脂血、高膽紅素和溶血標(biāo)本對乙型肝炎病毒DNA熒光定量測定結(jié)果的影響

楊　孟

（福建省三明市沙縣醫(yī)院，福建三明365050）

脂血、高膽紅素和溶血標(biāo)本對乙型肝炎病毒DNA熒光定量測定結(jié)果的影響

楊孟

（福建省三明市沙縣醫(yī)院，福建三明365050）

目的：探討脂血、高膽紅素、溶血標(biāo)本對乙型肝炎（乙肝）病毒DNA熒光定量測定結(jié)果產(chǎn)生的影響。方法：通過分組實驗，觀察對比正常血清與高血脂血清、未溶血血清與溶血血清、無黃疸血清與黃疸血清標(biāo)本乙肝病毒DNA熒光定量測定結(jié)果，分析其對測量結(jié)果的影響程度。結(jié)果：不同濃度脂血對乙肝病毒DNA熒光測定結(jié)果影響明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；血清是否溶血以及存在黃疸對乙肝病毒DNA熒光測定結(jié)果基本無影響，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：脂血會影響乙肝病毒DNA熒光測定結(jié)果，高膽紅素與溶血則不會。

乙型肝炎病毒DNA熒光定量測定；脂血；高膽紅素；溶血

近年來，乙型肝炎（乙肝）病毒DNA熒光定量測定憑借其操作方便、精確度高等顯著優(yōu)勢被廣泛應(yīng)用到臨床中［1］。為提升乙肝病毒DNA熒光定量測定的科學(xué)性與有效性，本研究觀察脂血、高膽紅素、溶血等因素對測定結(jié)果的影響?，F(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：收集我院乙肝患者10例、乙肝患者血液8份、高膽紅素血清8份、健康體檢血清8份。

1.2檢測方法：（1）乙肝患者首先給予空腹抽血，當(dāng)作本研究正常血脂水平血清。然后，進高脂肪食物2h后，再進行一次抽血，作為高血脂血清。最后，分別做好標(biāo)記；（2）乙肝患者血液8份，每例患者血液分裝至2只試管，其中一管直接進行血清分離，另外一管采用人工形式備為溶血血清，然后，分別進行標(biāo)記；（3）高膽紅素血清8份，給予乙肝三系、乙肝病毒DNA檢測，檢測三次結(jié)果均為陰性，則可以將其血清留存并測量所含膽紅素。最后，分別做好標(biāo)記；（4）健康體檢血清8份。處理方法與高膽紅素血清相同。①采用GeneLight 2400熒光定量檢測系統(tǒng)（安普利科技公司生產(chǎn)），熒光定量試劑盒來自安普利公司原裝試劑；②將收集的未溶血血清、溶血血清、正常血脂血清、高血脂血清制成模板。加聚合酶聯(lián)反應(yīng)（PCR）反應(yīng)液并上機做乙肝病毒DNA熒光定量測定；④制作高膽紅素血清模板，加PCR反應(yīng)液并上機做乙肝病毒DNA熒光定量測定，與此同時，選取乙肝血清模板與正常血清模板各4μl，進行對比測定［2］。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析：應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ2比較，計量資料以（ˉx±s）表示，比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

（1）10份乙肝患者高血脂、正常血脂血清乙肝病毒DNA熒光定量測定結(jié)果：2、3、5、6、7、10號高血脂血清乙肝病毒DNA測量結(jié)果顯示為0，而對應(yīng)的正常血清分別為：7.29E+6拷貝、3.15E+5拷貝、4.72E+8拷貝、5.29E+7拷貝、4.77E+ 8拷貝、4.56E+6拷貝。1、4、8、9號血液標(biāo)本中高血脂血清與正常血清結(jié)果分別為2.12E+3拷貝和4.02E+4拷貝、1. 95E+3拷貝和3.40E+4拷貝、2.32E+3拷貝和4.50E+ 3拷貝、2.03E+3拷貝和4.35E+3拷貝，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；（2）未溶血血清、溶血血清乙肝病毒DNA測定結(jié)果：未溶血血清1～8號標(biāo)本Hb含量依次為：5.40E+6拷貝、3.25E+6拷貝、4.66E+8拷貝、3.53E+7拷貝、4.50E+8拷貝、3.79E+6拷貝、3.09E+8拷貝、4.33E+6拷貝。溶血血清1～8號標(biāo)本Hb含量依次為：5.25E+7拷貝、3.15E+5拷貝、4.72E+8拷貝、3.40E+7拷貝、4.03E+8拷貝、3.72E+6拷貝、3.05E+6拷貝、4.06E+6拷貝。兩組Hb含量基本相似，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；（3）黃疸血清、無黃疸中膽紅素比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

3　討論

乙肝病毒DNA熒光測定技術(shù)的廣泛應(yīng)用，顯著提升了疾病診療的效率與速度。脂血、高膽紅素、溶血標(biāo)本是否會對其測定結(jié)果產(chǎn)生影響自然備受關(guān)注。

本研究結(jié)果顯示，①高血脂血清會對乙肝病毒DNA熒光測定結(jié)果產(chǎn)生明顯干擾，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。產(chǎn)生干擾原因：脂血乳糜微粒密度低，極易粘連于試管壁，導(dǎo)致沉淀和稀釋困難；②黃疸血清與非黃疸血清、溶血血清與未溶血血清乙肝病毒DNA熒光測定結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。原因：膽紅素吸光作用會對實驗產(chǎn)生干擾，但通過標(biāo)本處理與稀釋之后，這種干擾作用被明顯削弱［2］。因此，相關(guān)醫(yī)務(wù)工作人員在測定工作中，應(yīng)當(dāng)高度重視高血脂血清標(biāo)本的處理，提升乙肝病毒DNA熒光定量測定的科學(xué)性與有效性。

［1］馬蘭花，任君，劉利，等.探討實時熒光PCR法檢測乙肝病毒DNA在臨床中的應(yīng)用［J］.西南國防醫(yī)藥，2009，19（8）：815-817.

［2］俞安清，陳效琴，蘇麗萍，等.實時熒光PCR檢測乙肝病毒DNA的臨床意義［J］.中國臨床實用醫(yī)學(xué)，2010，4（1）：88-89.

［3］何印蕾.實時熒光PCR檢測乙肝病毒DNA的臨床意義［J］.實用醫(yī)技雜志，2006，13（22）：3954-3955.

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1002-2376（2015）12-0024-01

2015-11-13