淮南地區(qū)食用菌粉螨孳生研究（粉螨亞目）

徐朋飛，李 娜，徐海豐，祝海濱，李朝品，

淮南地區(qū)食用菌粉螨孳生研究（粉螨亞目）

徐朋飛1，李 娜2，徐海豐1，祝海濱1，李朝品1，2

目的調(diào)查淮南地區(qū)食用菌孳生粉螨種類及生物多樣性。方法分別于1～5月份、8～12月份（每月1次），從食用菌種植基地采取6種食用菌及其培養(yǎng)料。采用直接鏡檢法、避光爬附法和電熱集螨法分離粉螨、制片與鑒定。計(jì)算樣本中物種多樣性（Shannon-Wiener指數(shù)）、物種豐富度（Margalef指數(shù)）和物種均勻度（Pielou指數(shù)）。結(jié)果淮南地區(qū)食用菌中共分離出5種粉螨，隸屬于3科4屬。1年中粉螨的物種多樣性指數(shù)為1.606～1.683，其中3、4月份最高，1月份最低；物種豐富度指數(shù)為0.502～0.982，其中4月份最高，8月份最低；物種均勻度指數(shù)為1.003～1.493，其中8月份最高，11月份最低。結(jié)論淮南地區(qū)食用菌中有多種粉螨孳生。對此應(yīng)采取有效措施控制粉螨孳生，以防食用菌質(zhì)量和產(chǎn)量下降。

粉螨；食用菌；淮南

食用菌不僅味道鮮美、營養(yǎng)豐富，而且具有一定的藥用價(jià)值，深受廣大消費(fèi)者的喜愛。近年來，由于種植食用菌能帶來良好經(jīng)濟(jì)效益，產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，目前我國已成為世界食用菌產(chǎn)業(yè)大國，產(chǎn)量約占全球總產(chǎn)80%［1］。然而，食用菌生產(chǎn)常遭受害蟲侵襲，常見害蟲有螨類、菇蚊、菇癭、跳蟲、線蟲類等。其中螨類的危害是影響食用菌質(zhì)量和產(chǎn)量重要因素之一［2］。國外已報(bào)道［3］的食用菌螨類有8科20余種，其中粉螨和矮蒲螨是危害食用菌生產(chǎn)的主要螨種。江佳佳等［4］報(bào)道，食用菌及其培養(yǎng)料中孳生螨類共16科24屬43種，其中粉螨有4科11屬20種。近年來淮南地區(qū)的食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，為了解該地區(qū)食用菌栽培過程中粉螨孳生情況，該研究選擇了該地區(qū)4個(gè)食用菌種植基地，對粉螨的孳生情況進(jìn)行了調(diào)查，并對其進(jìn)行了生物多樣性分析，結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本 樣本采集于淮南地區(qū)4個(gè)較大的食用菌種植基地，分別采集6種食用菌，即：香菇（Lentinus edodes）、平菇（Pleurotus ostreature）、金針菇（Flammulina velutipes）、白靈菇（Pleurltus nebrodensis）、雙胞蘑菇（Button mushroom）和雞腿蘑（Coprinus comatus）。每個(gè)種植基地每月采集樣本1次（6～7月份除外），分別采集食用菌樣本100 g／份、食用菌菌種10 g／份以及食用菌培養(yǎng)料100 g／份。由于6～7月份氣候炎熱，菇房內(nèi)溫濕度難以控制，食用菌停止栽培。因此，6～7月份未能采集。

1.1.2 試劑 奧氏保存液（70%乙醇溶液、冰乙酸、甘油），臨時(shí)封固劑（酚、乳酸、甘油、木桃紅），多乙烯乳酸酚封固劑（多乙烯醇粉、無水乙醇、酚、乳酸）；參考李朝品等［5］推薦的方法配置。

1.1.3 儀器 電熱集螨器（Tullger集螨器，自制）；SMZ800型Nikon體視顯微鏡、E400型Nikon熒光顯微鏡（日本尼康公司）；CH20-BIM型Olympus顯微鏡（日本奧林巴斯公司）；XTB-C型體視顯微鏡（桂林光學(xué)儀器廠）；藍(lán)天8411型電動(dòng)振篩分離器（上虞向陽五金紗篩廠）；HH·B11·360-S-Ⅱ電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；DWS 508C／D型電子濕溫度計(jì)（北京亞光儀器有限責(zé)任公司）；PL602-S／00型電子天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司）等。

1.2 方法

1.2.1 樣本的采集與分離 將食用菌培養(yǎng)料和菌種樣本分別放入電動(dòng)振篩分離器，得到各自的實(shí)體部分和塵渣部分樣本。菌種和食用菌培養(yǎng)料的塵渣部分樣本采用避光爬附法分離螨，實(shí)體部分樣本則采用電熱集螨法收集螨；而食用菌樣本采用直接鏡檢法在體視顯微鏡下直接挑取螨。

