樹(shù)突細(xì)胞亞群與銀屑病的相關(guān)性研究進(jìn)展

張梁宇 陳楊 王翔

樹(shù)突細(xì)胞亞群與銀屑病的相關(guān)性研究進(jìn)展

張梁宇 陳楊 王翔

銀屑病是一種病因不明的慢性炎癥性、免疫性疾病，其皮損中可發(fā)現(xiàn)明顯增多的樹(shù)突細(xì)胞和效應(yīng)性T細(xì)胞浸潤(rùn)，提示樹(shù)突細(xì)胞參與了銀屑病的炎癥反應(yīng)。正常皮膚組織中，主要分布3類樹(shù)突細(xì)胞：表皮朗格漢斯細(xì)胞、真皮髓系樹(shù)突細(xì)胞和漿細(xì)胞樣樹(shù)突細(xì)胞。在銀屑病皮損組織中，3類樹(shù)突細(xì)胞與T細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的相互作用可引發(fā)和加重皮膚中的炎癥反應(yīng)。此外，漿細(xì)胞樣樹(shù)突細(xì)胞在以Toll樣受體依賴方式分泌的Ⅰ型干擾素還可能促進(jìn)髓系樹(shù)突細(xì)胞的活化及炎癥介質(zhì)的釋放。

銀屑病；樹(shù)突細(xì)胞；抗原，CD11c

銀屑病是一種以皮膚紅斑、鱗屑為主要特征的慢性炎癥性疾病。其皮損中有大量固有免疫細(xì)胞如樹(shù)突細(xì)胞（DC）、中性粒細(xì)胞等以及效應(yīng)性T細(xì)胞的浸潤(rùn)［1］。DC是體內(nèi)重要的專職抗原提呈細(xì)胞，參與機(jī)體固有免疫，并可活化T細(xì)胞啟動(dòng)適應(yīng)性免疫。不同炎癥環(huán)境下，DC細(xì)胞可在多種自身免疫性疾病中發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)或致病作用，銀屑病皮損有不同類型的DC細(xì)胞與疾病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)［2］。

1 DC在皮膚的分布及主要表型特征

正常皮膚按分布層次不同主要有3類DC，表皮朗格漢斯細(xì)胞（LC），真皮含髓系起源的真皮髓系DC和淋巴干細(xì)胞起源的漿細(xì)胞樣DC［3］。表皮LC細(xì)胞主要表達(dá)Langerin、CD1a、E鈣黏蛋白和CCR6，可向附近淋巴結(jié)中的T細(xì)胞遷移提呈抗原，此時(shí)表面的E鈣黏蛋白表達(dá)下降，MCHⅡ、CD40等表達(dá)增強(qiáng)，有助于其移行和抗原提呈［4］。真皮髓系主要表達(dá)CD11c、CD13、CD33 和 CD11b，與鼠表達(dá) CD11c+DC或經(jīng)典DC相類似。CD11c+髓系DC以CD11c+CD1c+DC、CD11c+CD141+DC兩類為主要分化群。漿細(xì)胞樣DC數(shù)量較少，特異性表達(dá)CD303，亦表達(dá)CD123、CD304。漿細(xì)胞樣DC與髓系DC均可高表達(dá)MCHⅡ，發(fā)揮抗原提呈功能［3，5］。真 皮 中 ，亦 存 在 表 達(dá)Langerin的DC細(xì)胞，其與LC細(xì)胞表型主要的區(qū)別在于Langerin+DC表達(dá)CD103而不表達(dá)上皮細(xì)胞黏附分子，LC細(xì)胞卻與之相反［4］。銀屑病皮損中存在一類分泌TNF-α和誘導(dǎo)型NO合酶（iNOS）的炎性DC 細(xì)胞，以 CD11c+CD1c-DC 為主要表型特征［5］。

2 DC與T細(xì)胞亞群

2.1 DC與效應(yīng)性T細(xì)胞：Th17、Th22是與銀屑病相關(guān)的效應(yīng)性T細(xì)胞亞群，分泌的細(xì)胞因子IL-17和IL-22可導(dǎo)致角質(zhì)形成細(xì)胞異常增殖及中性粒細(xì)胞趨化、單核細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)［6］。將外周血初始CD4+T細(xì)胞與皮膚體外移植模型中分離的LC細(xì)胞（高表達(dá)MCHⅡ、CD86）共同培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，LC細(xì)胞能同時(shí)分泌IL-6和IL-15促進(jìn)Th17細(xì)胞分化［7］，并且相對(duì)于單核細(xì)胞源性DC細(xì)胞，LC細(xì)胞能更強(qiáng)誘導(dǎo) Th22 細(xì)胞分化［8］。

