藤梨正丁醇部位化學成分的研究

向梅先， 金財多， 寇榮生， 楊光忠， 李 竣

(中南民族大學 藥學院， 武漢 430074)

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向梅先， 金財多， 寇榮生， 楊光忠， 李 竣*

(中南民族大學 藥學院， 武漢 430074)

采用薄層色譜，正相、反相硅膠，葡聚糖凝膠，半制備高效液相柱對中藥藤梨的正丁醇部位進行了分離研究.得到8個化合物，分別為：2-β-D-葡萄糖-1，3，7-三羥基-酮 (1)， 7-O-[β-D-吡喃木糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]-1，8-二羥基-3-甲氧基-酮(2)， 3-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖]-5，7，4′-三羥基黃酮(3)，6-C-葡萄糖-5，7，3′，4′-四羥基黃酮(4)， 6-C-葡萄糖-5，7，4′-三羥基黃酮 (5)， 1-O-[β-D-吡喃木糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]-8-羥基-3，7-二甲氧基-酮(6)， 3-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃半乳糖]-5，7，3′，4′-四羥基黃酮 (7)， 7-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖]-5，3′-二羥基-4′-甲氧基二氫黃酮 (8).所有的化合物都是首次從該植物分離得到.

藤梨； 正丁醇部位； 化學成分研究

藤梨又稱藤梨根、陽桃、木子、獼猴桃根，為獼猴桃科獼猴桃屬植物硬毛中華獼猴桃 [Actinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq.] 的根.中華獼猴桃史載于《開寶本草》，生于林下或灌木叢中，海拔1 400～1 620 m，主要分布于我國東北、華北、西北及長江流域，日本和朝鮮也有分布，我國陜西省廣泛栽培，栽植面積占全國一半以上.民間將獼猴桃的根洗凈，曬干，切碎后進行入藥使用.具清熱解毒、清熱利濕、防腫瘤抗癌、祛風除濕、利尿止血、解毒消腫，可緩解或治療消化不良、嘔吐、風濕痹痛、風濕骨痛、消化道癌腫、消化道腫瘤、癰瘍瘡癤、風濕骨痛及黃疸等癥.近年來發(fā)現(xiàn)該植物具有抗癌，降血脂等活性[1].隨著癌癥病人的高發(fā)，對該藥的研究也引起科學家的高度重視.本研究對其化學成分進行了系統(tǒng)分離研究,采用正相和反相硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠LH-20色譜、高效液相半制備色譜及重結(jié)晶等分離和純化方法，同時配合硅膠薄層層析跟蹤分析，以薄層色譜指導柱層析，從藤梨乙酸乙酯和正丁醇位分離得到共計25個化合物，鑒定出了正丁醇部位分離的8個，且所有化合物均首次從該植物分離得到.8個化合物的結(jié)構(gòu)如圖1所示.

1 儀器與材料

1.1 儀器

ZF-6型三用紫外光譜儀；Bruker AM-600型核磁共振儀；Finnigan LCQ-Deca和Waters/ Micromass Q-Tof-Ultima 型質(zhì)譜儀；美國戴安Ultimate 3000型高效液相色譜儀(Chromeleon 色譜工作站)；5C18-MS-Ⅱ(10 mm×250 mm)色譜柱；RE-52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)；KQ-500E型超聲波清洗儀；紫外分光光度儀(VU)；Nicolet NEXUS-670 傅立葉變更紅外光譜儀;中草藥粉碎機(FW177，天津市泰斯特儀器有限公司)．

1.2 材料

藤梨根購自湖北天濟中藥飲片廠，經(jīng)中南民族大學萬定榮教授鑒定為硬毛中華獼猴桃 [Actinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq.]的根.

1.3 試劑

95%的工業(yè)酒精(武漢酒精廠)；乙醇：分析純，天津博迪化學試劑廠；甲醇：分析純，天津博迪化學試劑廠；乙酸乙酯：分析純，上海國藥集團化學試劑有限公司；石油醚：分析純，上海國藥集團化學試劑有限公司；正丁醇：分析純，湖北大學化學試劑廠；苯：分析純，國藥集團化學試劑有限公司；

薄層層析：GF254高效薄層板，青島海洋化工有限公司；TLC板：GF254板，青島海洋化工有限公司；柱層析硅膠：100～200目、200～300目、硅膠H，青島海洋化工廠；RP-18: 50 μm; 反相硅膠，葡聚糖凝膠：日本YMC 公司.

