飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)性能及體組成的影響

韓光明 張 家宏 寇祥明 畢 建花 徐 榮 朱 凌宇 王 守紅 王 桂良

(江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，江蘇省生態(tài)農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究中心，揚(yáng)州 225007)

胭脂魚(yú)(Myxocyprinus asiaticus)屬鯉形目胭脂魚(yú)科或稱(chēng)亞口魚(yú)科。我國(guó)所產(chǎn)的胭脂魚(yú)是胭脂魚(yú)科在亞洲分布的唯一種屬，具有重要的學(xué)術(shù)研究?jī)r(jià)值，被列為國(guó)家2類(lèi)重點(diǎn)保護(hù)魚(yú)類(lèi)。胭脂魚(yú)個(gè)體大、生長(zhǎng)快、肉質(zhì)鮮美，曾經(jīng)是長(zhǎng)江重要的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi);同時(shí)，因其體形奇特、體色艷麗、性情溫馴、抗病力強(qiáng)，近年已成為國(guó)內(nèi)外觀(guān)賞魚(yú)中的珍品。隨著胭脂魚(yú)人工繁殖技術(shù)的逐步成熟，其養(yǎng)殖面積也不斷擴(kuò)大，因而僅靠天然餌料遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足胭脂魚(yú)養(yǎng)殖生產(chǎn)的需要。目前，在胭脂魚(yú)仔稚魚(yú)生長(zhǎng)階段主要使用鮮活餌料，在幼魚(yú)階段使用高蛋白質(zhì)高能量配合飼料(如鰻魚(yú)飼料或甲魚(yú)飼料)，稍大一點(diǎn)使用普通淡水魚(yú)混養(yǎng)配合飼料，飼料營(yíng)養(yǎng)不均或過(guò)剩限制了胭脂魚(yú)的人工養(yǎng)殖。

由于規(guī)格、品種、飼養(yǎng)環(huán)境等因素的不同，魚(yú)類(lèi)對(duì)蛋白質(zhì)和脂肪的需求量也不同，在滿(mǎn)足魚(yú)類(lèi)正常生長(zhǎng)的前提下，適當(dāng)降低飼料中的蛋白質(zhì)水平并相應(yīng)升高脂肪水平不僅可以降低飼料成本、提高蛋白質(zhì)利用率［1］，還可以降低魚(yú)體的氨氮排放量，減少對(duì)養(yǎng)殖水體的污染。但是，飼料中脂肪水平過(guò)高也會(huì)產(chǎn)生不利的影響，例如降低魚(yú)類(lèi)的攝食量［2］、導(dǎo)致脂肪在肝臟和肌肉等組織中大量沉積而降低魚(yú)體品質(zhì)［3－4］。胭脂魚(yú)幼魚(yú)的適宜蛋白質(zhì)和脂肪需求量已有相關(guān)報(bào)道［5－9］。但是，以往的研究多是單因素設(shè)計(jì)，沒(méi)有考慮飼料中蛋白質(zhì)和脂肪之間可能存在的交互作用，也沒(méi)有探討飼料營(yíng)養(yǎng)組成對(duì)魚(yú)體氨基酸和脂肪酸組成的影響。因此，本試驗(yàn)采用雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究飼料中不同蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)、全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)以及氨基酸和脂肪酸組成的影響，為胭脂魚(yú)飼料的配制提供理論依據(jù)和參考。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Com position and nutrient levels of experimental diets(air-dry basis) %

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用魚(yú)

試驗(yàn)所用胭脂魚(yú)魚(yú)苗購(gòu)自四川省瀘州市，魚(yú)苗平均體重為(16.40±0.02)g。試驗(yàn)地點(diǎn)在江蘇省揚(yáng)州市邗江區(qū)公道鎮(zhèn)養(yǎng)殖基地。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)中的“3×3因子設(shè)計(jì)”，以飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平為影響因素，每個(gè)因素各設(shè)3個(gè)水平。其中，蛋白質(zhì)的3個(gè)水平分別為35%、40%和45%，脂肪的3個(gè)水平分別為6%、8%和10%，共配制9種試驗(yàn)飼料。按照蛋白質(zhì)和脂肪水平，將9種試驗(yàn)飼料分別命名為P35L6、P35L8、P35L10、P40L6、P40L8、P40L10、P45L6、P45L8 和P45L10。

