急性腦梗死患者外周血清巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、基質(zhì)金屬蛋白酶-9和超敏C-反應(yīng)蛋白水平與病情嚴(yán)重程度的關(guān)系

于治華，王君，樊建華，高紅華，高連波

急性腦梗死患者外周血清巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、基質(zhì)金屬蛋白酶-9和超敏C-反應(yīng)蛋白水平與病情嚴(yán)重程度的關(guān)系

于治華，王君，樊建華，高紅華，高連波

[摘要]目的探討急性腦梗死患者血清巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9 (MMP-9)、超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)水平與病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性。方法急性腦梗死患者101例根據(jù)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評(píng)分分為輕型腦梗死組(A組，NIHSS評(píng)分<4分，n=38)、中型腦梗死組(B組，NIHSS評(píng)分4～15分，n=36)和重型腦梗死組(C組，NIHSS評(píng)分>15分，n=27)；同期住院44例有動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素非急性腦梗死患者為對(duì)照組(D組)。酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中MIF、MMP-9水平，免疫散射比濁法檢測(cè)hs-CRP水平。結(jié)果各組間MIF、MMP-9及hs-CRP水平從高到低依次為C組、B組、A組、D組(P< 0.05)。MIF與MMP-9 (r=0.301, P<0.01)和hs-CRP(r=0.309, P<0.001)呈正相關(guān)。結(jié)論急性腦梗死患者血清MIF、MMP-9、hs-CRP水平升高，可能預(yù)測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性。

[關(guān)鍵詞]急性腦梗死；動(dòng)脈粥樣硬化；巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；超敏C-反應(yīng)蛋白；美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表

[本文著錄格式]于治華，王君，樊建華，等.急性腦梗死患者外周血清巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、基質(zhì)金屬蛋白酶-9和超敏C-反應(yīng)蛋白水平與病情嚴(yán)重程度的關(guān)系[J].中國(guó)康復(fù)理論與實(shí)踐, 2015, 21(11): 1256-1259.

CITED AS: Yu ZH, Wang J, Fan JH, et al. Relationship of serum macrophage migration inhibitory factor, matrix metalloproteinase-9 and hypersensitive C-reactive protein with severity of acute cerebral infarction [J]. Zhongguo Kangfu Lilun Yu Shijian, 2015, 21(11): 1256-1259.

腦梗死的病理基礎(chǔ)是動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)，參與動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥因子仍是目前研究的熱點(diǎn)。巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)是一種多效能的細(xì)胞因子，主要集炎癥因子、酶和激素作用于一身，參與動(dòng)脈粥樣硬化的病理生理反應(yīng)[1-2]，在腦梗死的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。基質(zhì)金屬蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9, MMP-9)屬于明膠酶B，能特異性地與細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合，水解動(dòng)脈硬化斑塊的纖維帽結(jié)構(gòu)，破壞斑塊的穩(wěn)定性[3]。研究表明，MIF、MMP-9及超敏C-反應(yīng)蛋白(hypersensitive C-reactive protein, hs-CRP)與急性腦梗死(acute cerebral infarction)的病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)[4-5]。本研究通過(guò)比較不同病情程度的急性腦梗死患者外周血清MIF、MMP-9及hs-CRP水平，探討三者在判斷病情程度中的作用。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇2014年1～10月于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的急性腦梗死患者101例為病例組。均符合第四屆全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，全部經(jīng)頭顱MRI或CT證實(shí)的急性腦梗死。發(fā)病72h內(nèi)。

入院時(shí)，由經(jīng)統(tǒng)一培訓(xùn)的兩名住院醫(yī)師采用美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院腦卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale, NIHSS)評(píng)定神經(jīng)功能情況。出院時(shí)，由相同住院醫(yī)師再次評(píng)定。

根據(jù)患者NIHSS評(píng)分分成3組。輕度腦梗死組(A 組)：NIHSS評(píng)分<4分；38例，其中男性20例，女性18例；年齡(61.3±9.87)歲。中度腦梗死組(B組)：NIHSS評(píng)分4～15分；36例，其中男性19例，女性17例；年齡(60.65±9.12)歲。重度腦梗死組(C組)：NIHSS評(píng)分>15分；27例，其中男性13例，女性14例；年齡(60.73±10.02)歲。

同期住院同年齡組患者，根據(jù)病史、查體及頭顱MRI證實(shí)的無(wú)腦梗死，經(jīng)頸動(dòng)脈彩超檢查提示均有頸動(dòng)脈硬化斑塊，設(shè)為對(duì)照組(D組)。對(duì)照組共44例，其中男性22例，女性22例；平均年齡(60.36±10.21)歲。

