奧美沙坦酯平衡溶解度及油水分配系數(shù)的測(cè)定

郭佳營，何 瑩，馬攀勤，孫 進(jìn)

（沈陽藥科大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016；2. 寧夏康亞藥業(yè)有限公司，寧夏 銀川 750002）

奧美沙坦酯平衡溶解度及油水分配系數(shù)的測(cè)定

郭佳營1，何 瑩1，馬攀勤2，孫 進(jìn)1*

（沈陽藥科大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016；2. 寧夏康亞藥業(yè)有限公司，寧夏 銀川 750002）

目的對(duì)奧美沙坦酯的平衡溶解度和油水分配系數(shù)進(jìn)行測(cè)定，為其制劑研究提供依據(jù)。方法采用高效液相色譜法測(cè)定奧美沙坦酯在水及不同pH值的緩沖溶液中的平衡溶解度；以奧美沙坦酯在正辛醇和水相中的質(zhì)量濃度比，計(jì)算其油水分配系數(shù)。結(jié)果測(cè)定條件下奧美沙坦酯在水中的平衡溶解度為12.55 mg·L-1，且在一定pH值范圍內(nèi)奧美沙坦酯的平衡溶解度隨著pH值的升高先降低而后基本保持不變；奧美沙坦酯在正辛醇-水體系中的油水分配系數(shù)lgP為1.51，隨著pH值的升高先升高再降低。結(jié)論奧美沙坦酯水溶性差，脂溶性好，在整個(gè)胃腸道具有較好的吸收。

藥劑學(xué)；理化性質(zhì)；高效液相色譜法；奧美沙坦酯；平衡溶解度；油水分配系數(shù)

奧美沙坦酯（olmesartanmedoxomil）由日本第一三共株式會(huì)社開發(fā)上市，商品名為BenicarTM。奧美沙坦酯具有較強(qiáng)降壓作用，作為前體藥物，口服后在小腸壁完全去酯化轉(zhuǎn)化成活性代謝產(chǎn)物奧美沙坦（olmesartan），后者通過選擇性阻斷血管緊張素II（Ang II）與血管平滑肌AT I受體結(jié)合而阻斷Ang II收縮血管的作用[1-2]。

藥物的理化參數(shù)如：平衡溶解度、油水分配系數(shù)，對(duì)預(yù)測(cè)體內(nèi)過程有很大幫助。國內(nèi)尚無奧美沙坦酯的平衡溶解度和油水分配系數(shù)的文獻(xiàn)報(bào)道。參考文獻(xiàn)方法[3-6]，本文作者對(duì)奧美沙坦酯的平衡溶解度和油水分配系數(shù)進(jìn)行了測(cè)定，為該藥物的制劑研究和開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

Waters高效液相色譜儀（包括Pump E2695 SeparationsModule，Waters 2489 UV/Visible Detector，美國Waters公司），UV-1801紫外-可見分光光度儀（北京瑞利分析儀器公司），TGL-16B離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠），pHS-2C酸度計(jì)（上海理達(dá)儀器廠），KQ-100超聲波清洗器（江蘇昆山超聲儀器有限公司）。

奧美沙坦酯對(duì)照品（含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.0%，中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)100864），奧美沙坦酯原料藥（含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.9%，自制），鹽酸、氫氧化鈉、磷酸二氫鉀、磷酸（分析純，天津科密歐試劑廠），正辛醇（分析純，山東禹王實(shí)業(yè)有限公司），二次蒸餾水（自制）。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的配制

2.1.1 不同pH緩沖溶液的配制

依據(jù)《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄配制pH值為1.2鹽酸溶液，pH值為3.6、4.5醋酸鹽緩沖溶液，以及pH值為2.0、5.5、6.5、7.2的磷酸鹽緩沖溶液。

2.1.2 奧美沙坦酯正辛醇溶液

精密稱取奧美沙坦酯原料藥50.1 mg，用正辛醇溶解并稀釋至50 mL，得質(zhì)量濃度為1.002 g·L-1的奧美沙坦酯正辛醇溶液。

2.1.3 奧美沙坦酯對(duì)照溶液

精密稱取奧美沙坦酯對(duì)照品25.0 mg，用乙腈溶解并稀釋至50 mL，得質(zhì)量濃度為500 mg·L-1的奧美沙坦酯對(duì)照溶液。

2.2奧美沙坦酯平衡溶解度的測(cè)定

2.2.1 色譜條件的選擇

色譜柱：YMC-Triart C18柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：15 mmol·L-1磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)pH值為3.4）-乙腈（體積比50:50）；流速：1.0 mL·min-1；檢測(cè)波長：250 nm；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。