1.3 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)飼料以魚(yú)粉、蠶蛹粉、酪蛋白、豆粕、菜籽粕、花生粕和小麥為蛋白質(zhì)源，以魚(yú)油為脂肪源。試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。試驗(yàn)飼料的制作過(guò)程如下:將各種原料粉碎后按比例混合，然后均勻噴入一定量的魚(yú)油，再加入一定量的水，待充分混勻后制粒，飼料制成后自然晾干并保存于冰箱中備用。

續(xù)表1

1.4 養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)所用水泥池規(guī)格為 3.0 m×1.0 m×1.5 m，水池養(yǎng)殖時(shí)間內(nèi)平均水深0.8 m。胭脂魚(yú)魚(yú)苗馴化后，將810尾健康、規(guī)格整齊的魚(yú)苗隨機(jī)分入27個(gè)水泥池中，每個(gè)水泥池30尾。每種試驗(yàn)飼料隨機(jī)飼喂3個(gè)水泥池。每天定時(shí)投喂2次(09:00和16:00)。日投餌量為魚(yú)體重的3%～5%，具體投喂量根據(jù)前1天的攝食情況增減。根據(jù)試驗(yàn)魚(yú)的生長(zhǎng)和攝食情況，每周調(diào)整1次投喂量，養(yǎng)殖時(shí)間為8周。每3～5 d換水1次，換水量為總水量的40%左右。養(yǎng)殖期間水溫為18～26℃，pH為7.5～9.0，溶解氧濃度＞5 mg/L。

1.5 取樣及指標(biāo)測(cè)定方法

試驗(yàn)結(jié)束后，禁食24 h，對(duì)各組試驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行稱(chēng)重，計(jì)算增重率(weight gain rate，WGR)、特定生長(zhǎng)率(specific grow th ratio，SGR)、飼料系數(shù)(feed conversion ratio，F(xiàn)CR)及蛋白質(zhì)效率(protein efficiency ratio，PER)，計(jì)算公式如下:

增重率(%)=100×(Wf－Wi)/Wi;

特定生長(zhǎng)率(%/d)=100×ln(Wf/Wi)/D;

飼料系數(shù)=F/(Wf－Wi);

蛋白質(zhì)效率=(Wf－Wi)/P。

式中:Wf為試驗(yàn)?zāi)~(yú)體重(g)，Wi為試驗(yàn)初魚(yú)體重(g);D為飼養(yǎng)天數(shù)(d);F為攝入的飼料干重(g);P為蛋白質(zhì)攝入干重(g)。

每個(gè)水泥池隨機(jī)取3尾魚(yú)，放入冰箱作為樣品待測(cè)。分別采用65℃常壓干燥法、凱氏定氮法及索氏提取法測(cè)定樣品中的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量。全魚(yú)脂肪酸組成測(cè)定參照韓光明等［3］的方法，全魚(yú)氨基酸組成測(cè)定參照張家宏等［10］的方法。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

原始數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2010初步整理后，用SPSS 18.0中的雙因素方差分析(two-way ANOVA)進(jìn)行Duncan氏法多重比較，顯著水平為P＜0.05。數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

由表2可以看出，飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)的增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)和蛋白效率均有顯著影響(P＜0.05)，但二者對(duì)上述指標(biāo)無(wú)顯著的交互作用(P＞0.05)。其中，35%蛋白質(zhì)組的增重率、特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率顯著低于其他2組(P＜0.05)，而飼料系數(shù)的變化趨勢(shì)則相反;6%脂肪組的增重率和特定生長(zhǎng)率均顯著低于其他2組(P＜0.05)，6%和8%脂肪組的飼料系數(shù)顯著高于10%脂肪組(P＜0.05)，而蛋白質(zhì)效率則與飼料系數(shù)的變化趨勢(shì)相反。

