蠶種冷藏加工的實踐與體會(下)
楊希哲1吳鋼2
(1.重慶市蠶業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院,重慶北碚400700;2.四川省蠶業(yè)管理總站,四川成都610041)
4蠶種人工孵化技術(shù)要點
為打破春制越年種進入滯育狀態(tài),以解決當(dāng)年夏秋用種需要,在產(chǎn)卵后適當(dāng)時間給予蠶種物理或化學(xué)刺激,并結(jié)合冷藏低溫處理打破卵的滯育狀態(tài),恢復(fù)發(fā)育機能,直至正常孵化,這就是人工孵化。
人工孵化法種類很多,目前生產(chǎn)上推廣使用的是鹽酸孵化,依處理時期不同可分為即時浸酸、冷藏浸酸、隨時冷藏浸酸孵化等,前兩種用得較多。
4.1.1加溫即時浸酸
4.1.1.1制種要求。各批蠶種要做好投蛾時間、盛產(chǎn)卵時間、收種時間記錄,從投蛾到收種,產(chǎn)卵室的溫度應(yīng)保持23℃~25℃。盛產(chǎn)卵時間的確定,可以觀察母蛾產(chǎn)卵達70%~80%時開始計算。
用作即浸的蠶種應(yīng)在投蛾當(dāng)日晚上9點前收種,盡量減少振動、摩擦、堆積,及時插入線架,不要過于擁擠。為縮小卵齡開差,上下午投蛾的蠶種應(yīng)分開,凡冷藏過的母蛾應(yīng)單獨投蛾制種。
4.1.1.2浸酸適期。收種后將蠶種置于溫度24℃、濕度75%~80%中保護。盛產(chǎn)卵后18~20h,大部分卵色呈淡黃色,少數(shù)晚產(chǎn)卵呈鮮黃色為即時浸酸適期。日系偏早、中系偏遲進行浸酸處理。
4.1.1.3浸酸標(biāo)準(zhǔn)。酸溫控制在114.5℉、115.5℉范圍最佳,禁止突破114℉~116℉;鹽酸比重1.072;時間日系5min30s,中系5min,下缸時酸溫可偏高0.5℉~1℉。
4.1.1.4注意事項。酸溫、鹽酸比重、浸漬時間
等浸酸三要素應(yīng)嚴(yán)格控制,浸酸刺激均勻,浸酸后脫酸徹底。
A、準(zhǔn)確測定。觀察酸缸、溫度、比重必須在充分?jǐn)噭蛩嵋汉?,最好由兩人同時測讀,溫度計不要靠近缸壁,比重計最好放入大缸觀測,每次浸酸測溫3次即2、3、5min或2、4、6min時測報,并如實做好記錄,每次高、低1℉,延長或縮短10s,三次累計后調(diào)整起缸時間。
B、提籠濾酸。為使蠶卵感受鹽酸刺激量真實、均勻,下缸后應(yīng)立即提籠離酸液面1~2次,不計入浸酸時間。每浸酸4缸應(yīng)重新測配鹽酸比重。
C、裝籠要求。浸酸前裝入小籠的蠶種應(yīng)逐張折疊卵面向外,每籠裝種張數(shù)由負(fù)責(zé)人調(diào)查后確定,做到松緊適度。小籠蠶種裝入尼龍袋后,要做好品種、批次標(biāo)記。
D、固定平附。平附種浸酸可在浸酸前用含有效成分2%~3%的甲醛液浸漬1min,固定20min左右,也可在酸液中加入其重量2%的甲醛原液。
E、徹底脫酸。蠶種脫酸需逆水流向而行,散卵種脫酸20min,平附種40min,以舌尖舔嘗卵面無酸味為度。在保證脫盡酸液前移走,注意節(jié)約用水,脫酸后的蠶種應(yīng)盡快吹風(fēng)干燥,及時進入24℃保護或入冷庫冷藏。《蠶種總論》P425橫川等試驗:將不同濃度鹽酸涂在卵面上,各區(qū)的孵化率沒有差異;用15%的鹽酸(即時浸酸濃度)稀釋10000倍(略帶酸味)涂在卵面上,多角體病發(fā)生較多,對照區(qū)(涂水)的發(fā)病較少。