2.2.2 線性關(guān)系的考察

取奧美沙坦酯對(duì)照品約250 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加適量乙腈使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為奧美沙坦酯對(duì)照儲(chǔ)備液；分別精密量取奧美沙坦酯對(duì)照儲(chǔ)備液適量，用乙腈稀釋成質(zhì)量濃度分別為5.0、10.0、25.0、50.0、100.0、500.0和1 000.0 mg·L-1的奧美沙坦酯系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。照紫外-可見分光光度法對(duì)質(zhì)量濃度為 10.0 mg·L-1的奧美沙坦酯對(duì)照溶液進(jìn)行全波長掃描，在波長253 nm處有最大吸收，再參考國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（YBH06992006）含量測(cè)定項(xiàng)下要求，確定檢測(cè)波長為250 nm。將上述奧美沙坦酯系列標(biāo)準(zhǔn)溶液分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以奧美沙坦酯的峰面積（A）對(duì)質(zhì)量濃度（ρ）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：A=2.21×104+221（r=1）。結(jié)果表明奧美沙坦酯質(zhì)量濃度在5.0～1 000.0 mg·L-1內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.3 精密度試驗(yàn)

取質(zhì)量濃度為500.0 mg·L-1的奧美沙坦酯對(duì)照溶液，在波長250 nm下連續(xù)測(cè)定6次，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.66%，小于2%，表明儀器精密度良好。

2.2.4 平衡溶解度的測(cè)定

取過量的奧美沙坦酯原料藥置于10 mL具塞試管中，分別加入7 mL的水，pH值1.2鹽酸溶液，pH值3.6、4.5醋酸鹽緩沖溶液，以及pH值2.0、5.5、6.5、7.2的磷酸鹽緩沖溶液，渦旋使藥物溶液達(dá)到過飽和，放入空氣恒溫振蕩器中，于37 ℃下振搖96 h。將飽和奧美沙坦酯溶液以4 000 r·min-1離心10 min后，取上層澄清溶液再次離心，離心后稀釋至適當(dāng)質(zhì)量濃度，取10 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；每個(gè)pH值樣品平行操作并測(cè)定3次。樣品依次測(cè)定時(shí)，待測(cè)樣品于4 ℃冰箱內(nèi)保存。另取對(duì)照溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算奧美沙坦酯在不同溶液中的平衡溶解度。

Fig. 1 Equilibrium solubilities of olmesartanmedoxomil in the media of different pH at 37 ℃圖 1 37 ℃下奧美沙坦酯在不同pH介質(zhì)中的平衡溶解度曲線圖

由圖1可知，奧美沙坦酯平衡溶解度對(duì)pH有依賴性，pH越低，平衡溶解度越大，中性介質(zhì)條件下溶解最少，水中平衡溶解度為12.55 mg·L-1。

2.3表觀油水分配系數(shù)的測(cè)定

取奧美沙坦酯原料藥適量，分別用各水相（水，pH值1.2鹽酸溶液，pH值3.6、4.5醋酸鹽緩沖溶液，以及pH值5.5、6.5的磷酸鹽緩沖溶液）飽和的正辛醇溶解，配制成質(zhì)量濃度為1 000 mg·L-1奧美沙坦酯的正辛醇溶液。取奧美沙坦酯的正辛醇溶液5 mL作為油相，加入水或緩沖溶液（被正辛醇飽和）5 mL作為水相，渦旋后，放入空氣恒溫振蕩器中于37 ?C振搖96 h。樣品取出后，離心15 min，靜置，取下層的水相用各水相溶液稀釋至適當(dāng)質(zhì)量濃度后，取10 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。每個(gè)pH值樣品平行操作并測(cè)定3次。樣品依次測(cè)定時(shí)，待測(cè)樣品于4 ℃冰箱內(nèi)保存。另取奧美沙坦酯對(duì)照溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算奧美沙坦酯在不同pH溶液中的質(zhì)量濃度記為ρ1，將奧美沙坦酯正辛醇溶液質(zhì)量濃度記為ρ，那么ρ正辛醇=ρ-ρ1，油水分配系數(shù)Po/w=（ρ-ρ1）/ρ水相。結(jié)果見圖2。

Fig. 2 lgPo/wof olmesartanmedoxomilinn-octanol-water/buffer solution systems圖 2 在正辛醇-水/介質(zhì)系統(tǒng)中奧美沙坦酯的lgPo/w值

奧美沙坦酯在正辛醇-水系統(tǒng)中l(wèi)gP值為1.51，且lgP隨著溶液pH值增大呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)。奧美沙坦酯在整個(gè)胃腸道中吸收均較好，因此制備奧美沙坦酯口服制劑的關(guān)鍵在于增加藥物在體內(nèi)的溶出度。

