毛冬青苷對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響及其作用機(jī)制

王毓煒，謝承佳

(1.揚(yáng)州友好醫(yī)院；2.揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州　225000)

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毛冬青苷對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響及其作用機(jī)制

王毓煒1，謝承佳2

(1.揚(yáng)州友好醫(yī)院；2.揚(yáng)州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州225000)

摘要：目的考察毛冬青苷對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響。方法采用高脂乳劑灌飼方式建立大鼠高脂血癥模型,除正常組、模型組外各組預(yù)防給藥30 d后,測(cè)定大鼠血清中總甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白AⅠ(apoAⅠ)、載脂蛋白B100(apoB100)和全血黏度、血漿黏度等血液流變學(xué)指標(biāo)。結(jié)果毛冬青苷高劑量組能降低高脂血癥大鼠TG、TC、LDL-C、apoB100含量(P<0.01),升高HDL-C、apoAⅠ含量(P<0.01)，能有效改善全血黏度(高切、低切)，血漿黏度，紅細(xì)胞(RBC)壓積多項(xiàng)血液流變學(xué)指標(biāo)(P<0.01)。中劑量組對(duì)以上指標(biāo)改善作用明顯(P<0.05)。低劑量組能改善全血黏度(高切、低切)(P<0.05)。結(jié)論毛冬青苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠的血脂具有一定的調(diào)節(jié)作用，其降脂的作用機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)節(jié)載脂蛋白和改善血液流變學(xué)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

關(guān)鍵詞：毛冬青苷；高脂血癥；血脂；血液流變學(xué)

脂質(zhì)代謝紊亂是引起冠心病以及動(dòng)脈粥樣硬化最危險(xiǎn)的因素之一[1]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，毛冬青在治療心血管疾病方面有著積極的作用。毛冬青具有抗血栓及抗血小板聚集作用、抗心肌缺血，缺氧、降低心肌耗氧量、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、增加冠脈流量、增強(qiáng)心肌收縮功能、抗心律失常、降低血壓等作用[2-5]，提示毛冬青苷對(duì)高脂血癥可能有治療作用。本實(shí)驗(yàn)旨在研究毛冬青苷對(duì)高脂血癥模型大鼠的降血脂作用，并探索其可能的作用機(jī)制。

1材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康SD大鼠48只,雌性，體重(200±10)g，揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供，清潔級(jí)，動(dòng)物合格證號(hào):SYXK(蘇)2002-0045。實(shí)驗(yàn)期間飼養(yǎng)室溫度(20±2)℃。

1.2主要試劑與藥品毛冬青苷：白色粉末，由廣東省藥物設(shè)計(jì)院提供。用1%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液分別配成1.5%，3%，4.5%的藥物濃度。辛伐他汀片，上海信誼萬(wàn)象藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)為071101，規(guī)格為每片10 mg，臨用前用1%CMC-Na溶液配成0.012%的濃度。丙基硫氧嘧啶片(上海復(fù)星朝暉藥業(yè)有限公司,批號(hào)070302),膽固醇(上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司,批號(hào)080118),膽鹽(上?；瘜W(xué)試劑公司,批號(hào)F20060409),吐溫-80(上海申寧醫(yī)藥化工有限公司,批號(hào)070607)，其他試劑均為分析純。

2方法

2.1脂肪乳劑的制備在200 mL的燒杯中加入15 g豬油，放在電爐上加熱到100℃左右，緩慢的加入6 g膽固醇,邊加入邊攪拌，使其完全溶解；再加入丙基硫氧嘧啶0.2 g以及20 mL吐溫-80,充分?jǐn)嚢杈鶆?。取另外一個(gè)燒杯，加入65 mL蒸餾水，同時(shí)加熱至60℃，同樣邊攪拌邊加入膽鹽2 g，直至其完全溶解。將兩個(gè)燒杯中的溶液充分混勻，制成所需的脂肪乳劑。

