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    一株豇豆花內(nèi)生巨大芽孢桿菌的分離鑒定

    2015-03-18 12:22:02熊燕妮江瑞晶江漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院湖北武漢430056
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年32期
    關(guān)鍵詞:豇豆培養(yǎng)箱內(nèi)生

    熊燕妮,江瑞晶,方 浩,韓 雪,王 丹 (江漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,湖北武漢430056)

    豇豆俗稱角豆,為蝶形花科1年生纏繞草本植物,在我國(guó)各地普遍栽培,深受廣大消費(fèi)者的喜愛(ài)。內(nèi)生菌是從表面消毒的植物組織中分離得到的,不使植物的表型特征和功能發(fā)生改變的微生物。植物內(nèi)生菌可在植物體內(nèi)定殖,從宿主植物中獲得養(yǎng)分和穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境,不易受外界條件的影響,可長(zhǎng)期發(fā)揮生物學(xué)作用[1-2]。內(nèi)生菌在漫長(zhǎng)地與植物共生進(jìn)化的過(guò)程中已經(jīng)可以很好地利用植株所提供的條件和植株的生長(zhǎng)環(huán)境[3];同時(shí),有不少內(nèi)生菌對(duì)植株本身產(chǎn)生有益的作用,內(nèi)生菌與植株之間是共存互惠的關(guān)系[4]。目前,利用植物內(nèi)生菌制備基因工程益生菌和基因工程生防菌已成為內(nèi)生菌的研究熱點(diǎn)[5-6]。

    筆者從武漢豇豆種植區(qū)篩選出豇豆花內(nèi)生菌(whcfs1),在豇豆花各花期花瓣中為優(yōu)勢(shì)內(nèi)生菌,可以在28~44℃生長(zhǎng)。經(jīng)染色,鑒定為革蘭氏陽(yáng)性,芽孢桿菌,16S rDNA擴(kuò)增產(chǎn)物序列分析為巨大芽孢桿菌,可以分解淀粉,在豆莢中并未分離出此菌。該內(nèi)生芽孢桿菌有望成為豇豆基因工程益生菌、生防菌宿主菌株。

    1 材料與方法

    1.1 表面消毒處理 用燒杯取豇豆花沖洗表面污垢,移至無(wú)菌瓶中。用濃度0.1%升汞振蕩浸泡花3~4 min,用無(wú)菌水沖洗3~4遍,再用濃度75%酒精振蕩浸泡花3~4 min,無(wú)菌水沖洗5~6遍。

    1.2 內(nèi)生菌的分離 將表面消毒處理后的花移至無(wú)菌研缽中,減碎,加入生理鹽水和石英砂,研磨,2 000 r/min離心10 min,取上清涂布于NA培養(yǎng)基平板,取等量最后一次水洗的無(wú)菌水作為空白對(duì)照。在30℃恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48 h。取培養(yǎng)得到的單菌株做平板劃線,分離、提純并且保種。

    1.3 革蘭氏染色 將菌液移至載玻片烘干、固定,結(jié)晶紫染色1 min,用革蘭氏碘液進(jìn)行媒染1 min,酒精脫色,沖凈,番紅復(fù)染2 min,洗凈,用油鏡鏡檢。

    1.4 芽孢染色 熱固定菌液,孔雀綠染色液加熱染色4~5 min,番紅復(fù)染,洗凈,用油鏡鏡檢。

    1.5 細(xì)菌基因組抽提 細(xì)菌用沸水煮10 min,3 000 r/min離心10 min,取上清。

    1.6 16Sr DNA擴(kuò)增 采用16SrDNA通用引物為27F,5’-GAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’和 1492R,5’-ACGGCTACCTTGTTACGACTT-3’。

    1.7 聚合酶鏈擴(kuò)增反應(yīng) 利用特異性檢測(cè)引物,對(duì)提取的基因組進(jìn)行PCR。PCR反應(yīng)參數(shù)為:94℃ 5 min,94℃ 30 s,58℃ 45 s,72℃ 30 s循環(huán)30次,72℃10 min。

    1.8 序列分析 16SrDNA測(cè)序結(jié)果經(jīng)過(guò)Blast在Genebank中搜索相似序列,并且通過(guò)多序列對(duì)比軟件clustal分析,得到該菌種屬情況。

    1.9 生長(zhǎng)溫度范圍摸索 菌落涂于LB固體平板,在不同溫度培養(yǎng)箱中培養(yǎng),觀察菌落生長(zhǎng)情況,記錄菌落生長(zhǎng)情況。

    1.10 糖/酸發(fā)酵試驗(yàn) 分別接種于糖發(fā)酵培養(yǎng)基中,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16 h,另外保留一支不接種的培養(yǎng)基為對(duì)照。

    1.11 硫化氫產(chǎn)生試驗(yàn) 取檸檬酸鐵鹽半固體培養(yǎng)基,穿刺接種,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)24 h,觀察。

    1.12 V.P試驗(yàn) 接種于葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基中,置于37℃,培養(yǎng)24 h,觀察。在培養(yǎng)液中加入濃度40%KOH溶液10~20滴,然后加入等量的α-萘酚溶液,用力振蕩,再放入37℃恒溫箱中保溫15~30 min,觀察。

