肝細胞癌含洛鉑化療方案療效及與血管內皮生長因子和凝血酶蛋白表達水平的相關性

吳云軍

（遼寧省本溪市中心醫(yī)院放射科，遼寧 本溪 117000）

肝細胞癌含洛鉑化療方案療效及與血管內皮生長因子和凝血酶蛋白表達水平的相關性

吳云軍

（遼寧省本溪市中心醫(yī)院放射科，遼寧 本溪 117000）

目的 分析血管內皮生長因子（VEGF）、凝血酶（thrombin）蛋白表達水平與肝細胞癌（HCC）的相關性及含洛鉑化療方案的臨床療效。方法 收集HCC患者臨床資料共120例，按照隨機數(shù)字表法隨機分為觀察組65例和對照組55例。對照組采用含順鉑化療方案治療，觀察組采用含洛鉑化療方案治療。所有患者均行CT平掃及三期增強掃描；所有臨床標本組織均常規(guī)采用10%的福爾馬林液固定、石蠟包埋，采用免疫組化SP法測定各組VEGF及thrombin的蛋白表達水平。結果 觀察組65例患者中，根據CT圖像的血供特征，HCC可分為少供血型組（12例）、雙重供血型組（19例）及動脈供血型組（34例）3組，各組間蛋白表達陽性率差異有顯著性(P＜0．05）；根據CT圖像的侵襲特征，HCC可分為低危組（30例）和高危組（35例），其相應的 VEGF及 thrombin蛋白表達陽性率分別為 73．33%和88．57%，36．67%和85．71%，組間差異有顯著性（P＜0．05）；根據CT圖像是否明顯強化，HCC可分為明顯強化組（31例）和無明顯強化組（34例），組間蛋白表達陽性率差異有顯著性（P＜0．05）；根據CT圖像特征中邊界是否清晰，可分為清晰型組（21例）和欠清晰型組（44例），其相應的VEGF及thrombin蛋白表達陽性率分別為71．43%和86．36%，47．62%和70．45%，組間差異有顯著性（P＜0．05）；根據CT圖像中瘤體大小，可分為瘤體直徑 5 cm組（29例）和瘤體直徑＞5 cm組（36例），其相應的VEGF及thrombin蛋白表達陽性率分別為82．76%和80．56%，62．07%和63．89%，組間差異無顯著性（P＞0．05）。觀察組臨床總有效率為36．92%，顯著高于對照組的20．00%（P＜0．05）。結論 含洛鉑化療方案治療HCC的療效顯著。CT作為診斷HCC的一種無創(chuàng)性檢查手段，其表現(xiàn)特征與HCC組織中VEGF及thrombin蛋白表達水平有關，作用機制可能與VEGF及thrombin蛋白參與HCC的血管生成有關。

肝細胞癌；螺旋CT；血管內皮生長因子；凝血酶；洛鉑

肝癌是常見的惡性腫瘤，發(fā)病率呈逐年上升趨勢。血管內皮生長因子（VEGF）基因和凝血酶（thrombin）基因是與腫瘤侵襲轉移相關的基因，目前對同時檢測兩者蛋白表達與腫瘤螺旋CT征象間的相關性鮮有研究[1-3]。目前，肝癌治療手段主要包括外科治療與局部治療。本研究中采用含洛鉑化療方案治療，通過對肝細胞癌（HCC）患者行CT平掃及增強掃描，并采用免疫組化SP法測定各組VEGF及thrombin的表達，同時統(tǒng)計螺旋CT征象與各指標間的關系，試圖從HCC的VEGF及thrombin蛋白表達角度上分析螺旋CT征象，以評價腫瘤的生物學特性及腫瘤血管生成情況[4-5]，分析HCC影像改變及病理之間的關系，為HCC的影像學診斷、治療方案選擇和預后評估等提供幫助。