2.2動(dòng)物分組及給藥方法SD大鼠48只，在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d，隨機(jī)分為6組，即正常對(duì)照組、模型組、辛伐他汀組(1.2 mg·kg-1)、毛冬青苷低劑量組(150 mg·kg-1)、中劑量組(300 mg·kg-1)、高劑量組(450 mg·kg-1)，每組8只。各給藥組采用灌胃給藥,按照所需劑量，每日給藥1次，連續(xù)給藥30 d。正常對(duì)照組和模型組予以等量1%CMC-Na溶液灌胃。

2.3檢測(cè)指標(biāo)的測(cè)定各組大鼠自由攝取普通飼料，除正常組外，其余各組大鼠每天上午10時(shí)準(zhǔn)時(shí)灌胃給予脂肪乳劑(10 mL·kg-1)，間隔4 h后，于每天14時(shí)給予相應(yīng)的藥物,連續(xù)給藥30 d,直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。每隔3 d稱(chēng)1次體重,以便調(diào)整給藥量。給藥30 d后，各組動(dòng)物禁食不禁水12 h，摘眼球取血，分離血清，血清經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理后，用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血脂各項(xiàng)指標(biāo)。腹腔注射戊巴比妥(0.1 mL·kg-1)麻醉大鼠,頸動(dòng)脈采血5 mL,肝素抗凝,測(cè)血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)[6]。

3結(jié)果

3.1毛冬青苷對(duì)高脂血癥大鼠血脂TC、TG的影響從表1可以看出，與正常組比較，高脂模型組大鼠血清TC，TG含量顯著升高(P<0.01)，結(jié)果說(shuō)明高脂血癥大鼠血脂代謝紊亂，造模成功。進(jìn)行毛冬青苷給藥治療后發(fā)現(xiàn)，與高脂模型組比較，高劑量組能顯著降低TC、TG含量(P<0.01),辛伐他汀組能明顯降低TC、TG含量(P<0.05)；中劑量組能明顯降低TC、TG(P<0.05)。

3.2毛冬青苷對(duì)高脂血癥大鼠血脂HDL-C、LDL-C的影響從表2可以看出，與正常組比較，高脂模型組大鼠血清HDL-C含量明顯降低(P<0.05)，LDL-C含量顯著升高(P<0.01)，結(jié)果說(shuō)明高脂血癥大鼠血脂代謝紊亂，造模成功。進(jìn)行毛冬青苷給藥治療后發(fā)現(xiàn)，與高脂模型組比較，高劑量組能顯著升高HDL-C，顯著降低LDL-C(P<0.01),辛伐他汀組也能顯著升高HDL-C，顯著降低LDL-C(P<0.01)，中劑量組能明顯升高HDL-C(P<0.05)，顯著降低LDL-C (P<0.01)。

表1毛冬青苷對(duì)高脂模型大鼠血脂TC、TG

注：與正常組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與模型組比較,*P<0.05；**P<0.01。

表2毛冬青苷對(duì)高脂模型大鼠血脂HDL-C、LDL-C

注：與正常組比較,△P<0.05,△△P<0.01；與模型組比較,*P<0.05；**P<0.01。

3.3毛冬青苷對(duì)高脂血癥大鼠apoAⅠ、apoB100的影響從表3可看出，模型組大鼠血清apoAⅠ含量顯著降低，apoB100含量顯著升高，與正常組比較有顯著性差異(P<0.01)。進(jìn)行毛冬青苷給藥治療后發(fā)現(xiàn)，與高脂模型組比較，毛冬青苷高劑量組能顯著升高apoAⅠ，顯著降低apoB100(P<0.01)，辛伐他汀組也能顯著升高apoAⅠ，顯著降低apoB100(P<0.01)，毛冬青苷中劑量組能明顯升高apoAⅠ (P<0.05)，顯著降低apoB100(P<0.01)。

±s,n=8)

