非小細胞肺癌患者放療前后血清VEGF的水平變化及臨床意義*

馬瑾璐 金龍 韓蘇夏 郭希婧 何晨琛 田美麗 吳寧麗

(1.西安交通大學第一附屬醫(yī)院腫瘤放療科，陜西 西安 710061;2.西安昆侖醫(yī)院，陜西 西安 710016)

非小細胞肺癌患者放療前后血清VEGF的水平變化及臨床意義*

馬瑾璐1金龍1韓蘇夏1郭希婧1何晨琛1田美麗1吳寧麗2

(1.西安交通大學第一附屬醫(yī)院腫瘤放療科，陜西 西安 710061;2.西安昆侖醫(yī)院，陜西 西安 710016)

目的 探討非小細胞肺癌患者放療前后血清血管內皮生長因子(VEGF)水平與近期療效間的關系。方法 對46例非小細胞肺癌患者，采用常規(guī)三維適形照射(3D-CRT)及調強照射(IMRT)。用ELISA法檢測患者放療前1天、放療開始后7天及1個月時的血清VEGF含量。按近期療效分為有效組與無效組，分析比較近期療效與血清VEGF水平之間的關系。結果 46例非小細胞肺癌患者經放療6～7周，共30～33次，總治療劑量為60～66Gy。近期療效評價：46例患者中CR 2例，PR 28例，NC 10例，PD 6例，有效率(CR+PR)為65.2%，無效率(NC+PD)為34.8%。有效組放療前后血清VEGF水平均低于無效組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；放療開始后1周VEGF水平與放療前相當，而放療1個月時VEGF水平明顯低于放療前，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 非小細胞肺癌患者血清VEGF水平可能是一個有前景的生物學標志物，可用來預測放療敏感性和非小細胞肺癌患者的預后。

非小細胞肺癌; 血管內皮生長因子; 放射治療

放射治療是局部晚期非小細胞肺癌的主要治療手段之一。既往研究表明，非小細胞肺癌的局控率與放療劑量成正相關[1]。近年隨著三維適形放療(three dimensional conformal radiation ther-apy，3D-CRT) 和調強放療(intensity modulated radiation therapy，IMRT) 技術的應用，在正常組織受到較好地保護情況下，靶區(qū)的照射劑量也能得到有效提高[2]。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是與腫瘤生長、侵襲和轉移相關的主要調控因子之一[3,4]。研究證實，肺癌VEGF表達與腫瘤組織增生及淋巴結轉移關系密切，患者血清VEGF水平與臨床發(fā)病特征及預后之間有著密切關系[5]。

1 資料與方法

1.1 研究對象 為西安交通大學第一附屬醫(yī)院腫瘤放療科2013年2月～8月收治經病理證實確診的病歷資料完整患者46例，其中男38例，女8例，年齡45～75歲。病理分期：Ⅱ期2例，Ⅲ期40例，Ⅳ期4例；腺癌25例，鱗癌20例，大細胞癌1例。均未接受手術治療，患者的卡氏評分≥70分；血生化檢查：血紅蛋白≥12g/dL，白細胞≥4.0×109/L，血小板≥100.0×109/L；肌酐≤1.0×正常值上限，總膽紅素≤1.0×正常值上限，谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶≤2.5×正常值上限，AKP≤5.0×正常值上限；患者放療前6個月內未接受過放射治療，均簽署放療知情同意書。

1.2 查體及輔助檢查 治療前2周內對患者進行詳細的病史詢問和全面的體格檢查，包括全血細胞計數、肝腎功能檢查，心電圖、胸部CT，腹部B超或腹部CT檢查。放療期間為了觀察放療可能帶來的不良反應，每周對患者進行體格檢查，記錄呼吸道癥狀，同時進行全血細胞計數檢查。如遇特殊病例，每2～3天重復檢查。

1.3 放射治療 按照我國肺癌診療指南進行，17例患者采用調強放療，29例采用三維適形放療。放療范圍包括原發(fā)灶、同側肺門、縱隔可見淋巴結。95% PTV劑量至60～65 Gy，三維TPS中根據放療計劃分別統(tǒng)計V20、V30(接受20 Gy/30 Gy照射的肺占全肺總體積的百分數)和MLD(全肺照射平均劑量)。

