• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    西瓜抗枯萎病種質(zhì)資源的分子標(biāo)記篩選研究

    2015-03-18 12:22:44王吉明李楠楠尚建立李娜徐永陽(yáng)馬雙武
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年32期
    關(guān)鍵詞:感病枯萎病抗病

    王吉明,李楠楠,尚建立,李娜,徐永陽(yáng),馬雙武

    (中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所,河南鄭州450009)

    西瓜枯萎病是由半知菌亞門鐮孢屬尖孢鐮刀菌西瓜?;?Fusarium oxysporum f.sp.niveurn)寄生引起的一種世界性真菌土傳病害,嚴(yán)重制約西瓜的生產(chǎn)[1-4]。目前西瓜抗枯萎病育種主要采用人工接種鑒定技術(shù)進(jìn)行抗性選擇,易受環(huán)境和接種技術(shù)的影響,存在鑒定時(shí)間長(zhǎng)、準(zhǔn)確性差、鑒定效率低等缺點(diǎn),分子標(biāo)記技術(shù)鑒定具有不易受環(huán)境影響,鑒定時(shí)間短,準(zhǔn)確性高,鑒定效率高等優(yōu)點(diǎn),可作為分子輔助選擇的重要工具,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,研究者已對(duì)西瓜枯萎病病菌1號(hào)生理小種的抗病基因(Fon-1)進(jìn)行定位[5-8]。筆者采用張屹等[8]發(fā)表的西瓜枯萎病生理小種1抗性基因緊密連鎖Caps標(biāo)記“fon_7716”對(duì)130份不同類型西瓜種質(zhì)進(jìn)行抗性基因分子檢測(cè)分析,以期為西瓜抗枯萎病抗原篩選和分子輔助育種提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料 供試材料為國(guó)家西瓜甜瓜中期庫(kù)(河南,鄭州)提供的西瓜種質(zhì)資源,包括地方品種、育成品種(系)和野生種質(zhì),共計(jì)130份(表1),具有較為廣泛的代表性。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 DNA提取。于西瓜果實(shí)膨大期取蔓上幼嫩真葉用于基因組 DNA的提取,采取 CTAB法提取基因組 DNA[9]。

    1.2.2 PCR 反應(yīng)體系。擴(kuò)增反應(yīng)體系 25 μl,包括 12.5 μl 2×Taq Master Mix,2 μl模板 DNA,10 μmol/μl上、下游混合引物2μl,ddH2O 8.5μl。擴(kuò)增反應(yīng)程序:94℃預(yù)變性 5 min;94℃ 20 s,55℃ 20 s,72℃ 30 s,34個(gè)循環(huán);72℃延伸5 min;4℃保存。2×Taq Master Mix購(gòu)自北京百泰客生物技術(shù)有限公司。引物7716_fon為張屹等[8]已發(fā)表的西瓜抗枯萎病基因分子標(biāo)記,由鉑尚生物技術(shù)(上海)有限公司合成。7716_fon 引 物 序 列 為:5′-TTAAAAATCATCTCCTCTTTAAAACTATT-3′,5′-ATATATTTGGTCTCCGAGTGTTCAA-3′。

    1.2.3 CAPS反應(yīng)與分析。PCR產(chǎn)物采用 Taq I進(jìn)行酶切,酶切識(shí)別位點(diǎn)為T′CGA,酶切體系為 15 μl,含有 1.5 μl 10 ×Buffer;1.0 μl限制內(nèi)切酶Taq I;5 μl PCR 產(chǎn)物,7.5 μl H2O。酶切程序:65℃酶切16 h,80℃變性20 min,4℃保存。限制性內(nèi)切酶購(gòu)自Fermentas公司。