注：與正常組比較，△P<0.05；△△P<0.01；與模型組比較,*P<0.05；**P<0.01。

3.4毛冬青苷對(duì)高脂血癥大鼠血液流變學(xué)的影響從表4可看出，使用脂肪乳劑制作的高脂血癥模型大鼠全血黏度(高切、低切)以及紅細(xì)胞壓積值均顯著升高，與正常組比較有顯著性差異(P<0.01)，血漿黏度與正常組比較有明顯差異(P<0.05)；進(jìn)行毛冬青苷給藥治療后發(fā)現(xiàn)，與高脂模型組比較，高劑量組、辛伐他汀組的全血黏度(高切、低切)，血漿黏度，RBC壓積均顯著降低(P<0.01)。中劑量組的全血黏度(高切、低切)，RBC壓積顯著降低(P<0.01)，血漿黏度明顯降低(P<0.05)。低劑量組的全血黏度(高切、低切)明顯降低(P<0.05)。

±s,n=8)

注：與正常組比較,△P<0.05；△△P<0.01；與高脂模型組比較,*P<0.05；**P<0.01。

4討論

現(xiàn)代研究表明，高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化形成的高危因素之一，而動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致冠心病以及多種心血管疾病的病理基礎(chǔ)。而血清膽固醇和甘油三酯作為高血脂癥的重要指標(biāo)，其水平的升高是導(dǎo)致冠心病發(fā)病的重要因素，所以控制血清膽固醇和甘油三酯是減少冠心病發(fā)作的重要措施。高密度脂蛋白(HDL)由于可輸出膽固醇促進(jìn)膽固醇的代謝，所以現(xiàn)在作為動(dòng)脈硬化預(yù)防因子而受到重視。流行病學(xué)研究表明HDL-C與冠心病和動(dòng)脈粥樣硬化呈負(fù)相關(guān)[7]。高密度脂蛋白運(yùn)載周?chē)M織中的膽固醇，將膽固醇從肝外組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝進(jìn)行代謝,再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過(guò)膽汁從腸道排出[8]。HDL-C增高可加速膽固醇的代謝和分解,防止血中過(guò)高的膽固醇沉積于動(dòng)脈壁上，從而有利于防止動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。動(dòng)脈造影證明高密度脂蛋白膽固醇含量與動(dòng)脈管腔狹窄程度呈顯著的負(fù)相關(guān)。所以高密度脂蛋白是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護(hù)因子，俗稱(chēng)“血管清道夫”。血漿脂蛋白中的蛋白質(zhì)部分稱(chēng)為載脂蛋白，由于載脂蛋白的種類(lèi)及含量不同，使其具有各自特定的功能。apoAⅠ是HDL最主要的載脂蛋白，它維持HDL結(jié)構(gòu)的完整性，對(duì)卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(LCAT)有激活作用。因此，提高apoAⅠ就可以激活LCAT，加強(qiáng)膽固醇的逆轉(zhuǎn)運(yùn)，使脂質(zhì)清除功能增強(qiáng)，從而加速TC的清除速度。apoB占低密度脂蛋白(LDL)中蛋白質(zhì)重量的95%以上，是受體結(jié)合LDL的識(shí)別標(biāo)志。apoB與冠心病患病率呈正性相關(guān)[9]，apoB可與LDL受體結(jié)合，調(diào)節(jié)LDL的清除。

流行病學(xué)的研究已證實(shí)，血液流變學(xué)指標(biāo)的異常也是高脂血癥引起的異常變化之一，主要表現(xiàn)為紅細(xì)胞變形能力下降，血漿黏度增加，從而導(dǎo)致機(jī)體缺血缺氧及代謝紊亂，纖維蛋白溶酶活性和血小板聚集功能異常改變。TC、TG的升高及HDL-C的降低會(huì)使紅細(xì)胞膜的流動(dòng)性降低，導(dǎo)致脂質(zhì)沉積，從而加速動(dòng)脈粥樣硬化以及栓塞的形成，進(jìn)而加速了心腦血管性疾病的發(fā)生[10]。

