系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清白細胞介素-37水平的變化及其臨床意義

楊旭偉, 張　旸, 鄭祥雄, 李　頻, 林　芬, 鄒式文

系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清白細胞介素-37水平的變化及其臨床意義

楊旭偉1, 張旸2, 鄭祥雄1, 李頻1, 林芬1, 鄒式文1

摘要:目的探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者血清白細胞介素-37(IL-37) 水平的變化及其相應(yīng)的臨床意義。方法采用ELISA方法測定74例SLE患者和51例健康者(對照組)血清IL-37水平，比較SLE患者和對照組IL-37水平，分析SLE患者IL-37水平與白細胞介素-6(IL-6)水平、α干擾素(INF-α)水平、補體C3、補體C4、SLE疾病活動度指數(shù)(SLEDAI)的相關(guān)關(guān)系，檢測糖皮質(zhì)激素治療前后14例SLE患者血清IL-37水平。結(jié)果與對照組比較，SLE患者血清IL-37水平明顯升高，差別有統(tǒng)計學意義；SLE患者血清IL-37、IL-6及INF-α水平存在正相關(guān)關(guān)系，但與C3、C4、SLEDAI無顯著相關(guān)；14例SLE患者經(jīng)過糖皮質(zhì)激素治療后，其IL-37水平顯著降低。結(jié)論SLE患者血清IL-37水平高于健康人；經(jīng)過糖皮質(zhì)激素治療后，SLE患者的血清IL-37水平下降。

關(guān)鍵詞:紅斑狼瘡，系統(tǒng)性； 白細胞介素-1； 細胞因子類

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus, SLE)是一種多器官、多系統(tǒng)受累的自身免疫性炎癥性疾病。SLE患者體內(nèi)的免疫調(diào)節(jié)功能出現(xiàn)異常，T調(diào)節(jié)細胞(T regulatory cells, Tregs)與Th17細胞的比例失去平衡, 細胞因子之間失去平衡[1-2]。白細胞介素-37(interleukin-37, IL-37)是一種抗炎性細胞因子，是固有免疫應(yīng)答的天然抑制物[3]。本研究檢測SLE患者血清IL-37的水平，觀察其與白細胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、α干擾素(interferon-α, IFN-α)、補體C3、補體C4和SLE疾病活動度指數(shù)(SLE activity index, SLEDAI)的關(guān)系，并探討糖皮質(zhì)激素治療前后SLE患者血清IL-37水平的變化。

1對象與方法

1.1對象選擇2013年1-12月在筆者醫(yī)院住院的74例SLE患者，均符合1982年美國風濕病學院修訂的診斷標準，其中女性71例，男性3例，年齡(31.2±11.9)歲(13～60歲)，病程1月～12年。入院時SLEDAI積分0～4分者4例，5～9分者19例，10～14分者25例，≥15分者26例。所有病例無合并感染性疾病、惡性腫瘤或其他風濕性疾病。選擇同期健康體檢者51例作為對照組，其中女性48例，男性3例，年齡(35.5±13.4)歲(12～69歲)。2組之間性別、年齡的差別無統(tǒng)計學意義，具有可比性。所有入選對象均知情并同意。

1.2方法

1.2.1標本采集收集74例SLE患者入院時的血清及糖皮質(zhì)激素治療后的14例患者的血清。所有待檢測的對象均在清晨空腹采集靜脈血3 mL，室溫放置30 min后，1 000 r/min離心5 min，收集血清，-70 ℃保存待測。

1.2.2血清IL-37、IL-6、IFN-α的檢測采用ELISA法，所有標本均采用同一批號試劑(人血清IL-37、IL-6、IFN-α ELISA試劑批號均為201404，美國TSZ公司)同時測定。嚴格按試劑盒說明書操作。

1.2.3補體C3、C4的測定采用速率散射比濁法測定(補體C3檢測試劑批號：M309352；補體C4檢測試劑批號：M308279，均為美國Beckman-Coulter公司)。

2結(jié)果

2.1血清IL-37水平對照組血清IL-37水平為(25.945 2±7.489 4)pg/mL，SLE組為(50.737 6±63.791 1)pg/mL，差別具有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。

2.2IL-6和IFN-α水平對照組血清IL-6水平為(20.050 1±7.367 1)ng/L，SLE組為(36.826 4±32.164 8)ng/L，差別具有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。對照組血清IFN-α水平為(28.357 3±9.251 4)μg/L，SLE組為(48.555 0±58.796 8)μg/L，差別無統(tǒng)計學意義(P=0.126)。

2.3糖皮質(zhì)激素治療前后血清IL-37水平變化SLE患者接受糖皮質(zhì)激素治療前的血清IL-37水平為(40.243 8 ±26.892 1)pg/mL，治療后為(27.435 1±10.706 8)pg/mL，差別具有統(tǒng)計學意義(P=0.001)。14例SLE患者臨床資料及治療前后血清IL-37水平見表1。

表1　14例SLE患者臨床資料及接受甲基強的松龍治療前后比較

SLE：系統(tǒng)性紅斑狼瘡； SLEDAI：SLE疾病活動度指數(shù).