銀屑病患者的CD11c+CD1c+DC和CD11c+CD1c-DC上均可表達(dá)髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1信號(hào)通路，但極少表達(dá)于T細(xì)胞表面；與非皮損區(qū)相比，皮損區(qū)髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1在蛋白和mRNA水平均有明顯增加，在銀屑病皮損單細(xì)胞混懸液與T細(xì)胞同培養(yǎng)的同種異體混合淋巴反應(yīng)中阻斷髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1后，Th17細(xì)胞增殖和IL-17的分泌均受到明顯抑制，提示髓系DC細(xì)胞中該信號(hào)途徑與銀屑病有關(guān)［9］。成熟后的髓系DC細(xì)胞表達(dá)溶酶體相關(guān)膜蛋白（LAMP），LAMP+DC細(xì)胞在局部皮損浸潤(rùn)的數(shù)目與銀屑病嚴(yán)重程度顯著相關(guān)，幾乎大多數(shù)LAMP+DC細(xì)胞共表達(dá)CCR6，皮損中Th1、Th17、Th22和部分CD11c+DC均可分泌CCL20，表明LAMP+DC可通過(guò)CCR6/CCL20與效應(yīng)性T細(xì)胞相互趨化［10］。

雖然DC細(xì)胞可活化T細(xì)胞并影響其分化，但Alonso等［11］發(fā)現(xiàn)，在銀屑病皮損中Th細(xì)胞與單核細(xì)胞相鄰，并在粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激、干擾素（IFN）γ、腫瘤壞死因子（TNF）α等影響下，Th1和Th17細(xì)胞可誘導(dǎo)單核細(xì)胞形成DC，此類DC可分泌不同的細(xì)胞因子 IL-12 和 IL-1β、IL-6、IL-23，而這些細(xì)胞因子又是促使Th1和Th17細(xì)胞形成的關(guān)鍵因子，提示在銀屑病中DC細(xì)胞與效應(yīng)性T細(xì)胞之間存在互相影響的正反饋環(huán)路，進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)。

2.2 DC與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）：正常皮膚中T細(xì)胞是血液中的近2倍，皮膚中表達(dá)歸巢受體的記憶性T細(xì)胞較外周血中多出20倍以上，推測(cè)LC細(xì)胞遷移至外周，活化T細(xì)胞前，應(yīng)更易先接觸皮膚中的記憶性T細(xì)胞。將健康人群皮膚中LC細(xì)胞、記憶性T細(xì)胞分離后共同培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)LC細(xì)胞可誘導(dǎo)Treg細(xì)胞顯著增多，效應(yīng)性T細(xì)胞增殖則受到抑制；皮膚組織中發(fā)現(xiàn)，表達(dá)Ki67的Treg與CD1a+LC細(xì)胞分布相鄰，主要位于表皮、真皮乳頭層與表皮交界處，以白念珠菌刺激LC細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)在低劑量下主要引起Treg細(xì)胞增殖，較高劑量則主要致效應(yīng)性T細(xì)胞增殖。提示LC細(xì)胞可能通過(guò)促進(jìn)T細(xì)胞向Treg細(xì)胞分化而維持局部的免疫平衡［12］。

3 DC與角質(zhì)形成細(xì)胞

正常皮膚中，髓系DC多數(shù)為相對(duì)未成熟狀態(tài)的CD11c+CD1c+DC細(xì)胞［5］。銀屑病皮損中CD11c+CD1c+DC細(xì)胞明顯減少，CD11c+CD1c-DC細(xì)胞顯著增多，皮損區(qū)的CD11c+CD1c-DC細(xì)胞與正常皮膚及非皮損區(qū)相比分別增多近30倍和10倍。皮損中大部分CD11c+CD1c-DC細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有TNF-α及iNOS的共表達(dá)，提示CD11c+CD1c-DC為T(mén)ip-DC表型特征［13］。銀屑病早期皮損中CD11c+CD1c-DC分布于真皮血管周圍，隨著皮損加重向血管外周擴(kuò)散，且其數(shù)量的變化和皮損的厚度、角質(zhì)形成細(xì)胞K16的表達(dá)均有明顯的正相關(guān)［14］。咪喹莫特在IL-36受體缺失小鼠中不能誘導(dǎo)出銀屑病樣改變，IL-36受體拮抗缺失小鼠的銀屑病樣皮損比野生型更明顯，剔除小鼠CD11c+DC細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，小鼠銀屑病樣皮損明顯減輕，中性粒細(xì)胞、T細(xì)胞及分泌IL-17的細(xì)胞數(shù)量也顯著的下降，進(jìn)一步以咪喹莫特、IL-36β刺激髓系DC細(xì)胞能誘導(dǎo)其分泌IL-36α、IL-36γ及IL-23，并誘導(dǎo)皮膚中CD45-表達(dá)的細(xì)胞分泌粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α，表明CD11c+DC細(xì)胞可分泌IL-36并以正反饋方式增強(qiáng)局部炎癥因子表達(dá)，同時(shí)促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞分裂、增殖［15］。

