microRNAs在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中的作用

李棟，林珊

microRNAs在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中的作用

李棟，林珊△

近年研究發(fā)現(xiàn)微小RNA（miRNAs）是轉(zhuǎn)錄后基因調(diào)控的關(guān)鍵因素，參與諸多疾病的發(fā)生、發(fā)展。在腎臟病研究中，miRNAs的作用也日益受到重視。糖尿病腎?。―N）是終末期腎臟病的主要原因之一，發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。本文就miRNAs在DN發(fā)病機(jī)制中的作用進(jìn)行綜述。

微RNAs；糖尿病腎病；足細(xì)胞；應(yīng)激；氧化性應(yīng)激；自噬；綜述

近年研究發(fā)現(xiàn)微小RNA（microRNAs，miRNAs）是轉(zhuǎn)錄后基因調(diào)控的關(guān)鍵因素，是基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的核心成分之一。越來越多的miRNAs被發(fā)現(xiàn)與人類疾病的發(fā)生發(fā)展緊密相關(guān)［1］。在腎臟病研究中，miRNAs的作用也日益受到重視。糖尿病腎?。―N）是糖尿病（DM）患者的主要死亡原因之一，也是終末期腎臟?。‥SRD）的主要原因之一。雖然應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）與血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑（ARB）在減少蛋白尿、保護(hù)腎功能方面有一定療效，但仍無法有效遏制DN的發(fā)展。因此，盡快闡明其發(fā)病分子機(jī)制，成為防治DN的關(guān)鍵問題。目前DN發(fā)病機(jī)制研究熱點(diǎn)主要集中在血流動力學(xué)改變、氧化應(yīng)激、晚期糖基化終末產(chǎn)物及其受體（advanced glycation end-products/receptor for advanced glycation endproducts，AGEs/RAGE）、腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）、自噬（autophagy）、炎性反應(yīng)、細(xì)胞因子等方面。本文就miRNAs在DN發(fā)病機(jī)制中的作用進(jìn)行綜述。

1 miRNAs的生物合成及作用機(jī)制

在人類和其他動物體內(nèi)，成熟的miRNAs是由較長的初級轉(zhuǎn)錄物經(jīng)過一系列核酸酶的剪切加工而成。首先在RNA聚合酶Ⅱ（RNA polymeraseⅡ，polⅡ）作用下形成500～3 000 bp有發(fā)夾樣結(jié)構(gòu)的前體miRNA（pri-miRNA），再被Drosha/ Pasha裂解成 60～70個(gè)核苷酸的 pre-miRNA。后者由Exportin5/RanGTP將其從細(xì)胞核內(nèi)運(yùn)輸至胞漿，再由胞漿內(nèi)的RNaseⅢ內(nèi)切酶Dicer剪切加工后生成2個(gè)互補(bǔ)的短RNA分子，經(jīng)argonaut蛋白選擇進(jìn)入RNA誘沉默復(fù)合物（RNA induced silencing complex，RISC），通過堿基互補(bǔ)配對的方式識別靶信使RNA（mRNAs），并根據(jù)互補(bǔ)程度的不同引導(dǎo)RISC降解靶mRNAs或阻遏其翻譯［2］。另外miRNAs還能夠與靶基因的啟動子區(qū)域結(jié)合，抑制基因轉(zhuǎn)錄，從而誘導(dǎo)基因沉默［3］。因此，miRNAs能夠在轉(zhuǎn)錄與翻譯水平共同調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)，在不同的生物學(xué)過程中發(fā)揮重要作用。