1.4 血清VEGF測定 放療前1天、放療開始后7天及1個月采集晨起空腹靜脈血3ml于EDTA抗凝管，3000r/min離心10min。吸取血清放-80℃冰箱保存待測。用ELISA法定量檢測血清VEGF含量，人血管內皮生長因子ELISA試劑盒購于上海西唐生物科技有限公司，具體操作按試劑盒說明書進行，結果在酶標儀主波長450nm讀取光密度值，繪制標準曲線，得出待測血清VEGF含量。

1.5 近期療效及放療副反應評價 所有患者治療前和結束后均行胸部CT掃描。治療結束后3個月評價近期療效。近期療效采用世界衛(wèi)生組織(WHO)評價標準：CR(所有可見病灶完全消失至少4周)，PR(病灶縮小50%以上但未完全消失至少4周)，NC(病灶縮小不超過50%或增大不超過25%)，PD(病灶增大超過25%或出現新的病灶)。在本研究中，CR+PR為治療有效組，NC+PD為治療無效組。放療副反應分級采用RTOG放射損傷分級標準。

1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 10.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料用t檢驗和方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 臨床特征 46例患者經放射治療6～7周，共30～33次，總治療劑量為60～66Gy。其中男38例(82.6%)，女8例(17.4%)；年齡≥55歲者29例(63.0%)，<55歲者17例(37.0%)；病理類型：腺癌25例(54.3%)，鱗癌20例(43.5%)，大細胞癌1例(2.2%)；臨床分期：Ⅱ期2例(8.6%)，Ⅲ期40例(87.0%)，Ⅳ期4例(17.4%)；放療方式：3D-CRT者29例(63.0%)，IMRT 17例(37.0%)。

2.2 近期療效評價 46例患者中CR 2例，PR 28例，NC 10例，PD 6例，有效率(CR+PR)為65.2%，無效率(NC+PD)為34.8%。有效組放療前后血清VEGF水平均低于無效組，差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)；放療開始后1周VEGF水平與放療前相當，而放療1個月時VEGF水平明顯低于放療前，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

2.3 并發(fā)癥 放療過程中及放療結束后，患者均出現了1項或多項放療副反應，其中放射性肺炎38例，放射性食管炎16例，Ⅰ～Ⅱ度骨髓抑制29例，治療中及治療結束后3個月內未發(fā)生Ⅳ度骨髓抑制、大咯血、呼吸衰竭等危及生命的嚴重并發(fā)癥。

3 討論

血管內皮生長因子(VEGF)是在牛垂體濾泡星狀細胞體外培養(yǎng)液中純化出來的一種肝素結合因子，它位于6p21.3上，主要參與血管形成，與腫瘤浸潤轉移關系密切[6]。VEGF在多種人實體腫瘤中均有表達,包括結直腸癌、胃癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌等[5]?；颊哐逯蠽EGF水平與腫瘤侵襲轉移能力呈正相關，繼而與預后有著密切的關系，成為某些腫瘤生物治療靶點[7]。

既往研究證明，VEGF在肺癌組織中的表達，在肺癌組織增殖與淋巴結轉移過程中發(fā)揮重要作用。VEGF在肺癌組織中的陽性表達率明顯高于正常組織,且微血管計數值均高于陰性組織，但具體機制尚不完全清楚[8]。

近期研究人員通過meta分析亞洲肺癌患者放療前后VEGF水平與放療敏感性顯示，肺癌患者血清中VEGF表達水平與患者放療敏感性及預后有著密切的關系。放療后1周內血清VEGF水平先是有一個明顯下降過程，然后又迅速上升至治療前水平，治療后1周至1個月再逐漸下降，并明顯低于放療前水平。這一變化可能與腫瘤細胞受照射后DNA損傷修復過程有關，但具體機制不詳。該研究搜查了CISCOM科學網絡、PubMed、谷歌學術、EBSCO及Cochrane圖書館，使用STATA 12.0軟件進行薈萃分析。其中包含了14個臨床研究，包括5個病例對照研究和9個群組研究。分析結果顯示，非小細胞肺癌患者的血清VEGF水平高于健康對照組，放射治療前后血清VEGF水平有著顯著的差異(P<0.05)。進一步研究發(fā)現，血清VEGF水平的變化與患者放療療效及預后關系密切。血清VEGF水平與非小細胞肺癌患者組織學評分無明顯關系。本研究結果顯示，放療后1周時血清VEGF水平與放療前接近，放療1個月時VEGF水平則明顯低于放療前水平，有效組放療前后血清VEGF水平均明顯低于無效組(P<0.05)。其機制可能是高水平VEGF對腫瘤血管形成能力與腫瘤細胞乏氧有關，從而影響腫瘤細胞放療療效。