圖1 8個化合物的結(jié)構(gòu)Fig.1 Structures of compounds 1～8

2 方法

2.1 藥材的提取與分離

取藤梨根飲片10 kg，用粉碎機粉碎成粗粉.將其粗粉置95%的酒精中室溫浸泡提取3次，每次24 h.過濾，合并濾液，減壓回收濃縮得浸膏3.4 kg，將浸膏用90%的甲醇水溶液溶解后用等體積石油醚萃取，回收石油醚得到石油醚浸膏200 g，即石油醚部位.減壓回收下層的甲醇水溶液，得浸膏，浸膏用蒸餾水溶解后，分別用等體積的乙酸乙酯和正丁醇萃取，減壓回收正丁醇得到浸膏1.1 kg. 稱取乙酸乙酯部位和正丁醇部位浸膏各500 g，分別采用正相硅膠、反相硅膠、葡聚糖凝膠、半制備高效液相色譜柱進行分離，采用重結(jié)晶法對分離的化合物進行純化，得到25 個化合物，鑒定了其中的8個.這8個化合物均來自于正丁醇部位.

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:黃色粉末，MW=406.33.

1H NMR (600 MHz， DMSO): 13.41 (1H，s， 1-OH)，10.14 (1H，s，OH)，7.37(1H，d，J=9.0 Hz， H-5)，7.51 (1H，d，J=3.0 Hz， H-8)， 7.48 (1H，dd，J=9.0， 3.0Hz， H-6)，6.31 (1H，s，H-4)， 4.71 (1H， d，J=9.8 Hz， H-1 of Glc);13C NMR (150MHz，DMSO); 179.8 (C=O)，165.1 (C-3)， 162.1 (C-1)， 156.3 (C-4a)， 124.5 (C-6)， 148.8 (C-4b)， 153.9 (C-7)，120.5 (C-8a)， 108.3 (C-8)， 107.8 (C-2)，118.7 (C-5)， 101.9 (C-8b)， 93.2 (C-4)，81.7 (C-1′of Glc)， 79.2 (C-5′of Glc)， 73.3 (C-2′of Glc)，70.5 (C-3′of Glc)，70.3 (C-4′of Glc)，61.6 (C-6′of Glc).以上數(shù)據(jù)與參考文獻一致[2].故鑒定該化合物為2-β-D-吡喃葡萄糖-1，3，7-三羥基-酮.

化合物2:黃色粉末，MW=568.48.

1H NMR (600 MHz， DMSO): 11.75，11.72 (each 1H，s，1，8-OH)，7.80 (1H，d，J=9.2 Hz，H-6)， 6.76 (1H，d，J=9.2 Hz，H-5)， 6.67 (1H，d，J=2.1 Hz， H-4)， 6.46 (1H，d，J=2.1 Hz，H-2)， 4.76 (1H，d，J=7.1 Hz，H-1′of Glc)， 4.07 (1H，d，J=7.4 Hz， H-1″of Xyl)， 3.67 (3H，s，OCH3);13C NMR (150 MHz， DMSO): 184.2 (C=O)， 167.2 (C-3)， 162.0 (C-1)，157.6 (C-4a)， 149.3 (C-8)， 149.8 (C-4b)，140.4 (C-7)， 125.3 (C-6)， 107.2 (C-8a)， 101.7 (C-8b)， 106.2 (C-5)， 103.8 (C-1″of Xyl)， 101.1(C-1′of Glc)， 97.2(C-2)， 92.7 (C-4)， 76.5 (C-3″of Xyl)， 76.3 (C-5′of Glc)， 76.2(C-3′of Glc)， 73.3(C-2′of Glc)， 73.1 (C-2″of Glc)， 69.6 (C-4″of Xyl)， 69.5 (C-4′of Glc) ，68.4 (C-6′of Glc)， 65.7 (C-5″of Xyl)， 56.4 (OCH3).以上數(shù)據(jù)與參考文獻一致[3]，故鑒定該化合物為7-O-[β-D-吡喃木糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]-1，8-二羥基-3-甲氧基-酮．