2.2 飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)組成的影響

由表3可以看出，飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)全魚(yú)水分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量均有顯著影響(P＜0.05)，但二者對(duì)上述指標(biāo)無(wú)顯著的交互作用(P＞0.05)。其中，35%蛋白質(zhì)組的全魚(yú)粗蛋白質(zhì)含量顯著低于40%蛋白質(zhì)組(P＜0.05)，全魚(yú)粗脂肪含量顯著低于其他2組(P＜0.05)，全魚(yú)水分含量與其他2組無(wú)顯著差異(P＞0.05);10%脂肪組的全魚(yú)水分含量顯著低于6%脂肪組(P＜0.05)，全魚(yú)粗脂肪含量顯著高于其他2組(P＜0.05)，全魚(yú)粗蛋白質(zhì)含量與其他2組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

表2 飼喂不同蛋白質(zhì)和脂肪水平飼料的胭脂魚(yú)的生長(zhǎng)性能Tab1e 2 Grow th performance of Chinese sucker fed diets differing in protein and lipid levels

表3 飼喂不同蛋白質(zhì)和脂肪水平飼料的胭脂魚(yú)的全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)組成(濕重基礎(chǔ))Table 3 Whole-body common nutritional composition of Chinese sucker fed diets differing in protein and lipid levels(wetweight basis) %

續(xù)表3

2.3 飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)全魚(yú)氨基酸組成的影響

由于不同試驗(yàn)組全魚(yú)氨基酸組成檢測(cè)未做重復(fù)，所以未計(jì)算蛋白質(zhì)和脂肪水平的交互作用，下文脂肪酸組成相同。由表4可以看出，飼料蛋白質(zhì)水平顯著影響胭脂魚(yú)全魚(yú)纈氨酸、異亮氨酸、組氨酸、谷氨酸、必需氨基酸以及總氨基酸含量(P＜0.05)，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的提高，胭脂魚(yú)全魚(yú)纈氨酸、異亮氨酸、組氨酸、谷氨酸、必需氨基酸以及總氨基酸含量升高;飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)全魚(yú)其他氨基酸含量無(wú)顯著影響(P＞0.05)。飼料脂肪水平顯著影響胭脂魚(yú)全魚(yú)精氨酸含量(P＜0.05)，隨著飼料脂肪水平的提高，胭脂魚(yú)全魚(yú)精氨酸含量下降;飼料脂肪水平對(duì)全魚(yú)其他氨基酸含量無(wú)顯著影響(P＞0.05)。

表4 飼喂不同蛋白質(zhì)和脂肪水平飼料的胭脂魚(yú)的全魚(yú)氨基酸組成(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 4 Whole-body am ino acid composition of Chinese sucker fed diets differing in protein and lipid levels(air-dry basis) %

續(xù)表4

2.4 飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)全魚(yú)脂肪酸組成的影響

由表5可以看出，飼料蛋白質(zhì)水平顯著影響胭脂魚(yú)全魚(yú)C14∶0(肉豆蔻酸)和 C18∶0(硬脂酸)含量(P＜0.05)，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的提高，胭脂魚(yú)全魚(yú)C14∶0含量下降，C18∶0含量上升;除此之外，其他飽和脂肪酸(saturated fatty acids，SFA)、單不飽和脂肪酸(monounsaturated fatty acids，MUFA)、多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids，PUFA)、n-3 PUFA、n-6 PUFA 含 量 以 及∑n-3/∑n-6均不受飼料蛋白質(zhì)水平的顯著影響(P＞0.05)。飼料脂肪水平除顯著影響胭脂魚(yú)全魚(yú)C18 ∶0含量(P＜0.05)外，對(duì)其他 SFA、MUFA、PUFA、n-3 PUFA、n-6 PUFA 含量以及∑n-3/∑n-6均無(wú)顯著影響(P＞0.05)。

表5 飼喂不同蛋白質(zhì)和脂肪水平飼料的胭脂魚(yú)的全魚(yú)脂肪酸組成Table 5 Whole-body fatty acid composition of Chinese sucker fed diets differing in protein and lipid levels %

