乳腺癌分子分型與新輔助化療前后GST-π和Topo-Ⅱ表達的相關性研究

張艷霞，馬東華，孫冬霞，李軍澎，駱向利，石曉鵬

(1. 河北省邯鄲市婦幼保健院,河北 邯鄲 056301；2. 河北省大名縣婦幼保健院,河北 大名 056000；3. 河北省涉縣婦幼保健院，河北 涉縣 056400；4. 河北省曲周縣婦幼保健院，河北 曲周 057250；5. 河北省武安市第一人民醫(yī)院，河北 武安 056300)

乳腺癌分子分型與新輔助化療前后GST-π和Topo-Ⅱ表達的相關性研究

張艷霞1，馬東華2，孫冬霞1，李軍澎3，駱向利4，石曉鵬5

(1. 河北省邯鄲市婦幼保健院,河北 邯鄲 056301；2. 河北省大名縣婦幼保健院,河北 大名 056000；3. 河北省涉縣婦幼保健院，河北 涉縣 056400；4. 河北省曲周縣婦幼保健院，河北 曲周 057250；5. 河北省武安市第一人民醫(yī)院，河北 武安 056300)

目的 探討乳腺癌不同分子分型與新輔助化療前后GST-π和Topo-Ⅱ表達的相關性。方法 對155例乳腺癌患者進行分子分型，采用免疫組織化學EnVison二步法檢測不同分型患者GST-π和Topo-Ⅱ表達情況,并結合病理特點進行分析。結果HER2過表達型及Basal-like型GST-π表達率高于LuminalA型和LuminalB型(P均<0.05)。HER2過表達型及Basal-like型Topo-Ⅱ表達率低于LuminalA型和LuminalB型,但差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。不同分型患者GST-π表達情況與患者新輔助化療療效之間無明顯相關性(P>0.05)，不同分型患者Topo-Ⅱ表達情況與新輔助化療療效有關(P<0.05)。結論 乳腺癌中GST-π的表達情況與化療藥物作用無明顯相關性，而Topo-Ⅱ表達量的高低與化療藥物作用成正相關性，Topo-Ⅱ的表達有助于判斷乳腺癌的預后及為用藥提供選擇依據(jù)。

乳腺癌；分子分型；新輔助化療；免疫組化

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居女性惡性腫瘤第一位[1]。目前新輔助化療作為局部晚期乳腺癌的首選治療方法，使手術的適應證越來越寬。有研究報道，乳腺癌新輔助化療的病理完全緩解率為4%～34%[2-3]。但是，多藥耐藥(Multidrug resistance,MDR) 是臨床腫瘤化療中常常遇到的難題，導致患者生存期縮短，是化療方案無效的主要原因。為尋找反映化療效果的生物學標志物，指導臨床選擇個體化的治療方案，新輔助化療可以作為療效的預測模型來指導。谷胱甘肽-S-轉移酶-π(GST-π) 是腫瘤及組織細胞中最常見的同工酶, 能夠催化機體內(nèi)谷胱甘肽與親電性化合物結合，使有毒化合物的水溶性增加，加速毒性排出體外[4], 從而增加GST-π活性的代謝而產(chǎn)生耐藥性。拓撲異構酶-Ⅱ(Topo-Ⅱ)在多種抗腫瘤藥中起靶點作用，由于它位于染色體17q21,在DNA的復制、轉錄以及染色體分離中起著至關重要的作用[5]。臨床研究發(fā)現(xiàn), Topo-Ⅱ可能成為預測蒽環(huán)類化療藥療效的有效指標[6]。目前研究發(fā)現(xiàn)不同分子分型的乳腺癌患者對化療敏感程度不同，其治療已經(jīng)進入個體化的治療時代。本研究采用免疫組織化學方法檢測新輔助化療前后不同分子分型乳腺癌患者病理組織中GST-π和Topo-Ⅱ多種耐藥基因蛋白表達情況, 探討GST-π和Topo-Ⅱ表達與新輔助化療療效間的關系，旨在為臨床治療方案選擇提供參考。

1 臨床資料

1.1一般資料 選取2008年1月—2013年12月在邯鄲市婦幼保健院治療的155例女性乳腺癌患者，均自愿按照新輔助化療方案治療, 患者對用藥情況知情同意。治療前均做雙乳彩超及X射線檢查，明確腫瘤的最大徑，均行粗針穿刺，并明確病理診斷及做免疫組化；治療后，取手術切除的病理標本再次確定腫瘤的大小及免疫組化。患者年齡33～72歲，中位年齡53歲；病理診斷均為浸潤性導管癌，其中T2期60例，T3期71例，T4期24例; 采用2013年St Gallen最新乳腺癌分子分型方法[7]：LuminalA型42例，Luminal B型43例，HER-2過表達型38例,Basal-like型32例。

