人尿激肽酶原對急性腦梗死患者神經(jīng)功能及MMP表達(dá)的影響

人尿激肽酶原對急性腦梗死患者神經(jīng)功能及MMP表達(dá)的影響

王玥1，尤如芹1，王璐1，劉洪雨1，王立波1，包曉群1，莽靖1*，王欣2*，徐忠信1

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，吉林 長春130033；2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院 檢驗科，吉林 長春130041)

人尿激肽酶原是從男性尿液中提取的糖蛋白，為組織型激肽酶原。有研究發(fā)現(xiàn)其有縮小急性腦梗死患者梗死面積、改善神經(jīng)功能的作用，機制可能與選擇性擴張缺血區(qū)微動脈，改善缺血腦組織微循環(huán)有關(guān)[1]。另有研究表明金屬基質(zhì)蛋白酶(MMPs)存在腦缺血后的表達(dá)變化，并與側(cè)枝循環(huán)重建、血腦屏障結(jié)構(gòu)的完整性、血流動力學(xué)等病理及病理生理過程相關(guān)[2，3]。提示人尿激肽原參與腦缺血損傷與修復(fù)的過程可能與MMPs有關(guān)，但相關(guān)研究較少。本研究擬通過觀察人尿激肽酶原治療急性腦梗死前后NIHSS評分變化及血清MMP-2，MMP-9水平的變化，探討人尿激肽酶原改善急性腦梗死患者神經(jīng)功能缺損的機制，為缺血性腦血管病的臨床治療尋求更確切的理論依據(jù)。

1對象與方法

1.1病例來源研究病例均來自2012年1月至2013年1月，吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院急性腦梗死患者。

1.2病例納入標(biāo)準(zhǔn)①首次發(fā)病48小時內(nèi)的急性腦梗死，符合全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議制定的急性腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。②NIHSS評分在4-20分之間。③腦梗死血管分型為頸內(nèi)動脈系統(tǒng)型腦梗死。④年齡在18-80周歲之間，性別不限。⑤住院期間用藥療程不少于14天。⑥腦梗死發(fā)病前2天和住院期間未用ACEI類降壓藥物。⑦簽署知情同意書。

1.3排除標(biāo)準(zhǔn)①NIHSS評分超過21或低于3分。②檢查和(或)查體不配合者。③既往有嚴(yán)重的心、肺、腎、血液等重要臟器疾病以及精神障礙的患者。④查體有外傷、活動性出血及凝血常規(guī)提示有出血傾向者。⑤血壓低于100/70 mmHg者。⑥處于妊娠或哺乳期患者。⑦既往腦卒中2次以上且遺留有嚴(yán)重的神經(jīng)功能障礙者。⑧患各種急慢性炎癥疾病、免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤、應(yīng)用免疫或炎癥抑制劑的患者。

1.4實驗分組按隨機對照試驗入組，納入病例88例，人尿激肽酶原組男29例，女15例，平均年齡60.33±9.18歲；對照組男27例，女17例，平均年齡62.51±8.13歲。人尿激肽酶原組給予人尿激肽酶原0.15PNA/日，對照組給予疏血通6 ml/日，療程均為14天。人尿激肽酶原組及對照組均常規(guī)給予調(diào)整血壓、調(diào)節(jié)血脂水平、抗血小板聚集，神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)劑等常規(guī)治療，治療期間禁止使用血管緊張素受體拮抗劑(ARB)和(或)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)降壓。入組的所有患者在治療前、治療后7天及14天分別進(jìn)行NIHSS評分并行血清MMP-2、MMP-9檢查。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料的均數(shù)間比較采用t檢驗，P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1人尿激肽酶原對神經(jīng)功能的影響

與對照組比較，人尿激肽酶原組在治療的第7天及第14天神經(jīng)功能評分明顯降低，有顯著性差異(P<0.05)，見表1。

表1　患者治療前后NIHSS評分變化

注：a：與對照組比較P>0.05，b：與對照組比較P<0.05，c：與對照組比較P<0.05。

2.2人尿激肽酶原對MMP-2、MMP-9表達(dá)的影響

通過對MMP-2、MMP-9表達(dá)的影響的分析，表明治療第7天及第14天MMP-2和MMP-9值較治療前均有升高，有統(tǒng)計學(xué)意義；對照組和人尿激肽酶原組MMP-9在治療第7天和治療第14天相比，人尿激肽酶原組低于對照組，有統(tǒng)計學(xué)意義，MMP-2在同一時間段相比無明顯變化,無統(tǒng)計學(xué)意義，見表2、3。