4.1.2常溫即時浸酸
4.1.2.1浸酸標(biāo)準(zhǔn)。常溫即時浸酸標(biāo)準(zhǔn)見下表。
常溫即時浸酸標(biāo)準(zhǔn)表
注:從產(chǎn)卵到浸酸保護溫度24℃,鹽酸15℃時比重為1.110(約合22%)
4.1.2.2注意事項。重點把握浸酸適期、鹽酸比重、液溫及時間。
A、浸酸適期。產(chǎn)卵后保護在25℃,經(jīng)過15~20h浸酸為好。
B、鹽酸準(zhǔn)備。鹽酸提前半天配好,比重1.100~1.110,酸溫24℃~29℃。
四川某蠶種場采用酸溫29.5℃、比重1.105、時間29~30min效率較高,孵化情況也不錯。
C、其他事項。參考即時浸酸操作4.1.1.4。
常溫浸酸采用浸酸結(jié)合脫?;蛳让摿:蠼峋?,如采用浸酸結(jié)合脫粒,酸中不能加入甲醛。蠶種可裝小籠套尼龍袋,也可折疊后(卵面向外)直接裝入賽璐珞籠子中,注意松緊適度,然后將蠶種垂直插入鹽酸中,以利酸液迅速滲入,中途應(yīng)提動2~3次。使用上漿布或上漿連紙可先脫粒后浸酸,既節(jié)約紙張鹽酸等成本,又可加快浸酸速度,孵化效果好。
4.2.1入庫適期
產(chǎn)卵后保護溫度以24℃為宜,入庫冷藏適期根據(jù)預(yù)計冷藏天數(shù)、產(chǎn)卵后保護溫度、卵色來決定。
入庫冷藏適期
蠶種入庫前保護溫度如超過27℃以上,入庫應(yīng)經(jīng)15℃中間溫度2~4h。
4.2.2處理要點
4.2.2.1入庫包裝。蠶種入庫最好插入線架,在庫內(nèi)放置1d以上,待蠶種冷透后,再抽出打捆上架或裝箱。在架上不能排列過緊。
4.2.2.2冷藏溫度。冷藏溫度以5℃為標(biāo)準(zhǔn),如果預(yù)計冷藏日數(shù)在60d以上,當(dāng)冷藏到40d后,應(yīng)降溫到2.5℃作抑制性冷藏。
4.2.2.3出庫要求。蠶種出庫應(yīng)充分散冷(插入線架或平攤箔內(nèi)),經(jīng)過15℃中間溫度2~3h,再出庫到自然溫度(最好30℃~32℃)2~3h后再行浸酸。
4.2.3浸酸標(biāo)準(zhǔn)
鹽酸比重1.092,酸溫以118℉為中心,117℉~119℉為范圍。日系品種6min30s,中系品種6min,多化性品種可酌量縮短。其他注意事項可參考即時浸酸操作4.1.1.4。
隨時冷藏浸酸孵化是解決秋用種入庫數(shù)量不足的一種應(yīng)急措施。由于是促使已進入滯育的蠶卵孵化,孵化成績不穩(wěn)定,因蠶品種產(chǎn)卵后保護環(huán)境和時間長短不同而有差異。具體操作可分為:
4.3.1浸酸冷藏浸酸
此法以浸酸為主結(jié)合低溫處理,如產(chǎn)卵后蠶種保護在20d以內(nèi),且浸酸后冷藏日數(shù)可達50d及以上,其孵化成績能滿足生產(chǎn)需要。