1.2 新輔助化療方案 采用FEC方案:在第1天、第8天靜脈注射400 mg/m2環(huán)磷酰胺、表柔比星50 mg/m2、氟尿嘧啶500 mg/m2，28 d為1個周期，治療4個周期后休息2個周期再行手術治療，化療期間可給予支持、對癥治療，治療方案可根據(jù)患者實際情況進行調整。

1.3 觀察指標 化療前后采用免疫組織化學EnVison二步法檢測不同分型患者GST-π和Topo-Ⅱ表達情況。免疫組化試劑盒購自北京中衫生物技術開發(fā)有限公司， GST-π和Topo-Ⅱ多抗均為中衫公司提供的工作液;采用中衫公司提供的乳腺癌免疫組化預實驗陽性片作為陽性對照結果。操作過程按試劑盒說明書進行?；熐凹盎熀蠼Y果均由2位有經(jīng)驗的病理醫(yī)師在單盲的情況下評定。GST-π的表達多位于細胞漿,Topo-Ⅱ位于細胞核。陽性判定標準為細胞核為清晰的黃色或棕黃色彌漫性染色，細胞漿為黃色或棕黃色。根據(jù)陽性細胞數(shù)及著色強度分為4個等級，分別為(-)(±)(+)()，其中(-)(±)判定為陰性，(+)()判定為陽性。

1.4 化療療效判定標準 完全緩解：化療后腫瘤病灶完全消失；部分緩解：腫瘤大小減少50%或增加<25%；無變化：腫瘤大小減少<50%或增加<25%；進展(PD)：腫瘤大小增加>25%或出現(xiàn)新病灶。其中完全緩解和部分緩解為有效，無變化和進展為無效。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析,組間比較采用2檢驗, 采用Spearman檢驗進行相關分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1乳腺癌組織中GST-π、Topo-Ⅱ表達情況 乳腺癌組織中GST-π和Topo-Ⅱ染色陽性表達率分別為42.6%(66/155)、40.6%(63/155)。

2.2 不同分子分型患者乳腺癌組織中GST-π和Topo-Ⅱ表達情況 HER2過表達型及Basal-like型中GST-π陽性表達率高于Luminal A型和Luminal B型(P均<0.05)；Topo-Ⅱ陽性率低于Luminal A型和Luminal B型,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 化療前不同分子分型患者乳腺癌組織中GST-π、Topo-Ⅱ表達情況 例(%)

注：①與Luminal A型和Luminal B型比較，P<0.05。

2.3 化療前不同GSP-π和Topo-Ⅱ表達情況患者的化療效果 Topo-Ⅱ表達陽性有效率高于表達陰性的(P<0.05)；GST-π表達陽性的有效率與表達陰性的有效率比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 化療前不同GSP-π和Topo-Ⅱ表達患者的化療效果 例(%)

注：①與Topo-Ⅱ表達陰性比較，P<0.05。

2.4 不同分子分型患者GST-π和Topo-Ⅱ表達情況化療效果 不同分子分型間Topo-Ⅱ表達陽性的有效率高于表達陰性的(P<0.05)，而不同分子分型間GST-π表達陽性有效率與陰性有效率比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3。

2.5 化療后不同GST-π和Topo-Ⅱ表達改變情況療效比較 患者化療前后GST-π表達情況比較差異無統(tǒng)計學意義，且化療前后GST-π表達的改變與化療療效也無相關性(P>0.05)；Topo-Ⅱ表達由陽性轉陰性的有效率最高，Topo-Ⅱ表達由陰性轉陽的有效率最低(P<0.05)。見表4。

表3 不同分子分型患者GST-π和TOPⅡ表達情況化療效果 例(%)

注：①與同型表達陰性比較，P<0.05。

表4 化療后GST-π和Topo-Ⅱ表達改變情況化療效果 例(%)

注：①與陽轉陰比較，P<0.05。

3 討 論

近年來，隨著病理學研究的發(fā)展，人類在乳腺癌的治療方面取得了巨大的成功，在其手段和策略方面也發(fā)生了重大的轉變，但在標志腫瘤生物學行為方面和對臨床治療提供指導性作用的組織學分類方法方面，沿用先前的組織學分類和解剖學分期已經(jīng)遠遠不能滿足臨床診治需求[8]，而正確評價和預測療效和疾病轉歸將成為重要的研究內(nèi)容。2000年Perou等[9]利用cDNA 芯片檢測技術對乳腺癌進行了分子分型，經(jīng)不斷研究證明，這種分型是正確的，并且這種分子檢測要比傳統(tǒng)的組織病理能更好指導乳腺癌的臨床治療[10-11]。