表2　急性腦梗死患者不同時間MMP-2變化

注：a,b:與治療前比較P<0.05；c,d:與對照組對比P>0.05。

表3　急性腦梗死患者不同時間MMP-9變化

注：a,b:與治療前比較P<0.05；c,d:與對照組對比P<0.05。

3討論

人尿激肽酶原為絲氨酸蛋白水解酶的一種亞型，是激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)(KKS)核心成分其可將激肽原轉(zhuǎn)化為激肽和血管舒張素，激肽與相應(yīng)的受體結(jié)合激活一氧化氮-cGMP和前列腺環(huán)素-cAMP等信號通路，促發(fā)廣泛的生物效應(yīng)，包括血管舒張，側(cè)枝循環(huán)開放，新生血管形成等[5]。金屬基質(zhì)蛋白酶(MMPs)是一組鋅依賴的能夠水解多種細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分的蛋白水解酶，可以降解除多糖外的全部細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分。MMPS在哺乳動物及人類均存在廣泛表達(dá)。有研究發(fā)現(xiàn)MMP-2于腦缺血后24h 表達(dá)增加，7 d達(dá)高峰，直到缺血后 30 d 仍有低水平表達(dá)，提示腦組織缺血及再灌注是MMPs的重要誘導(dǎo)因素[6]。也有研究發(fā)現(xiàn)腦梗死患者血清中MMP-2水平較正常人高，其活性伴隨著新生血管的修復(fù)而出現(xiàn)，參與缺血后腦組織自身修復(fù)以及凋亡細(xì)胞碎片的清除[7-9]。有體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)大腦中動脈閉塞 3-4h 后，MMP-9 表達(dá)出現(xiàn)上升，12 h、24 h 后梗死病灶內(nèi)的 MMP-9 表達(dá)增高明顯[10]。以上研究均提示了人尿激肽酶原可能通過影響MMPs表達(dá)水平而參與腦缺血后的血管重建和損傷修復(fù)過程。

本研究首先對人尿激肽酶原治療急性腦梗死的前后NIHSS評分變化進(jìn)行了觀察。結(jié)果顯示，與治療前對比，人尿激肽酶原組和對照組在治療后7天及14天的NIHSS評分均明顯低于治療前；與對照組對比，人尿激肽酶原組的治療有效率優(yōu)于對照組。以上結(jié)果進(jìn)一步證實人尿激肽酶原可顯著改善急性前循環(huán)腦梗死患者神經(jīng)功能缺失。

為進(jìn)一步研究人尿激肽酶原參與腦缺血后的血管重建和損傷修復(fù)過程的可能機制，本研究在治療前、治療第7天及第14天對血清MMP-2 及MMP-9水平進(jìn)行了動態(tài)監(jiān)測。結(jié)果顯示：治療前、治療第7天及第14天發(fā)現(xiàn)MMP-2水平在腦缺血后呈上升趨勢，并且在第7天MMP-2水平明顯較治療前和治療第14天高，在治療第14天MMP-2仍未回到治療前水平，通過比較兩者治療前、治療第7天及第14天的數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)人尿激肽酶原組MMP-2水平較對照組相比無明顯差異性；治療前、治療第7天及第14天發(fā)現(xiàn)MMP-9是呈逐漸下降的趨勢，治療前MMP-9水平最高，治療第7天MMP-9水平明顯低于治療前，但高于治療第14天，通過比較兩者治療前、治療第7天及第14天的數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)人尿激肽酶原組MMP-9水平較對照組降低明顯，這與先前多項國內(nèi)外研究結(jié)果一致[6-10]。綜上，與對照組比較，人尿激肽酶原組抑制了MMP-9的表達(dá)，降低了腦梗死后缺血部位的炎癥反應(yīng)，但未能明顯抑制MMP-2在腦缺血病理中的過度表達(dá)，提示人尿激肽酶原可能通過抑制MMP-9的表達(dá)，從而改善了急性腦梗死的神經(jīng)功能缺損。其機制考慮為：MMP-9 可能與腦梗死早期血腦屏障的損傷有關(guān)，而 MMP-2 則可能與腦缺血損傷后神經(jīng)細(xì)胞的修復(fù)和再生有關(guān)。

綜上，本研究結(jié)果高度提示MMP表達(dá)水平可能與急性腦梗死神經(jīng)功能損傷相關(guān)，人尿激肽酶原可能通過降低MMP-9表達(dá)改善急性腦梗死患者的神經(jīng)功能缺損，而其更為詳盡的分子機制尚需在急性腦缺血損傷的動物或細(xì)胞模型中行進(jìn)一步研究。

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收稿日期：(2013-11-07)

作者簡介：王玥(1990-)，女，碩士研究生，主要從事臨床神經(jīng)病學(xué)。

文章編號：1007-4287(2015)03-0454-03

通訊作者*

基金項目：吉林省科技發(fā)展計劃項目(20130206045SF)