1 資料與方法

1．1 一般資料

收集醫(yī)院2009年3月至2013年3月手術切除并經病理證實的HCC患者病理標本 120例。納入標準：經影像學、病理學確診為肝癌；病史資料完整；骨髓功能正常；簽署知情同意書；均經醫(yī)院倫理委員會批準。排除標準：不符合上述納入標準；合并嚴重心、肝、腎等功能異常；藥物過敏；妊娠或哺乳期婦女。所有患者掃描前及手術前未進行化學、介入等抗腫瘤治療，均行CT平掃及三期增強掃描，于CT檢查后2～28 d行手術治療。根據隨機數(shù)字表法將其隨機分為觀察組65例和對照組55例。觀察組中，男 42例，女23例；年齡38～75歲，平均（56．52±3．84）歲；腫瘤直徑最小1．52 cm，最大12．41 cm，平均（5．63±0．50）cm。對照組中，男36例，女19例；年齡 36～74歲，平均（57．16±3．25）歲；腫瘤直徑最小1．56 cm，最大11．89 cm，平均（5．58±0．62）cm。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0．05），具有可比性。

1．2 方法

觀察組按照患者腫瘤大小以阿霉素（Antibioticos S．p．A，國藥準字 X19990296）20～40 mg／m2+洛鉑（海南長安國際制藥有限公司，國藥準字H20050308）40～50 mg／m2與碘油乳化后行介入治療。對照組化療方案中將洛鉑換為順鉑（昆明貴研藥業(yè)有限公司，國藥準字H53020409）40～50 mg／m2，方法同觀察組。

取觀察組65例患者肝組織標本，均常規(guī)10%的福爾馬林液固定，石蠟包埋，操作嚴格按照試劑盒（上海拜力生物科技有限公司）說明書標準。陽性對照為抑制的陽性切片，而陰性對照為正常肝組織，空白對照組為磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗。

1．3 療效評定標準與觀察指標

參照文獻[6]標準評定療效。完全緩解（CR）：患者所有目標病灶消失或功能性消失；部分緩解（PR）：患者目標病灶長徑總和縮小不低于30%；疾病穩(wěn)定（SD）：患者基線病灶總和有所縮小但未達PR；疾病進展（PD）：患者肝內新發(fā)病灶或原位新發(fā)病灶增長長徑總和超過20%?？傆行В≧R）=CR+PR。

CT平掃可顯示HCC病灶的部位、大小、形態(tài)和數(shù)目，并可了解肝臟的基礎情況。增強掃描動脈期，絕大多數(shù)病灶都能見到強化表現(xiàn)；增強掃描門脈期，多數(shù)肝內病灶密度下降，低于正常肝組織；也有呈等密度或高密度的，分析其原因，與肝動脈和門脈參與腫瘤供血有關。因此，從以下5個方面進行分組。根據血供類型分組：HCC血供的CT分型根據平掃、動脈期、門脈期掃描CT表現(xiàn)，參考黃娟等[7]的方法，分為少供血型、肝動脈和門靜脈雙重供血型（以下簡稱雙重供血型）、動脈供血型3組。其中少供血型HCC CT平掃病灶呈低密度影，在動脈期和門脈期掃描均無明顯強化；雙重供血型HCC CT平掃病灶呈高、等或低密度，動脈期病灶可強化，門脈期病灶強化程度減低；動脈供血型HCC CT平掃病灶呈高、等或低密度，動脈期明顯強化，門脈期強化明顯減低或不強化，典型表現(xiàn)為“快進快出”。根據侵襲危險性分組：動脈期圖像上出現(xiàn)肝門和（或）腹腔淋巴結轉移者，門靜脈癌栓以及主癌灶周圍出現(xiàn)衛(wèi)星病灶者為高危組；未出現(xiàn)以上征象者為低危組。根據強化特征分組：腫瘤在平掃基礎上CT值增加幅度大于30 HU為明顯強化，不超過30 HU為不明顯強化。根據邊界情況分組：清晰型是指腫瘤邊緣顯示清晰、邊界完整；欠清晰型是指腫瘤與正常肝組織無明確分界線，邊緣形態(tài)不規(guī)則。根據癌灶大小分組：直徑不超過5 cm為結節(jié)型肝癌組，直徑大于5 cm為巨塊型肝癌組。

1．4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 13．0統(tǒng)計軟件分析處理。計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗。P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2．1 臨床療效

結果見表1。觀察組總有效率顯著高于對照組（χ2=4．130，P＜0．05）。

表1 兩組患者臨床療效比較[例（%）]