4 DC與中性粒細(xì)胞

銀屑病早期皮損中漿細(xì)胞樣DC較非皮損區(qū)有增多趨勢(shì)［14］。銀屑病患者血清可明顯刺激中性粒細(xì)胞釋放分泌型粒細(xì)胞蛋白酶抑制劑（SLPI）和中性粒細(xì)胞外網(wǎng)（NET）形成的復(fù)合物。SLPI是絲氨酸蛋白酶如人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶（HNE）及組織蛋白酶G（GatG）強(qiáng)有力的抑制劑，可有效限制炎癥反應(yīng)或創(chuàng)傷修復(fù)中蛋白酶介導(dǎo)的組織損傷。NET是由中性粒細(xì)胞染色體降解物、顆粒蛋白酶等組成的類似網(wǎng)狀復(fù)合物，由活化后中性粒細(xì)胞釋放到細(xì)胞外捕獲并清除微生物，HNE和中性粒細(xì)胞DNA是其主要組成結(jié)構(gòu)。皮損中發(fā)現(xiàn)，SLPI和大多數(shù)HNE陽(yáng)性中性粒細(xì)胞分布相近，中性粒細(xì)胞胞外基質(zhì)可觀察到SLPI和 NET（HNE-DNA）聚集；且皮損中近半數(shù)漿細(xì)胞樣DC細(xì)胞分布在SLPI陽(yáng)性中性粒細(xì)胞周圍，其中約1/5的漿細(xì)胞樣DC細(xì)胞與之直接接觸，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，三聚復(fù)合物（HNE-SLPI-DNA）主要通過(guò)TLR9刺激漿細(xì)胞樣DC細(xì)胞分泌IFN-α，而復(fù)合物中任意的單一成分或兩種成分均不能誘導(dǎo)漿細(xì)胞樣DC分泌IFN-α，此三聚復(fù)合物比self-DNA-LL37能更強(qiáng)的誘導(dǎo)漿細(xì)胞樣DC分泌IFN-α［16］。GatG-SLPIDNA復(fù)合物亦能誘導(dǎo)漿細(xì)胞樣DC分泌IFN-α，不同之處，GatG-SLPI-DNA刺激漿細(xì)胞樣DC分泌能力較HNE-SLPI-DNA弱，但GatG和SLPI或DNA形成的二聚復(fù)合物亦可較明顯的刺激pDC分泌IFN-α［17］。提示pDC細(xì)胞可與中性粒細(xì)胞相互作用加重銀屑病炎癥。

5 DC亞群間作用

銀屑病中，self-DNA-LL37可通過(guò)TLR9刺激pDC產(chǎn)生IFN-α，后者可促使mDC活化并分泌誘導(dǎo)Th1、Th17 分化的細(xì)胞因子 IL-12、IL-23［18］。有研究用咪喹莫特分別刺激野生型和TLR7受體缺失（Tlr7-/-） 小鼠后發(fā)現(xiàn)，IFN-α 和 TNF-α、iNOS 的mRNA表達(dá)在野生型小鼠皮損與三者在Tlr7-/-小鼠中的表達(dá)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Tlr7-/-小鼠pDC、Tip-DC產(chǎn)生炎癥因子能力明顯減弱。作者分別用咪喹莫特、IFN-α或兩者聯(lián)合刺激，發(fā)現(xiàn)兩者聯(lián)合刺激能更明顯誘導(dǎo)骨髓源性DC分泌TNF-α、iNOS、IL-23、IL-6 等炎癥因子，IFN-α 刺激可明顯增加骨髓源性DC中Tlr7 mRNA的表達(dá)［19］。以上結(jié)果表明，pDC可在Toll受體的介導(dǎo)下分泌IFN-α，促使mDC活化，分泌大量TNF-α、iNOS及誘導(dǎo)產(chǎn)生Th1、Th17分化的細(xì)胞因子。