第1次浸酸。浸酸標(biāo)準(zhǔn):酸溫115℉,比重1.075~1.094,時間15min。如果蠶種產(chǎn)卵后在24℃~25℃中保護時間未超過20d,浸酸后,可在5℃中冷藏40d以上的,則第1次浸酸中系品種比重可在1.075~1.094,日系品種1.075~1.085范圍。如果產(chǎn)卵后蠶種保護已達20~30d,浸酸后只能冷藏40d,無論中系還是日系,第1次浸酸比重均以1.094為好,實用孵化率可達90%以上。而5℃中只冷藏30d的實用孵化率為84%左右。
入庫冷藏。第1次浸酸晾干后,經(jīng)15℃中間溫度6h,再入庫5℃冷藏。冷藏時間40d以上。
第2次浸酸。浸酸標(biāo)準(zhǔn):按常規(guī)冷浸種浸酸標(biāo)準(zhǔn)處理,即酸溫48℃,比重1.092~1.094,時間6min~6min30s。浸酸后,按常規(guī)冷藏浸酸種鹽比整理裝盒出庫。
4.3.2長期冷藏浸酸
產(chǎn)卵后1個月內(nèi),任何時間均可進行冷藏,先在15℃中放置3d,再進入5℃冷藏70d后,按一般冷浸種標(biāo)準(zhǔn)進行浸酸處理。個別難解除滯育的品種可酌量延長冷藏時數(shù)。
4.4.1即時浸酸種浸酸前冷藏
生產(chǎn)中由于推遲收蟻時期或為了集中處理減少浸酸次數(shù),需要進行浸酸前冷藏,具體方法為:
4.4.1.1產(chǎn)卵后溫度時間控制。產(chǎn)卵后,保護在24℃~25℃中,經(jīng)18~20h(盛產(chǎn)卵起計算)后入13℃~15℃中過渡2h,再入庫5℃冷藏,時間不超過5d。
4.4.1.2浸酸前溫度時間控制。出庫浸酸要經(jīng)中間溫度2h,再送到自然溫度或30℃中放置2~3h充分散冷后裝籠浸酸。浸酸時可能部分卵已開始著色,但無大礙。冷藏中最好蓋濕布補濕。
4.4.1.3其他。蠶卵剛產(chǎn)下不久用15℃保護,可推遲浸酸適期5d左右。但注意不能在產(chǎn)卵后第2天浸酸,可在產(chǎn)卵后3~5d實施酸處理。
4.4.2即時浸酸種浸酸后冷藏
即浸種浸酸后胚子發(fā)育,常溫比加溫浸酸的胚子要快3~5h,冷藏時應(yīng)注意。
4.4.2.1乙胚子冷藏。浸酸后的蠶種,在18℃~20℃中保護10~12h,待胚子發(fā)育到乙1乙2時,經(jīng)中間溫度10℃~12℃保護6~8h,入庫5℃中冷藏7~15d,然后降為2.5℃冷藏30~40d。出庫也應(yīng)經(jīng)中間溫度過渡3~4h。
4.4.2.2丙胚子冷藏。蠶種浸酸后,在24℃~25℃保護18~22h,胚子發(fā)育到丙1丙1+時,經(jīng)中間溫度10℃~13℃過渡2~4h,入庫用2.5℃冷藏。冷藏期限20~30d。
4.4.2.3丁胚子冷藏。浸酸后,在25℃中保護40h,經(jīng)12℃~15℃中間溫度2~3h,胚子在丁2前用2.5℃冷藏,丁2后宜用5℃冷藏,再冷藏時間2.5℃的在20d以內(nèi),丁2后的冷藏期7~10d為限。
4.4.3冷藏浸酸種浸酸后冷藏
4.4.3.1乙胚子冷藏。浸酸后,用24℃~25℃保護,在浸酸后12h內(nèi)經(jīng)10℃~13℃中間溫度2~4h,入庫2.5℃冷藏。冷藏期限45d。