2．2 HCC CT征象與VEGF及thrombin蛋白表達的關系

結果見表2。結果提示，VEGF及thrombin蛋白表達水平增高與HCC的CT表現(xiàn)血供分型顯著相關，雙重供血型組與動脈供血型組陽性率均明顯高于少供血型組（P＜0．05）；VEGF及thrombin蛋白表達水平增高與HCC侵襲危險性顯著相關，高危組陽性率明顯高于低危組（P＜0．05）；VEGF及 thrombin蛋白表達水平增高與HCC CT圖像強化特征顯著相關，明顯強化組陽性率明顯高于無明顯強化組（P＜0．05）；VEGF及 thrombin蛋白表達水平增高與HCC的CT表現(xiàn)邊界是否清晰顯著相關，邊界清晰型組陽性率明顯高于邊界欠清晰型組（P＜0．05）；VEGF及thrombin蛋白表達水平增高與HCC瘤體大小無顯著性相關，瘤體直徑≤5 cm組和直徑＞5 cm組陽性率差異無顯著性（P＞0．05）。

表2 HCC CT征象與VEGF及thrombin蛋白表達的關系[例（%）]

3 討論

許多研究表明，HCC的發(fā)病機制與眾多因素有關。可誘發(fā)肝癌的因素包括黃曲霉毒素污染、乙型肝炎病毒（HBV）或丙型肝炎病毒（HCV）感染、飲酒和電離輻射、遺傳毒性的人類代謝物等，大多直接作用于肝細胞的遺傳物質，引起 DNA損傷，這是 HCC發(fā)生的一個重要的分子學基礎。深入研究HCC的機制，特別是從基因水平研究，可能在預防和診斷HCC上取得突破性進展。介入治療作為治療HCC的一種新興方法，越來越受到臨床重視，同時腫瘤基因治療也正在成為研究熱點[8]。近年來，許多研究利用影像學手段探討腫瘤的CT表現(xiàn)與相關因子之間的關系，分析HCC螺旋CT增強征象和腫瘤血管生成及相關因子的表達關系，可進一步認識CT征象的意義[9]。腫瘤新生血管的形成決定HCC血供類型，血供類型又決定了 CT的強化表現(xiàn)，故 HCC的 VEGF及thrombin表達與 CT表現(xiàn)之間存在著必然的聯(lián)系[7，10]。因此，通過研究CT增強的特點可以間接推測腫瘤的血供特點。本研究中共收集HCC患者65例（男42例，女23例），根據血供多少和CT強化表現(xiàn)，將其分為少供血型、雙重供血型和動脈供血型3類，患者數(shù)分別為12例（18．46%）、19例（29．23%）、34例（52．31%），可見，HCC的血供大都很豐富。但有些HCC的影像學表現(xiàn)不典型，僅靠影像學信息還不能滿足臨床需要，需要多方面的臨床信息來進行綜合判斷。本研究結果顯示，VEGF及thrombin蛋白的表達與HCC CT表現(xiàn)的血供分型顯著相關（P＜0．05）。

肝癌的發(fā)生與晚期肝慢性疾病以及肝硬化關系密切，故通常預后較差，僅少數(shù)患者能得到根治治療，而大多數(shù)患者需接受經導管肝動脈化療栓塞（TACE）治療。多種化療藥物聯(lián)用能明顯延長患者生存時間，但毒副作用也會相應增多。洛鉑具有很好的溶解度，且在水中較穩(wěn)定，能確保腫瘤血管內的高血藥濃度，從而延長了對腫瘤的滅活時間。本研究結果顯示，含洛鉑化療方案治療HCC的總有效率顯著高于含順鉑方案（P＜0．05），提示含洛鉑化療方案療效顯著。

綜上所述，含洛鉑化療方案治療 HCC療效顯著；VEGF及thrombin蛋白表達等多個因素會因影響 HCC的血管生成而影響HCC的CT表現(xiàn)，CT增強圖像特征對于HCC的臨床診療有重要的應用價值。作者簡介:吳云軍（1971-），男，大學本科，副主任醫(yī)師，研究方向為CT診斷（血管造影），（電子信箱）manlipu1221＠163．com。

[1]朱 玲，付歡英，楊 芳，等．腸道清潔藥物用于肝癌患者術前臨床護理的效果研究[J]．中國藥業(yè)，2013，22(13)：98-99．

[2]周康榮，嚴福華．肝臟腫瘤病變的CT診斷[J]．中國臨床醫(yī)學，2009，6（2）：170-173．

[3]肖 璐，陳志鵬，陳 娟，等．Chol-PEG-GA修飾的馬錢子堿脂質體體外肝癌細胞攝取特性[J]．中國新藥與臨床雜志，2012，31(1)：16-20．

[4]文國容，金 海，計 蓓，等．泮托拉唑對人肝癌HepG2細胞體外遷移和侵襲的影響[J]．中國新藥與臨床雜志，2013，32(9)：749-752．

[5]Tsopanoglou NE，Maragoudakis ME．Role of thrombin in Angiogenesis and tumor progression[J]．Semin Thromb Hemost，2004，30(1)：63-69．