化合物3: 黃色粉末，MW=594.52．

1H NMR (600 MHz， 甲醇): 8.18 (1H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′)， 6.58 (1H，d，J=8.6 Hz， H-3′，5′)， 6.58 (1H， brs，H-8)， 6.19 (1H，brs， H-6)， 5.13 (1H，d，J=7.8 Hz， H-1″of Gal)， 4.62 (1H，s，H-1?of Rha)， 1.28 (3H，d，J=6.2 Hz， H-6?of Rha);13C NMR (150 MHz，甲醇); 179.4 (C=O)， 166.8 (C-7)， 162.8 (C-5)，161.7 (C-4′)，158.6 (C-4)， 159.3 (C-2)， 135.6 (C-3)， 132.4 (C-2′，6′)， 122.5 (C-1′)， 116.3 (C-3′，5′)， 105.7 (C-1″ of Gal)，105.4 (C-10)， 101.7 (C-1?of Rha)， 100.3 (C-6)， 95.0 (C-8)， 75.5 (C-3″ of Gal)， 75.2 (C-5″of Gal)， 73.7 (C-4?of Rha)， 73.1 (C-2″of Gal)， 72.4 (C-3?of Rha)， 72.2 (C-2?of Rha)， 70.1 (C-5?of Rha)， 69.8 (C-4″of Gal)， 67.4 (C-6″of Gal)， 18.1 (C-6?of Rha).以上數(shù)據(jù)與參考文獻一致[4]，故鑒定該化合物為3-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃半乳糖]-5，7，4′-三羥基黃酮．

化合物4:黃色粉末，MW=462.40．

1H NMR( 600MHz， DMSO): 13.44 (1 H，s，5-OH)， 7.52 (2 H，m，H-2′，6′)， 6.79(1H，d，J=8.2 Hz，H-5′)， 6.57 (1H，s，H-3)， 6.68 (1H，s，H-8)， 4.59 (1H，d，J=9.8 Hz H-1″of Glc);13C NMR (150 MHz， DMSO): 181.5 (C=O)， 163.6 (C-7)， 163.6 (C-2)， 160.5 (C-5)， 156.2 (C-9)，149.7 (C-4′)，145.6 (C-3′)， 121.5 (C-1′)，119.2 (C-6′)，113.3 (C-2′)， 116.3 (C-5′)， 108.7 (C-6)， 103.4 (C-10)， 102.6 (C-3)， 93.3 (C-8)， 81.5 (C-1′of Glc)， 79.2 (C-5′of Glc)， 73.2 (C-2′of Glc)， 70.7 (C-3′of Glc)， 70.3 (C-4′of Glc)， 61.4 (C-6″of Glc).以上數(shù)據(jù)與參考文獻一致[5]，故鑒定該化合物為6-C-葡萄糖-5，7，3′，4′-四羥基黃酮．

化合物5：黃色粉末，MW=432.37．

1H NMR (600 MHz， DMSO): 13.46 (1H，s，5-OH)， 7.91 (2H，d，J=7.8 Hz，H-2′，6′)， 6.82 (1H，d，J=7.5 Hz， H-3′，5′)， 6.65 (1H，s，H-3)， 6.59 (1H，s，H-8)， 4.60 (1H， d，J=9.6 Hz， H-1″ of Glc);13C NMR (150 MHz， DMSO): 181.7 (C=O)，163.4 (C-7)， 161.4 (C-5)， 160.7 (C-4′)， 156.4 (C-9)， 156.5 (C-2)，128.3 (C-2′，6′)， 121.2 (C-1′)，116.1(C-3′，5′)，109.2 (C-6)， 103.3 (C-10)， 102.5 (C-3)， 93.6 (C-8)， 81.7 (C-1″of Glc)，79.2 (C-5″of Glc)， 73.2 (C-2″of Glc)， 70.7 (C-3″of Glc)，70.2 (C-4″of Glc)， 61.4 (C-6″of Glc)).以上數(shù)據(jù)與參考文獻一致[6]，故鑒定該化合物為6-C-葡萄糖-5，7，4′-三羥基黃酮．