3 討論

a. 藥物的溶解度是藥物重要的理化性質(zhì)之一，對(duì)制劑的開發(fā)設(shè)計(jì)具有指導(dǎo)意義[7]。酯在酸堿環(huán)境下都存在水解反應(yīng)，在此過程中，酯在介質(zhì)中溶解，溶解的藥物部分水解，促使酯進(jìn)一步溶解，因此測(cè)定酯的平衡溶解度是比較困難的。在某一時(shí)刻溶解與水解達(dá)到平衡時(shí)，同時(shí)還在有酯的固體粉末的情況下，酯的平衡溶解度測(cè)定才有意義。預(yù)實(shí)驗(yàn)中分別在24、48、72和96 h取點(diǎn)測(cè)定，發(fā)現(xiàn)72 h和96 h時(shí)奧美沙坦酯的含量基本不變，說明72 h溶解與水解已達(dá)平衡，為保證平衡完全，故最終選擇96 h進(jìn)行相應(yīng)的測(cè)定。且試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)水解物在奧美沙坦酯最大吸收波長處有吸收，紫外-可見分光光度法準(zhǔn)確性不及高效液相色譜法，因此最終選擇高效液相色譜法測(cè)定奧美沙坦酯的平衡溶解度。

本實(shí)驗(yàn)通過測(cè)定奧美沙坦酯在不同pH值的緩沖溶液中的平衡溶解度，可知其具有pH依賴性：pH在0～2內(nèi)，奧美沙坦酯的平衡溶解度隨著pH的升高而急劇降低；pH在2～6內(nèi)，其平衡溶解度基本不隨pH發(fā)生變化；pH在6～8內(nèi)，奧美沙坦酯的平衡溶解度隨著pH的升高有所升高。

b. 油水分配系數(shù)的測(cè)定有很多方法[8]，如：產(chǎn)生柱法、HPLC法和搖瓶法，其中以搖瓶法最為方便簡單。選用正辛醇模擬生物膜，是因?yàn)槠錁O性與多數(shù)有機(jī)體液相差不大，且溶解度參數(shù)δ為21.07，與生物膜相同。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明隨著pH的改變，奧美沙坦酯溶解度變化較大，在pH值2.0緩沖液中溶解度幾乎是水中的10倍，在水中溶解度極低，因此現(xiàn)將藥物溶于油相，再加入水相平衡。且綜合考慮，選擇油相與水相體積比1:1。

c. 在奧美沙坦酯平衡溶解度及油水分配系數(shù)測(cè)定實(shí)驗(yàn)過程中，樣品溶液依次配制并放入空氣恒溫振蕩器中，待一定時(shí)間后樣品按順序取出，分批取樣離心，使得樣品在 4℃冰箱內(nèi)保存，時(shí)間盡量短，以免出現(xiàn)結(jié)晶析出現(xiàn)象。

d. 奧美沙坦酯為一種前體藥物，經(jīng)胃腸道吸收水解為活性產(chǎn)物奧美沙坦。奧美沙坦為酸性藥物，極性大，不易透過生物膜。制成酯后，雖然其在水中的溶解度下降，但其溶解度有 pH值依賴性，且由奧美沙坦酯平衡溶解度及油水分配系數(shù)可知，其在整個(gè)胃腸道吸收良好。這也正是上市制劑為奧美沙坦酯而非奧美沙坦的原因之一。

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Determination of the equilibrium solubility and partition coefficient of olmesartanmedoxomil

GUO Jia-ying1, HE Ying1, MA Pan-qin2,SUN Jin1*
（1. School of Pharmacy, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China; 2. Kangya of Ningxia Pharmaceutical Co., Ltd., Yinchuan 750002, China）

ObjectiveTo provide essential information for formulation design by determination of the equilibrium solubility and partition coefficient of olmesartanmedoxomil.MethodsThe equilibrium solubility of olmesartanmedoxomilin water and different pH solutions was measured by HPLC. A shake flask method was applied to determine the partition coefficient in n-octanol-water/buffer solutions at different pH.ResultsThe equilibrium solubility of olmesartanmedoxomil was 12.55 mg·L-1in water. In a range of pH, it would decrease and then increase with pH. lgP of olmesartanmedoxomil in n-octanol-water system was 1.51. As the pH increasing, lgP value went up and then down.ConclusionOlmesartanmedoxomil has poor solubility, while high lipophilicity. It can be absorbed well in the gastrointestinal tract.

pharmaceutics; physicochemical property; HPLC; olmesartanmedoxomil; equilibrium solubility; partition coefficient

R94

A

(本篇責(zé)任編輯：馬麗麗)

（2015）02-0051-05

10.14146/j.cnki.cjp.2015.02.002

2014-06-18

郭佳營（1990-），女（滿族），吉林公主嶺人，碩士研究生，E-mail jya89111@126.com；*通訊作者：孫進(jìn)（1975-），男（漢族），安徽人，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事生物藥劑學(xué)與藥動(dòng)學(xué)、基于納米技術(shù)的藥物傳遞系統(tǒng)的研究，Tel. 024-23986325，E-mail sunjin0529@aliyun.com。