[6]梁長虹．肝臟疾病CT診斷[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：82．

[7]黃 娟，周祥平，劉榮波，等．原發(fā)性肝癌血供特點的類型螺旋 CT表現(xiàn)及其與病理學特點的相關性研究[J]．中華放射學雜志，2000，34(11)：753-756．

[8]施寧姚，王志炎．艾迪注射液治療晚期肝癌 35例[J]．中國藥業(yè)，2011，20(22)：96-97．

[9]于詠梅，宋岫峰，金艷霞，等．小肝癌的CT及MRI診斷價值[J]．中國CT和MRI雜志，2009，7(4)：43-45．

[10]王輔林，韋立新，陳樂新，等．血管內皮生長因子、微血管密度與乳腺癌淋巴結轉移及預后的關系[J]．中華病理學雜志，2000，29(3)：172-175．

Efficacy of Lobaplatin Containing Chemotherapeutic Regimen in Hepatocellular Carcinoma and Correlation between Hepatocellular Carcinoma with VEGF,Thrombin Protein Expression Level

Wu Yunjun
(Department of Radiology,Benxi Municipal Central Hospital,Benxi,Liaoning,China 117000)

Objective To analyze the correlation between the VEGF and thrombin expression levels with hepatocellular carcinoma(HCC) and the clinical efficacy of lobaplatin containing chemotherapeutic regimen．M ethods The clinical data in 120 cases of HCC were collected and randomly divided into the observation group(65 cases)and the control group(55 cases)according to the random number table．The control group was treated by the cisplatin-containing regimen,while the observation group by the lobaplatin-containing chemotherapeutic regimens．All cases underwent CT plain scan and triple-phase enhanced scan;all tissue samples routinely adopted 10% formalin solution for conducting fixation and paraffin embedding;the VEGF and thrombin protein expression levels were measured by the immunohistochemical staining method．Results Among 65 cases in the observation group,HCC could be divided into the less blood supply group(12 cases), dual blood supply group(19 cases)and the arterial blood supply group(34 cases)according to the blood supply characteristics in CT imaging,the positive rate of protein expression had statistically significant differences among the various groups(P＜0．05)．According to the invasion characteristics in CT imaging,HCC could be divided into the low risk group(30 cases)and the high risk group(35 cases),the positive rates of VEGF and thrombin protein expression were 73．33%,88．57%and 36．67%,85．71%,respectively,the differences between the two groups were statistically significant(P＜0．05)．According to whether the CT imaging being obviously enhanced,HCC could be divided into the obvious enhancement group(31 cases)and the non-enhancement group(34 cases),the protein expression had statistical differences between the two groups(P＜0．05)．According to whether the tumor boundary being clear in the CT imaging,HCC could be divided into the clear boundary group(21 cases)and the less clear boundary group(44 cases),the positive rates of VEGF and thrombin protein expression were 71．43%,86．36% and 47．62%,70．45% respectively,the differences between the two groups had statistical significance (P＜0．05)．According to the tumor size in CT imaging,HCC could be divided into the tumor diameter≤5 cm group(29 cases)and the tumor diameter＞5 cm group(36 cases),the positive rate of VEGF and thrombin protein expression were 82．76%,80．56% and 62．07%, 63．89% respectively,the differences between the two groups had no statistical significance(P＞0．05)．The total effective rate in the observation group was 36．92%,which was significantly higher than 20．00% in the control group(P＜0．05)．Conclusion The lobaplatin-containing chemotherapeutic regimen has significant effect for treating HCC,the manifestation characteristics of CT as a noninvasive examination measure for diagnosing HCC are related with the VEGF and thrombin protein expression levels in HCC tissue,its mechanism may be related with VEGF and thrombin proteins participating in HCC angiogenesis．

hepatocellular carcinoma;spiral CT;vascular endothelial growth factor;thrombin;lobaplatin

R969.4；R979.1；R445

A

1006-4931(2015)05-0018-03

2014-10-27)