潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清消褪素及白介素-6的含量及意義①

李 璇，苗秋實(shí)，韓宇鵬，鮑秀琦

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

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潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清消褪素及白介素-6的含量及意義①

李 璇，苗秋實(shí)，韓宇鵬，鮑秀琦

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：研究和探討大鼠潰瘍性結(jié)腸炎血清消褪素和白介素-6 的變化及相關(guān)性。方法：健康清潔級(jí)6～8周齡雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為UC組和正常對(duì)照組，每組20只，采用免疫學(xué)方法，刺激結(jié)腸制備成潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型，標(biāo)記為實(shí)驗(yàn)組20只，對(duì)照組不做任何操作，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)出血清RvD1、白介素-6(IL-6)含量。結(jié)果：潰瘍性結(jié)腸炎的大鼠白介素-6平均含量為(94.84±6.43)ng/L，消褪素含量為(63.59±5.93)ng/L，正常對(duì)照組的大鼠白介素-6平均含量為(58.49±8.08)ng/L，消褪素含量為(44.85±3.55)ng/L。實(shí)驗(yàn)組大鼠白介素-6與消褪素呈正相關(guān)(r=0.444，P=0.006)，對(duì)照組大鼠白介素-6與消退素?zé)o相關(guān)性(r=-0.011，P=0.948)。結(jié)論：血清消退素與白介素-6具有相關(guān)性，前者具有治療潰瘍性結(jié)腸炎的潛在作用。

潰瘍性結(jié)腸炎；血清消褪素；白介素-6

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerativecolitis,UC)是由多種病因引起的、異常免疫機(jī)制介導(dǎo)的慢性腸道非特異性炎癥。目對(duì)于UC的病因及發(fā)生機(jī)制研究并不明確,但多項(xiàng)研究認(rèn)為免疫因素在UC中具有重要作用[1]。研究認(rèn)為促炎細(xì)胞因子與抗炎細(xì)胞因子之間的免疫表達(dá)相互影響，通常是UC的重要發(fā)病機(jī)制。因此，對(duì)于潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病原因及發(fā)生機(jī)制的研究，從而指導(dǎo)對(duì)該疾病的治療，具有顯著意義。血清消退素D1(RvD1)是一種具有抗炎作用的多不飽和脂肪酸衍生物。白介素-6(IL-6)是由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的的多向性細(xì)胞因子。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)造模大鼠體內(nèi)消退素、白介素-6的測(cè)定，以健康鼠為參照，進(jìn)一步研究大鼠潰瘍性結(jié)腸炎體內(nèi)消退素、白介素-6的含量及意義。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康清潔級(jí)6～8周齡雄性SD大鼠40只體質(zhì)量(200±20)g，清潔級(jí)，由佳木斯大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，隨機(jī)分為UC組和正常對(duì)照組，每組20只。

1.2 模型制備

采用免疫學(xué)方法，刺激結(jié)腸制備成潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型，標(biāo)記為UC組，UC組和對(duì)照組禁食不禁水7d。

1.3RvD1白介素-6(IL-6)測(cè)定

各組大鼠稱質(zhì)量后，按6mL/kg腹腔內(nèi)注射10%水合氯醛30min后分離腹腔，采取腹主動(dòng)脈血，常溫靜置1h后以3000r/min離心30min，取血清，置于-60℃低溫冰箱中保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)出血清RvD1、白介素-6(IL-6)含量，具體步驟并嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.4 主要儀器

5804R低溫離心機(jī)(EPPENDORF公司)、海爾低溫冰箱、白介素6(IL-6)檢測(cè)試劑盒MERCODIA、血清素ELISA試劑盒(上海瓦蘭生物科技有限公司)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組血清白介素-6、消退素含量比較

實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組血清白介素-6含量的比較：實(shí)驗(yàn)組(94.84±6.43)ng/mL明顯高于對(duì)照組(58.49±8.08)ng/mL，差異有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組血清消退素含量的比較：實(shí)驗(yàn)組(63.59±5.93)ng/mL明顯高于對(duì)照組(44.85±3.55)ng/mL，差異有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。，見(jiàn)表1。

表1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組白介素-6、消退素水平比較

注：與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組白介素-6及消退素水平明顯升高，差異有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。

2.2 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組血清白介素、消退素相關(guān)性分析

潰瘍性結(jié)腸炎組大鼠血清白介素-6與消退素呈顯著正相關(guān)性(P<0.05)，而正常對(duì)照組二者未得出相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 血清白介素、消退素相關(guān)性分析

