癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子1對(duì)大腸癌轉(zhuǎn)移的影響

蔣敦科　劉　瑩

作者單位：530021 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院老年消化科

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子1對(duì)大腸癌轉(zhuǎn)移的影響

蔣敦科劉瑩

作者單位：530021 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院老年消化科

【摘要】目的探討癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子1 (CEACAM1)對(duì)大腸癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的影響。方法60例大腸癌患者根據(jù)局部有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況分為淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，每組各30例。另選正常大腸粘膜40例為健康對(duì)照組，采用ELISA和免疫組學(xué)法分別檢測(cè)血清中sICAM-1水平和腫瘤組織中CEACAM1的表達(dá)。結(jié)果大腸癌中CEACAM1的表達(dá)與腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)；大腸癌患者血清中sICAM-1的水平明顯高于健康對(duì)照組，比較結(jié)果差異顯著(P<0.01)，大腸癌中有淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者血清中sICAM-1的水平明顯高于無轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。結(jié)論CEACAM1是防治大腸癌及其浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的有效靶點(diǎn)，與大腸癌淋巴轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，檢測(cè)血清sICAM-1的水平能夠有效預(yù)測(cè)腫瘤的轉(zhuǎn)移情況。

【關(guān)鍵詞】大腸癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子1

Effects of Carcinoembryonic Antigen Related Cellular Adhesion Molecule 1 on Colorectal Cancer Metastasis

JIANGDunke，LIUYing.TheFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity，Nanning，530021

【Abstract】ObjectiveTo study the effects of carcinoembryonic antigen related to cell adhesion molecule 1(CEACAM1) on colorectal cancer metastasis.Methods60 cases of colorectal cancer were divided into distant lymph node metastasis group and no lymph node metastasis group according to the local presence of lymph node metastasis，30 cases in each group.40 cases of normal colon mucosa was the healthy control，serum sICAM-1 level and CEACAM1 expression in tumor tissues were detected by ELISA and immunohistochemistry.ResultsThe expression of CEACAM1 in colorectal cancer was associated with tumor stage and lymph node metastasis (P<0.05);serum sICAM-1 level in colorectal cancer was obviously higher than that of the healthy controls，there had significant difference (P<0.01)，serum sICAM-1 level in colorectal cancer patients with distant metastasis lymph node was obviously higher than those without metastasis (P<0.05).ConclusionCEACAM1 is an effective target for prevention and treatment of colorectal cancer and its metastasis，it is significantly associated with colorectal cancer lymph node metastases.Detection of serum sICAM-1 level can effectively predict the tumor metastasis.

【Key words】Colorectal cancer；Lymph node metastasis；Carcinoembryonic antigen related to cell adhesion molecule 1 (CEACAM1)

(ThePracticalJournalofCancer,2015,30:0352～0354)

大腸癌(colorectal cancer，CRC)是目前臨床發(fā)病率日益增高的一種消化系統(tǒng)惡性腫瘤，主要包括結(jié)腸癌和直腸癌。隨著現(xiàn)代醫(yī)療器械的發(fā)展和免疫學(xué)、分子生物學(xué)研究的廣泛應(yīng)用，大腸癌的誘發(fā)機(jī)制及相關(guān)臨床試驗(yàn)方面的研究已達(dá)到分子水平[1]。癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子1 (carcinoembryonic antigen related cellular adhesion molecule 1，CEACAM1)是免疫球蛋白超家族的一種單鏈跨膜蛋白成員，以往報(bào)道顯示，CEACAM1于腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴管內(nèi)細(xì)胞上表達(dá)上調(diào)時(shí)能夠促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移[2-3]。因此，本研究采用合適的檢測(cè)技術(shù)探究CEACAM1對(duì)大腸癌轉(zhuǎn)移的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1　樣本來源

選擇2005年1月-2010年1月期間在我院手術(shù)及住院的60例大腸癌患者，均通過病理學(xué)組織檢測(cè)和手術(shù)確診，其中男性39例，女性21例，年齡30～80歲，平均年齡(53.7±10.6)歲，根據(jù)局部有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況分為淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，每組各30例。大腸癌分期按照TNM病理分級(jí)(2009年)標(biāo)準(zhǔn)：T1期2例，T2期12例，T3期45例，T4期1例，所有患者術(shù)前均未接受放射治療或化療。同期選擇40例經(jīng)查體大腸粘膜正常的健康人員為對(duì)照組，其中男性20例，女性20例，年齡36～75歲，平均年齡(55.2±9.8)歲，三組患者在年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2　方法

1.2.1標(biāo)本采集所有入組對(duì)象尚未治療，次日清晨空腹下靜脈抽取2 ml血樣置于不含抗凝劑的EP管中，高速冷凍離心機(jī)下5 000 r/min離心10 min，棄除沉淀，收集上清，所得樣品凍存于-20 ℃冰箱中待測(cè)，所有大腸癌患者的切片標(biāo)本均統(tǒng)一浸入10%福爾馬林液進(jìn)行固定，4 μm不間斷切片，石蠟包埋。

1.2.2試劑與方法兔抗人CEACAM1 單克隆購(gòu)抗體自美國(guó) Epitomics 公司，血清sICAM-1購(gòu)自于美國(guó)Neulasta公司，免疫組學(xué)SP試劑盒幽上海寶生物技術(shù)公司提供。血清中sICAM-1的水平測(cè)定采用雙抗體夾心法ELISA免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定，具體操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，CEACAM1 單克隆抗體滴度為1∶70，采用免疫組織化學(xué)法，應(yīng)用SP試劑盒進(jìn)行陽性測(cè)定，以PBS緩沖液代替做陰性對(duì)照。