體外實(shí)驗(yàn)表明，LC細(xì)胞可攝取、提呈抗原并活化效應(yīng)性T細(xì)胞，促進(jìn)機(jī)體的免疫反應(yīng)，但體內(nèi)研究表明，在感染狀態(tài)下，啟動(dòng)免疫反應(yīng)的關(guān)鍵抗原提呈細(xì)胞是真皮源性的langerin+CD103+DC，在接觸性超敏反應(yīng)和LC細(xì)胞缺陷小鼠中發(fā)現(xiàn)，LC細(xì)胞卻可能有著抑制免疫炎癥反應(yīng)、產(chǎn)生免疫耐受的功能［18］。銀屑病早、晚發(fā)患者皮損中的LC細(xì)胞都存在不同程度遷移功能障礙［20］，并隨著治療臨床癥狀改善，LC細(xì)胞的遷移功能有明顯恢復(fù)［21］。這也提示銀屑病炎癥反應(yīng)中，LC細(xì)胞可能在原位調(diào)節(jié)免疫平衡。

綜上所述，DC細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)的重要組成部分，接觸抗原或炎癥因子的影響下可遷移、分化成熟、提呈抗原刺激T細(xì)胞活化，啟動(dòng)機(jī)體的適應(yīng)性免疫；亦可誘導(dǎo)免疫耐受、參與免疫調(diào)節(jié)。分布于皮膚中不同類型的DC細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、T細(xì)胞之間相互作用，誘導(dǎo)T細(xì)胞分化參與銀屑病發(fā)病。然而，DC細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)是否發(fā)揮初始啟動(dòng)炎癥反應(yīng)，病程中是否有免疫調(diào)節(jié)功能，是否還有其他未定類DC細(xì)胞參與炎癥反應(yīng)，尚待研究。

［1］Monteleone G,Pallone F,MacDonald TT,et al.Psoriasis:from pathogenesis to novel therapeutic approaches ［J］.Clin Sci（Lond）,2011,120（1）:1-11.

［2］Ganguly D,Haak S,Sisirak V,et al.The role of dendritic cells in autoimmunity［J］.Nat Rev Immunol,2013,13（8）:566-577.

［3］Collin M,McGovern N,Haniffa M.Human dendritic cell subsets［J］.Immunology,2013,140（1）:22-30.

［4］Merad M,Ginhoux F,Collin M.Origin,homeostasis and function of Langerhans cells and other langerin-expressing dendritic cells［J］.Nat Rev Immunol,2008,8（12）:935-947.

［5］Zaba LC,Krueger JG,Lowes MA.Resident and “inflammatory”dendritic cells in human skin ［J］.J Invest Dermatol,2009,129（2）:302-308.

［6］Michalak-Stoma A,Pietrzak A,Szepietowski JC,et al.Cytokine network in psoriasis revisited ［J］.Eur Cytokine Netw,2011,22（4）:160-168.

［7］Mathers AR,Janelsins BM,Rubin JP,et al.Differential capability of human cutaneous dendritic cell subsets to initiate Th17 responses［J］.J Immunol,2009,182（2）:921-933.

［8］Fujita H,Nograles KE,Kikuchi T,et al.Human Langerhans cells induce distinct IL-22-producing CD4+T cells lacking IL-17 production ［J］.Proc Natl Acad Sci U S A,2009,106 （51）:21795-21800.

［9］Hyder LA,Gonzalez J,Harden JL,et al.TREM-1 as a potential therapeutic target in psoriasis ［J］.J Invest Dermatol,2013,133（7）:1742-1751.

［10］Kim TG,Jee H,Fuentes-Duculan J,et al.Dermal clusters of mature dendritic cells and T cells are associated with the CCL20/CCR6 chemokine system in chronic psoriasis［J］.J Invest Dermatol,2014,134（5）:1462-1465.

［11］Alonso MN,Wong MT,Zhang AL,et al.Th1,Th2,and Th17 cells instruct monocytes to differentiate into specialized dendritic cell subsets［J］.Blood,2011,118（12）:3311-3320.