續(xù)表5

3 討 論

3.1 胭脂魚(yú)飼料中蛋白質(zhì)和脂肪的適宜水平

蛋白質(zhì)和脂肪是動(dòng)物生長(zhǎng)所需的關(guān)鍵和基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)速度的快慢與攝食飼料的營(yíng)養(yǎng)成分有很大關(guān)系，研究魚(yú)類(lèi)最大增重的營(yíng)養(yǎng)需要非常必要［2，11］。魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)速度和飼料系數(shù)與飼料中蛋白質(zhì)水平間呈現(xiàn)一定的生長(zhǎng)－劑量反應(yīng)。在飼料蛋白質(zhì)水平偏低時(shí)，魚(yú)體生長(zhǎng)減慢，飼料系數(shù)較高;提高飼料蛋白質(zhì)水平，可促進(jìn)魚(yú)體生長(zhǎng)，降低飼料系數(shù);但當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平達(dá)到適宜值后，再提高飼料蛋白質(zhì)水平，魚(yú)體生長(zhǎng)速度和飼料系數(shù)則不再有顯著變化。這可能與當(dāng)魚(yú)類(lèi)攝食較高蛋白質(zhì)水平的飼料時(shí)，飼料蛋白質(zhì)被水解，較多的氨基酸用作能量被分解，而且魚(yú)體還需消耗能量來(lái)排出多余的氨［12］。在某一飼料能量水平時(shí)，飼料中蛋白質(zhì)水平越低，飼料中提供的非蛋白質(zhì)形式的可消化能則越高，可使飼料氮損失減少，提高飼料氮在體內(nèi)的積累量［13］。

Mai等［14］指出，飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率等指標(biāo)的可靠性在很大程度上依賴(lài)于魚(yú)類(lèi)具體的攝食量，但是精確測(cè)定攝食量比較困難，多數(shù)學(xué)者［8－9，15－18］采用增重率或特定生長(zhǎng)率結(jié)合飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率來(lái)估算魚(yú)類(lèi)對(duì)蛋白質(zhì)和脂肪的最適需求量。本次試驗(yàn)顯示，飼料蛋白質(zhì)水平從35%提高到45%，胭脂魚(yú)的增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)以及蛋白質(zhì)效率均得到改善，但是40%和45%蛋白質(zhì)組之間差異不顯著，說(shuō)明胭脂魚(yú)對(duì)蛋白質(zhì)的適宜需求量為40%，這一結(jié)果與陳建等［9］的研究結(jié)果基本一致;飼料脂肪水平從6%提高到10%，胭脂魚(yú)的增重率和特定生長(zhǎng)率顯著升高，而且飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率也得到改善，說(shuō)明適當(dāng)提高飼料的脂肪水平能夠起到節(jié)約蛋白質(zhì)的作用。王朝明等［8］研究認(rèn)為胭脂魚(yú)飼料適宜脂肪含量為6.88%，從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，將胭脂魚(yú)飼料的脂肪水平提高到10%，可以達(dá)到提高飼料利用率的作用，但是10%脂肪組的胭脂魚(yú)全魚(yú)粗脂肪含量較6%脂肪組顯著增加，飼料中脂肪水平的增加通常會(huì)導(dǎo)致魚(yú)體脂含量的增加，這種正相關(guān)關(guān)系在很多魚(yú)類(lèi)中都存在［15］，而體脂含量增加有損害魚(yú)體健康的風(fēng)險(xiǎn)。因此，建議胭脂魚(yú)飼料中蛋白質(zhì)和脂肪的適宜水平分別為40%和6%～8%。這一結(jié)果與青魚(yú)幼魚(yú)的需求量類(lèi)似［16］，比團(tuán)頭魴［17］、春鯉［18］等魚(yú)類(lèi)的需求量要高。

3.2 飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)、氨基酸和脂肪酸組成的影響

由于試驗(yàn)魚(yú)種類(lèi)、飼料原料組成等差異，飼料中蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)體組成的影響結(jié)果也不盡相同［19－21］。本試驗(yàn)中，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的提高，胭脂魚(yú)全魚(yú)粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量呈先增加后下降的趨勢(shì)，全魚(yú)水分含量無(wú)顯著變化，說(shuō)明飼料蛋白質(zhì)水平過(guò)高不僅不利于魚(yú)體生長(zhǎng)，反而會(huì)加重魚(yú)體代謝負(fù)擔(dān)，使魚(yú)體蛋白質(zhì)含量降低。隨著飼料脂肪水平的提高，全魚(yú)粗脂肪含量增加，水分含量下降，粗蛋白質(zhì)含量無(wú)顯著變化，這與韓光明等［3］和劉永堅(jiān)等［22］的研究結(jié)果一致。