2 miRNAs在正常腎臟生理和發(fā)育中的作用

2.1 miRNAs與腎臟生理 miRNAs對于水、電解質(zhì)、酸堿平衡及血壓等腎臟生理功能的調(diào)節(jié)必不可少，miRNAs的表達(dá)同時(shí)也受到腎臟高滲環(huán)境的影響。miR-192在腎臟豐富表達(dá)，可以通過抑制Na+/K+-ATPase參與水鹽平衡的調(diào)節(jié)［4］。Na+、K+的攝入又可以改變miR-192的表達(dá)水平，后者通過抑制賴氨酸缺陷型蛋白激酶1（WNK lysine deficient protein kinase 1）影響血壓［5］。Huang等［6］研究發(fā)現(xiàn)高Na+環(huán)境可以顯著抑制腎髓質(zhì)集合管上皮細(xì)胞miR-200和miR-717表達(dá)，同時(shí)介導(dǎo)了滲透壓反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（osmotic response element binding protein，OREBP）的高表達(dá)。高K+可以明顯抑制腎皮質(zhì)集合管上皮細(xì)胞miR-802表達(dá)，后者通過下調(diào)微囊蛋白1 （caveolin-1），對上皮細(xì)胞物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)起重要的調(diào)節(jié)作用。在髓袢升支粗段，miR-9和miR-374通過調(diào)控緊密連接蛋白claudin-14、claudin-16、claudin-19完成對腎小管上皮細(xì)胞Ca2+通道蛋白的調(diào)節(jié)作用。

2.2 miRNAs與腎臟早期發(fā)育 miRNAs也是包括腎臟在內(nèi)的許多臟器發(fā)育過程中重要的調(diào)控因子。Shi等［7］通過構(gòu)建選擇性敲除足細(xì)胞Dicer（一種核糖核酸內(nèi)切酶，成熟的miRNAs經(jīng)過Dicer酶加工后生成）基因小鼠模型發(fā)現(xiàn)，該基因敲除鼠可出現(xiàn)腎小球nephrin和podocin表達(dá)下降，并且表達(dá)方式由線性分布變?yōu)轭w粒樣分布，致使足細(xì)胞凋亡，出現(xiàn)大量蛋白尿，并在出生后2～4周死于嚴(yán)重的腎功能衰竭。特異性敲除小鼠足細(xì)胞另一種miRNAs合成的關(guān)鍵酶Drosha，有幾乎同樣的表現(xiàn)，長至成年鼠后會發(fā)生塌陷性腎小球病變（collapsing glomerulopathy，CG），說明miRNAs對維持正常足細(xì)胞功能至關(guān)重要［8］。腎臟發(fā)育早期，從整個(gè)腎單位中特異敲除Dicer酶，會導(dǎo)致小鼠腎皮質(zhì)中具有分化潛能的祖細(xì)胞、腎小囊、S形小體等腎單位發(fā)育過程中的結(jié)構(gòu)消失，小鼠出生后很快死亡，上述結(jié)果可能與前凋亡蛋白Bim過表達(dá)有關(guān)［9］。

2.3 miRNAs與老年腎臟 既往有關(guān)miRNAs與腎臟發(fā)育的研究多集中在腎臟胚胎時(shí)期和發(fā)育早期，而關(guān)于老年腎臟的研究相對較少。Bai等［10］分析了3個(gè)月和24個(gè)月大鼠腎臟miRNAs表達(dá)譜，從中篩選出了差異表達(dá)的miRNAs，其中老年大鼠腎臟有18個(gè)miRNAs表達(dá)上調(diào)，這些上調(diào)的miRNAs主要調(diào)控能量代謝、氧化應(yīng)激、細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)降解有關(guān)的基因，如miR-335和miR-34a通過抑制超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）2和硫氧還蛋白還原酶（thioredoxin reductase，Txnrd）2活性導(dǎo)致系膜細(xì)胞衰老甚至凋亡。

