貴州省不同產(chǎn)地杠板歸的水分、灰分、浸出物和槲皮素的測定*

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貴州省不同產(chǎn)地杠板歸的水分、灰分、浸出物和槲皮素的測定*

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20150113.1805.005.html

何瑾1， 李莉2**， 許超飛2， 張敏2， 郝陽2， 盛鈺2， 劉豫1

(1.貴陽醫(yī)學(xué)院附院 藥劑科， 貴州 貴陽550004； 2.貴陽醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院， 貴州 貴陽550004)

[摘要]目的： 測定貴州產(chǎn)杠板歸的水分、總灰分、水溶性浸出物和槲皮素的含量。方法： 采集貴州省19個(gè)產(chǎn)地的杠板歸藥材，按《中華人民共和國藥典》(2010年版)中水分測定法(烘干法)、灰分測定法和水溶性浸出物測定法測定各地杠板歸藥材中水分、灰分和浸出物，采用高效液相色譜法測定槲皮素的含量。結(jié)果： 19個(gè)產(chǎn)地杠板歸藥材中水分含量為5.66%～10.47%，平均8.64%；總灰分含量為4.40%～7.79%，平均5.80%；水溶性浸出物含量為16.54%～26.82%，平均22.55%；槲皮素含量為0.17%～0.58%，平均0.38%；19批貴州產(chǎn)杠板歸樣本水分、總灰分、水溶性浸出物及槲皮素含量最高值和最低值均相差1倍以上。結(jié)論： 貴州省內(nèi)不同產(chǎn)地的杠板歸質(zhì)量存在較大的差異。

[關(guān)鍵詞]杠板歸； 水分； 灰分； 浸出物； 槲皮素； 含量測定

杠板歸又名貫葉蓼、蛇牙草等，為蓼科蓼屬植物杠板歸(PolygonumperfoliatumL.)的地上部分，在貴州擁有豐富的野生資源。杠板歸具有清熱解毒，利水消腫，止咳的功效。可用于咽喉腫痛，肺熱咳嗽，濕熱瀉痢，濕疹，蛇蟲咬傷等癥的治療[1-3]。不同來源的杠板歸藥材槲皮素含量存在差異[4-6]。為更客觀、科學(xué)地評(píng)價(jià)杠板歸質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)收集貴州19個(gè)產(chǎn)地的杠板歸，對(duì)其水分、總灰分、浸出物和槲皮素的含量進(jìn)行分析比較。

1材料與儀器

1.1材料

杠板歸藥材(貴州遠(yuǎn)程制藥有限責(zé)任公司提供)及槲皮素對(duì)照品(購自中國藥品生物制品檢定所，供含量測定使用)，甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

1.2儀器

Agilent1100型高效液相色譜儀系統(tǒng)(美國安捷倫公司)，超聲清洗器(SG8200H型，上海冠特超聲儀器有限公司)，AUY分析天平(日本島津公司)，馬弗爐(SX-4-10型箱式電阻爐，天津市泰斯特儀器有限公司)，數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-4型，國華電器有限公司)。

2方法與結(jié)果

2.1浸出物測定

按照《中國藥典》(2010版)浸出物測定法項(xiàng)下熱浸法(附錄Ⅹ A)測定[1]。取不同產(chǎn)地杠板歸藥材(過2號(hào)篩)約4.0 g，精密稱定，置250 mL的錐形瓶中，分別加水50 mL，密塞，稱定重量，靜置1 h，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，保持微沸1 h；放冷，再稱定重量，用水補(bǔ)足減失重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25 mL，至已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干后，于105 ℃干燥3 h，移至干燥器中冷卻30 min，以干燥品計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量(%)，見表1。

2.2水分測定

按照《中國藥典》(2010年版)水分測定法項(xiàng)下烘干法(附錄Ⅸ H)測定[1]。取不同產(chǎn)地杠板歸藥材(過2號(hào)篩)2.0 g，置于干燥至恒重扁形稱量瓶中，于100～105 ℃干燥5 h，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30 min，再在上述溫度干燥1 h，冷卻稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5 mg。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水量(%)。見表1。

2.3總灰分測定

按照《中國藥典》(2010年版)灰分測定法項(xiàng)下總灰分測定法(附錄Ⅸ K)測定[1]。取不同產(chǎn)地杠板歸藥材(過2號(hào)篩)2.0 g，置熾灼至恒重的坩堝中，精密稱定，緩緩熾熱，注意避免燃燒，至供試品完全炭化，逐漸升高溫度至600 ℃，使之完全灰化并至恒重，根據(jù)殘?jiān)|(zhì)量，計(jì)算供試品中總灰分的含量(%)。見表1。

表1　19批不同產(chǎn)地杠板歸中浸出物、水分、

2.4槲皮素含量測定

2.4.1色譜條件色譜柱Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流動(dòng)相 甲醇-0.4%磷酸溶液(40∶60)，流速 1.0 mL/min，檢測波長 360 nm，柱溫 30 ℃；進(jìn)樣量 10 μL。在此色譜條件下槲皮素對(duì)照品與杠板歸樣品的色譜圖見圖1。

注：A為對(duì)照品；B為樣品；1為槲皮素(quercetin)圖1　杠板歸提取物及對(duì)照品槲皮素的HPLC-UV色譜圖Fig.1　HPLC-UV chromatograms of extracts of Polygonum perfoliatum L. and quercetin reference substance