實(shí)驗(yàn)使用脂肪乳劑灌胃制作高脂血癥大鼠模型，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型大鼠血清中TG、TC、LDL-C含量顯著升高，HDL-C含量明顯降低，模型大鼠脂質(zhì)代謝紊亂，提示高脂血癥大鼠模型制作成功。毛冬青苷中、高劑量組及辛伐他汀組大鼠血清中的TG、TC、LDL-C的含量均顯著降低，HDL-C含量顯著升高，與模型組比較均有明顯差異，結(jié)果說(shuō)明毛冬青苷對(duì)脂肪乳劑制作的高脂血癥大鼠的血脂具有調(diào)節(jié)作用。同時(shí)，毛冬青苷中、高劑量組均可明顯升高apoAⅠ、降低apoB100，與模型組比較有明顯差異。apoAⅠ含量的升高，可以促使TC排泄、而apoB100含量降低則可促使LDL含量下降，從而通過(guò)改變載脂蛋白的含量起到調(diào)節(jié)高脂血癥脂質(zhì)代謝的作用。上述共同作用促進(jìn)大鼠血清中TG、TC的含量明顯下降。說(shuō)明毛冬青苷對(duì)血脂的調(diào)節(jié)作用，與其對(duì)載脂蛋白的調(diào)節(jié)作用有關(guān)，從而起到防治高脂血癥的作用，其調(diào)脂的作用機(jī)制可能與辛伐他汀調(diào)節(jié)血脂的作用機(jī)制存在相似或相同之處。

毛冬青苷對(duì)高脂血癥血液流變學(xué)的影響表明，毛冬青苷能降低全血黏度(高切、低切)、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積值，對(duì)血液流變性有良好的改善作用。現(xiàn)代藥理研究顯示，多數(shù)具有活血化瘀功效的藥物均具有較好改善血液流變功能[11]。因此毛冬青苷的改善血液流變學(xué)作用，可能是其有效調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂異常的作用機(jī)制之一。

綜上所述，毛冬青苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血脂具有調(diào)節(jié)作用，并推測(cè)其可能是通過(guò)對(duì)載脂蛋白的調(diào)節(jié)作用和改善血液流變學(xué)作用來(lái)降低血脂。

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The Effects and Mechanism of ilexsaponin on Blood Lipid

in Hyperlipemia Model Rats

WANG Yu-wei1,XIE Cheng-jia2

(1.YangzhouFriendlinessHospital; 2.YangzhouPolytechnicInstitute,Yangzhou225000,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the effects of ilexsaponin on blood lipid in hyperlipidemia model rats.MethodsHyperlipidemia model was established by douche of high fat emulsion continuously.In addition to the normal group and the model group,the rats in each group were administrated with defined preventive drugs.TC,TG,LDL-C,HDL-C,apoAⅠ,apoB100,whole blood viscosity and Plasma viscosity and other indicators of hemorheology were determined 30d after the drug administration.ResultsIn the high-dose group of ilexsaponin ,the levels of TC,TG,LDL-C,apoB100were decreased significantly (P<0.01) and those of HDL-C and apoAⅠincreased (P< 0.01) ,and blood viscosity (high-cut,low-cut),plasma viscosity,RBC pressure plot of hemorheology indicators could be effectively improved (P<0.01).These indicators could be improved significantly(P<0.05) in the dose group.In the low-dose group of ilexsaponin,the blood viscosity (high-cut,low-cut) could be effectively improved (P<0.05).ConclusionIlexsaponin can effectively adjust lipid metabolic disorder in hyperlipemia rats.Regulation of apolipoprotein and hemorheology may be one of the mechanisms.

Key words:ilexsaponin; Hyperlipoidemia; Blood lipid; Hemorheology

(收稿日期：2014-05-11，修回日期：2014-06-25)

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2015.02.011