3 miRNAs在DN發(fā)病機(jī)制中的作用

3.1 miRNAs與機(jī)械應(yīng)激 腎小球血流動力學(xué)改變被認(rèn)為是蛋白尿發(fā)生的始動因素和DN的重要發(fā)病機(jī)制之一。DN早期，在循環(huán)血壓正常情況下，腎小球內(nèi)即有出、入球小動脈舒縮平衡失調(diào)，出現(xiàn)以腎小球高囊內(nèi)壓、高灌注和高濾過為特征的血流動力學(xué)變化，后者將造成包括足細(xì)胞在內(nèi)的腎小球固有細(xì)胞機(jī)械應(yīng)激的增加及黏附損傷。當(dāng)足細(xì)胞出現(xiàn)黏附損傷繼而脫落時(shí)，會引起腎小球?yàn)V過屏障破壞和蛋白尿發(fā)生，導(dǎo)致腎小球進(jìn)行性硬化，腎功能減退。研究表明，miRNAs與細(xì)胞黏附密切相關(guān)［11］。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)足細(xì)胞在機(jī)械應(yīng)激下，存在差異表達(dá)的miRNAs，其中miR-124可以下調(diào)整合素α3表達(dá)，造成足細(xì)胞黏附功能損傷［12］。動物實(shí)驗(yàn)也證實(shí)，STZ誘導(dǎo)的單側(cè)腎切除糖尿病大鼠尾靜脈注射miR-124的反義寡聚核苷酸（antisense oligonucleotide，ASO），可以下調(diào)腎皮質(zhì)miR-124的表達(dá)，明顯改善足細(xì)胞黏附功能，減少蛋白尿發(fā)生［13］。由此可見，miR-124是機(jī)械應(yīng)激下足細(xì)胞黏附功能損傷的重要調(diào)控因子，也可能成為DN早期的生物標(biāo)志物和藥物作用靶點(diǎn)之一。除足細(xì)胞外，腎小管上皮細(xì)胞也容易受到機(jī)械應(yīng)激的影響。Sonomura等［14］發(fā)現(xiàn)機(jī)械應(yīng)激下，腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β1和結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）表達(dá)明顯上調(diào)，其中TGF-β1在上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）中起重要作用。miR-200家族（miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-429和miR-141）具有保持上皮細(xì)胞分化和抑制纖維化的作用，TGF-β1所誘導(dǎo)的EMT中，上述miRNAs表達(dá)均明顯減少［15］。由此可見，血流動力學(xué)對DN腎小管的影響部分是通過miRNAs途徑實(shí)現(xiàn)的。

3.2 miRNAs與氧化應(yīng)激 氧化應(yīng)激是指機(jī)體受到多種因素刺激后，體內(nèi)活性氧族（reactive oxygen species，ROS）產(chǎn)生過多，抗氧化能力下降，打破了機(jī)體正常氧化-還原動態(tài)平衡，造成生物大分子如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等的氧化損傷，干擾正常生命活動而形成的一種嚴(yán)重的應(yīng)激狀態(tài)。ROS是生物體內(nèi)有氧代謝過程中產(chǎn)生的活性產(chǎn)物，主要包括H2O2、過氧化脂類（LOOH）、超氧陰離子（O2-）和羥自由基（OH）等。長期高血糖導(dǎo)致ROS產(chǎn)生增多，氧化應(yīng)激水平增高，最終損傷腎臟［16］。miR-377在自發(fā)性和STZ誘導(dǎo)的糖尿病動物模型及暴露于高糖的系膜細(xì)胞中存在高表達(dá)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miR-377通過調(diào)節(jié)p21活化激酶1（p21-activatedkinase1，PAK1）和錳超氧化物歧化酶（manganesesuper oxidedismutase，MnSOD）活性，間接導(dǎo)致纖維連結(jié)蛋白的表達(dá)升高［17］。因此，DN中過表達(dá)的miR-377能夠通過氧化應(yīng)激作用引起纖維連接蛋白表達(dá)增加，加重DN腎小球硬化［17］。miR-23a～27a～24-2簇表達(dá)上調(diào)將導(dǎo)致人胚腎細(xì)胞通過JNK信號傳導(dǎo)通路產(chǎn)生過多的ROS和前凋亡因子（proapoptotic factors），最終致細(xì)胞死亡。將miR-23a～27a～24-2簇過表達(dá)的人胚腎細(xì)胞與正常對照的基因表達(dá)譜進(jìn)行差異比較，發(fā)現(xiàn)miR-23a～27a～24-2簇所導(dǎo)致的ROS產(chǎn)生與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）及非折疊蛋白反應(yīng)（unfolded protein response，UPR）通路有關(guān)［18］。Zhong等［19］在20周齡的db/db小鼠中觀察到腎臟miR-21表達(dá)較正常明顯增高，以miR-21敲除質(zhì)粒尾靜脈注射，可以顯著減少小鼠尿蛋白水平。另一研究發(fā)現(xiàn)，miR-21可通過靶向mpv17-like protein（MPV17L）參與腎臟氧化應(yīng)激的發(fā)生，而MPV17L是一種跨膜蛋白，能抑制線粒體產(chǎn)生過多ROS［20］。因此，miR-21也是DN中腎臟氧化應(yīng)激發(fā)生的重要調(diào)控因素之一。Kato等［21］發(fā)現(xiàn)miR-192可以通過Akt/FoxO3a途徑下調(diào)MnSOD水平，增加腎臟氧化應(yīng)激的發(fā)生。DM小鼠MnSOD水平較非糖尿病小鼠明顯下降，應(yīng)用鎖核酸修飾的miR-192抑制劑（Locked nucleic acid modified anti-miR-192，LNA-anti-miR-192）后，MnSOD水平明顯上調(diào)，證實(shí)LNA-anti-miR-192可以減少腎臟氧化應(yīng)激水平，抑制DN進(jìn)展［22］。