2.4.2溶液的配制取槲皮素對(duì)照品適量，加甲醇溶解制得0.3 g/L對(duì)照品貯備溶液。量取對(duì)照品貯備溶液1 mL置10 mL的量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。取藥材粉末適量(過3號(hào)篩)約0.7 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇∶鹽酸(4∶1)50 mL，置90 ℃水浴中加熱回流1 h，放冷。再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖均，濾過，即得供試品溶液。

2.4.3線性關(guān)系考察精密量取對(duì)照品貯備液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 mL置10 mL量瓶中，甲醇稀釋至刻度，得線性系列溶液，按上述色譜條件測定，以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，槲皮素進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)(X)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算得回歸方程：Y=3.66×103X-4.61，r=0.999 9。 表明槲皮素在0.15～2.40 μg具有良好的線性關(guān)系。

2.4.4精密度試驗(yàn)精密量取槲皮素對(duì)照品溶液(29.48 mg/L )，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定槲皮素的峰面積并計(jì)算該面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)編差(RSD)為0.94%。

2.4.5穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、10 h內(nèi)測定槲皮素的峰面積，計(jì)算槲皮素峰面積的RSD為1.74%。表明供試品溶液在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.6重復(fù)性試驗(yàn)取同一批號(hào)杠板歸樣品，制備供試品溶液6份，按2.4.1項(xiàng)色譜條件測定，計(jì)算含量，RSD為0.48%，表明重復(fù)性良好。

2.4.7回收率試驗(yàn)取6份已知含量(槲皮素含量4.443 mg/g)的樣品0.35 g，置100 mL錐形瓶中，精密加入用甲醇∶鹽酸(4∶1)制備的30.9 mg/L的槲皮素對(duì)照品溶液50 mL，置90 °C水浴中加熱回流1 h，取下放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖均，用微孔濾膜(0.45 μm)濾過，濾液按上述色譜條件進(jìn)行測定，計(jì)算回收率，槲皮素的平均回收率為100.98%，RSD為1.97%，見表2。

2.4.8樣品測定取不同產(chǎn)地的杠板歸藥材，按供試品溶液制備方法制備杠板歸樣品溶液，分別量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，見表1。

表2　回收率試驗(yàn)結(jié)果

3討論

研究結(jié)果顯示，來源于貴州19個(gè)產(chǎn)地的杠板歸藥材中，水溶性浸出物單個(gè)樣品最高為26.82%，最低為16.54%，平均22.55%；槲皮素含量最高為0.58%，最低為0.17%，平均為0.38%；水分、總灰分平均為8.64%和5.80%，單個(gè)樣品水分最高值和最低值分別為10.47%和5.66%，總灰分為7.79%和4.40%，均相差1倍以上，表明貴州省內(nèi)不同產(chǎn)地杠板歸藥材的質(zhì)量存在較大差異[7]。因此，在建立大規(guī)模的杠板歸種植基地時(shí)，應(yīng)關(guān)注種植地氣候、地形、土壤等因素與杠板歸內(nèi)在質(zhì)量的關(guān)系，才能保證不同批次藥材質(zhì)量有較穩(wěn)定的均一性，才能使工業(yè)化的相關(guān)制劑有更可靠的品質(zhì)保證。

參考文獻(xiàn)4

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[7] 秦健，吳孟嵐，王珂雅. 不同產(chǎn)地何首烏藥材水分、灰分和浸出物的測定[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)， 2012(13)：61-62.

(2014-08-25收稿，2014-10-09修回)

中文編輯： 劉平； 英文編輯： 劉華

Contents Determination of Water，Ash，Extracts and Quercetin inPolygonum

perfoliatumL. from Different Areas in Guizhou Province

HE Jin1， LI Li2， XU Chaofei2， ZHANG Min2， HAO Yang2， SHENG Yu2， LIU Yu1

(1.SectionofPharmaceuticalPreparation,theAffiliatedHospitalofGuiyangMedicalCollege,Guiyang55004,Guizhou,China;

2.SchoolofPharmacy,GuiyangMedicalCollege,Guiyang55004,Guizhou,China)

[Abstract]Objective: To determine the contents of water, total ash, extracts and quercetin in Polygoni perfoliatii herba from Guizhou. Methods： Polygoni perfoliatii herba were collected from 19 areas of Guizhou. The methods in the Chinese Pharmacopoeia (2010 edition) were adopted for the determination of water (Appendix IX H), ash (Appendix IX K) and water soluble extract(Appendix X A). Quercetin contents in Polygoni perfoliatii herba were detected with HPLC. Results： In the 19 specimens of Polygoni perfoliatii herba, content ranges of water, total ash, water-soluble extracts and quercetin were 5.60% to 10.50% (average 8.65%), 4.4% to 7.80% (average 5.80%), 17.00% to 26.80% (average 22.58%), and 0.17% to 0.58% (average 0.38%) respectively. These contents varied among the 19 specimens by up to 1.0 fold between the highest and the lowest. Conclusion： There exists large differences in the contents of water, ash, water-soluble extracts and quercetin in Polygoni perfoliatii herba from different areas of Guizhou province.

[Key words]Polygoni perfoliatii herba； water； ash； water-soluble extracts； quercetin; content determination

[中圖分類號(hào)]R284

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1000-2707(2015)01-0045-03

通信作者**E-mail:1226072965@qq.com網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2015-01-13

[基金項(xiàng)目]*貴陽市科技局項(xiàng)目[筑科合同(2012204)],貴陽醫(yī)學(xué)院院基金(2012037)