化合物6:黃色粉末，MW=582.50．

1H NMR (600 MHz， DMSO): 3.26 (1H，s，1-OH)， 7.44 (1H，d，J=8.1 Hz，H-6)， 6.69(1H，d，J=7.8 Hz，H-5)， 6.83 (2H，brs，H-2，4)， 5.17 (1H，d，J=7.3 Hz，H-1′of Glc)， 4.27 (1H，d，J=7.4 Hz，H-1′of Xyl)， 3.81， 3.91 (each 3H， s， 3，7-OCH3);13C NMR (150 MHz， DMSO): 181.3 (C=O)， 165.6 (C-3)， 159.3 (C-1)， 158.7 (C-4a)， 150.3 (C-8)， 148.2 (C-4b)， 142.4 (C-7)， 120.5 (C-6)， 104.6 (C-8b)，104.4 (C-5)， 104.1 (C-1″ of Xyl)， 100.6 (C-1′of Glc)， 98.6 (C-2)， 94.8 (C-4)，76.7 (C-3″ of Xyl)， 76.5 (C-5′ of Glc)， 75.6 (C-3′ of Glc)， 73.5 (C-2′ of Glc)， 73.3 (C-2″ of Glc)， 69.7 (C-4″ of Xyl)， 69.4 (C-4′ of Glc)， 68.6 (C-6′ of Glc)， 65.6 (C-5″ of Xyl)， 56.6 (OCH3)， 56.3 (OCH3). 以上數(shù)據(jù)與參考文獻一致[7]， 故鑒定該化合物為1-O-[β-D-吡喃木糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]-8-羥基-3，7-二甲氧基-酮．

化合物7:黃色針狀結(jié)晶，MW=610.50．

1H NMR (600 MHz， DMSO): 12.48 (1H，s，5-OH)， 7.75 (1H， dd，J=8.5， 2.1Hz，H-6′)，7.52 (1H，d，J=1.9 Hz，H-2′)， 6.71 (1H，J=8.4 Hz， H-5′)， 6.46 (1H，brs，H-8)， 6.16 (1H， brs， H-6)， 5.31 (1H， d，J=7.7 Hz， H-1′of Gal)， 4.32 (1H， s， H-1?of Rha)， 1.26 (3H，d，J=6.2 Hz， H-6?of Rha);13C NMR (150 MHz， DMSO): 177.5 (C=O)， 165.2 (C-7)， 161.2 (C-5)，156.6 (C-9)，156.4 (C-2)，148.8 (C-4′)， 144.7 (C-3′)，133.4 (C-3)， 121.7 (C-1′)， 121.2 (C-6′)， 115.8 (C-2′)， 115.4 (C-5′)， 103.6 (C-10)， 102.2 (C-1″of Gal)， 100.2 (C-1?of Rha)， 99.3 (C-6)， 93.7 (C-8)， 73.5 (C-3″of Gal)， 73.2 (C-5″of Gal)， 71.9 (C-4?of Rha)，71.0 (C-2″of Gal)， 70.7 (C-3?of Rha)，70.4 (C-2?of Rha)， 68.3 (C-4″of Gal)， 68.3 (C-5?of Rha)， 65.2 (C-6″of Gal)， 17.8 (C-6?of Rha).以上數(shù)據(jù)與參考文獻一致[8]， 故鑒定該化合物為3-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃半乳糖]-5，7，3′，4′-四羥基黃酮．

化合物8:黃色粉末，MW=610.56.