3.3 miRNAs與AGE/RAG 高血糖使體內(nèi)大分子物質(zhì)如核酸及蛋白質(zhì)等非酶糖基化，最終形成AGEs，AGEs是DN主要的發(fā)病機(jī)制之一。通過激活A(yù)GE受體（RAGE），AGE可以介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生［23］。S100b為一種RAGE配體，能減少DNA/RNA結(jié)合蛋白異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K（heteroge-neous nuclear ribonuclear protein K，hnRNPK）與COX-2啟動子的結(jié)合率，增加hnRNPK與COX-2 3′端非編碼區(qū)（3′Untranslated Region，3′UTR）結(jié)合，上調(diào)人單核細(xì)胞COX-2基因表達(dá)。此外，S100b蛋白還可以下調(diào)miR-16的水平，后者通過結(jié)合COX-2 3′-UTR而抑制COX-2表達(dá)。敲除hnRNPK能增加miR-16與COX-2 3′-UTR結(jié)合，從而下調(diào)COX-2的表達(dá)。由此可見，通過抑制hnRNPK和miR-16的功能，可以有效減少DM導(dǎo)致的炎癥物質(zhì)的產(chǎn)生［24］。AGEs還能使單核細(xì)胞延遲凋亡并參與炎癥反應(yīng)的發(fā)生。通過對miRNAs差異表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，各種AGEs處理的人類單核細(xì)胞均有miR-214的表達(dá)上調(diào)。miR-214的高表達(dá)也同樣在慢性腎衰竭患者單核細(xì)胞中被檢測到，敲除miR-214使得AGEs導(dǎo)致的人類單核細(xì)胞延遲凋亡現(xiàn)象大幅減少。miR-214的上述作用可能是通過靶定PTEN（phosphatase and tensin homolog，PTEN）實(shí)現(xiàn)的［23］。人高遷移率族蛋白B1（high-mobility group box 1，HMGB1）作為炎癥因子可以通過RAGE和Toll樣受體對免疫系統(tǒng)造成損傷，且能上調(diào)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞miR-221和miR-222表達(dá)［25］。有研究表明，miR-221在糖尿病小鼠腎臟和高糖培養(yǎng)的系膜細(xì)胞中呈高表達(dá)，并靶定調(diào)控金屬蛋白酶（TIMP）-3［26］。細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）受TIMP-3調(diào)節(jié)，ECM堆積是DN重要的病理特點(diǎn)。由此可見，DM條件下，HMGB1/RAGE/miR-221軸可能被激活，并在細(xì)胞外基質(zhì)堆積等DN病理改變過程中起重要作用。

3.4 miRNAs與RAAS RAAS是造成包括DN在內(nèi)的許多慢性腎臟疾病（chronic kidney disease，CKD）進(jìn)展的主要因素之一。Marques等［27］用微陣列技術(shù)分析了15例未經(jīng)干預(yù)的高血壓和7例正常血壓男性受試者腎臟mRNA和miRNAs表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)腎皮質(zhì)renin mRNA和miR-181a、miR-663均存在差異表達(dá)；功能實(shí)驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)miR-663和miR-181a均能靶定并下調(diào)renin表達(dá)，故DN高血壓過程中renin水平增高可能與上述2個(gè)miRNAs表達(dá)下調(diào)有關(guān)。

