開胃合劑中揮發(fā)油的提取工藝研究

錢 芳 施 煒

（江蘇省中醫(yī)院藥學部，南京 210029）

開胃合劑由佩蘭、川石斛、陳皮、石菖蒲、益智仁、冬瓜子、甘草等組成，具有醒脾開胃助食之功效，臨床用于病后、體弱、胃氣不振，表現(xiàn)為飲食無味，食欲呆滯，食量減少，以致神疲乏力等癥，以及功能性消化不良的患者。方中佩蘭、石菖蒲、益智仁、陳皮均含有揮發(fā)油類成分，由于這類成分具有較強的揮發(fā)性，在提取及制劑工藝過程中易損失，為保證復方藥效，應最大程度保留開胃合劑中的揮發(fā)油成分。本試驗采用水蒸氣蒸餾法提取方中揮發(fā)油，以總揮發(fā)油得量為指標，用單因素試驗和正交試驗對揮發(fā)油的提取方法進行考察，優(yōu)選出最佳提取工藝，為規(guī)范制劑質量標準提供科學依據(jù)。

1 儀器與試藥

揮發(fā)油提取器（上海醫(yī)用分析儀器廠）；電熱套（上海羌強儀器設備有限公司）； XY1000C精密電子天平（常州市幸運設備有限公司）。所用中藥飲片均購自江蘇省藥材公司，并由本室專家鑒定。

2 方法與結果

2.1 實驗方法 揮發(fā)油提取參照2010版《中華人民共和國藥典》一部附錄XD揮發(fā)油測定法進行[1]。按處方量比例稱取佩蘭、石菖蒲、益智仁、陳皮310 g，置玻璃燒瓶中，加入定量的水，連接揮發(fā)油測定器，然后連接回流冷凝管。置電熱套中加熱至沸，調溫并保持微沸，讀取揮發(fā)油量。

2.2 實驗內容

2.2.1 單因素實驗

2.2.1.1 加水量的考察 按處方量比例稱取佩蘭、石菖蒲、益智仁、陳皮310 g，共稱取5份，用水蒸汽蒸餾法提取揮發(fā)油，分別加4倍量、6倍量、8倍量、10倍量和12倍量水，浸泡1 h，水蒸汽蒸餾6 h，考察揮發(fā)油提取量。結果分別為2.24 mL、2.26 mL、2.35 mL、2.37 mL、2.36 mL。總揮發(fā)油提取量在加水量為10倍量時最高，故選擇加水量為10倍量。

2.2.1.2 提取時間的考察 按處方量比例稱取佩蘭、石菖蒲、益智仁、陳皮310 g，共稱取5份，加10倍量水，浸泡1h，分別水蒸汽蒸餾2 h、4 h、6 h、8 h、10 h，考察揮發(fā)油提取量。結果分別為2.02 mL、2.32 mL、2.36 mL、2.33 mL、2.29 mL。揮發(fā)油提取量在提取6 h時最高，故選擇提取時間為6 h。

2.2.1.3 浸泡時間的考察 按處方量比例稱取佩蘭、石菖蒲、益智仁、陳皮310 g，共稱取5份，加10倍量水，浸泡0 h、1 h、2 h、3 h、4 h，水蒸汽蒸餾6 h，考察揮發(fā)油提取量。結果分別為2.32 mL、2.37 mL、2.38 mL、2.34 mL、2.35 mL。在浸泡時間為2 h時，揮發(fā)油提取量最高，故選擇浸泡2 h。

2.2.2 正交試驗

2.2.2.1 因素水平安排 在單因素實驗的基礎上，結合生產(chǎn)實際，以揮發(fā)油提取量為考察指標，采用水蒸汽蒸餾法，選擇對揮發(fā)油提取率影響較大的浸泡時間、加水量（倍）、提取時間作為考察因素，設計采用L9（34）正交設計進行實驗。因素水平安排見表1。