    擴(kuò)增/酶切產(chǎn)物采用8.0%聚丙烯酰胺電泳,280 V恒定電壓下電泳50 min,銀染顯色后拍照分析;PCR產(chǎn)物酶切后電泳出單條帶170 bp判定為抗病基因型,出現(xiàn)單條帶104 bp為感病基因型,同時(shí)出現(xiàn)170和104 bp 2條帶為抗/感病雜合基因型。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 PCR及Caps酶切結(jié)果 130份西瓜種質(zhì)資源的總DNA提取后均擴(kuò)增出170 bp條帶,但條帶較淺;采用Taq I酶切后部分種質(zhì)的PCR產(chǎn)物出現(xiàn)104 bp條帶和一條70 bp左右的條帶,將170 bp和104 bp條帶判定為抗病和感病基因型(圖1)。

    2.2 種質(zhì)資源基因型鑒定 在130份種質(zhì)資源中,45份種質(zhì)資源表型為抗病基因型(+),80份種質(zhì)資源為感病基因型(-),5份種質(zhì)資源為抗/感病雜合基因型(+/-)(表1)。

    2.2.1 地方品種基因型鑒定。在34份地方品種類型種質(zhì)資源中,21份種質(zhì)鑒定為抗病基因型,占供試地方品種總數(shù)的61.8%??共』蛐头N質(zhì)包括著名的地方品種三白瓜、撫州瓜、馬鈴瓜、喇嘛瓜、陜西白、黑崩筋等食用西瓜,以及鄭州籽瓜、大板紅籽瓜、皋蘭籽瓜、寧夏紅籽瓜、大安子瓜等籽瓜。

    2.2.2 野生種質(zhì)資源基因型鑒定。選用13份野生種質(zhì)進(jìn)行了抗性基因型鑒定,結(jié)果鑒定出3份抗病基因型種質(zhì),分別為PI 494530、PI 494528、PI 595203,占供試野生種質(zhì)總數(shù)的23.1%,其余均為感病基因型種質(zhì)。

    2.2.3 育成品種基因型鑒定。在82份育成品種(系)類型種質(zhì)資源中,鑒定出21份抗病基因型種質(zhì),主要為久比例、Smokylee、Sugarlee等國(guó)外育成品種,以及紅1號(hào)、中育10號(hào)、中育1號(hào)和96B41等國(guó)內(nèi)育成品種(系),占供試育成品種(系)種質(zhì)總數(shù)的25.6%;另鑒定出5份雜合基因型種質(zhì),分別為 Jan-06、All Sweet、Dixielee、開雜5 號(hào)-1、AB 系;其余為感病基因型種質(zhì),主要為查理斯頓、Black Stone、Calhoun Gray、Black diamond、Crimson Sweet等國(guó)外育成品種和中育9號(hào)、興城紅、火洲1號(hào)、無(wú)杈早、蘇蜜1號(hào)、中汴一號(hào)等國(guó)內(nèi)育成品種。

    表1 西瓜種質(zhì)資源抗枯萎病生理小種1基因型鑒定

    續(xù)表1

    3 討論

    該研究采用Caps標(biāo)記“Fon_7716”對(duì)我國(guó)部分西瓜種質(zhì)資源包括地方品種、野生種質(zhì)、育成品種(系)3種不同類型的種質(zhì)資源進(jìn)行了抗枯萎病生理小種1的基因型鑒定,結(jié)果表明抗性基因型種質(zhì)比例偏高,如我國(guó)地方西瓜品種通常認(rèn)為不抗枯萎病,但在34份我國(guó)地方西瓜品種中,有21個(gè)品種表現(xiàn)為抗病基因型,抗性種質(zhì)比例高達(dá)61.8%,表明抗性基因型和表型抗性性狀之間出現(xiàn)一定的偏差,推測(cè)不同類型種質(zhì)資源之間存在較大的抗性背景遺傳差異,有待進(jìn)一步研究;此外一些公認(rèn)的抗性種質(zhì)如PI296341是目前認(rèn)為兼抗枯萎病生理小種0、1、2的材料,而Calhoun Gray則是開發(fā)“Fon_7716”標(biāo)記的抗性親本材料,這些種質(zhì)在該研究中均表現(xiàn)為感病基因型,出現(xiàn)這種情況可能與采用的試驗(yàn)材料與之前報(bào)道用的材料來(lái)源不同,或在繁殖更新過(guò)程中抗性基因丟失有關(guān)。在育成品種(系)中,Sugarlee、Smokylee、紅1號(hào)等是抗枯萎病育種中較為常用的抗性材料,該研究鑒定為抗病基因型,與表型抗性性狀相符。