1.2.2 粉螨標(biāo)本的保存 用零號毛筆或毛發(fā)針挑取粉螨，放入50%～70%的熱乙醇溶液（70～80℃）中固定，使螨體伸展，姿勢正常；記錄該螨采集地點(diǎn)、時(shí)間、寄主、采集地溫濕度等，隨螨一起放入裝有奧氏保存液的指管中，脫酯棉塞塞口，放入裝有同樣保存液的廣口瓶內(nèi)，以軟木塞塞口，此法亦稱為雙重溶液浸漬法。

1.2.3 螨標(biāo)本的制作

1.2.3.1 臨時(shí)標(biāo)本的制作 將螨直接封入50%～100%乳酸中，于60℃左右的板上加熱，冷卻后即可；骨化不明顯的粉螨用乳酸木桃紅，使表皮染色。1.2.3.2 永久標(biāo)本的制作 將螨置于封固劑內(nèi)，用毛發(fā)針輕輕攪動(dòng)清洗；將清洗過后的粉螨移到加有適量封固劑的載玻片上，加蓋玻片。將載玻片放在酒精燈上加熱，至封固劑出現(xiàn)氣泡或者開始沸騰時(shí)停止加熱，冷卻干燥后，在蓋玻片周圍涂封一層無色指甲油防止封固劑發(fā)霉。最后在載玻片的右邊粘貼標(biāo)簽，標(biāo)明粉螨的學(xué)名、漢名、采集時(shí)間、地點(diǎn)、寄主以及采集者姓名等。

1.3 螨種的鑒定采用李朝品等［5］推薦的方法鑒定螨種。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

1.4.1 平均孳生密度 D＝N／T，式中N是指所有孳生粉螨個(gè)體總數(shù)，T是指樣本總重量。

1.4.2 物種豐富度指數(shù) 采用Margalef指數(shù)，Rmargalef＝（S-1）／lnN，式中S是指物種數(shù)目，N是指所有物種個(gè)體總數(shù)。

1.4.3 物種多樣性指數(shù) 采用Shannon-Wiener指數(shù)，H’＝-ΣPilnPi，式中Pi＝Ni／N，是指一個(gè)個(gè)體屬于第i種的概率。

1.4.4 物種均勻度指數(shù) 采用Pielou指數(shù)，J＝H’／Hmax，式中Hmax＝lnS。

2 結(jié)果

2.1 食用菌中分離出的粉螨種類從樣本中共分離出5種粉螨，隸屬于3科4屬。分別為粉螨科食酪螨屬（Tyrophagus）中的腐食酪螨（Tyrophagus putrescentiae），從香菇、平菇、金針菇和雞腿蘑中分離；粉螨科嗜木螨屬（Caloglyphus）中的食菌嗜木螨（Caloglyphus mycophagus）和伯氏嗜木螨（Caloglyphus berlesei），食菌嗜木螨從香菇、平菇和雙胞蘑菇中分離，伯氏嗜木螨從香菇、平菇、金針菇和雞腿蘑中分離；食甜螨科嗜鱗螨屬（Lepidoglyphus）中的害嗜鱗螨（Lepidoglyphus destructor），從6種食用菌均分離出該螨；薄口螨科薄口螨屬（Histiostoma）中的速生薄口螨（Histiostoma feroniarum），僅從香菇和金針菇中檢獲。

2.2 食用菌中粉螨孳生情況對不同時(shí)期食用菌中孳生粉螨的種類和數(shù)目進(jìn)行調(diào)查分析，具體情況如下。

2.2.1 食用菌中孳生粉螨的種類 據(jù)統(tǒng)計(jì)，4、5、9、10、11月份有5種粉螨孳生，3、12月份有4種，其余月份只有3種。見圖1。

2.2.2 食用菌中孳生粉螨的數(shù)量 不同時(shí)期粉螨孳生數(shù)量用平均孳生密度（平均每克樣本中孳生粉螨的數(shù)量，只／g）表示。據(jù)統(tǒng)計(jì)，1～5月份和8～12月份的平均孳生密度依次為3.725、3.517、6.445、9.802、11.935、8.962、9.992、12.957、10.840、6.530只／g，其中10月份最高，2月份最低。見圖2。

2.3 多樣性分析經(jīng)檢測，菇房的溫度基本維持在20～35℃，濕度保持在55%～80%，光照條件不佳，通風(fēng)情況較差，非常適宜粉螨生長繁殖。本實(shí)驗(yàn)通過Margalef指數(shù)、Shannon-Wiener指數(shù)和Pielou指數(shù)對調(diào)查資料進(jìn)行群落多樣性分析，具體情況如下。