各組間年齡、性別無(wú)顯著性差異(P>0.05)

排除標(biāo)準(zhǔn)：①出血性腦梗死；②重度糖尿病或冠心病，伴有感染、炎癥反應(yīng)性疾病、嚴(yán)重肝腎功能異常、多器官功能衰竭，接受甾體激素類藥物、免疫抑制劑或其他抗炎藥物治療；③入院前口服他汀類、葉酸及維生素類藥物；④血液系統(tǒng)疾病、房顫導(dǎo)致的腦梗死；⑤近6個(gè)月重大手術(shù)、外傷史，腫瘤和自身免疫性疾病。

所有患者均簽署知情同意書。

1.2方法

受試者于入院后次日清晨(發(fā)病72 h內(nèi))空腹自肘靜脈抽取靜脈血約3 ml，置于含促凝劑的真空采血管內(nèi)，輕輕搖勻，3000 r/min離心10 min。分離血清，置于2 ml EP管中；編號(hào)標(biāo)記，保存于-80℃冰箱備用。

采用ELISA法檢測(cè)MIF (試劑盒購(gòu)于RAYBIO公司)、MMP-9 (試劑盒購(gòu)于上海酶聯(lián)生物科技有限公司)。操作按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

hs-CRP、總膽固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein, HDL)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein, LDL)采用西門子Dimension EXL with LM全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以(xˉ±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析(ANOVA)，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；病例組MIF、MMP-9和hs-CRP相關(guān)性分析間相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。顯著性水平α=0.05。

2　結(jié)果

各組間收縮壓、舒張壓和LDL存在顯著性差異(P<0.05)。見(jiàn)表1。

各組間MIF、MMP-9和hs-CRP存在顯著性差異(P<0.05)，差異主要存在于C組與D組間。見(jiàn)表2。

病例組MIF和MMP-9(r=0.301, P=0.004)、MIF和hs-CRP(r=0.309, P<0.001)的表達(dá)呈正相關(guān)，MMP-9和hs-CRP(r=0.088, P=0.292)無(wú)明顯相關(guān)性。

表1　各組臨床資料比較

表2　各組血清MIF、MMP-9及hs-CRP比較

3　討論

動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)，受累動(dòng)脈從血管內(nèi)膜開(kāi)始，出現(xiàn)脂質(zhì)和復(fù)合糖類積聚，纖維組織增生，形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊；當(dāng)斑塊不穩(wěn)定破裂，或覆蓋其上的內(nèi)皮脫落，內(nèi)皮下組織和脂質(zhì)核心暴露，誘發(fā)原位血栓形成，引起血流動(dòng)力學(xué)障礙，發(fā)生急性腦梗死。其中動(dòng)脈硬化纖維帽撕裂是引起急性腦梗死的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，MIF[4]、MMP-9[5]和hs-CRP[6]與斑塊的不穩(wěn)定性密切相關(guān)。

MIF是一種高度恒定及多效能的細(xì)胞因子[7]。Schober等研究證明，MIF參與動(dòng)脈粥樣硬化的整個(gè)發(fā)展過(guò)程[8-9]。MIF的主要作用是抑制巨噬細(xì)胞的自由移動(dòng)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞在炎癥局部浸潤(rùn)、聚集、增生、激活[10]，進(jìn)而破壞斑塊的穩(wěn)定性，引起斑塊出血破裂[11]。本研究顯示，隨著急性腦梗死病情加重，患者外周血清MIF水平逐漸升高。與此前的研究結(jié)果一致[4,12]。

炎癥反應(yīng)參與腦梗死的病理生理過(guò)程。急性期hs-CRP水平反映炎癥反應(yīng)程度[13]，已有學(xué)者發(fā)現(xiàn)其與腦梗死急性期斑塊的炎癥反應(yīng)程度密切相關(guān)[14]。hs-CRP有可能成為顱內(nèi)外血管事件的重要檢測(cè)指標(biāo)[15]。本研究顯示，急性重癥腦梗死患者外周血清hs-CRP水平升高，提示斑塊不穩(wěn)定。本研究還發(fā)現(xiàn)MIF水平與hs-CRP呈正相關(guān)，與此前的研究相同[6, 12]。

