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    乳腺癌VEGF-C和VEGFR-3表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系

    2015-03-08 09:44:00劉麗娜
    關(guān)鍵詞:淋巴管浸潤(rùn)性內(nèi)皮

    劉麗娜

    乳腺癌VEGF-C和VEGFR-3表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系

    劉麗娜

    目的分析乳腺癌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)表達(dá)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)聯(lián)性。方法手術(shù)切除乳腺纖維瘤標(biāo)本23例作為對(duì)照組, 選取同期切除乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌標(biāo)本48例作為觀察組, 通過免疫組化法對(duì)兩組標(biāo)本VEGF-C及VEGFR-3進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果觀察組VEGF-C表達(dá)陽性率、VEGFR-3表達(dá)陽性率均明顯比對(duì)照組高(P<0.05)。經(jīng)統(tǒng)計(jì), 發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本的VEGFR-3表達(dá)陽性率及VEGF-C陽性率均顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本(P<0.05)。結(jié)論與良性病變相比, 乳腺癌患者VEGF-C及VEGFR-3表達(dá)顯著增加, 且發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本VEGFR-3表達(dá)陽性率、VEGF-C陽性率明顯高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本, 說明VEGF-C及VEGFR-3表達(dá)對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯的促進(jìn)作用。

    乳腺癌;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

    惡性腫瘤最重要生物學(xué)特性即為轉(zhuǎn)移, 不同器官轉(zhuǎn)移是大多數(shù)惡性腫瘤患者死亡的重要原因[1], 其中最為常見的轉(zhuǎn)移方式為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖的重要載體, 有研究顯示VEGF-C與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定聯(lián)系[2], 然而VEGF-C促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的機(jī)制還不清楚, 且目前不同研究人員在VEGFR-3與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性方面仍有一定爭(zhēng)議。本次研究通過對(duì)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌標(biāo)本與乳腺纖維瘤標(biāo)本中VEGF-C及VEGFR-3表達(dá)情況進(jìn)行分析,探討VEGFR-3及VEGF-C表達(dá)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間的關(guān)系, 現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取本院2012年6月~2014年8月手術(shù)切除乳腺纖維瘤標(biāo)本23例作為對(duì)照組, 選取同期切除乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌標(biāo)本48例作為觀察組, 所有標(biāo)本均來源于女性患者, 年齡39~58歲, 平均年齡(46.3±3.5)歲;觀察組腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例, 無腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移22例;腫塊長(zhǎng)徑為5 cm以上5例,2~5 cm28例,2 cm以下15例;根據(jù)國(guó)際病理學(xué)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn), Ⅰ級(jí)16例, Ⅱ級(jí)17例, Ⅲ級(jí)15例。兩組標(biāo)本取樣后檢驗(yàn)時(shí)間、取樣量等方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

    1.2 方法 對(duì)所有標(biāo)本采用免疫組化染色SP法進(jìn)行檢測(cè),采用美國(guó)Santa Cruz公司生產(chǎn)的兔抗人VEGF-C及VEGFR -3多克隆抗體與DAB試劑盒與免疫組化染色SP試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)進(jìn)行檢測(cè):將標(biāo)本利用石蠟進(jìn)行包埋后將其切片, 每片厚度為4 μm, 以試劑盒說明書為依據(jù)進(jìn)行相應(yīng)操作, 行微波抗原修復(fù), 其中一抗工作濃度為1:100。陰性對(duì)照用PBS緩沖液而非一抗, 設(shè)置已知陽性的結(jié)腸癌組織切片作陽性對(duì)照。

    1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) 按照Shimizu法擬定診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]:在顯微鏡下觀察為棕黃色為陽性, 按照著色強(qiáng)度與范圍加以處理,陽性細(xì)胞在視野內(nèi)全部細(xì)胞中占據(jù)的比例為著色范圍。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組標(biāo)本中VEGF-C表達(dá)情況分析 VEGF-C主要在乳腺癌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)且為棕黃色或淡黃色顆粒, 細(xì)胞核、細(xì)胞膜中無染色。觀察組48例乳腺癌標(biāo)本中35例(72.9%) VEGF-C表達(dá)為陽性, 而對(duì)照組23例標(biāo)本中3例(13.0%) VEGF-C表達(dá)為陽性, 觀察組VEGF-C表達(dá)陽性率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本VEGF-C陽性率為54.5%, 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本VEGF-C陽性率為88.5%, 經(jīng)對(duì)比可知有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本VEGF-C陽性率明顯比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本高(P<0.05)。見表1。