2.3.1 食用菌粉螨物種豐富度 據(jù)統(tǒng)計(jì)，1～5月份和8～12月份的Margalef指數(shù)依次為0.644、0.656、0.821、0.982、0.937、0.502、0.977、0.919、0.959、0.818，其中5月份物種豐富度最高，8月份最低。見圖3。

2.3.2 食用菌粉螨物種多樣性 據(jù)統(tǒng)計(jì)，1～5月份和8～12月份的Shannon-Wiener指數(shù)依次為1.606、1.614、1.683、1.675、1.657、1.641、1.656、1.657、1.616、1.642，其中3月份物種多樣性最高，1月份最低。見圖4。

2.3.3 食用菌粉螨物種均勻度 據(jù)統(tǒng)計(jì)，1～5月份和8～12月份的Pielou指數(shù)依次為1.462、1.469、1.214、1.040、1.029、1.493、1.029、1.030、1.003、1.184，其中8月份物種均勻度指數(shù)最高，11月份最低。見圖5。

3 結(jié)論

粉螨隸屬于蛛形鋼（Arachnida），蜱螨亞綱（Acari），真螨目（Acariformes），粉螨亞目（Acaridida），是一種廣泛分布于世界各地的小型節(jié)肢動(dòng)物。Hughes（1976）將粉螨亞目分為7科，分別為粉螨科（Acaridae）、嗜渣螨科（Chortoglyphidae）、食甜螨科（Glycyphagidae）、果螨科（Carpoglyphidae）、薄口螨科（Histiostomidae）、脂螨科（Lardoglyphidae）以及麥?zhǔn)瞅疲≒yrolyphidae）。粉螨常孳生于食用菌及其培養(yǎng)料，可危害食用菌的制種和栽培，也是導(dǎo)致食用菌產(chǎn)量和質(zhì)量下降的主要因素之一［6］。粉螨是一種全球性的過敏原，螨體及其代謝產(chǎn)物均可引起過敏性哮喘、過敏性鼻炎、過敏性皮炎等超敏反應(yīng)性疾病，嚴(yán)重時(shí)可危及患者生命［7］。此外，某些生存力強(qiáng)的種類也可在人的消化道、呼吸道、泌尿道等部位寄生引起人體內(nèi)螨病，應(yīng)引起栽培者的注意。

超敏反應(yīng)性疾病在世界范圍內(nèi)有快速上升的趨勢，世界變態(tài)反應(yīng)組織（WAO）在若干個(gè)國家對12億人口進(jìn)行超敏反應(yīng)性疾病調(diào)查，結(jié)果顯示有22%的人患有不同類型的變態(tài)反應(yīng)性疾病。而螨類是引起變態(tài)反應(yīng)性疾病重要的變應(yīng)原，每克室內(nèi)灰塵中最多可有數(shù)千只螨［8］。而粉螨與人類變態(tài)反應(yīng)性疾病關(guān)系最為密切，其中塵螨1、2類變應(yīng)原是主要變應(yīng)原，大量存在于床墊粉塵中，80%的哮喘患者對室內(nèi)變應(yīng)原過敏［9］。陳木開等［10］報(bào)道螨類是引起過敏性皮炎最常見的變應(yīng)原，患者血清與屋塵螨和粉塵螨特異性IgE反應(yīng)陽性檢出率分別為50.0%和47.8%。研究［11］顯示引起變應(yīng)性鼻炎的主要變應(yīng)原是粉螨。據(jù)以往職業(yè)人群粉螨性變態(tài)反應(yīng)感染的報(bào)道［12］，食用菌栽培者粉螨性變態(tài)反應(yīng)感染率明顯偏低，其原因可能是因?yàn)槭秤镁脑耘嘁蠊椒?、工具等必須保持清潔，減少了粉螨的孳生機(jī)率。但是，為提高食用菌的產(chǎn)量和質(zhì)量，也為保護(hù)栽培者以及食用者，仍應(yīng)做好粉螨的防治工作。