2.4SLE患者血清IL-37水平與IL-6、IFN-α、補體C3、補體C4、SLEDAI的相關(guān)性分析SLE患者血清IL-37與IL-6、IFN-α成正相關(guān)的關(guān)系(圖1，2),與補體C3無相關(guān)關(guān)系(R=-0.135，P=0.253),與C4無相關(guān)關(guān)系(R=-0.078，P=0.507),與SLEDAI無相關(guān)關(guān)系(R=-0.016，P=0.891)。

3討論

SLE是常見的自身免疫性疾病。促炎性細胞因子、抗炎性細胞因子在SLE的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。促炎性細胞因子IL-6和IFN-α均參與了SLE的發(fā)病。SLE患者血中含有高滴度的IL-6和IFN-α[4]。Lyn缺陷的小鼠的B淋巴細胞產(chǎn)生大量的IL-6，IL-6促進B淋巴細胞和T淋巴細胞過度活

SLE：系統(tǒng)性紅斑狼瘡； IL-6：白細胞介素-6； IL-37：白細胞介素-37.　R=0.884，P=0.000.圖1　Spearman相關(guān)分析SLE患者血清IL-37水平與IL-6水平的相關(guān)Fig 1　Correlation between IL-37 levels and IL-6 levels in SLE patients by Spearman analysis

SLE：系統(tǒng)性紅斑狼瘡； IFN-α：α干擾素； IL-37：白細胞介素-37.　R=0.74，P=0.000.圖2　Spearman相關(guān)分析SLE患者血清IL-37水平與IFN-α水平的相關(guān)性Fig 2　Correlation between IL-37 levels and IFN-α levels in SLE patients by Spearman analysis

化，小鼠在這種高水平的IL-6的細胞因子環(huán)境中易發(fā)展成SLE或其他自身免疫性疾病[5]。IFN-α促進單核細胞分化為樹突狀細胞(dendritic cells,DC)，并促進不成熟的DC變?yōu)槌墒斓腄C。IFN-α促進活化的B淋巴細胞轉(zhuǎn)化為分泌抗體的漿細胞?？乖贵w復合物被漿細胞樣DC攝取后，通過TLR 7/9通路，又產(chǎn)生更多的IFN-α。IFN-α參與Treg與效應(yīng)T細胞的平衡。增多的IFN-α會增強效應(yīng)T細胞的功能，抑制Treg的功能[6]。本研究中，SLE患者血清IL-6水平高于對照組。

IL-37是一種抗炎性細胞因子[7]。其亞型IL-37b的成熟體與IL-18BP和IL-18Rα的Fc段結(jié)合，抑制IL-18信號傳導通路，導致NF-κB通路受抑制，從而抑制炎癥反應(yīng)；IL-37b的成熟體進入細胞核，與Smad3結(jié)合，抑制p38MAPK的磷酸化，最終導致Toll樣受體(TLR)誘導的促炎性細胞因子的mRNA的轉(zhuǎn)錄被阻止。轉(zhuǎn)IL-37基因的小鼠能避免出現(xiàn)LPS誘發(fā)的休克，也能避免出現(xiàn)右旋糖苷誘發(fā)的結(jié)腸炎。在上皮細胞或巨噬細胞中表達的IL-37，能完全抑制促炎性細胞因子的合成[8]。在體外，重組人IL-37能抑制SLE患者血單個核細胞生產(chǎn)IL-6、TNF-α、和IL-1β[9]。用siRNA干擾外周血單個核細胞表達IL-37b,導致IL-6、TNF-α、和IL-1β等促炎性細胞因子的合成大幅增加[8]。

本研究中，IL-37在健康人血清中呈低度表達，在SLE患者體內(nèi)的表達卻顯著升高，并且與促炎性細胞因子IL-6和IFN-α的水平呈正相關(guān)。因此，體內(nèi)的IL-37可能通過負反饋的機制來抑制SLE過度的炎癥反應(yīng)，在SLE的發(fā)病過程中起到保護作用。升高的IL-37可能對抑制體內(nèi)促炎性細胞因子的生成有一定的作用，以盡可能把炎癥反應(yīng)控制在一定的范圍，減少過度的炎癥反應(yīng)對正常的組織或器官所造成的損害。

Song等報道，糖皮質(zhì)激素能下調(diào)SLE患者體內(nèi)促炎性細胞因子水平、血清IL-37水平和外周血單個核細胞IL-37 mRNA的表達[10]。本研究中，14例SLE患者經(jīng)過甲基強的松龍治療后，血清IL-37水平也顯著下降。由于糖皮質(zhì)激素抑制了SLE的炎癥反應(yīng)，導致促炎性細胞因子水平下降，隨后機體可能通過負反饋調(diào)節(jié)機制，SLE患者的IL-37水平隨著下調(diào)。