Macconi等［28］對一種自發(fā)進(jìn)展性腎病大鼠（MWF大鼠）腎小球進(jìn)行miRNAs表達(dá)譜分析，發(fā)現(xiàn)miR-324-3p上調(diào)最為明顯。脯氨酰內(nèi)肽酶（prolyl endopeptidase，Prep）是一種絲氨酸蛋白酶，能特異性水解血管緊張素（angiotensin，ANG）。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-324-3p通過靶定并抑制Prep表達(dá)參與RAAS調(diào)控［28］。MWF大鼠腎臟過表達(dá)miR-324-3p后，會出現(xiàn)腎小球及腎小管Prep表達(dá)下調(diào)，腎小球內(nèi)膠原蛋白沉積增加。賴諾普利是一種ACEI，可以下調(diào)MWF大鼠腎臟miR-324-3p表達(dá)水平，并使上述病理損害減輕。由于miR-324-3p參與RAAS軸調(diào)控，故DN中ACEI藥物降尿蛋白的作用很可能是通過靶定miR-324-3p實(shí)現(xiàn)的。Eskildsen等［29］比較了ANGⅡ介導(dǎo)的高血壓大鼠與正常大鼠各臟器miRNAs表達(dá)譜差異，發(fā)現(xiàn)miR-132和miR-212在心臟、主動脈壁和腎臟呈高表達(dá)；隨后，通過分析冠狀動脈旁路移植手術(shù)患者剩余的乳腺動脈組織發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用ARB的患者miR-132和miR-212表達(dá)水平明顯下降，而應(yīng)用β受體阻滯劑并無此效果。由此可見，miR-132和miR-212可能參與了CKD患者腎臟RAAS的激活。Smad7是DN等CKD的保護(hù)性因子。Smad7基因敲除鼠及野生型小鼠分別皮下注射ANGⅡ及生理鹽水4周，前者更易出現(xiàn)蛋白尿。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，ANGⅡ注射的Smad7基因敲除鼠腎臟miR-29b表達(dá)明顯下調(diào)。miR-29b為TGF-β/Smad3通路的下游作用靶點(diǎn)，miR-29b表達(dá)下調(diào)將導(dǎo)致腎臟纖維化［30］。由此推測，腎臟miR-29的丟失加重了ANGⅡ介導(dǎo)的Smad7基因敲除鼠腎間質(zhì)纖維化。

足細(xì)胞在機(jī)械刺激下，醛固酮、醛固酮受體（mineralocorticoid receptor，MR）、血清和糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)蛋白激酶1（serum and glucocorticoid induced kinase 1，SGK1）表達(dá)水平均明顯上調(diào)，說明醛固酮系統(tǒng)被激活。以微陣列芯片技術(shù)分析正常足細(xì)胞、機(jī)械應(yīng)激下足細(xì)胞和機(jī)械應(yīng)激下足細(xì)胞以螺內(nèi)酯干預(yù)3組間miRNAs表達(dá)譜差異，發(fā)現(xiàn)機(jī)械刺激下足細(xì)胞有54個(gè)miRNAs上調(diào)，應(yīng)用螺內(nèi)酯后出現(xiàn)18個(gè)miRNAs表達(dá)下調(diào)，取其交集篩選出4個(gè)miRNAs，分別是miR-124、miR-190、miR-217和miR-188，故上述miRNAs可能參與了DN腎臟醛固酮系統(tǒng)的激活［31］。