    不同西瓜種質(zhì)資源材料其抗病基因可能各不相同,抗性遺傳和表型規(guī)律也相差很大,枯萎病抗性遺傳可能受多個(gè)基因協(xié)同控制[10-18],采用單一分子標(biāo)記難以全面從整個(gè)種質(zhì)資源角度篩選和鑒定抗性種質(zhì),因此十分有必要繼續(xù)從分子水平開展枯萎病的抗性遺傳和抗性機(jī)理研究,并開發(fā)更多緊密連鎖的分子標(biāo)記。

    [1]徐潤(rùn)芳,楊鼎新.我國(guó)西瓜抗枯萎病育種的進(jìn)展與前景[J].中國(guó)西瓜甜瓜,1992(1):2-5.

    [2]周鳳珍,康國(guó)斌.西瓜部分抗枯萎病材料的抗性遺傳研究[J].中國(guó)西瓜甜瓜,1996(2):17-18.

    [3]ZHANGZ G,ZHANGJY,WANG Y C,et al.Molecular detection of Fusarium oxysporum f.sp.niveum and Mycosphaerella melonis in infected plant tissues and soil[J].FEMSmicrobiol lett,2005,249(1):39-47.

    [4]徐瑞富,劉軟林,劉起麗,等.西瓜枯萎病菌的生物學(xué)特性研究[J].河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2013(2):36-40.

    [5]XU Y,OU Y X,ZHANG H Y,et al.Identification of a RAPD marker linked to Fusarium wilt resistant gene in wild watermelon germplasm(Citrullus lanatus var.citroides)[J].Acta botanicasinica,1999,41(9):952-955.

    [6]許勇,張海英,康國(guó)斌,等.西瓜抗枯萎病育種分子標(biāo)記輔助選擇的研究[J].遺傳學(xué)報(bào),2000,27(2):151-157.

    [7]LEIGH K,F(xiàn)ENNY D.Draft of RAPD map of watermelon[J].American society for horticultural science,2001,126(3):344-350.

    [8]張屹,張海英,郭紹貴,等.西瓜枯萎病菌生理小種1抗性基因連鎖標(biāo)記開發(fā)[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,46(10):2 085-2 093

    [9]MURRAY M G,THOMPSON W F.Rapid isolation of high molecular weight plant DNA[J].Nucleic acids research,1980,8(19):4 321-4 325.

    [10]GRALL J M.History and present status of watermelon improvement by breeding[J].Soil Sci,1953,13:71-74.

    [11]HENDERSON WR.The inheritance of Fusarium wilt resistance in watermelon[J].JAm Soc Hort Sci,1970,95:276-282.

    [12]NETZER D.Inheritance of resistance in watemelon to races of Fusarium oxysporurn[J].Plant disease,1980,164(9):853-854.

    [13]黃學(xué)森,張學(xué)煒,焦定量,等.西瓜部分品種抗枯萎病特性在 F1代中遺傳表現(xiàn)的初步探討[J].中國(guó)西瓜甜瓜,1991(2):11-15.

    [14]ZHANGX P,RHODESB.Inheritance of resistance to race0,1 and 2 of Fusarium oxysporum f.sp.niveum in Watermelon(Citrullus sp.P1296341)[J].CGCreport,1993,16:77-78.

    [15]周鳳珍,康國(guó)斌.西瓜抗枯萎病品種“卡紅”的抗病遺傳研究[J].植物病理學(xué),1996,26(3):261-262.

    [16]張國(guó)良,崔廣海.西瓜枯萎病抗性材料的轉(zhuǎn)育及遺傳規(guī)律的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),1999,27(6):616-618.

    [17]于利,徐潤(rùn)芳,趙有為.西瓜品種抗枯萎病遺傳研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),1995,11(1):45-48.

    [18]羊杏平,姚懷蓮,劉廣,等.西瓜品種枯萎病抗性的遺傳研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2008,24(6):882-887.