4 結論

我們的研究表明，非小細胞肺癌患者血清VEGF水平可能是一個有前景的生物標志物，可用來預測放療敏感性和非小細胞肺癌患者的預后。

[1] Laine AM, Westover KD, Choy H. Radiation therapy as a backbone of treatment of locally advanced non-small cell lung cancer[J]. Semin Oncol，2014,41:57-68.

[2] Padda SK, Burt BM, Trakul N,etal. Early-stage non-small cell lung cancer: surgery, stereotactic radiosurgery, and individualized adjuvant therapy[J]. Semin Oncol, 2014,41:40-56.

[3] Ferrara N, Houck KA, Jakeman LB,etal. The vascular endothelial growth factor family of polypeptides[J]. J Cell Biochem, 1991,47:211-218.

[4] Petrillo M, Borriello M, Fuoco G,etal. Novel VEGF-independent strategies targeting tumor vasculature: clinical aspects[J]. Curr Pharm Des,2012,18:2702-2712.

[5] Shibuya M. VEGF-VEGFR Signals in Health and Disease[J]. Biomol Ther (Seoul), 2014,22:1-9.

[6] Dvorak HF. Leaky tumor vessels: consequences for tumor stroma generation and for solid tumor therapy[J]. Prog Clin Biol Res, 1990,354(A):317-330.

[7] Funakoshi T, Lee CH, Hsieh JJ. A systematic review of predictive and prognostic biomarkers for VEGF-targeted therapy in renal cell carcinoma[J]. Cancer Treat Rev，2014， 40:533-547.

[8] Alevizakos M, Kaltsas S, Syrigos KN. The VEGF pathway in lung cancer[J]. Cancer Chemother Pharmacol, 2013,72:1169-1181.

Clinical significance of serum VEGF of non-small cell lung cancer patients with radiotherapy

MA Jinlu1, JIN Long1, HAN Suxia1,etal

(1.DepartmentofRadiotherapy,TheFirstAffiliatedHospitalofMedicalCollege,Xi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061; 2.Xi'anKunlunHospital,Xi’an710016)

Objective To investigate the relationship between recent effect of radiotherapy and serum vascular endothelial growth factor (VEGF) level in patients with non-small cell lung cancer (NSCL). Methods 46 patients with non-small cell lung cancer were treated with conventional three-dimensional conformal irradiation (3 d CRT) and intensity modulated radiation (IMRT). The serum VEGF was detected with ELISA before radiotherapy and 1 d, 7 d and 1 month after radiotherapy. According to the recent curative effect, the patients were divided into effective and ineffective group. Results The total therapeutic doses were 60-66 Gy. The efficient rate (CR+PR) was 65.2% and no efficiency rated (NC+PD) was 34.8%. Serum VEGF levels before and after radiotherapy of effective group was lower than that of ineffective group. The difference was statistically significant. VEGF 1 week and 1 month after radiotherapy was lower than that before radiotherapy. The difference was statistically significant. Conclusion Non-small cell lung cancer patients serum VEGF levels may be a promising biomarker, which can be used to predict radiation sensitivity and the prognosis of patients with non-small cell lung cancer.

Non-small cell lung cancer; VEGF; Radiotherapy

國家自然科學基金(81001027)

韓蘇夏，教授，《西部醫(yī)學》常務編委，E-mail: shan87@mail.xjtu.edu.cn

R 734；R 815

A

10.3969/j.issn.1672-3511.2015.06.007

2014-06-03； 編輯： 母存培)