    2.2 兩組標(biāo)本中VEGFR-3表達(dá)情況分析 經(jīng)檢驗(yàn)VEGFR-3在乳腺癌癌巢周圍間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)且為大片棕黃色或淡黃色, 細(xì)胞質(zhì)中無染色。觀察組48例乳腺癌標(biāo)本中33例(68.8%)VEGFR-3表達(dá)為陽性, 對(duì)照組23例標(biāo)本中2例(8.7%) VEGFR-3表達(dá)為陽性, 觀察組VEGFR-3表達(dá)陽性率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本VEGFR-3陽性率顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本(P<0.05)。見表1。

    表1 48例乳腺癌標(biāo)本淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與VEGF-C、VEGFR-3表達(dá)情況分析[n(%)]

    3 討論

    在過去很長(zhǎng)一段時(shí)間中, 人們更關(guān)注于血管形成對(duì)實(shí)體腫瘤形成及進(jìn)展的重要推動(dòng)作用, 忽視了腫瘤進(jìn)展中淋巴管形成的重要意義。近年來有研究顯示, 淋巴管因自身結(jié)構(gòu)及功能的相應(yīng)特征可參與到腫瘤生長(zhǎng)維持之中, 同時(shí)也是諸多惡性腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散的重要方法, 特別是在具有豐富淋巴管的器官中, 這一現(xiàn)象更為明顯[4]。在這一背景下, VEGF-C與VEGFR-3逐漸成為了研究熱點(diǎn)。

    VEGF-C屬于血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子重要成員, 為人類首個(gè)發(fā)現(xiàn)的促淋巴管生成因子。而VEGFR-3是VEGFR家族的一員, 屬于內(nèi)皮受體型酪氨酸蛋白激酶中的一種。國(guó)內(nèi)有研究[5]顯示, 腫瘤細(xì)胞能夠合成VEGF-C, VEGF-C經(jīng)絲氨酸蛋白纖溶酶作用可發(fā)生水解, 生成具有活性的物質(zhì), 而該物質(zhì)和表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的VEGFR-3親和力較高, 據(jù)統(tǒng)計(jì)二者的親和力是VEGF-C與VEGFR-3親和力的400倍以上。當(dāng)該活性物質(zhì)和VEGFR-3結(jié)合之后可快速進(jìn)行磷酸化,能夠誘導(dǎo)下游信號(hào)傳導(dǎo)過程, 如對(duì)VEGFR-3所致ERK1、ERK2活化及Shc磷酸化加以激活, 可促進(jìn)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增生, 使之發(fā)生擴(kuò)張或增生, 從而促使腫瘤發(fā)生淋巴管轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)大幅增加。本次研究通過對(duì)本院收集的手術(shù)切除的23例乳腺纖維瘤標(biāo)本(對(duì)照組)與48例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌標(biāo)本(觀察組)VEGF-C及VEGFR-3表達(dá)情況展開免疫組化法檢測(cè), 發(fā)現(xiàn)觀察組VEGF-C表達(dá)陽性率、VEGFR-3表達(dá)陽性率均明顯比對(duì)照組高, 且VEGF-C表達(dá)位置主要為乳腺癌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi), VEGFR-3在乳腺癌癌巢周圍間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。經(jīng)對(duì)48例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌標(biāo)本展開進(jìn)一步分析, 發(fā)現(xiàn)26例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本中VEGFR-3表達(dá)陽性率、VEGF-C陽性率均明顯比22例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)本高, 由此可見VEGF-C及VEGFR-3可促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生。

    綜上所述, 與良性病變相比, 乳腺癌患者VEGF-C及VEGFR-3表達(dá)明顯增多, VEGF-C及VEGFR-3表達(dá)對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯的促進(jìn)作用。

    [1]杜宏道, 盛薇, 高希濤, 等. vegf-c、cxcr4在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中的表達(dá)及意義.西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2012,33(1):75-79.

    [2]李凌, 陳立章.老年乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨床特征分析.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,3(14):1503,1511.

    [3]張陽, 汪春紅, 王英麗. VEGF-C和FLT-4在乳腺癌中的表達(dá)及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性.中國(guó)婦幼保健,2011,26(15):2351-2352.

    [4]王若珺, 初明, 岑羽捷, 等.新生淋巴管與乳腺癌淋巴管轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究進(jìn)展.生理科學(xué)進(jìn)展,2014,45(1):49-54.

    [5]何靜, 劉安文, 蔡婧, 等.姜黃素對(duì)乳腺癌細(xì)胞VEGF-C表達(dá)及增殖、侵襲性的影響.腫瘤防治研究,2011,38(10):1109-1112.

    10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.08.018

    2014-10-29]

    473000 河南省南陽市第二人民醫(yī)院腫瘤一病區(qū)

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