    猜你喜歡
    感病枯萎病抗病
    我國(guó)小麥基因組編輯抗病育種取得突破
    土壤pH和主要養(yǎng)分含量與山核桃干腐病的相關(guān)性研究
    5個(gè)歐亞種葡萄品種感染霜霉病后4種酶活性的變化
    bZIP轉(zhuǎn)錄因子在植物激素介導(dǎo)的抗病抗逆途徑中的作用
    葡萄新品種 優(yōu)質(zhì)又抗病
    非洲:控制香蕉枯萎病的新方法
    葡萄白粉病與幾種酶活性的關(guān)系
    番茄果實(shí)感染灰霉病過(guò)程中H2O2的抗病作用
    不同抗性甜瓜接種蔓枯病菌后若干生理指標(biāo)的變化
    銅、鋅元素對(duì)香蕉枯萎病的防治有顯著效果
    伦理电影大哥的女人| 精品人妻偷拍中文字幕| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲av熟女| 国产成人av教育| 黄色丝袜av网址大全| 人人妻人人看人人澡| 小说图片视频综合网站| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日本免费a在线| 麻豆成人午夜福利视频| 丁香六月欧美| 久久久久久九九精品二区国产| 一区福利在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 男人狂女人下面高潮的视频| 日本熟妇午夜| 婷婷色综合大香蕉| 啪啪无遮挡十八禁网站| 直男gayav资源| 国产成+人综合+亚洲专区| 久久精品人妻少妇| 床上黄色一级片| 男插女下体视频免费在线播放| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 精品福利观看| 热99在线观看视频| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲久久久久久中文字幕| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 一个人免费在线观看电影| x7x7x7水蜜桃| 久久久久久久久中文| 国产高潮美女av| 亚洲精品色激情综合| 一区二区三区免费毛片| 日本三级黄在线观看| 少妇高潮的动态图| 一进一出好大好爽视频| 禁无遮挡网站| 欧美最黄视频在线播放免费| 大型黄色视频在线免费观看| 国产亚洲欧美在线一区二区| 在线免费观看不下载黄p国产 | 久久精品91蜜桃| 久久精品国产清高在天天线| 午夜福利在线观看吧| 国产精品久久电影中文字幕| 白带黄色成豆腐渣| 国产免费av片在线观看野外av| 69av精品久久久久久| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 免费在线观看成人毛片| 国产熟女xx| 日韩欧美国产一区二区入口| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲不卡免费看| 国产乱人伦免费视频| av欧美777| 亚洲七黄色美女视频| 男人狂女人下面高潮的视频| 小说图片视频综合网站| 少妇的逼好多水| 俺也久久电影网| 天堂影院成人在线观看| 三级国产精品欧美在线观看| 成人特级av手机在线观看| 无人区码免费观看不卡| 色综合婷婷激情| 人人妻人人澡欧美一区二区| 免费搜索国产男女视频| 亚洲不卡免费看| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲av免费在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲人成伊人成综合网2020| 免费av观看视频| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲熟妇熟女久久| 久99久视频精品免费| 中文字幕高清在线视频| 色噜噜av男人的天堂激情| 啪啪无遮挡十八禁网站| 免费在线观看日本一区| 亚洲真实伦在线观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 老司机午夜十八禁免费视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲真实伦在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 桃色一区二区三区在线观看| 国内精品久久久久精免费| netflix在线观看网站| 在线观看66精品国产| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产高清视频在线观看网站| 色哟哟·www| 中文字幕熟女人妻在线| 毛片女人毛片| 欧美xxxx性猛交bbbb| 啪啪无遮挡十八禁网站| 夜夜爽天天搞| 午夜福利视频1000在线观看| 很黄的视频免费| 级片在线观看| 内射极品少妇av片p| 悠悠久久av| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 淫秽高清视频在线观看| a在线观看视频网站| 两人在一起打扑克的视频| 又爽又黄a免费视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产午夜福利久久久久久| 国产高清激情床上av| 亚洲国产欧美人成| 欧美性猛交黑人性爽| 91av网一区二区| 十八禁网站免费在线| a级毛片免费高清观看在线播放| 午夜老司机福利剧场| 如何舔出高潮| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产精品久久久久久久电影| 色噜噜av男人的天堂激情| 18禁在线播放成人免费| 成人性生交大片免费视频hd| 精品久久久久久久久久久久久| 欧美激情国产日韩精品一区| 99国产极品粉嫩在线观看| 变态另类丝袜制服| 最近最新免费中文字幕在线| 国内精品久久久久久久电影| 午夜久久久久精精品| 天堂影院成人在线观看| 丁香六月欧美| 成年女人看的毛片在线观看| 日本五十路高清| 亚洲18禁久久av| 免费人成视频x8x8入口观看| 精品无人区乱码1区二区| 脱女人内裤的视频| 