4.4.3.2丙胚子冷藏。浸酸后,用24℃~25℃保護20~24h,當(dāng)胚子發(fā)育到丙1,經(jīng)10℃~13℃中間溫度2~4h,充分感受中間溫度后,用2.5℃冷藏。期限30d。
4.4.3.3丁胚子冷藏。浸酸后,用24℃~25℃保護36~48h,待胚子發(fā)育到丁1丁2時,經(jīng)中間溫度2~4h,充分感受中間溫度后,再入冷庫5℃冷藏。冷藏期限7d。
4.4.3.4注意事項。冷藏處理要避開浸酸后24h到48h這一段危險期;冷藏前要用中間溫度過渡,并充分感受中間溫度;冷藏前后的溫差要控制在12.5℃內(nèi),冷藏溫度5℃比2.5℃安全;冷藏再冷藏時間寧短勿長,過長要增加白死卵出現(xiàn)機率;再冷藏后出庫前,必須經(jīng)過中間溫度10℃~13℃過渡2~4h,并且充分感受中間溫度。
5各類蠶種事故及誘發(fā)原因
一般來說,孵化不齊是由于蠶卵活性化不齊所致,但也存在蠶卵活性化后,因處理失誤,卵粒間感受溫濕度出現(xiàn)差異,造成胚子發(fā)育不齊的情況。
5.1.1越年種活性化不齊的原因
5.1.1.1親代越年性管理不善。蠶種繁育過程中,催青、小蠶期低溫,大蠶、制種期高溫等,可使蠶種化性變化,生種增加。再出卵多的蠶種其卵胚子滯育程度不一,蠶卵活性化開差較大。
5.1.1.2蠶卵過早接觸低溫。秋冬冷暖交替季節(jié),蠶卵過早接觸低溫,以后又接觸較高溫度,部分在低溫中已開始解除滯育的蠶卵便開始發(fā)育拉大了胚子發(fā)育開差。
冬暖地區(qū)蠶種在自然溫度下越冬,由于蠶卵間的差異,胚子活性不一,在較高溫度下先解除滯育的胚子開始發(fā)育,未解除滯育的胚子不發(fā)育,造成胚子發(fā)育不齊。
5.1.1.3越冬期蠶卵活性化不充分。如5℃保護時間不夠或者過早使用2.5℃或0℃冷藏,延緩或抑制了胚子活性化進程,對活性化不充分的蠶種進行中感,必然會拉大胚子發(fā)育差距。
5.1.2人工孵化種活性化不齊的原因
5.1.2.1錯過浸酸適期。即浸種浸酸處理過遲,蠶卵胚子越年化趨向已比較明顯的蠶種。
5.1.2.2錯過冷藏適期。冷浸種入庫時,卵齡過長,卵色已偏老,加之冷藏時間較短,胚子滯育程度解除不夠。
5.1.2.3入庫散熱不充分。冷浸種入庫冷藏,蠶種捆扎過緊或排列架上過密,影響蠶種捆中心部位散熱較慢,其周緣部分和中心部位的蠶卵處于不同溫度下,胚子滯育進程和活性化程度產(chǎn)生差異。
5.1.2.4出庫散冷不充分。冷浸種出庫浸酸前,因散冷不充分、不均勻?qū)е虏糠中Q卵接觸酸溫較低,或測定鹽酸比重、溫度時攪拌不充分,測量倉促失準(zhǔn),影響浸酸效果。
5.1.2.5蠶種裝籠過多。蠶種裝籠過多過擠,影響了酸溫滲透和熱交換,使蠶種接觸鹽酸刺激不勻。
5.1.2.6熱交換不充分。受浸酸用具影響,如賽璐珞籠子孔徑小,內(nèi)外鹽酸熱交換慢,籠內(nèi)蠶種實際接觸酸溫比籠外實測酸溫低,蠶種感受刺激量不足。
5.1.3活性化后蠶種孵化不齊的原因
5.1.3.1中感溫度過高。越年種中感溫度超過15℃,在較高溫度中,大胚子發(fā)育快,小胚子發(fā)育慢,拉大了開差。
5.1.3.2容器裝卵過多。用紗布袋冷藏散卵蠶種,裝卵過多,冷氣難以滲入袋的中心位置,加上蠶卵呼吸發(fā)熱,袋的中心卵粒處于較高溫度和缺氧狀態(tài),致使出現(xiàn)放射狀發(fā)育障礙和胚子發(fā)育開差,這是冷庫多次出現(xiàn)胚子嚴(yán)重不齊和死卵增多的主要原因。
