肉羊胚胎移植的要點

（黑龍江省訥河市青色草原種畜場 161300）

（黑龍江省訥河市青色草原種畜場 161300）

胚胎移植是指通過同期發(fā)情和超數(shù)排卵技術將優(yōu)良肉羊品種的胚胎，即約7日齡的受精卵，采取人工方法將其移植到普通品種母羊的子宮內繼續(xù)發(fā)育，形成胎兒，直至生產的過程。目前，我國通過采用該技術對現(xiàn)有的生產性能較低品種的肉羊、山羊和綿羊進行改良，對羊群整體生產性能的提高具有非常重要的意義。

1 供、受體母羊

供體選擇。供體母羊具有優(yōu)質的遺傳基因，即具備遺傳優(yōu)勢，一般選擇高生產性能和經濟價值的母羊作為供體。供體的繁殖能力良好，即繁殖史較好，且容易配種，容易成功受孕；繁殖史上不存在遺傳性缺陷；分娩過程順利，未出現(xiàn)胎衣不下或難產的現(xiàn)象；未患過繁殖性疾病，生殖器官發(fā)育正常；發(fā)情表現(xiàn)明顯，性周期正常。另外，選擇供體母羊還要考慮年齡、營養(yǎng)需要、發(fā)情周期對超數(shù)排卵的反應、繁殖力以及自然排卵是否正常等方面，由此進一步選擇優(yōu)質供體，然后建立嚴格、規(guī)范的供體檔案，同時要根據(jù)供體在胚胎移植過程中的具體情況重新評價或淘汰個別供體。供體母羊健康無病，體質健壯，且營養(yǎng)狀況良好。具體是選擇經產母羊作為供體，但必須是產后超過60天的母羊，且其生殖系統(tǒng)已經恢復正常，有正常的發(fā)情周期。供體母羊體況良好，年齡為1.5～7周歲，膘情中等。選擇的供體羊必須加強飼養(yǎng)管理，同時制定完善的超數(shù)排卵計劃。

受體選擇。受體母羊一般選擇本地品種或者非優(yōu)良品種，但必須確保其健康狀態(tài)和繁殖性能良好，體型在中上等。如養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的母羊數(shù)量很多，也可以選擇與供體發(fā)情時間相近或相同的自然發(fā)情母羊，一般二者間發(fā)情時間相差要少于24小時。但一般情況下常無法找到非常合適的母羊作為受體，因此多數(shù)情況下需要對供體和受體采取同期發(fā)情。

2 同期發(fā)情

供體母羊和受體母羊的發(fā)情時間要基本保持一致，且發(fā)情時間越接近其受胎率越高，從而為受精卵移植奠定良好基礎。據(jù)報道，移植肉羊受精卵時，供體和受體母羊同期發(fā)情相差小于24小時，其受胎率可高于70%，而相差48小時則在50%以下。近年來，一般給供體和受體母羊分別肌肉注射15 mg前列腺素一次，則使二者實現(xiàn)發(fā)情同期化。

3 供體羊的超數(shù)排卵和配種

超數(shù)排卵。促卵泡素（FSH）+多聚半乳糖醛酸酶（PG）法，即母羊發(fā)情的第12天或第13天進行皮下注射FSH，并呈遞減劑量持續(xù)注射3天，每天2次，每次間隔12小時，第五次注射FSH的同時注射PG。母羊注射完FSH后，在每天上午和下午開始進行試情超數(shù)排卵處理，待其發(fā)情后每只母羊要馬上皮下或靜脈注射100～150 IU黃體刺激素。孕馬血清促性腺激素（PMSG）法，同多次注射FSH法相比，該法操作簡單，動物刺激性小，只要注射1次，價格相對比較便宜，缺點是PMSG的半衰期較長，一般在21小時左右，因此超數(shù)排卵后血液中殘留的PMSG往往會造成第二次排卵波出現(xiàn)。聚乙烯吡咯烷酮（PVP）+FSH法，即將適量的FSH溶于適量的15%PVP中再進行一次肌肉注射，可使其超數(shù)排卵。

配種。供體母羊進行超數(shù)排卵處理后，要對其采取密切觀察，以便及時發(fā)現(xiàn)發(fā)情。一般情況下，供體母羊多數(shù)在超排處理完成后的12～48小時出現(xiàn)發(fā)情，在胚胎移植實際過程中，主要的判定標準是其站立不動的接受爬跨。供體母羊發(fā)情后，每天早、晚分別進行1次自然交配，中間進行1次人工輸精，每次間隔6個小時，還可依據(jù)實際情況確定，直至發(fā)情結束。

4 胚胎的、檢查和分級

供體母羊經過超數(shù)排卵處理后產生的胚胎，要根據(jù)胚胎移植需要的發(fā)育階段進行定期回收，一般采取手術法采集供體母羊輸卵管內的胚胎。收集時，現(xiàn)在供體母羊腹中線切口，通過輸卵管傘部將乳膠管導入，在由其引入胚胎收集杯，在宮管連接處將沖胚液注入到輸卵管內進行早卵裂期胚胎的沖洗。一般選擇收集桑椹胚和囊胚，即母羊發(fā)情5～7天形成的胚胎，這是由于8天后胚胎會在透明帶中孵出，容易被損傷和丟失。此外，可由子宮基部將二通管插入子宮腔，氣囊充氣后由宮管連接部向子宮腔注入沖胚液，胚胎和沖胚液經由二通管流入到胚胎收集杯中。

胚胎采集結束后，必須將其放在變倍體視顯微鏡下靜置2～3分鐘，當胚胎沉入皿底后進行觀察。檢查完全部的胚胎后要將其移入到發(fā)育培養(yǎng)液中進行清洗，并在培養(yǎng)液中對胚胎進行質量分級。

在實際應用中，一搬將胚胎簡單分為三個級別。A級，即胚胎發(fā)育情況符合采胚時的胚齡，且形態(tài)正常，未出現(xiàn)退化跡象；B級，即發(fā)育時期符合胚齡，但形態(tài)稍有不同，往往存在小暗區(qū)，或者形態(tài)正常，但發(fā)育時期滯后1天左右；C級，即胚胎發(fā)育時期滯后2天，且卵裂球形態(tài)松散，非常不正常，或出現(xiàn)大塊深暗的退化區(qū)?？梢浦才呤茿、B級，C級則不能移植。此外，檢出的胚胎不能夠與處于1—細胞期的空透明帶、未發(fā)育卵和未受精卵相混。

5 胚胎移植

一搬采用外科手術方法將收集于供體母羊的6～7日齡胚胎移植到發(fā)情6～7天的受體母羊的子宮角尖端。手術時，先將受體母羊進行全身麻醉，在腹下乳房前白線處切口，將腹腔打開，并將出現(xiàn)黃體一側的子宮角拉出。之后用針頭將子宮壁刺透，再用移胚細管將胚胎移入。此外，還可在母羊乳房前白線兩側將腹腔鏡分別插入腹腔，觀察兩側卵巢黃體情況，并在生成黃體一側的腹腔鏡插入處開一小孔，將該側子宮角子宮用腸鉗拉出，在子宮角尖端移入胚胎。胚胎移入后，子宮角要放回原處，然后縫合腹壁。根據(jù)實際情況，1只受體母羊一般可移入1～3枚胚胎。移植胚胎的受體母羊經2～3個情期的觀察，未返情的則為妊娠羊。

肉羊胚胎移植的要點

莊愛春