久久精品91蜜桃| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 午夜亚洲福利在线播放| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 精品人妻1区二区| 日韩av在线大香蕉| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲电影在线观看av| 综合色av麻豆| 日韩欧美在线二视频| 国产一区二区三区视频了| 舔av片在线| 午夜福利成人在线免费观看| 国内精品美女久久久久久| 欧美一区二区国产精品久久精品| 午夜福利成人在线免费观看| 午夜福利高清视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久久久久九九精品二区国产| 国产黄色小视频在线观看| 午夜久久久久精精品| 亚洲 国产 在线| 69av精品久久久久久| 麻豆av噜噜一区二区三区| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 免费无遮挡裸体视频| av在线观看视频网站免费| 亚洲国产欧美人成| 成人性生交大片免费视频hd| 国产欧美日韩精品一区二区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| www.999成人在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 真实男女啪啪啪动态图| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 真人一进一出gif抽搐免费| 在线播放国产精品三级| 赤兔流量卡办理| 国产午夜福利久久久久久| 天堂√8在线中文| 国产麻豆成人av免费视频| 国产色婷婷99| 99久久精品一区二区三区| 麻豆成人av在线观看| 国产老妇女一区| 欧美bdsm另类| 久久99热这里只有精品18| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 午夜免费成人在线视频| 国产主播在线观看一区二区| 免费观看人在逋| 极品教师在线视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 高清日韩中文字幕在线| 国产精品女同一区二区软件 | 欧美黄色淫秽网站| 国产成人a区在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久精品国产自在天天线| 老鸭窝网址在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲第一区二区三区不卡| av欧美777| 欧美黑人欧美精品刺激| 久久久色成人| 国产成人欧美在线观看| 免费人成在线观看视频色| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 日本与韩国留学比较| 偷拍熟女少妇极品色| 99热6这里只有精品| 亚洲一区二区三区不卡视频| 午夜福利欧美成人| 一区二区三区四区激情视频 | 亚洲在线观看片| 国产精品99久久久久久久久| 成人av一区二区三区在线看| 久久久久久久久大av| 欧美黑人欧美精品刺激| 成人特级av手机在线观看| 最近在线观看免费完整版| 中出人妻视频一区二区| 波多野结衣巨乳人妻| 嫩草影视91久久| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲综合色惰| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产成人av教育| 9191精品国产免费久久| 亚洲精品在线观看二区| .国产精品久久| 亚洲第一区二区三区不卡| 99热只有精品国产| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产v大片淫在线免费观看| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产黄片美女视频| eeuss影院久久| 亚洲av一区综合| 毛片女人毛片| 欧美中文日本在线观看视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产精品99久久久久久久久| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 欧美日本视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 身体一侧抽搐| 亚洲精品粉嫩美女一区| 最近最新免费中文字幕在线| 久久精品国产亚洲av天美| 免费无遮挡裸体视频| 美女大奶头视频| 99在线人妻在线中文字幕| 午夜免费激情av| 中文在线观看免费www的网站| 赤兔流量卡办理| 91字幕亚洲| 欧美成人性av电影在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 国产乱人视频| 亚洲内射少妇av| 国产真实乱freesex| 欧美+日韩+精品| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 天堂动漫精品| 俺也久久电影网| 亚洲在线自拍视频| av天堂中文字幕网| 国产主播在线观看一区二区| 99riav亚洲国产免费| 91九色精品人成在线观看| 最新中文字幕久久久久| 嫩草影院新地址| 一级作爱视频免费观看| 99热精品在线国产| 中文字幕av成人在线电影| 综合色av麻豆| 国产日本99.