3.5 miRNAs與自噬 自噬在保持足細(xì)胞正常功能中起重要作用，在沒有任何刺激的情況下，足細(xì)胞的自噬活性仍很強(qiáng)，提示足細(xì)胞需要一個(gè)正常的自噬強(qiáng)度來保持細(xì)胞內(nèi)的平衡［32］。在許多代謝性疾病和衰老相關(guān)疾病中自噬受到營養(yǎng)條件的調(diào)控，高糖血癥對腎臟來說是一個(gè)“營養(yǎng)過剩”的環(huán)境，自噬途徑會明顯下調(diào)。DN時(shí)，細(xì)胞自噬對凋亡細(xì)胞及其產(chǎn)物的清除不足，導(dǎo)致組織損傷和炎性反應(yīng)，介導(dǎo)了DN的發(fā)生發(fā)展。特異性敲除足細(xì)胞中自噬相關(guān)基因5（autophagy-related 5，Atg5）的老齡小鼠，會出現(xiàn)腎臟足細(xì)胞丟失和蛋白尿的發(fā)生，最終導(dǎo)致腎小球硬化。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明，足細(xì)胞在DM環(huán)境中易出現(xiàn)自噬活性下降：STZ誘導(dǎo)的DM小鼠足細(xì)胞自噬活性明顯降低；高糖培養(yǎng)的足細(xì)胞也表現(xiàn)為自噬活性的降低，相伴隨的是自噬相關(guān)蛋白Beclin-1及Atg5-Atg12復(fù)合物表達(dá)減少［32］。Tekirdag等［33］發(fā)現(xiàn)，miR-181a可通過靶向Atg5調(diào)控饑餓和雷帕霉素介導(dǎo)的自噬作用；miR-30a也被證實(shí)通過下調(diào)Beclin-1蛋白（一種參與自噬體形成的重要蛋白）和Atg5的表達(dá)影響慢性髓細(xì)胞樣白血病細(xì)胞自噬活性。由此可見，miR-181a和miR-30a可能通過作用自噬相關(guān)蛋白，參與了DN中腎臟自噬功能的減弱。Xu等［34］在DM患者外周血中分選出內(nèi)皮祖細(xì)胞，分別轉(zhuǎn)染miR-130a抑制劑和擬似物，前者使得自噬體數(shù)目和Beclin-1表達(dá)明顯上調(diào)，凋亡抑制基因bcl-2表達(dá)明顯下調(diào)；相反，miR-130a過表達(dá)明顯減少了自噬體數(shù)目和Beclin-1的表達(dá)，上調(diào)了bcl-2水平。由此可見，miR-130a可能通過調(diào)控自噬相關(guān)蛋白參與DN血管病變。

作為目前生命科學(xué)領(lǐng)域研究的一大熱點(diǎn)，miRNAs在DN中的研究價(jià)值正日益受到關(guān)注，它不僅應(yīng)用于DN發(fā)生機(jī)制的探討，更重要的是，隨著越來越多miRNAs擬似物和抑制劑的功能在體外實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)，作為候選藥物靶點(diǎn)及分子生物學(xué)標(biāo)志，miRNAs或?qū)镈N的早期診斷、治療提供新的視野和切入點(diǎn)。

［1］Arora S，Swaminathan SK，Kirtane A，et al.Synthesis，characterization，and evaluation of poly（D，L-lactide-co-glycolide）-based nano-formulation of miRNA-150:potential implications for pancreatic cancer therapy［J］.Int J Nanomedicine，2014，9（1）:2933-2942.doi: 10.2147/IJN.S61949.eCollection 2014.

［2］Lee HM，Nguyen DT，Lu LF.Progress and challenge of microRNA research in immunity［J］.Front Genet，2014，12（5）:178.doi: 10.3389/fgene.2014.00178.eCollection 2014.

［3］Kim DH，Saetrom P，Sn?ve O Jr，et al.MicroRNA-directed transcriptional gene silencing in mammalian cells［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2008，105（42）:16230-16235.doi:10.1073/pnas.0808830105.

［4］Mladinov D，Liu Y，Mattson DL，et al.MicroRNAs contribute to the maintenance of cell-type-specific physiological characteristics: miR-192 targets Na+/K+-ATPase β1［J］.Nucleic Acids Res，2013，41（2）:1273-1283.doi:10.1093/nar/gks1228.

［5］Elvira-Matelot E，Zhou XO，F(xiàn)arman N，et al.Regulation of WNK1 expression by miR-192 and aldosterone［J］.J Am Soc Nephrol，2010，21（10）:1724-1731.doi:10.1681/ASN.2009111186.

［6］Huang W，Liu H，Wang T，et al.Tonicity-responsive microRNAs contribute to the maximal induction of osmoregulatory transcription factor OREBP in response to high-NaCl hypertonicity［J］.Nucleic Acids Res，2011，39（2）:475-485.doi:10.1093/nar/gkq818.