［12］Seneschal J,Clark RA,Gehad A,et al.Human epidermal Langerhans cells maintain immune homeostasis in skin by activating skin resident regulatory T cells ［J］.Immunity,2012,36（5）:873-884.

［13］Zaba LC,Fuentes-Duculan J,Eungdamrong NJ,et al.Psoriasis is characterized by accumulation of immunostimulatory and Th1/Th17 cell-polarizing myeloid dendriticcells ［J］.JInvest Dermatol,2009,129（1）:79-88.

［14］Teunissen MB,Zheng L,de Groot M,et al.Rise in dermal CD11c+dendritic cells associates with early-stage development of psoriatic lesions［J］.Arch Dermatol Res,2012,304（6）:443-449.

［15］Tortola L,Rosenwald E,Abel B,et al.Psoriasiform dermatitis is driven by IL-36-mediated DC-keratinocyte crosstalk ［J］.J Clin Invest,2012,122（11）:3965-3976.

［16］Skrzeczynska-Moncznik J,Wlodarczyk A,Zabieglo K,et al.Secretory leukocyte proteinase inhibitor-competent DNA deposits are potent stimulators of plasmacytoid dendritic cells:implication for psoriasis［J］.J Immunol,2012,189（4）:1611-1617.

［17］Skrzeczynska-Moncznik J,Wlodarczyk A,Banas M,et al.DNA structures decorated with cathepsin G/secretory leukocyte proteinase inhibitor stimulate IFNI production by plasmacytoid dendritic cells ［J］.Am J Clin Exp Immunol,2013,2 （2）:186-194.

［18］Nestle FO,Di Meglio P,Qin JZ,et al.Skin immune sentinels in health and disease［J］.Nat Rev Immunol,2009,9（10）:679-691.

［19］Ueyama A,Yamamoto M,Tsujii K,et al.Mechanism of pathogenesis of imiquimod-induced skin inflammation in the mouse:a role for interferon-alpha in dendritic cell activation by imiquimod［J］.J Dermatol,2014,41（2）:135-143.

［20］Shaw FL,Cumberbatch M,Kleyn CE,et al.Langerhans cell mobilization distinguishes between early-onset and late-onset psoriasis［J］.J Invest Dermatol,2010,130（7）:1940-1942.

［21］Shaw FL,Mellody KT,Ogden S,et al.Treatment-related restoration of Langerhans cell migration in psoriasis ［J］.J Invest Dermatol,2014,134（1）:268-271.

Relationship between dendritic cell subsets and psoriasis

Zhang Liangyu,Chen Yang,Wang Xiang.Department of Dermatology,98th Hospital of People′s Liberation Army,Anhui Medical University,Huzhou 313000,Zhejiang,China

Chen Yang,Email:98cy@163.com

Psoriasis is a chronic inflammatory and immunologic disease of unknown etiology.It has been found that increased number of dendritic cells （DCs） and effector T-lymphocytes infiltrate skin lesions of psoriasis,indicating that DCs are involved in the inflammatory response in psoriasis.In normal skin,there are mainly three kinds of DCs:epidermal Langerhans cells,dermal myeloid DCs and plasmacytoid DCs.In skin lesions of psoriasis,the three kinds of DCs interact with T cells,keratinocytes and neutrophilic granulocytes,which can induce and aggravate inflammatory responses.In addition,type I interferon secreted by plasmacytoid DCs in a Toll-like receptor-dependent manner can enhance the activation of myeloid DCs and release of inflammatory mediators.

Psoriasis;Dendritic cells;Antigens,CD11c

10.3760/cma.j.issn.1673-4173.2015.01.013

全軍醫(yī)學(xué)科技青年培育項(xiàng)目（13QNP045）；南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)科技創(chuàng)新重點(diǎn)項(xiàng)目（12Z03）

313000浙江湖州，安徽醫(yī)科大學(xué)解放軍第九八臨床學(xué)院解放軍98醫(yī)院皮膚科

陳楊，Email:98cy@163.com

本文主要縮寫(xiě)：DC：樹(shù)突細(xì)胞，LC：朗格漢斯細(xì)胞，iNOS：誘導(dǎo)型NO合酶，LAMP：溶酶體相關(guān)膜蛋白，SLPI：分泌型粒細(xì)胞蛋白酶抑制劑，NET：中性粒細(xì)胞外網(wǎng)，HNE：人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶，GatG：組織蛋白酶G

2014-03-08）