MMP-9的主要作用是降解細(xì)胞外基質(zhì)[16-17]，導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞向內(nèi)膜下遷移，引起斑塊不穩(wěn)定，破裂出血[18]；同時(shí)MMP-9也破壞血腦屏障[19]，可導(dǎo)致炎癥因子擴(kuò)散到腦實(shí)質(zhì)內(nèi)，加重炎癥反應(yīng)，引起更大范圍的腦損傷。

血管內(nèi)MMP-9存在于巨噬細(xì)胞豐富的斑塊肩部區(qū)域，與斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)[20]。正常情況下MMP-9表達(dá)量較低[21]；急性腦梗死發(fā)生后，MMP-9表達(dá)量升高；抑制MMP-9表達(dá)可減輕神經(jīng)損傷[22]。本研究顯示，急性重癥腦梗死患者M(jìn)MP-9表達(dá)水平明顯升高，與Lenti的研究一致[23]。但本研究未發(fā)現(xiàn)輕、中度腦梗死組較對(duì)照組有顯著性差異，應(yīng)擴(kuò)大樣本量，繼續(xù)研究。

MIF和MMP-9均參與巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)[24]，破壞膠原纖維。本研究發(fā)現(xiàn)，血清MIF和MMP-9的表達(dá)正相關(guān)。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)脈硬化形成中，MIF誘導(dǎo)MMP-9產(chǎn)生增多[25]。但MIF和MMP-9相互作用機(jī)制尚不清楚，兩者是否有協(xié)同促進(jìn)作用，有待進(jìn)一步研究。

由于本實(shí)驗(yàn)入選患者受限，樣本量少，未測(cè)定患者發(fā)病72 h后表達(dá)水平的變化，結(jié)果還不能完全反映人群的特征。需進(jìn)一步進(jìn)行大樣本和多中心觀察。

綜上所述，急性腦梗死患者外周血清MIF和MMP-9水平升高，與神經(jīng)功能缺損程度相關(guān)。臨床上聯(lián)合檢測(cè)MIF和MMP-9水平，可能預(yù)測(cè)急性腦梗死的病情程度；早期抑制兩者表達(dá)，有望改善患者預(yù)后。

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·專題·

Relationship of Serum Macrophage Migration Inhibitory Factor, Matrix Metalloproteinase-9 and Hypersensitive C-ReactiveProteinwith Severityof AcuteCerebral Infarction

YU Zhi-hua, WANGJun, FANJian-hua, GAOHong-hua, GAOLian-bo
Department of Neurology, the Fourth Hospital Affiliated to China Medical University, Shenyang, Liaoning 110032, China

Abstract:Objective To investigate the relationship of serum levels of macrophage migration inhibitory factor (MIF), matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), hypersensitive C-reactive protein (hs-CRP) with the severity of acute cerebral infarction (ACI). Methods101 patientswith ACI wereenvolved and divided into 3 groupsaccording to thescoresof National Instituteof Health Stroke Scale(NIHSS): mild group (group A, n=38, NIHSS score<4), moderate group (group B, n=36, NIHSS score 4-15) and severe group (group C, n=27, NIHSS score>15). Meanwhile, 44 non-ACI inpatientswith atherosclerosiswereincluded ascontrol group (group D). Their serum MIF and MMP-9 weredetected with ELISA, and hs-CRPwith immunoturbidimety. ResultsThelevelsof serum MIF, MMP-9 and hs-CRPranged from more to lessasgroups C, B, A and D (P<0.05). Therewaspositivecorrelation of MIF with MMP-9 (r=0.301, P<0.01) and hs-CRP(r=0.309, P< 0.001). Conclusion Serum MIF, MMP-9 and hs-CRPlevelsincreased with theseverity in ACI patients, which may beprediction of atheroscleroticplaqueinstability.

Key words:acutecerebral infarction; atherosclerosis; macrophagemigration inhibitory factor; matrix metalloproteinase-9; hypersensitiveC-reactiveprotein; National Instituteof Health StrokeScale

(收稿日期：2015-06-29修回日期：2015-09-01)

作者簡(jiǎn)介：作者單位：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，遼寧沈陽(yáng)市110032。于治華(1985-)，女，漢族，山東榮城市人，碩士，醫(yī)師，主要研究方向：缺血性腦血管病。通訊作者：高連波(1965-)，男，漢族，遼寧沈陽(yáng)市人，碩士，教授，主要研究方向：缺血性卒中的基礎(chǔ)與臨床研究。E-mail: gaolbdoc@163.com。

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No.81471198)。

DOI:10.3969/j.issn.1006-9771.2015.11.004

[中圖分類號(hào)]R743.32

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1006-9771(2015)11-1256-04