    1.13 吲哚試驗(yàn) 接種于蛋白胨水培養(yǎng)液中,置于37℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)24 h,觀察。觀察時(shí),加入乙醚1 ml,充分振蕩,靜置待乙醚浮于上層時(shí),沿管內(nèi)壁慢慢加入吲哚試劑10滴,觀察。

    1.14 檸檬酸鹽利用試驗(yàn) 接種檸檬酸鈉斜面,置于37℃,培養(yǎng)24~48 h,觀察。

    1.15 淀粉水解試驗(yàn) 接種于淀粉培養(yǎng)基涂平板,于37℃恒溫箱,培養(yǎng)16 h,觀察。

    1.16 油脂水解試驗(yàn) 劃線于油脂培養(yǎng)基(花生油)上,于37℃恒溫箱培養(yǎng)16、24 h,觀察。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 革蘭氏染色 在革蘭氏染色后,油鏡下可以看到菌體為短桿狀(圖1),為革蘭氏陽(yáng)性菌。

    1.2 芽孢染色 由圖2可知,在視野下可見(jiàn)紅色的桿菌和綠色的芽孢,為芽孢桿菌。

    2.3 16Sr DNA測(cè)序結(jié)果 由圖3可知,該內(nèi)生菌為芽孢桿菌。從所構(gòu)建的16SrDNA基因進(jìn)化樹(shù)上來(lái)看,它屬于巨大芽孢桿菌。

    2.4 生理生化試驗(yàn)結(jié)果 根據(jù)生化試驗(yàn)結(jié)果,發(fā)現(xiàn)分離得到的芽孢桿菌不能進(jìn)行糖發(fā)酵,不能產(chǎn)H2S,V.P試驗(yàn)和吲哚試驗(yàn)結(jié)果為陰性,不能利用檸檬酸,不能分解油脂,但可以分解淀粉。

    2.5 菌落生長(zhǎng)溫度范圍 在LB固體培養(yǎng)基中,菌體營(yíng)養(yǎng)體可在23~49℃溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng)。

    3 討論

    植物內(nèi)生菌的研究是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)微生物學(xué)的研究熱點(diǎn)。由于起步較晚,很多領(lǐng)域還有待研究,目前在豇豆中分離內(nèi)生菌的報(bào)道仍是空白。該試驗(yàn)分離得到一株豇豆花的內(nèi)生巨大芽孢桿菌。它可以在豇豆花中定殖,在各期花中屬于優(yōu)勢(shì)菌株,但在豆莢、豆、葉片和根系中沒(méi)有分離到。該內(nèi)生菌生長(zhǎng)溫度范圍寬,營(yíng)養(yǎng)體可在23~49℃溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng),更適合武漢地區(qū)豇豆開(kāi)花、結(jié)莢的夏秋兩季。16S rDNA測(cè)序結(jié)果顯示,該內(nèi)生菌為巨大芽孢桿菌。生理生化試驗(yàn)表明,該菌符合巨大芽孢桿菌的生化特征。研究表明,巨大芽孢桿菌具有解磷固鉀的功能,可用于生產(chǎn)有機(jī)肥,是植物良好的益生菌菌株[7-8];此外,分離得到的豇豆花內(nèi)生芽孢桿菌可在豇豆花中定植生長(zhǎng),同時(shí)可作為豇豆基因工程益生菌或基因工程生防菌的理想宿主菌株。

    [1]徐玲玲,單慶紅,郭斌.植物內(nèi)生菌研究進(jìn)展及應(yīng)用展望[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,41(13):5641 -5643.

    [2]楊威.細(xì)菌定殖能力與其生物防治功能相關(guān)性研究進(jìn)展[J].中國(guó)生物防治,2010,26(S1):90 -94.

    [3]BABALOLA O O.Beneficial bacteria of agricultural importance[J].Biotechnol lett,2010,32(11):1559 -1570.

    [4]SOLTERL E,MADDOX JV,VOSSBRINCK CR.Physiological host specificity:A model using the European corn borer,Ostrinia nubilalis(Hübner)(Lepidoptera:Crambidae)and microsporidia of row crop and other stalk - boring hosts[J].J Invertebr Pathol,2005,90(2):127 -130.

    [5]劉峰,蔣宇揚(yáng),劉世英.植物內(nèi)生菌抗蟲(chóng)工程研究進(jìn)展[J].生物技術(shù)通訊,2004,15(4):417 -420.

    [6]陳澤斌,靳松,張永福.物內(nèi)生菌生物防治研究進(jìn)展及存在的問(wèn)題[J].昆明學(xué)院學(xué)報(bào),2014,36(3):40 -42.

    [7]SPINOSAM R,BRACCINIT,RICCAE,et al.On the fate of ingested Bacillus spores[J].Research in microbiology,2000,151:361 -368.

    [8]呂黎,王蕾,周佳敏.巨大芽孢桿菌的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)科學(xué)研究,2014,35(3):48 -51.

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