本研究中，IL-37水平與補體C3、C4、SLEDAI之間不存在相關(guān)關(guān)系，與其他報道不同[9]，這可能與測量技術(shù)不同有關(guān)，或與本研究病例數(shù)太少有關(guān)。SLEDAI評分標準中不涉及肺動脈高壓和肺間質(zhì)性病變，表明SLEDAI評分標準有一定的局限性。表1中序號為3的SLE患者出現(xiàn)嚴重的全身多發(fā)性彌漫性大皰性皮疹。由于皮疹在SLEDAI評分標準中僅占1分，該患者SLEDAI積分只為5分，但其IL-37水平顯著升高，為36.591 5 pg/mL。因此，如果能綜合應(yīng)用補體C3、C4、SLEDAI、抗ds-DNA、血常規(guī)、尿常規(guī)、IL-37等多種指標，就可能更準確地判斷SLE的炎癥程度，從而指導SLE的臨床治療。

參考文獻：

[1]Yu S,Kuan W,Wong C,etal. Immunopathological roles of cytokines, chemokines, signaling molecules, and pattern-recognition receptors in systemic lupus erythematosus[J].ClinDevImmunol, 2012, 2012:1-14.

[2]Apostolidis S A,Lieberman L A,Kis-Toth K,etal. The dysregulation of cytokine networks in systemic lupus erythematosus[J].JInterferonCytokinesRes, 2011,31:769-779.

[3]Boraschi D,Lucchesi D,Hainzl S,etal. IL-37: a new anti-inflammatory cytokine of the IL-1 family[J].EurCytokineNetw,2011,22(3):127-147.

[4]Lyn-Cook B D,Xie C,Oates J,etal. Increased expression of Toll-like receptors (TLRs) 7 and 9 and other cytokines in systemic lupus erythematosus (SLE) patients: ethnic differences and potential new targets for therapeutic drugs[J].MolImmunol,2014,61(1):38-43.

[5]Tsantikos E,Oracki S A,Quilici C,etal. Autoimmune disease in Lyn-deficient mice is dependent on an inflammatory environment established by IL-6[J].JImmunol,2010,184(3):1348-1360.

[6]Golding A, Rosen A, Petri M,etal. Interferon-alpha regulates the dynamic balance between human activated regulatory and effector T cells: implications for antiviral and autoimmune responses[J].Immunology,2010,131(1):107-117.

[7]Banchereau J,Pascual V,O'Garra A. From IL-2 to IL-37: the expanding spectrum of anti-inflammatory cytokines[J].NatImmunol,2012,13(10):925-931.

[8]Nold M F,Nold-Petry C A,Zepp J A,etal. IL-37 is a fundamental inhibitor of innate immunity[J].NatImmunol,2010,11(11):1014-1022.

[9]Ye L,Ji L,Wen Z,etal. IL-37 inhibits the production of inflammatory cytokines in peripheral blood mononuclear cells of patients with systemic lupus erythematosus: its correlation with disease activity[J].JTranslMed,2014,12(69):1-8.

[10]Song L, Qiu F, Fan Y,etal. Glucocorticoid regulates interleukin-37 in systemic lupus erythematosus[J].JClinImmunol,2013,33(1):111-117.

(編輯:張慧茹)

Serum IL-37 Levels in Patients with SLE and its Association with Clinical Characteristics

YANG Xuwei1, ZHANG Yang2, ZHENG Xiangxiong1, LI Pin1, LIN Fen1, ZOU Shiwen1

1.Department of Rheumatology, 2.Department of Laboratory,Fujian Medical University Union Hospital, Fuzhou 350001, China

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the change of serum IL-37 levels in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and its association with clinical characteristics.MethodsThe serum IL-37 levels in 74 patients with SLE and 51 healthy people were measured by way of ELISA, and then IL-37 levels of both groups were compared; the correlation between IL-37 levels and α-interferon (IFN-α) levels, interleukin 6(IL-6) levels, complement 3(C3), complement 4(C4), SLE disease activity index (SLEDAI) were analyzed.Also IL-37 levels in 14 patients were measured before and after glucocorticoid therapy.ResultsCompared with healthy subjects, serum IL-37 levels in SLE patients is higher with a statistical significance.A significantly positive correlation was observed between serum IL-37 levels and serum IL-6 levels or serum INF-α levels.There were no significant correlations between serum IL-37 levels and C3, C4, SLEDAI; the serum IL-37 levels in 14 patients with SLE dropped significantly after the glucocorticoid therapy.ConclusionSerum IL-37 levels in patients with SLE were higher than those in healthy subjects.Serum IL-37 levels in patients with SLE dropped after the administration of glucocorticoid and this change was statistically significant.

KEY WORDS:lupus erythematosus, systemic； interleukin-1； cytokines

作者簡介:楊旭偉(1968-)，副主任醫(yī)師，醫(yī)學博士. Email:yangxwla@126.com

收稿日期:2014-10-16

中圖分類號:R392.11； R392.12； R593.24； R593.241； R977.6

文獻標志碼:A

文章編號:1672-4194(2015)01-0020-04

作者單位: 福建醫(yī)科大學 附屬協(xié)和醫(yī)院,福州3500011.風濕科；2.檢驗科