電鏡技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用

李詩(shī)恒

(吉林大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，長(zhǎng)春130021)

臨床病理診斷往往被稱為診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，目前電鏡診斷技術(shù)以其可以觀察到亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化，廣泛應(yīng)用于現(xiàn)代臨床病理診斷中，成為病理診斷中一項(xiàng)重要依據(jù)［1］。在對(duì)一些疑難雜癥的診斷中，電鏡技術(shù)在病理診斷中所發(fā)揮的作用更加明顯，許多病理改變發(fā)生在亞細(xì)胞水平上，可以使許多疾病早期即被發(fā)現(xiàn)，控制病情惡化。

1 電鏡技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用

1.1 心肌活檢 心內(nèi)膜心肌活檢(EMB)是診斷心臟移植術(shù)后排斥反應(yīng)的金標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)在已成為診斷心臟移植術(shù)后排斥反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)檢查方法［2］。而對(duì)于心肌淀粉樣變的患者心肌活檢也是確診的最直接且高度敏感的診斷方法。由于心肌活檢取材的局限性，常會(huì)被誤診為肥厚型心肌病、冠心病等。此時(shí)，應(yīng)用電鏡技術(shù)可以避免因淀粉纖維在組織上沉積不均且較少時(shí)，剛果紅染色為陰性。對(duì)心肌淀粉樣變患者心肌超微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)，沉積嚴(yán)重區(qū)域心肌細(xì)胞完全被淀粉樣纖維包繞，心肌細(xì)胞膜中斷不連續(xù)，心肌肌原纖維肌絲減少，排列紊亂，嚴(yán)重病變的心肌細(xì)胞心肌肌絲斷裂、崩解，肌節(jié)分離，結(jié)構(gòu)模糊、消失，心肌細(xì)胞損傷嚴(yán)重。線粒體除出現(xiàn)形態(tài)改變、腫脹、形成空泡外，分布則出現(xiàn)兩種情況:部分患者線粒體積聚成堆，灶狀分布，心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)往往較完整且周圍淀粉樣纖維少或無(wú)沉積;部分患者線粒體數(shù)量減少，患者往往心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)不完整，損傷較嚴(yán)重，細(xì)胞周圍往往存在大量淀粉樣纖維沉積，提示可能病變較重、疾病晚期的表現(xiàn)，早期則可能出現(xiàn)積聚成堆［3］。在心肌活檢中，應(yīng)用電鏡技術(shù)可以檢測(cè)出微小的病變，提高了病理診斷的準(zhǔn)確性。

1.2 腎活檢 近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，影像學(xué)設(shè)備的更新及操作技能的提高，經(jīng)皮腎活檢技術(shù)開(kāi)展的較為廣泛，可以直接觀察腎臟病的腎臟形態(tài)學(xué)的改變，并能進(jìn)行系列的觀察。經(jīng)皮腎臟穿刺活檢技術(shù)是目前診斷腎臟疾病的重要手段之一，由于檢測(cè)的成功率高、病理結(jié)果分析確切，能夠?yàn)榕R床采用準(zhǔn)確的治療方案提供重要依據(jù)。因此，經(jīng)皮腎臟穿刺活檢在臨床診斷和治療腎臟疾病中發(fā)揮了極其重要的作用［4］。腎臟疾病種類眾多，變化復(fù)雜，所以單一的檢查方法無(wú)法對(duì)其進(jìn)行確診，必須是光學(xué)顯微鏡技術(shù)、免疫化學(xué)技術(shù)及電子顯微鏡技術(shù)聯(lián)合檢測(cè)。其中，電鏡技術(shù)在腎病病理診斷上起著決定性作用［5］。近年來(lái)電鏡技術(shù)不斷發(fā)展，推陳出新，在腎活檢的領(lǐng)域，加入了新的動(dòng)力——冷凍超薄切片免疫電鏡技術(shù)。該技術(shù)可以較好的保持抗原活性，而且在觀察腎組織超微結(jié)構(gòu)的同時(shí)可以進(jìn)行免疫組織染色，檢測(cè)出是何種免疫復(fù)合物沉積所導(dǎo)致的腎臟疾病。朱小東等［6］發(fā)現(xiàn)該技術(shù)不但可以提高免疫反應(yīng)的敏感性，還能較好地保存超微結(jié)構(gòu)?；顧z病理診斷不光應(yīng)用于心臟、腎臟方面的疾病診斷，對(duì)于某些罕見(jiàn)遺傳性疾病的診斷亦有幫助［7］。

1.3 肺癌的診斷 在分化程度較低的肺癌中，利用常規(guī)方法進(jìn)行病理診斷往往很困難，故需要利用免疫組織化學(xué)和電鏡技術(shù)聯(lián)合診斷，才能更準(zhǔn)確地確定肺癌的組織分型。有關(guān)研究表明，鱗癌超微結(jié)構(gòu)中可見(jiàn)張力原纖維;腺癌的超微病理學(xué)結(jié)構(gòu)中100%可見(jiàn)緊密連接，卻沒(méi)有看到張力原纖維;腺鱗癌中既有張力原纖維又有緊密連接;肺小細(xì)胞癌中沒(méi)有張力原纖維和緊密連接，但存在神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒［8-10］。電鏡下的超微結(jié)構(gòu)不僅可以進(jìn)行腫瘤來(lái)源的分析，還可以對(duì)同一種肺癌在亞細(xì)胞水平上進(jìn)行分型，據(jù)此了解其肺癌的發(fā)展。如肺腺癌中電鏡下可以觀察到3種分泌顆粒:黏液顆粒、板層小體和管狀髓鞘脂以及Clara顆粒。根據(jù)3種分泌顆粒的種類及存在的不同，可以將肺腺癌進(jìn)一步分為4個(gè)超微類型:Ⅰ型黏液細(xì)胞型、Ⅱ型肺泡細(xì)胞型、Ⅲ型Clara細(xì)胞型和混合型［11］。除此之外，肺黏膜相關(guān)淋巴組織型淋巴瘤也是一種需要通過(guò)超微結(jié)構(gòu)診斷的罕見(jiàn)疾病。其在肺泡上皮和支氣管黏膜上皮周圍及肺泡腔內(nèi)有大量的淋巴源性瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)，這種瘤細(xì)胞顯示淋巴細(xì)胞的形態(tài)特征。此外，還可見(jiàn)到個(gè)別細(xì)胞的細(xì)胞核不規(guī)則、扭曲、分葉或腦回樣，具有T淋巴細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)［12］。

2 結(jié)語(yǔ)

電鏡技術(shù)豐富了對(duì)生物大分子、細(xì)胞、組織等形態(tài)學(xué)上的認(rèn)識(shí)，同時(shí)在病理學(xué)的發(fā)展上，利用電子顯微鏡技術(shù)觀察到微小的病變，有利于臨床的早期診斷和疾病的分期分型，極大拓展了臨床視野。電鏡技術(shù)作為一種診斷上的輔助手段，還可以做到觀其形態(tài)知其功能，推測(cè)其基因改變、代謝紊亂等。單一的電鏡技術(shù)在病理學(xué)上的應(yīng)用存在著較大的局限性，對(duì)于疑難病癥的診斷還要多種診斷技術(shù)的支持，以縮小診斷誤差。

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