近年來隨著我國食用菌產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展，螨類對食用菌生產(chǎn)中的危害逐漸受到栽培者的重視。害螨是食用菌生產(chǎn)中的突出問題，輕則延緩發(fā)菌和出菇，重則是食用菌產(chǎn)量大幅度下降甚至絕收［13］。為了了解食用菌中孳生粉螨群落多樣性的季節(jié)變化，本研究對淮南地區(qū)食用菌中粉螨進(jìn)行了全年的多樣性分析，以期對粉螨的防治有一定的指導(dǎo)意義。調(diào)查結(jié)果顯示，6種食用菌中均有一定數(shù)量的粉螨孳生，共檢測出5種粉螨，其中害嗜鱗螨對6種食用菌均有侵害。一年之中粉螨在食用菌中孳生有兩個(gè)高峰期，分別為4～5月份和9～11月份，粉螨群落中的物種數(shù)也相應(yīng)最多；而在12～2月份孳生密度較低，物種數(shù)也最低。粉螨群落的物種豐富度指數(shù)的變化趨勢也在4～5月份和9～11月份出現(xiàn)兩個(gè)高峰期，而低谷期在8月份，與物種數(shù)的變化趨勢相似，這是因?yàn)樨S富度指數(shù)反映出的就是物種數(shù)目的多少。8月份粉螨孳生密度和物種數(shù)表現(xiàn)為低谷期，可能是因?yàn)?、7月份食用菌停止栽培并清潔菇房，致使8月份雖溫濕度適宜，但粉螨孳生較少。粉螨群落的物種多樣性指數(shù)變化在3月份和10月份出現(xiàn)兩個(gè)高峰期，而11月份為低谷期，這是因?yàn)?月份和10月份物種數(shù)和孳生密度呈上升趨勢，而11月份孳生密度開始呈下降趨勢。粉螨群落的均勻度指數(shù)在1～2月份和8月份出現(xiàn)兩個(gè)高峰期，在11月份出現(xiàn)低谷期，這可能是因?yàn)樵?～2月份和8月份粉螨孳生密度不高，并且物種數(shù)也較少，因此物種分部相對均勻，而11月份粉螨物種數(shù)最高但其孳生密度呈下降趨勢，因此物種分布相對不夠均勻。

綜上所述，1年中粉螨孳生變化出現(xiàn)兩個(gè)高峰期，與俞木青［14］報(bào)道的基本相似。本研究是以部分推算整體的方法，對所得資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，反映出1年中粉螨群落組成和物種多樣性，該結(jié)果可對淮南地區(qū)食用菌中粉螨防治起到參考作用。粉螨的防治措施應(yīng)以防為主，防治結(jié)合?？稍诠椒克闹車姙硵澄罚―DV）殺滅成蟲或幼蟲，保持菇房內(nèi)的良好通風(fēng)環(huán)境；避免使用過夏的老菌種，不要在秋季高溫期播種，新舊均袋分開放置，及時(shí)踢出死菇和殘根；培養(yǎng)料可利用高溫和低溫處理來滅螨，及使培養(yǎng)料溫度長時(shí)間維持在50～60℃殺死螨蟲之后，冷卻至25℃再播上菌種。Jess et al［15］還報(bào)道了用捕食性益螨可有效防治螨蟲。結(jié)合以上防治措施，參照本研究結(jié)果，在粉螨孳生的高峰期重點(diǎn)做好粉螨的防治工作，工作人員做好自我防護(hù)措施，以期使食用菌的質(zhì)量與產(chǎn)量均得到進(jìn)一步的發(fā)展。

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Investigation on the breeding of acaroid mites（Acaridida）in edible mushrooms in Huainan district

Xu Pengfei1，Li Na2，Xu Haifeng1，et al
（1School of Medicine，Anhui University of Science and Technology，Huainan 232001；2Dept of Medical Parasitology，Wannan Medical College，Wuhu 241002）

ObjectiveTo investigate the biodiversity of acaroid mites breeding in the edible mushrooms in Huainan of Anhui province，China.MethodsSix species of edible mushrooms，together with their composts，were collectedfrom different mushroom cultivation plants from January to May and August to December（Sample collection was carried out once each month）.The acaroid mites were separated and identified from the samples with stereoscopy and microscopy，galvanothermy and tullgren techniques.The richness index，biodiversity and species evenness were estimated with Shannon-Wiener index，Margalef index and Pielou index，respectively.ResultsFive species of acaroid mites，belonging to 4 genera under 3 families，were identified from the total samples.Annual Shannon-Wiener indices were from 1.606 to 1.683，and peaked in March and April，but were lowest in January.The Margalef indices were ranged from 0.502 to 0.982，which was highest in April and lowest in August.Pielou indices stayed between 1.003 and 1.493，which was maximal in August and minimal in November.ConclusionA variety of species of acaroid mites breed in the edible mushrooms in Huainan，for which effective measures should be taken to prevent the mushrooms from quality degradation and yield reduction.

acaroid mites；edible mushroom；Huainan

R 384.4

A

1000-1492（2015）12-1721-05

時(shí)間：2015-11-18 10：12：34

http：／／www.cnki.net／KCMS／detail／34.1065.R.20151118.1012.006.html

2015-05-22接收

國家自然科學(xué)基金（編號：81270091）；安徽省自然科學(xué)基金（編號：070413088）

1安徽理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院，淮南 232001

2皖南醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)寄生蟲學(xué)教研室，蕪湖 241002

徐朋飛，女，碩士研究生；

李朝品，男，教授，博士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E-mail：cpli001＠126.com