［7］Shi S，Yu L，Chiu C，et al.Podocyte-selective deletion of dicer induces proteinuria and glomerulosclerosis［J］.J Am Soc Nephrol，2008，19（11）:2159-2169.doi:10.1681/ASN.2008030312.

［8］Zhdanova O，Srivastava S，Di L，et al.The inducible deletion of Drosha and microRNAs in mature podocytes results in a collapsing glomerulopathy［J］.Kidney Int，2011，80（7）:719-730.doi:10.1038/ ki.2011.122.

［9］Nagalakshmi VK，Ren Q，Pugh MM，et al.Dicer regulates the development of nephrogenic and ureteric compartments in the mammalian kidney［J］.Kidney Int，2011，79（3）:317-330.doi:10.1038/ ki.2010.385.

［10］Bai XY，Ma Y，Ding R，et al.miR-335 and miR-34a Promote renal senescence by suppressing mitochondrial antioxidative enzymes［J］.J Am Soc Nephrol，2011，22（7）:1252-1261.doi:10.1681/ ASN.2010040367.

［11］Valastyan S，Weinberg RA.Roles for microRNAs in the regulation of cell adhesion molecules［J］.J Cell Sci，2011，124（Pt 7）:999-1006.doi:10.1242/jcs.081513.

［12］Li D，Lu Z，Jia J，et al.Curcumin ameliorates Podocytic adhesive capacity damage under mechanical stress by inhibiting miR-124 expression［J］.Kidney Blood Press Res，2013，38（1）:61-71.doi: 10.1159/000355755.

［13］Li D，Lu Z，Jia J，et al.miR-124 is related to podocytic adhesive capacity damage in STZ-induced uninephrectomized diabetic rats［J］.Kidney and Blood Press Research，2013，37（4-5）:422-431.doi: 10.1159/000355721.

［14］Sonomura K，Okigaki M，Kimura T，et al.The kinase Pyk2 is involved in renal fibrosis by means of mechanical stretch-induced growth factor expression in renal tubules［J］.Kidney Int，2012，81（5）: 449-457.doi:10.1038/ki.2011.403.

［15］Gregory PA，Bert AG，Paterson EL，et al.The miR-200 family and miR-205 regulate epithelial to mesenchymal transition by targeting ZEB1 and SIP1［J］.Nat Cell Biol，2008，10（5）:593-601.

［16］Stanton RC.Oxidative stress and diabetic kidney disease［J］.Curr Diab Rep，2011，11（4）:330-336.doi:10.1007/s11892-011-0196-9.

［17］Wang Q，Wang Y，Minto AW，et al.MicroRNA-377 is up-regulated and can lead to increased fibronectin production in diabetic nephropathy［J］.FASEB J，2008，22（12）:4126-4135.doi:10.1096/ fj.08-112326.

［18］Chhabra R，Dubey R，Saini N.Gene expression profiling indicate role of ER stress in miR-23a～27a～24-2 cluster induced apoptosis in HEK293T cells［J］.RNA Biol，2011，8（4）:648-664.doi:10.4161/ rna.8.4.15583.

［19］Zhong X，Chung AC，Chen HY，et al.miR-21 is a key therapeutic target for renal injury in a mouse model of type 2 diabetes［J］.Diabetologia，2013，56（3）:663-674.doi:10.1007/s00125-012-2804-x.

［20］Chau BN，Xin C，Hartner J，et al.MicroRNA-21 promotes fibrosis of the kidney by silencing metabolic pathways［J］.Sci Transl Med，2012，4（121）:121ra18.

［21］Kato M，Putta S，Wang M，et al.TGF-beta activates Akt kinase through a microRNA-dependent amplifying circuit targeting PTEN ［J］.Nat Cell Biol，2009，11（7）:881-889.doi:10.1126/scitranslmed.3003205.

［22］Putta S，Lanting L，Sun G，et al.Inhibiting microRNA-192 ameliorates renal fibrosis in diabetic nephropathy［J］.J Am Soc Nephrol，2012，23（3）:458-469.doi:10.1681/ASN.2011050485.

［23］Li LM，Hou DX，Guo YL，et al.Role of microRNA-214-targeting phosphatase and tensin homolog in advanced glycation end productinduced apoptosis delay in monocytes［J］.J Immunol，2011，186（4）: 2552-2560.doi:10.4049/jimmunol.1001633.