1H NMR (600 MHz， DMSO): 11.89 (1H， s， 5-OH)， 9.26 (1H，s，3′-OH)， 6.79(3H， m， H-2′，5′，6′)， 6.21 (1H，brs，H-2)， 6.19 (1H，brs，H-4)， 4.84 (1H，d，J=7.2 Hz， H-1′of Glc)， 4.53 (1H， brs， H-1″ of Rha)， 3.54 (3H， s， OCH3)， 1.16 (3H， d，J=6.0 Hz， H-6″of Rha);13C NMR(150 MHz， DMSO): 197.2 (C=O)， 165.1 (C-7)， 163.3 (C-5)， 162.4 (C-9)， 148.1 (C-4′)， 146.6 (C-3′)， 130.7 (C-1′)， 118.1 (C-6′)， 114.3 (C-2′)， 112.3 (C-5′)， 103.2 (C-10)， 100.7 (C-1?of Rha)， 99.4 (C-1″of Glc)， 96.4 (C-6)， 95.7 (C-8)， 78.3 (C-2)， 76.5 (C-3″ of Glc)， 75.6 (C-5″of Glc)， 73.2 (C-2″of Glc)， 72.1 (C-4?of Rha)， 70.5 (C-3?of Rha)， 70.3 (C-2?of Rha)， 69.5 (C-4″of Glc)， 68.3 (C-5?of Rha)， 66.2 (C-6″of Glc)， 55.6 (4′-OCH3)， 42.1 (C-3)， 17.6 (C-6?of Rha).以上數(shù)據(jù)與參考文獻一致[9]， 故鑒定該化合物為7-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖]-5，3′-二羥基-4′-甲氧基二氫黃酮．

3 討論

藤梨為恩施土家藥，具有較好的抗腫瘤活性.鑒于藤梨的藥效，有必要對藤梨進行全面研究與開發(fā)，充分發(fā)揮其潛在的應用價值.本文對藤梨根的乙酸乙酯、正丁醇等部位進行了化學成分的分離研究，并探討了治療腫瘤的藥效及作用機制.采用系統(tǒng)溶劑萃取及柱層析技術分離和重結(jié)晶方法，從乙酸乙酯部位和正丁醇部位分離得到25個化合物，鑒定了其中8個化合物的結(jié)構(gòu)，這8個化合物均來自于正丁醇部位.經(jīng)結(jié)構(gòu)分析和文獻資料查閱[10]，發(fā)現(xiàn)分離的化合物全部為首次從該屬植物中分離得到，下一步將對其進行活性篩選與作用機制研究，以期為該藥在治療腫瘤的臨床應用提供科學依據(jù).

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Study on chemical compound ofn-butyl alcohol fraction fromActinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq．

XIANG Meixian， JIN Caiduo， KOU Rongsheng， YANG Guangzhong， LI Jun

(College of Pharmacy， South-Central University for Nationalities， Wuhan 430074)

To study chemical composition of fraction fromActinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq. TLC， normal-phase silica gel column， reverse-phase silica gel column， sephadex-LH and semi-preparative HPLC column were used to isolate chemical compositions ofn-butyl alcohol fraction fromarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq. Eight compounds were identified as: 2-β-D-Glu-1，3，7-tri hydrogen-xanthone (1)， 7-O-[beta-D-xylose-(1-6)-beta-D-glucopyranoside]-1， 8-dihydroxy-3-methoxy Xanthone (2); 3-O-[beta-D-Pyranrham-nose-(1-6)-beta-D-galactopyranose]-5，7，4′-trihydroxy flavone (3); 6-C-glucose-5，7，3′，4′-tetra hydroxy flavone (4); 6-C-glucose -5，7，4′-trihydroxy flavone(5)， 1-O-[beta-D-xylose-(1-6)-beta-D-glucopyranoside]-8-hydroxy-3，7-dimethoxy Xanthone (6); 3-O-[beta-D-pyran rhamnose-(1-beta-D-pyran galactose]-5，7，3′，4′-tetrahydroxy flavone (7); 7-O-[beta-D-pyran rhamnose-(1-6)-beta-D-pyran glucose]-5， 3′-dihydroxy-4′-methoxy two dihydrogen flavone (8)．All compounds were isolated for the first time from this plant， moreover， all compounds were gained from genus for first time．

Actinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq.;n-butyl alcohol fraction; chemical composition

2015-02-18.

武漢市科技晨光計劃項目(2014070404010210).

1000-1190(2015)03-0397-05

O629

A

*通訊聯(lián)系人. E-mail: Lijunwuhan@sina.com.