結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值

張景艷 榮幸 王守芹

結(jié)核病多由結(jié)核菌入侵機(jī)體多種組織器官引發(fā)所致，嚴(yán)重影響患者生命健康[1]。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，近年來(lái)我國(guó)因結(jié)核病致死的人數(shù)已超過(guò)13萬(wàn)人次/年[2]。為了探索更加高效準(zhǔn)確的結(jié)核病檢測(cè)路徑，本文就結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT試驗(yàn)）在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值展開了研究，現(xiàn)整理如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年11月—2017年11月來(lái)我院就診的327例疑似結(jié)合病患者作為研究對(duì)象，患者男173例，女154例；年齡29～54歲，平均（46.07±3.29）歲。以臨床綜合診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，A組為TST檢測(cè)結(jié)果，B組為T-SPOT檢測(cè)結(jié)果。

1.2 方法

全部患者均行TST和T-SPOT試驗(yàn)檢測(cè)。（1）TST檢測(cè)：采用PPD（包含5單位結(jié)核菌素）0.1 ml對(duì)患者前臂尺側(cè)實(shí)施皮內(nèi)檢測(cè)試驗(yàn)，2 d后觀察結(jié)果，硬結(jié)直徑≥10 mm即為陽(yáng)性[3]。（2）T-SPOT試驗(yàn)檢測(cè)[2]：首先對(duì)患者行外周靜脈血液抽取5 ml作業(yè)，分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），在含有抗IFN－γ的4個(gè)微量板孔中依此加入不同種類的陽(yáng)性對(duì)照物（植物血凝素、A抗原早期分泌性靶抗原6、陰性對(duì)照細(xì)胞培養(yǎng)液、B抗原濾液培養(yǎng)蛋白10） ，然后分別向各孔中添加濃度2×105的PBMC，置于CO2恒溫培養(yǎng)箱中保存20 h，溫度37℃。最后采用磷酸鹽緩沖溶液 （PBS）對(duì)其行洗脫處理，添加堿性磷酸酶標(biāo)記過(guò)的抗干擾素抗體，于室溫條件下行2 h孵育處理，洗脫處理后以PBS溶液終止反應(yīng)過(guò)程，進(jìn)行斑點(diǎn)計(jì)數(shù)，測(cè)量孔點(diǎn)數(shù)＞陰性對(duì)照的2倍或是點(diǎn)數(shù)與陰性對(duì)照相比較＞5個(gè)點(diǎn)則為陽(yáng)性[4]。其中A組僅對(duì)TST檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，B組僅對(duì)T-SPOT檢測(cè)進(jìn)行分析。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）以金標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)，對(duì)A組、B組得出的診斷結(jié)果進(jìn)行分析。（2）比較兩組檢測(cè)方法的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

運(yùn)用SPSS 20.0軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用（%、n）表示，以χ2檢驗(yàn)，P＜0.05代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組檢測(cè)結(jié)果和金標(biāo)準(zhǔn)診斷結(jié)果對(duì)比

由金標(biāo)準(zhǔn)診斷結(jié)果可知，327例疑似結(jié)合病患者共包括結(jié)核病115例，非結(jié)核病212例，以此為參照標(biāo)準(zhǔn)，A、B兩組檢測(cè)結(jié)果與臨床綜合診斷結(jié)果對(duì)比如下所示：A組真陽(yáng)82例，假陰33例，假陽(yáng)59例，真陰153例；B組真陽(yáng)98例，假陰17例，假陽(yáng)24例，真陰188例。

2.2 兩種不同檢測(cè)方法的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性分析

A組檢測(cè)方法的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性依次為71.30%（82/115）、72.17%（153/212） 和 71.87%（235/327）。B組檢測(cè)方法的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性分別為85.22%（98/115）、88.68%（188/212）和87.46%（286/327）。A、B組兩組診斷敏感性（χ2=6.54，P=0.01）、特異性（χ2=18.35，P=0.00）和準(zhǔn)確性（χ2=24.55，P=0.00）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

目前臨床多采用細(xì)菌學(xué)診斷方法對(duì)結(jié)核病進(jìn)行臨床診斷，然而實(shí)踐證明此方法具有檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)、檢測(cè)過(guò)程相對(duì)復(fù)雜、早期檢出率較低等缺陷[5]。因此為了做到提早發(fā)現(xiàn)、及時(shí)治療，臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域加大了對(duì)結(jié)核病檢測(cè)方法的研究力度，以便及早發(fā)現(xiàn)結(jié)核病例，改善預(yù)后恢復(fù)效果。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步與發(fā)展，T-SPOT試驗(yàn)檢測(cè)已成為臨床診斷肺結(jié)核的有效方式，并在臨床中得到了逐步應(yīng)用與推廣。T-SPOT試驗(yàn)主要通過(guò)運(yùn)用結(jié)合分支桿菌抗原對(duì)PBMC發(fā)揮刺激作用，同時(shí)通過(guò)IFN－γ釋放的特異性抗原T淋巴細(xì)胞的具體反應(yīng)情況，對(duì)患者進(jìn)行結(jié)核感染狀態(tài)判斷，較少受到人體免疫狀態(tài)的客觀影響，具有較高檢測(cè)敏感性和特異性[6]。另有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，與常規(guī)的TST檢測(cè)方法相比較，T-SPOT試驗(yàn)檢測(cè)法在結(jié)核病例診斷中具有較高的診斷敏感性和準(zhǔn)確性，其診斷準(zhǔn)確性可達(dá)到90.86%[7]。臨床實(shí)踐中為了進(jìn)一步提高診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，還需結(jié)合影像學(xué)檢測(cè)、組織病理學(xué)、病原學(xué)檢查、對(duì)抗癆治療反應(yīng)和臨床癥狀表現(xiàn)等途徑進(jìn)行結(jié)核病例的輔助篩查，減少誤診、漏診情況[8]。本文研究發(fā)現(xiàn)，327例疑似結(jié)核病患者包括結(jié)核病115例，非結(jié)核病212例。其中B組檢測(cè)方法的診斷敏感性85.22%、特異性88.68%和準(zhǔn)確性87.46%，均明顯優(yōu)于A組的71.30%、72.17%和71.87%，組間數(shù)據(jù)對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說(shuō)明B組結(jié)核病有效檢出率更高，在陽(yáng)性預(yù)測(cè)、陰性預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確度方面更具優(yōu)勢(shì)。

綜上所述，采用結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)檢測(cè)法對(duì)疑似結(jié)核病病例進(jìn)行結(jié)核病檢查具有較高的診斷敏感性、特異性和準(zhǔn)確性，能夠有效提高結(jié)核病陽(yáng)性檢出率，改善結(jié)核病誤診、漏診情況，幫助醫(yī)師及早發(fā)現(xiàn)結(jié)核病例，促使患者提早就醫(yī)治療，有助于改善預(yù)后。

[1] 楊雪梅. 探討結(jié)核感染T淋巴細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核診斷中的價(jià)值[J]. 中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理，2017，8（10）：118-119.

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