5.1.3.3胚子發(fā)育狀態(tài)、冷藏適期、溫度等把握不準(zhǔn)。蠶種浸酸后冷藏處理中,在出入庫時間、中間過渡、冷藏溫度和期限等環(huán)節(jié)出現(xiàn)失誤也會導(dǎo)致死卵多,孵化不齊。
5.1.3.4運輸催青條件不良。出庫的幼嫩胚子,在運輸途中遇高溫干燥或其他不良刺激。
蠶種處理失誤的另一嚴(yán)重后果就是死卵增加,孵化率下降。這對蠶種品種影響最為突出。死卵多,有效卵減少,不僅影響收蟻量,而且存活下來的蠶卵品質(zhì)和蟻蠶體質(zhì)也要變劣。
剔除遺傳致死基因的因素,非遺傳性死卵的發(fā)生和外界環(huán)境有著密切關(guān)系,其原因較復(fù)雜。從原蠶飼養(yǎng)條件,蠅蛾期的保護,產(chǎn)卵和蠶種處理以及出庫催青,如遇環(huán)境因素異常,人為管理不當(dāng)?shù)?,都會?dǎo)致死卵發(fā)生。因死因和時期不同,死卵種類較多,下面介紹幾種主要死卵。
5.2.1早期死卵
早期死卵通常指蠶卵從漿液膜著色一直到點青前出現(xiàn)的各類死卵。特征是卵窩深陷或成癟卵,卵色多為黑褐色、淡紅色、赤褐色等,有的卵雖外觀無異常,但胚子已受害直到催青感受較高溫度時才顯現(xiàn)出來,這種卵多在反轉(zhuǎn)期因不能反轉(zhuǎn)而死亡,早期死卵因跨度時間長,形成的原因較多。
5.2.1.1飼育因素。原蠶飼育條件差,蛹期保護不當(dāng)造成卵質(zhì)虛弱。
5.2.1.2保種因素。蠶種場在產(chǎn)卵保種,遭遇摩擦、振動、擠壓、堆積,或越夏期溫度過高、時間過長、溫度過大,使胚子出現(xiàn)生理障礙。
5.2.1.3人工越夏因素。秋制種沒經(jīng)高溫保護或保護時間不夠,成為滯育不充分的“軟性卵”,這種卵易活性化,不耐冷藏。
5.2.1.3胚子發(fā)育因素。蠶種浴消前后接觸較高溫度,早活性化胚子開始發(fā)育,因不耐長期冷藏而成為死卵。
5.2.1.4冷藏浸酸因素。浸酸種入庫冷藏處理不當(dāng)或浸酸刺激過強,使胚子喪失活力。
5.2.2點青和轉(zhuǎn)青死卵
催青到后期,蠶卵見點后終止發(fā)育而死亡,成為點死卵,若胚子發(fā)育到蟻體完成,能吞食漿液膜使卵色轉(zhuǎn)青,不能咬破卵殼而孵化的成為轉(zhuǎn)青死卵。一般轉(zhuǎn)青死卵多于點青死卵,其特征是卵殼不陷,呈現(xiàn)點青或轉(zhuǎn)青卵色,但卵不能孵出蟻蠶。形成原因有:
5.2.2.1遭遇高溫。催青后期或在運種途中,溫度過高(28℃以上)或受溫度激變影響。
5.2.2.2補濕不夠。受催青后濕度影響最大。點青后,胚胎表面漸失去漿液膜保護,在干燥尤其是高溫干燥情況下,胚體極易散失水分成為轉(zhuǎn)青死卵。
5.2.2.3未適時活性化。活性化過早,活力下降或活性化不充分孵化機能弱的蠶卵。受浸酸刺激過強或過弱的蠶卵。
5.2.2.4超期冷藏。冷藏抑制期過長,營養(yǎng)物質(zhì)消耗太大的蠶卵。