免费观看| 在线播放无遮挡| 午夜福利欧美成人| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 日韩人妻高清精品专区| 久久精品影院6| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产精品电影一区二区三区| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 日本 欧美在线| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 成人一区二区视频在线观看| 人人妻人人澡欧美一区二区| 欧美成人a在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 天堂动漫精品| 麻豆成人午夜福利视频| 看黄色毛片网站| 亚洲精品一区av在线观看| 中国美女看黄片| 国产色爽女视频免费观看| 91久久精品电影网| 午夜福利免费观看在线| 欧美色视频一区免费| 赤兔流量卡办理| 高清日韩中文字幕在线| 精品人妻熟女av久视频| 丁香六月欧美| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 91在线精品国自产拍蜜月| 日韩大尺度精品在线看网址| 国内精品美女久久久久久| 91在线精品国自产拍蜜月| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 欧美日韩国产亚洲二区| 精品国产三级普通话版| 一级黄片播放器| 激情在线观看视频在线高清| 国产91精品成人一区二区三区| 男插女下体视频免费在线播放| 国产伦精品一区二区三区四那| 嫩草影视91久久| 中国美女看黄片| 波多野结衣巨乳人妻| 一进一出好大好爽视频| 极品教师在线视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 特大巨黑吊av在线直播| 国内精品美女久久久久久| 精品免费久久久久久久清纯| 高清在线国产一区| 一个人看视频在线观看www免费| 精品国产三级普通话版| 97热精品久久久久久| 成人美女网站在线观看视频| av国产免费在线观看| 97热精品久久久久久| 亚洲在线观看片| 国产高清视频在线播放一区| 最近中文字幕高清免费大全6 | 禁无遮挡网站| 午夜视频国产福利| 久久国产乱子伦精品免费另类| 夜夜爽天天搞| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 我的女老师完整版在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 窝窝影院91人妻| 国产精品av视频在线免费观看| 欧美激情在线99| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 毛片一级片免费看久久久久 | 亚洲人与动物交配视频| 黄色丝袜av网址大全| ponron亚洲| 欧美性感艳星| 老女人水多毛片| 精品一区二区三区人妻视频| 丁香欧美五月| bbb黄色大片| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 伦理电影大哥的女人| 长腿黑丝高跟| 又爽又黄无遮挡网站| 成年女人看的毛片在线观看| 成人特级av手机在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 深爱激情五月婷婷| bbb黄色大片| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产高清激情床上av| 亚洲人成电影免费在线| 国产精品乱码一区二三区的特点| 在线观看一区二区三区| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产91精品成人一区二区三区| 国产 一区 欧美 日韩| av欧美777| 午夜激情欧美在线| av天堂在线播放| 又爽又黄无遮挡网站| 婷婷色综合大香蕉| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 午夜两性在线视频| 俺也久久电影网| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 可以在线观看的亚洲视频| 国产三级中文精品| 老司机午夜福利在线观看视频| 久久精品国产自在天天线| 久久精品国产亚洲av天美| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲人成网站高清观看| 欧美性猛交黑人性爽| 韩国av一区二区三区四区| 深爱激情五月婷婷| 网址你懂的国产日韩在线| 性色avwww在线观看| 国产极品精品免费视频能看的| 国产淫片久久久久久久久 | 十八禁人妻一区二区| 国产一区二区三区视频了| 精品人妻熟女av久视频| 国产真实伦视频高清在线观看 | 婷婷精品国产亚洲av| 一本久久中文字幕| 大型黄色视频在线免费观看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 直男gayav资源| 亚洲自偷自拍三级| 欧美高清成人免费视频www| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 精华霜和精华液先用哪个| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲自偷自拍三级| 9191精品国产免费久久| 日韩av在线大香蕉| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产成人aa在线观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 一进一出抽搐动态| 亚洲精品在线观看二区| 老司机福利观看| 99久久九九国产精品国产免费| 精品久久久久久久末码| 悠悠久久av| 免费在线观看成人毛片| 男女下面进入的视频免费午夜| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产精品一区二区三区四区久久| 在线播放无遮挡| 成人午夜高清在线视频| 成年女人看的毛片在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 精品久久久久久久久亚洲 | 成人特级黄色片久久久久久久| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲真实伦在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 