1.3　結(jié)果判定

CEACAM1陽性判定：細(xì)胞膜/質(zhì)被染成棕黃色的為陽性標(biāo)本，高倍鏡下在隨機(jī)選擇的視野中觀察著色強(qiáng)度并計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞的數(shù)量，陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)為0%，為無色，記0分；0%～25%，為淺黃色，記1分；26%～50%為棕黃色，記2分；>50%為棕褐色，記3分；兩項(xiàng)指標(biāo)相加為0～1分時(shí)CEACAM1表達(dá)為陰性，1～6分時(shí)CEACAM1表達(dá)為陽性。

1.4　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2結(jié)果

2.1　CEACAM1表達(dá)與大腸癌臨床病理因素的關(guān)系

大腸癌局部發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的CEACAM1表達(dá)陽性率為86.7%(26/30)，明顯高于大腸癌未轉(zhuǎn)移的[40.0%(12/30)]，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。此外，T1/T2期患者CEACAM1表達(dá)陽性率與T3/T4期患者比較差異顯著 (P<0.05)。CEACAM1表達(dá)與患者性別、年齡、淋巴管浸潤(rùn)與否無關(guān)(P>0.05)，見表1。

表1　大腸癌中CEACAM1表達(dá)與其臨床病理因素的關(guān)系/例

2.2　血清中sICAM-1表達(dá)水平比較

大腸癌患者血清中sICAM-1水平與健康對(duì)照組比較明顯升高，組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2　2組血清中sICAM-1水平比較

2.3　淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者血清中sICAM-1的水平比較

病例組中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清中sICAM-1的水平，明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的(P<0.05)，見表3。

表3　淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者血清中

3討論

大腸癌的發(fā)病誘因主要與低纖維高脂肪飲食、大腸慢性炎癥、大腸腺瘤及部分遺傳因素和環(huán)境因素等緊密相關(guān)，其發(fā)病部位多見于直腸、盲腸、乙狀結(jié)腸、橫結(jié)腸等。臨床證據(jù)顯示，大腸癌無早期發(fā)病癥狀或癥狀不明顯，有的患者僅表現(xiàn)消化不良、腹部不適或便中潛血等[4]。但若不及時(shí)給予治療，使其腫癌進(jìn)一步蔓延和發(fā)展，臨床并發(fā)癥亦出現(xiàn)并隨之加重。淋巴細(xì)胞發(fā)生局部復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)侵襲可引起受累器官病理學(xué)改變，這些因素往往是影響患者預(yù)后并危及其生命的根本原因。

CEACAM1是免疫球蛋白癌胚抗原基因超家族中的成員，是1種跨膜蛋白，也被稱為膽汁糖蛋白、CD66a或細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子(C-CAM)。CEACAM1的生物學(xué)功能十分復(fù)雜，研究發(fā)現(xiàn)，CEACAM1在人體一些正常的臟器組織均有表達(dá)，如結(jié)腸、前列腺、乳腺、子宮等，其在胰腺癌、肺癌、人膠質(zhì)瘤細(xì)胞中高表達(dá)，在宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌中則鮮見表達(dá)，說明CEACAM1的表達(dá)在某些疾病中能夠促進(jìn)腫瘤的發(fā)展，而在某些疾病中則呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，提示不同腫瘤類型中CEACAM1的表達(dá)完全不同，目前國(guó)內(nèi)關(guān)于大腸癌組織中CEACAM1的表達(dá)情況尚未見報(bào)道[5]。本研究結(jié)果顯示CEACAM1在大腸癌組織中的表達(dá)與患者的性別、年齡、淋巴管浸潤(rùn)與否無關(guān)，與臨床腫瘤分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否有相關(guān)性。隨著腫瘤病理分期提高，淋巴結(jié)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，腫瘤惡性程度加強(qiáng)，此時(shí)CEACAM1的陽性例數(shù)隨之增加，提示CEACAM1表達(dá)的上調(diào)能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，參與組織細(xì)胞間的異質(zhì)粘附，為加劇病情惡化提供先決條件。因此，CEACAM1是不利于患者預(yù)后的一項(xiàng)指標(biāo)，是腫瘤發(fā)生、發(fā)展中一個(gè)重要生物信息[6]。從腫瘤細(xì)胞及其他單核細(xì)胞上脫落產(chǎn)生的可溶性細(xì)胞間粘附分子sICAM-1(soluble intercellular adhesion molecule-1)，能夠有效阻斷天然免疫細(xì)胞和毒性T淋巴細(xì)胞的粘附，殺滅腫瘤細(xì)胞[7]。有報(bào)道顯示，正常人血清中sICAM-1的含量明顯低于腫瘤患者，而且伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的要顯著高于未發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者。本研究結(jié)果表明，與健康對(duì)照組相比，大腸癌患者sICAM-1的水平明顯上升，在淋巴結(jié)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者中則尤為顯著，提示sICAM-1的濃度的高低與腫瘤的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)呈正相關(guān)。

綜上所述，CEACAM1在腫瘤細(xì)胞上表達(dá)過度時(shí)，促進(jìn)CEACAM1進(jìn)入血液并結(jié)合白細(xì)胞表明受體，與血液循環(huán)中游離癌細(xì)胞的ICAM-1/LFA相互作用，引起局部無菌性炎性因子釋放內(nèi)皮細(xì)胞和中細(xì)胞的聚攏，進(jìn)而使癌細(xì)胞脫離體液免疫的監(jiān)視，導(dǎo)致腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的進(jìn)一步增強(qiáng)[8]。因此，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)CEACAM1的水平對(duì)預(yù)防腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有積極作用。

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(編輯：吳小紅)

(收稿日期2014-09-09修回日期 2014-12-10)

中圖分類號(hào)：R735.3+4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1001-5930(2015)03-0352-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2015.03.011

通訊作者：劉瑩