表1 因素水平表

2.2.2.2提取方法 處方量比例稱取佩蘭、石菖蒲、益智仁、陳皮310 g，共稱取9份，按正交設計要求加入溶劑，浸泡，提取，記錄揮發(fā)油的提取總量。

2.2.2.3 正交試驗結果 見表2

表2 水煎提取正交試驗結果

2.2.2.4 方差分析 由方差分析表和正交試驗結果可以看出，因素C對試驗結果有顯著影響，因素A、B對試驗結果沒有顯著影響，各因素影響次序為C＞B＞A；各因素不同水平的影響次序為A2＞A1＞A3，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1，因此最佳提取工藝為A2B3C3，即加12倍量水，浸泡2 h，提取6 h。見表3。

表3 方差分析表

2.2.3 驗證試驗 稱取與正交試驗等量飲片三份，按優(yōu)選的提取工藝提取。結果見表4。

表4 驗證試驗結果表

3 討論

佩蘭揮發(fā)油具有祛痰、抑菌、抗炎、增強免疫力等作用[2]。佩蘭揮發(fā)油是佩蘭的主要藥用成分，多用于濕濁中阻，脘痞嘔惡，口中甜膩，口臭，多涎，暑濕表癥，頭脹胸悶等治療[3]。石菖蒲揮發(fā)性成分較為復雜，已知成分達60余種，主要結構類型為苯丙素類（簡單苯丙素 木脂素及香豆素類） 和萜類（單萜倍半萜 二萜及三萜類） 化合物[4]。石菖蒲揮發(fā)油對消化系統(tǒng)可促進消化，調節(jié)胃腸運動作用[5]。益智仁含有多種萜類、黃酮類、氨基酸、微量元素及揮發(fā)油等成分[6]，其中揮發(fā)油占1%~2%，有溫脾、暖腎、澀精，治冷氣腹痛、夜多小便等功效[7]。陳皮主要成分為橙皮苷、新橙皮苷、對羥福林、黃酮化合物、揮發(fā)油等。廣陳皮揮發(fā)油的主要成分為D-檸檬烯、β-月桂烯等萜烯烴類，對某些革蘭氏陽性菌、真菌有較好的抑制作用[8]。故在進行制劑工藝研究時，對佩蘭、石菖蒲、益智仁、陳皮中的揮發(fā)油成分單獨進行提取，以保留更多的有效成分。

目前用于中草藥揮發(fā)油成分提取的方法有許多，包括水蒸氣蒸餾法、溶劑回流法、微波法、超臨界流體萃取法，其中水蒸氣蒸餾法具有成本低、操作簡便、效率較高等優(yōu)點，在中藥的生產(chǎn)中應用廣泛[9]，是提取揮發(fā)油的傳統(tǒng)方法，為《中國藥典》2010年版收錄方法。水蒸氣蒸餾法采用特制的揮發(fā)油提取裝置直接加熱蒸餾或者通入水蒸氣，使揮發(fā)油隨導入的蒸氣一同餾出。此法設備簡單、成本低廉、操作簡便，產(chǎn)量大。因此，本研究采用了此經(jīng)典方法。

由正交試驗結果可知，因素C對試驗結果有顯著影響，因素A、B對試驗結果沒有顯著影響。最佳提取工藝為A2B3C3，即加12倍量水，浸泡2 h，提取6 h。驗證試驗結果表明，優(yōu)選工藝合理可行。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄63.

[2]魏道志，寧書菊，林文雄，等.佩蘭的研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥，2007，18（7）：1782.

[3]國家藥典委員會.中國藥典[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：201．

[4]董小平，鄧放.石菖蒲質量標準研究進展[J].成都中醫(yī)藥大學學報，2011，24（1）：60-63．

[5]王睿，費洪新，李曉明，等.石菖蒲的化學成分及藥理作用研究進展[J].中華中醫(yī)藥學刊，2013，31（7）：1606-1610.

[6]徐俊駒，譚寧華，曾廣智，等.益智仁化學成分的研究[J].中國中藥雜志，2009，34（8）：990-992．

[7]李興華，胡昌江，李文兵，等.益智仁止瀉作用初步研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2009，20（10）：2498-2499.

[8]高蓓.廣陳皮黃酮類化合物和揮發(fā)油成分及其活性研究[D].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學食品科技學院博士學位論文，2011．

[9]溫悅.揮發(fā)油提取方法研究概況[J].中國藥業(yè)，2010，19（12）：84-85.