新輔助化療是一種術前先進行化療再手術的新方法，這樣可以提高乳腺癌患者的緩解率，提高保乳概率，可使手術切除范圍縮小，改善患者術后的生活質量，同時可以尋找預測化療療效的生物標記物[12-13]。而Rocque等[14]研究表明個體化治療要依據(jù)乳腺癌的分子分型。在乳腺癌患者的分子分型中，Luminal A型的內(nèi)分泌治療療效明顯好于Luminal B型。由于Luminal B型的HER-2表達陽性, 對他莫昔芬的反應性低于Luminal A型,而用其他的內(nèi)分泌治療仍有效果。HER-2過表達型由于激素受體表達陰性,一般內(nèi)分泌治療沒有明顯療效,但患者的化療療效好,并且適用于赫塞汀靶向治療。Basal-like型乳腺癌易發(fā)生局部及遠處轉移,且組織學類型多為Ⅲ級[15]。本研究結果發(fā)現(xiàn)，GST-π和Topo-Ⅱ在化療前陽性表達率分別為42.6% 和40.6%,與文獻[16]相一致；按分型分類進行分析，發(fā)現(xiàn)HER2過表達型及Basal-like型中GST-π陽性率高于Luminal A型和Luminal B型(P<0.05)，Topo-Ⅱ陽性率低于Luminal A型和Luminal B型,但差異無統(tǒng)計學意義，與岳玉函等[17]研究結果相一致；另外Topo-Ⅱ表達陽性的有效率高于表達陰性的， GST-π表達陽性的有效率與表達陰性的有效率比較差異無統(tǒng)計學意義；不同分子分型間Topo-Ⅱ表達陽性的有效率高于表達陰性的，而不同分子分型間GST-π表達陽性有效率與陰性有效率比較差異無統(tǒng)計學意義；患者化療前后GST-π表達情況差異無統(tǒng)計學意義，且化療前后GST-π表達的改變與化療療效也無相關性； Topo-Ⅱ表達由陽性轉陰性的有效率最高，Topo-Ⅱ表達由陰性轉陽的有效率最低(P<0.05)。提示GST-π、Topo-Ⅱ可能與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有一定的關系,GST-π、Topo-Ⅱ的表達可能對判斷不同類型乳腺癌預后以及在用藥選擇方面提供有利的依據(jù)。

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Research on the correlation of breast cancer molecular classification with the expression of GST-π and Topo-Ⅱ before and after neoadjuvant chemotherapy

ZHANG Yanxia1, MA Donghua2, SUN Dongxia1, LI Junpeng3, LUO Xiangli4, SHI Xiaopeng5

(1.Maternal and Child Health-Care Hospital of Handan, Handan 056301, Hebei, China; 2.Maternal and Child Health-Care Hospital of Daming, Daming 056000, Hebei, China; 3.Maternal and Child Health-Care Hospital of Shexian, Shexian 056400, Hebei, China; 4.Maternal and Child Health-Care Hospital of Quzhou, Quzhou 057250, Hebei, China; 5.The First People’s Hospital of Wuan, Wuan 056300, Hebei, China)

Objective It is to investigate the correlation of breast cancer molecular classification with the expression of GST-π and Topo-Ⅱbefore and after neoadjuvant chemotherapy. Methods 155 patients with breast cancer were selected to carry on the molecular classification, the expression of GST-π and Topo-Ⅱwere detected by using immunohistochemical detection EnVison ldpe-g-nvp in patients with different parting, and the data were analyzed combining the pathological features. Results The expression of GST-π in HER2 expression type and Basal-like type was higher than LuminalA and LuminalB type (allP<0.05). The expression of Topo-Ⅱ in HER2 expression type and Basal-like type was lower than LuminalA and LuminalB type, but there was no significant difference (allP>0.05). There was no significant correlation between the expression of GST-π in patients with different parting and neoadjuvant chemotherapy curative effect (P>0.05), but the Topo-II expression in different classification was related to the curative effect of neoadjuvant chemotherapy in patients with difference parting (P<0.05). Conclusion The expression of GST-π in breast cancer has no significant correlation with neoadjuvant chemotherapy curative effect, but the Topo-Ⅱ expression in different classification is related to the curative effect of neoadjuvant chemotherapy in patients with difference parting. The expression of Topo-Ⅱ can help to judge the prognosis of breast cancer and provide basis for the selection of drug.

breast cancer; molecular classification; neoadjuvant chemotherapy; immunohistochemical

張艷霞，女，主治醫(yī)師，主要從事乳腺外科工作。

石曉鵬，E-mail：shixiaopengxing@163.com

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.24.007

R737.9

A

1008-8849(2015)24-2643-04

2015-02-10