［24］Shanmugam N，Reddy MA，Natarajan R.Distinct roles of heterogeneous nuclear ribonuclear protein K and microRNA-16 in cyclooxygenase-2 RNA stability induced by S100b，a ligand of the receptor for advanced glycation end products［J］.J Biol Chem，2008，283（52）: 36221-36233.doi:10.1074/jbc.M806322200.

［25］Mardente S，Mari E，Consorti F，et al.HMGB1 induces the overexpression of miR-222 and miR-221 and increases growth and motility in papillary thyroid cancer cells［J］.Oncol Rep，2012，28（6）:2285-2289.doi:10.3892/or.2012.2058.

［26］Fiorentino L，Cavalera M，Mavilio M，et al.Regulation of TIMP3 in diabetic nephropathy:a role for microRNAs［J］.Acta Diabetol，2013，50（6）:965-969.10.1007/s00592-013-0492-8.

［27］Marques FZ，Campain AE，Tomaszewski M，et al.Gene expression profiling reveals renin mRNA overexpression in human hypertensive kidneys and a role for microRNAs［J］.Hypertension，2011，58 （6）:1093-1098.doi:10.1161/HYPERTENSIONAHA.111.180729.

［28］Macconi D，Tomasoni S，Romagnani P，et al.MicroRNA-324-3p promotes renal fibrosis and is a target of ACE inhibition［J］.J Am Soc Nephrol，2012，23（9）:1496-1505.doi:10.1681/ASN.2011 121144.

［29］Eskildsen TV，Jeppesen PL，Schneider M，et al.Angiotensin II Regulates microRNA-132/-212 in Hypertensive Rats and Humans［J］.Int J Mol Sci，2013，14（6）:11190-11207.doi:10.3390/ijms 140611190.

［30］Liu GX，Li YQ，Huang XR，et al.Disruption of Smad7 promotes ANG II-mediated renal inflammation and fibrosis via Sp1-TGF-β/ Smad3-NF-κB-dependent mechanisms in mice［J］.PLoS One，2013，8（1）:e53573.doi:10.1371/journal.pone.0053573.

［31］Li D，Lu Z，Jia J，et al.Changes in microRNAs associated with podocytic adhesion damage under mechanical stress［J］.J Renin Angio-tensin Aldosterone Syst，2013，14（2）:97-102.doi:10.1177/ 1470320312460071.

［32］Fang L，Zhou Y，Cao H，et al.Autophagy attenuates diabetic glomerular damage through protection of hyperglycemia-induced podocyte injury ［J］.PLoS One，2013，8:e60546.doi:10.1371/journal.pone.0060546.

［33］Tekirdag KA，Korkmaz G，Ozturk DG，et al.MIR181A regulates starvation-and rapamycin-induced autophagy through targeting of ATG5［J］.Autophagy，2013，9（3）:374-385.doi:10.4161/auto.23117.

［34］Xu Q，Meng S，Liu B，et al.MicroRNA-130a regulates autophagy of endothelial progenitor cells through Runx3［J］.Clin Exp Pharmacol Physiol，2014，41（5）:351-357.doi:10.1111/1440-1681.12227.

（2014-07-22收稿 2014-12-08修回）

（本文編輯 魏杰）

The role of microRNAs in the pathogenesis of diabetic nephropathy

LI Dong，LIN Shan△
Tianjin Medical University General Hospital，Tianjin 300052，China
△Revisor E-mail:linshan@medmail.com.cn

In recent years，microRNAs were shown to be one of the key factors in post transcriptional gene regulation which are involved in occurrence，development of many diseases.In the field of kidney disease research，the role of microRNAs attracted more and more attention.Diabetic nephropathy is one of the major causes of end-stage renal disease，whose pathogenesis however has not been fully elucidated yet.This article reviews the role of microRNAs in the pathogenesis of diabetic nephropathy.

microRNAs；diabetic nephropathies；podocytes；stress；oxidative stress；autophagy；review

R587.2

A DOI:10.11958/j.issn.0253-9896.2015.06.032

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81100404）

天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院腎內(nèi)科（郵編300052）

△審校者 E-mail:linshan@medmail.com.cn