国产私拍福利视频在线观看| 麻豆一二三区av精品| 欧美一区二区亚洲| 欧美日韩综合久久久久久 | 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产精品免费一区二区三区在线| 99久久精品一区二区三区| 免费观看人在逋| 一级黄色大片毛片| 日韩 亚洲 欧美在线| 少妇人妻一区二区三区视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 亚洲avbb在线观看| 欧美精品国产亚洲| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产成人影院久久av| 不卡一级毛片| 成人鲁丝片一二三区免费| 精品一区二区免费观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产精品女同一区二区软件 | 国产欧美日韩一区二区三| 成人欧美大片| av视频在线观看入口| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 少妇人妻精品综合一区二区 | 欧美色欧美亚洲另类二区| 精品国产三级普通话版| 99精品在免费线老司机午夜| 嫩草影院新地址| 亚洲中文字幕日韩| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲中文字幕日韩| 免费在线观看亚洲国产| 精品一区二区免费观看| 久久久久久久久中文| 啪啪无遮挡十八禁网站| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产亚洲欧美98| 国产欧美日韩一区二区三| 少妇的逼水好多| 啪啪无遮挡十八禁网站| ponron亚洲| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲av成人av| 内射极品少妇av片p| 一本久久中文字幕| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲性夜色夜夜综合| 又紧又爽又黄一区二区| 免费在线观看亚洲国产| 欧美午夜高清在线| 在线观看舔阴道视频| 97热精品久久久久久| 男人舔奶头视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 午夜福利免费观看在线| 一级黄色大片毛片| 在线看三级毛片| 香蕉av资源在线| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 丝袜美腿在线中文| 午夜福利高清视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 99国产精品一区二区三区| 欧美成狂野欧美在线观看| 色在线成人网| 久久久精品大字幕| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 首页视频小说图片口味搜索| 免费电影在线观看免费观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 午夜老司机福利剧场| av在线观看视频网站免费| 国产 一区 欧美 日韩| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 久久精品91蜜桃| 免费看日本二区| 长腿黑丝高跟| 伦理电影大哥的女人| 精品一区二区三区视频在线| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产爱豆传媒在线观看| 日韩欧美在线二视频| 午夜福利免费观看在线| 国产视频一区二区在线看| 日本黄色片子视频| 久久久久久久久久黄片| 国产精品99久久久久久久久| 欧美色视频一区免费| 欧美bdsm另类| 亚洲中文日韩欧美视频| 99riav亚洲国产免费| 亚洲成人精品中文字幕电影| 日本一本二区三区精品| 国产高清有码在线观看视频| 国产爱豆传媒在线观看| 国产av一区在线观看免费| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 在线天堂最新版资源| 亚洲精品456在线播放app | 成人av在线播放网站| 午夜福利欧美成人| 中文字幕av在线有码专区| 日韩高清综合在线| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲人成网站高清观看| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美日韩乱码在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 高清在线国产一区| 制服丝袜大香蕉在线| 成人av一区二区三区在线看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 成年女人看的毛片在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 一级黄色大片毛片| 男人狂女人下面高潮的视频| 色哟哟·www| .国产精品久久| 欧美丝袜亚洲另类 | 日本一二三区视频观看| 日韩中字成人| 看片在线看免费视频| 国模一区二区三区四区视频| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产精品野战在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| www日本黄色视频网| 赤兔流量卡办理| 毛片女人毛片| 国产高清激情床上av| 欧美日韩国产亚洲二区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产精品久久久久久精品电影| 搞女人的毛片| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产精品av视频在线免费观看| 国产伦在线观看视频一区| 国产人妻一区二区三区在| 日韩欧美一区二区三区在线观看|