶向這一技術(shù)對(duì)卵巢癌、肺癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌等各類EGFR過度表達(dá)的腫瘤都有價(jià)值。而在主動(dòng)靶向卵泡刺激素受體（FSHR）的研究中，F(xiàn)an等[12]用FSHR修飾紫杉醇納米顆粒后，相對(duì)于單純的紫杉醇和非FSHR靶向的納米顆粒，經(jīng)FSHR修飾后納米藥物能靶向腫瘤細(xì)胞，增強(qiáng)紫杉醇的效率，納米顆?？鼓[瘤細(xì)胞增殖和抗腫瘤效果更強(qiáng)，減輕了不良反應(yīng)。對(duì)于葉酸受體（FR）過度表達(dá)的卵巢癌，Ganta等[13]用葉酸和釓修飾納米乳膠顆粒（NEs）遞送多西他賽發(fā)現(xiàn)，與單一的多西他賽相比，該靶向葉酸受體的NEs對(duì)SKOV3的半抑制濃度（IC50）明顯降低；相比傳統(tǒng)造影劑，其腫瘤組織中藥物積聚時(shí)間延長，腫瘤對(duì)比顯像效果增強(qiáng)。這一NEs不僅在FR陽性的卵巢癌和其他以多西他賽為標(biāo)準(zhǔn)治療的腫瘤中具有研究前景，且其所具備的顯像功能可以直接檢測納米藥物的攝取和監(jiān)控腫瘤進(jìn)展。

2.3 磁靶向 磁靶向是指利用磁性納米顆粒遞送紫杉醇等化療藥物，起到靶向治療卵巢癌的作用。四氧化三鐵（Fe3O4）顆粒具有超順磁性，能實(shí)現(xiàn)靶向定位腫瘤。Huang等[14]結(jié)合磁靶向和主動(dòng)靶向技術(shù)，用靶向卵巢癌內(nèi)皮糖蛋白的單鏈抗體修飾Fe3O4磁性納米顆粒表面，制備出雙重靶向的納米顆粒，遞送紫杉醇。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)提示該納米顆粒緩釋性好，無明顯毒性反應(yīng)，相對(duì)單一靶向，其協(xié)助紫杉醇抑制SKOV3細(xì)胞生長的能力更強(qiáng)。多種靶向方式的結(jié)合應(yīng)用正成為納米靶向藥物研究的新趨勢(shì)。此外，在對(duì)電磁納米顆粒（MENs）的研究中，Guduru等[15]制備特異MENs遞送紫杉醇，在低能量磁場作用下，可殺滅大部分SKOV3細(xì)胞，同時(shí)對(duì)周圍正常細(xì)胞沒有影響。

2.4 基因靶向 基因靶向是指用納米載體遞送各類基因片段，增加目的基因進(jìn)入細(xì)胞的同時(shí)，增強(qiáng)抵抗核酸酶破壞的能力?；虬邢虻募{米顆粒也能遞送化療藥物。在基因靶向多重耐藥基因1（MDR-1）聯(lián)合紫杉醇治療卵巢癌的研究中，Yadav等[16]制備了包裹MDR-1基因的小干擾RNA（siRNA）和紫杉醇的特異納米顆粒，結(jié)果顯示siRNA增加了耐紫杉醇卵巢癌細(xì)胞系（SKOV3TR）中紫杉醇的積聚，增加了細(xì)胞凋亡，而紫杉醇對(duì)SKOV3TR細(xì)胞無明顯作用。同樣是遞送siRNA來進(jìn)行基因靶向，王欣然等[17]采用磁性介孔二氧化硅納米顆粒（magnetic mesoporous silica nanoparticles，M-MSN），結(jié)果提示 M-MSN 具有良好的生物安全性，能使siRNA抵達(dá)并釋放于SKOV3實(shí)驗(yàn)鼠的癌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，是siRNA的良好載體。同時(shí)M-MSN具有T2負(fù)增強(qiáng)效果，能提示腫瘤部位，是一種對(duì)卵巢癌兼具診療功能的納米靶向藥物。

2.5 免疫靶向 免疫療法分為主動(dòng)免疫和被動(dòng)免疫。主動(dòng)免疫是指將具有抗原性的腫瘤疫苗輸注體內(nèi)，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗腫瘤免疫。被動(dòng)免疫是指將外源性免疫效應(yīng)物質(zhì)輸入體內(nèi)，該外源性物質(zhì)將發(fā)揮抗腫瘤作用。近年樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）療法是抗卵巢癌免疫治療領(lǐng)域的熱點(diǎn)。作為機(jī)體內(nèi)的專職性抗原遞呈細(xì)胞，DCs能顯著刺激初始型T細(xì)胞增殖。通過結(jié)合納米技術(shù)，DCs誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫效應(yīng)進(jìn)一步增強(qiáng)。Fang等[18]成功制備出腫瘤細(xì)胞膜包裹的聚合納米顆粒，其表面抗原性與原腫瘤細(xì)胞相仿，穩(wěn)定性好。在免疫增敏劑單磷酰脂質(zhì)A的作用下，DCs刺激T細(xì)胞增殖效果明顯。同時(shí)，因?yàn)橥|(zhì)黏附結(jié)合作用，其具有運(yùn)載輸送化療藥物的潛力。Cubillos-Ruiz等[19]也成功制備了一種新型的免疫靶向的納米顆粒，能提升DCs所誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞對(duì)卵巢癌細(xì)胞的特異性殺傷作用，將其注射于腫瘤鼠腹腔后腫瘤進(jìn)展延緩。

2.6 超聲靶向 超聲靶向破壞微泡技術(shù)是指在特定部位發(fā)射不同聲強(qiáng)的超聲波，當(dāng)超聲強(qiáng)度足夠大時(shí)，血液中的微泡發(fā)生破裂，產(chǎn)生微射流和沖擊波，使得周圍血管壁或細(xì)胞膜表面出現(xiàn)穿孔，損傷血管內(nèi)皮，增加血管通透性，提高外源物質(zhì)到達(dá)指定部位的劑量，增強(qiáng)相應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)。張勁宜等[20]設(shè)計(jì)了黃體生成激素釋放激素靶向的納米微泡，能有效靶向并結(jié)合人卵巢癌OVCAR-3細(xì)胞。但是，通過其來完成超聲破壞微泡靶向遞送，定位釋放紫杉醇治療卵巢癌的研究仍在進(jìn)行中。

3 問題與展望

納米靶向藥物在動(dòng)物卵巢癌模型中抗癌效果表現(xiàn)突出，藥物不良反應(yīng)明顯減輕。雖然nab-PTX已處于臨床試驗(yàn)，但仍需大樣本考察?？傮w而言缺乏人體試驗(yàn)。近年具有診療功能的納米靶向藥物正在開發(fā)中。不同靶向方式結(jié)合應(yīng)用、多藥靶向的研究也成為了納米靶向藥物研究的新思路。納米載體的穩(wěn)定性、載藥量需要優(yōu)化，藥物包封率低、毒性、免疫原性以及遠(yuǎn)期不良反應(yīng)等問題均需進(jìn)一步驗(yàn)證。今后應(yīng)進(jìn)一步完善納米靶向藥物，完成更多的體內(nèi)外試驗(yàn)，以使納米靶向藥物在卵巢癌等其他惡性腫瘤的治療中起到更多作用。

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