5.2.2.5有害物質(zhì)。卵期接觸過不良?xì)怏w、農(nóng)藥,尤其是神經(jīng)性毒劑而死亡的多呈現(xiàn)為轉(zhuǎn)青死卵(此階段胚子神經(jīng)系統(tǒng)已完成)。
5.2.2.6病原感染。感染微粒子病的蠶卵。
5.2.2.7其他影響胚子正常發(fā)育因素。催青前各階段,胚子曾遭受過影響,出現(xiàn)微弱障礙,雖未成早期死卵,或尚可吞食漿液膜,但無力咬破卵殼成為點青或轉(zhuǎn)青死卵。
5.2.3不孵化卵
蠶種收蟻后,殘留的外觀正常、不轉(zhuǎn)青、不再孵化的蠶卵。其形成原因:
5.2.3.1保護浸酸冷藏。解除滯育不完全或錯過了浸酸適期,或浸酸刺激不足。
5.2.3.2堆積產(chǎn)生蒸熱。蠶卵浴消時,在濕潤狀態(tài)下,堆積過久產(chǎn)生的蒸熱卵。
5.2.3.3接觸異常高溫。蠶種運送或催青前、中期,蠶種曾短暫接觸過異常高溫。
5.2.4白死卵
白死卵是漿液膜破損產(chǎn)生異常卵的總稱,其胚子大多能發(fā)育到反轉(zhuǎn)期,后因胚體不能反轉(zhuǎn)而致死。產(chǎn)生的原因除遺傳因素外,主要是因溫度激變而引起的,有以下幾個表現(xiàn)特點:
5.2.4.1冷藏因素。冷藏浸酸種,浸酸后冷藏在12~48h,尤其24~48h,出入庫又不經(jīng)過中間溫度,或冷藏前后溫度差12.5℃以上,容易誘發(fā)白死卵產(chǎn)生。
5.2.4.2超期冷藏。長期冷藏種容易出現(xiàn)白死卵。
5.2.4.3保種因素。蠶種越夏期高溫保護時間長的出現(xiàn)白死卵幾率大。
5.2.4.4品種因素。日系和多化性品種容易產(chǎn)生白死卵。
5.2.5白殼卵
這種死卵是在漿液膜和卵殼之間出現(xiàn)一段空隙而呈現(xiàn)卵殼白色所致。因這段空隙多出現(xiàn)蠶卵的一端,又稱白頭卵。
5.2.5.1卵面消毒液濃度。蠶種浴消時,漂白粉有效氯濃度偏高,過分溶解卵殼致使?jié){液膜收縮而致。
5.2.5.2蠶卵機械損傷。脫卵時,過度摩擦,卵殼受損。
5.2.6淡色卵
淡色卵多數(shù)為越年性不充分的蠶卵,往往間接與再出卵和孵化不良原因結(jié)合在一起。淡色卵孵化較差,孵化出的蟻蠶體質(zhì)也較弱。多與品種遺傳性有關(guān)。
5.2.7濃色卵
濃色卵系因蟑螂、蟋蟀咬食蠶卵流出的卵汁,或脫卵及其他機械因素使卵殼受損,卵汁滲出污染周邊良卵所造成的死卵。
蠶種不當(dāng)處理,部分受影響較小的蠶卵雖可孵化,但所出蟻蠶體質(zhì)下降,在收蟻飼養(yǎng)中往往表現(xiàn)出蠶體發(fā)育不齊,且因體質(zhì)虛弱而感染蠶病,使減蠶率增加,導(dǎo)致產(chǎn)繭量下降。
越年蠶種越夏期保護溫度過高,時間過長或過分干燥,浸酸種刺激量偏大均會造成蟻蠶體質(zhì)下降,體重減輕、體色發(fā)黃、活力較差。另外,因孵化不齊采取二夜包、三夜包收蟻的,因久未食葉造成饑餓,活力下降、體質(zhì)變差、附著力減弱,并伴有死蟻和吐浮絲現(xiàn)象。
蠶種處理不當(dāng)所造成的各種事故,原因比較復(fù)雜,除以上談到的幾種主要類型,還有其他情況,在此不再論及。
作者簡介:楊希哲(1941-),男,推廣研究員,從事蠶種生產(chǎn)技術(shù)管理工作。