目前，關(guān)于飼料營(yíng)養(yǎng)組成對(duì)全魚(yú)和組織中氨基酸組成影響的研究報(bào)道很少。A lam等［23］研究指出，飼料中不同氨基酸模式對(duì)牙鲆生長(zhǎng)及魚(yú)體氨基酸的組成有影響。Mai等［24］研究發(fā)現(xiàn)，大黃魚(yú)肌肉中其他必需氨基酸不受飼料中蛋氨酸含量的影響，但蛋氨酸和異亮氨酸含量受飼料中蛋氨酸含量的影響。代小芳［25］將蘋(píng)果籽、白瓜籽、黑瓜籽以及豆油添加到飼料中發(fā)現(xiàn)，在同一蛋白質(zhì)水平下飼料組成對(duì)團(tuán)頭魴全魚(yú)和肌肉的氨基酸組成無(wú)顯著影響，但是在團(tuán)頭魴全魚(yú)和肌肉氨基酸組成中，異亮氨酸、組氨酸和脯氨酸含量受飼料組成的影響最大。王川等［26］研究發(fā)現(xiàn)，延遲首次投喂時(shí)間，胭脂魚(yú)仔魚(yú)的全魚(yú)丙氨酸、異亮氨酸、亮氨酸和組氨酸含量顯著下降。本試驗(yàn)中，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的提高，胭脂魚(yú)全魚(yú)纈氨酸、異亮氨酸、組氨酸、谷氨酸、必需氨基酸以及總氨基酸含量均升高，與代小芳［25］和王川等［26］的研究結(jié)果對(duì)比后不難發(fā)現(xiàn)，受飼料影響較大的氨基酸中均涉及到異亮氨酸和組氨酸，而這2種氨基酸均為魚(yú)類(lèi)的必需氨基酸。這一信息，一方面說(shuō)明魚(yú)體的異亮氨酸和組氨酸含量可能很容易受飼料中氨基酸組成影響，另一方面可能是本試驗(yàn)配制的飼料中異亮氨酸和組氨酸含量較高。本試驗(yàn)研究還發(fā)現(xiàn)，隨著飼料脂肪水平的提高，胭脂魚(yú)全魚(yú)精氨酸含量下降，其具體原因尚待進(jìn)一步研究。

關(guān)于飼料營(yíng)養(yǎng)組成對(duì)魚(yú)體脂肪酸組成的影響，一般來(lái)講，魚(yú)體的脂肪含量和脂肪酸組成能夠反映飼料的脂肪水平和脂肪酸組成［3］。本次試驗(yàn)中，提高飼料蛋白質(zhì)和脂肪水平能夠使魚(yú)體粗脂肪含量增加，但是對(duì)全魚(yú)脂肪酸組成的影響較小，僅觀(guān)察到全魚(yú)飽和脂肪酸中的C14∶0和C18∶0含量有一定的變化，而未觀(guān)察到對(duì)其他脂肪酸含量有顯著影響。其原因可能是由于飼料中的脂肪水平的梯度差異小，未導(dǎo)致魚(yú)體脂肪酸組成出現(xiàn)顯著差異。

4 結(jié)論

①以增重率和特定生長(zhǎng)率為主要指標(biāo)，結(jié)合飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率以及全魚(yú)粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量，得出胭脂魚(yú)飼料中適宜的蛋白質(zhì)和脂肪水平分別為40%和6%～8%。

②胭脂魚(yú)全魚(yú)的氨基酸組成受飼料中蛋白質(zhì)水平的影響較大，尤其是纈氨酸、異亮氨酸、組氨酸、谷氨酸、必需氨基酸以及總氨基酸含量;胭脂魚(yú)全魚(yú)的粗脂肪含量受飼料蛋白質(zhì)和脂肪水平的影響較大，但是全魚(yú)脂肪酸組成受到的影響較小。

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