注：實(shí)驗(yàn)組白介素-6與消退素呈顯著正相關(guān)性(r=0.444,P<0.01)。

4 討論

潰瘍性結(jié)腸炎是以結(jié)腸黏膜慢性炎性反應(yīng)和潰瘍形成為病理特點(diǎn)的一種非特異性炎癥性腸病，系多病因引起、異常免疫介導(dǎo)的腸道慢性炎癥性疾病，目前認(rèn)為各種微生物抗原的刺激,激活機(jī)體免疫反應(yīng)，導(dǎo)致多種細(xì)胞因子參與的腸道組織的慢性非特異性炎癥[2]。UC被普遍認(rèn)為系癌前病變，對(duì)健康具有潛在的威脅[3]。 血清消褪素(resolvin，Rv)是由ω-3多不飽和脂肪酸(EPA和DHA)衍生的脂質(zhì)分子，研究顯示Rv具有抗炎作用。EPA和DHA可分別產(chǎn)生E-系列和D-系列的消退素[4]。消退素具有多種抗炎作用，有研究報(bào)道，血清消退素的含量可能與急性胰腺炎嚴(yán)重程度相關(guān)，在急性胰腺炎中起抗炎及促進(jìn)炎性反應(yīng)消退作用。目前國(guó)內(nèi)未見(jiàn)到消退素對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的相關(guān)研究。已研究的結(jié)果提示，血清消退素是通過(guò)調(diào)節(jié)多種細(xì)胞因子和降低氧化應(yīng)激，發(fā)揮抗炎和免疫調(diào)節(jié)的作用。白介素-6具有促進(jìn)巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞釋放的作用，白介素-6的過(guò)度表達(dá)是機(jī)體多種疾病的主要因素之一[5]。白介素-6可在急性炎癥、機(jī)體免疫反應(yīng)中對(duì)多種細(xì)胞產(chǎn)生促炎作用和誘導(dǎo)肝組織產(chǎn)生急性反應(yīng)蛋白，多項(xiàng)數(shù)據(jù)表明，血清IL-6水平在活動(dòng)期UC患者與健康人比較，明顯高于后者，所以研究白介素-6 對(duì)UC的病因診斷具有重要的臨床意義。本文通過(guò)對(duì)患有潰瘍性結(jié)腸炎的大鼠進(jìn)行抽血化驗(yàn)，測(cè)定其血清消褪素及白介素-6的含量，通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，潰瘍性結(jié)腸炎的大鼠白介素-6平均含量為(94.84±6.43)ng/L，消褪素含量為(63.59±5.93)ng/L，正常對(duì)照組的大鼠白介素-6平均含量為(58.49±8.08)ng/L，消褪素含量為(44.85±3.55)ng/L。由此可見(jiàn)，白介素-6和消褪素D1與潰瘍性結(jié)腸炎密切相關(guān)。從表2可以得出，實(shí)驗(yàn)組潰瘍性結(jié)腸炎的大鼠血清消褪素含量與白介素-6含量相比，存在相關(guān)性，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，相反對(duì)照組正常大鼠，血清消褪素含量與白介素-6含量相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05。) 本研究提示，血清消退素能夠抑制促炎性細(xì)胞因子IL-6的產(chǎn)生，從而減少炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，改善腸組織的病理變化，減輕組織氧化損傷，調(diào)節(jié)促炎抗炎系統(tǒng)的平衡，從而抑制潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生與發(fā)展。通過(guò)以上研究可以推論：消退素可能具有治療潰瘍性結(jié)腸炎的潛在作用。

[1]胡仁偉.細(xì)胞因子與炎癥性腸病[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)·消化系疾病分冊(cè)，1998，18(3)：146

[2]宋愛(ài)玲.TNF-A、IL-6、IL-8與潰瘍性結(jié)腸炎嚴(yán)重程度相關(guān)研究[J]. 中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2008，12(3)：3-4

[3]姜威，顏玉. 潰瘍性結(jié)腸炎Toll樣受體表達(dá)和NF-κB變化及益生菌的作用研究[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2013,36(5)：34-35

[4]SchwabJM,ChiangN,AritaM,etal.ResolvinE1andprotectinD1activateinflammation-resolutionprogrammes[J].Nature,2007,447,869-874

[5]IsaacsKL,SartorRB,HaskillS.CytokinemessengerRNAprofilesininflammatoryboweldiseasemucosadetectedbypolymerasechainreactionamplification[J].Gastroenterology, 1992, 103:1587-1595

李璇(1988～)女，黑龍江佳木斯人，在讀碩士研究生。

鮑秀琦(1963～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，教授，主任醫(yī)師，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:506964552@qq.com。

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