米邦塔仙人掌果膠對慢性不可預知溫和應激小鼠絕望癥狀的改善作用

肖同楚，黃朝明，楊興娥，湛進進，郭蓮軍

(1. 湖北省宜昌市夷陵區(qū)婦幼保健院，湖北 宜昌 443100；2. 華中科技大學同濟醫(yī)學院，湖北 武漢 430030)

米邦塔仙人掌果膠對慢性不可預知溫和應激小鼠絕望癥狀的改善作用

肖同楚1，黃朝明1，楊興娥1，湛進進2，郭蓮軍2

(1. 湖北省宜昌市夷陵區(qū)婦幼保健院，湖北 宜昌 443100；2. 華中科技大學同濟醫(yī)學院，湖北 武漢 430030)

目的 研究米邦塔仙人掌果膠(MCP)對慢性不可預知溫和應激(CUMS)小鼠絕望癥狀的改善作用。方法 雄性昆明種小鼠隨機分為空白對照組、模型組、MCP低劑量組(50 mg/kg)、MCP中劑量組(100 mg/kg)、MCP高劑量組(200 mg/kg)。除空白對照組不進行任何應激處理外，其余組均進行CUMS，各MCP組均在進行CUMS期間每天灌胃相應劑量MCP。造模結(jié)束24 h后進行懸尾實驗，48 h后進行強迫游泳實驗。結(jié)果 模型組懸尾實驗潛伏期顯著短于空白對照組(P<0.01)，累計不動時間顯著長于空白對照組(P<0.01)；MCP高劑量組潛伏期顯著長于模型組(P<0.05)，MCP中、高劑量組累計不動時間顯著短于模型組(P均<0.01)。模型組強迫游泳實驗潛伏期顯著短于空白對照組(P<0.01)，累計不動時間顯著長于空白對照組(P<0.01)；MCP各給藥組潛伏期與空白對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)，而MCP高劑量組累計不動時間顯著短于模型組 (P<0.05)。結(jié)論 MCP能較好地緩解CMS小鼠的行為絕望癥狀。

米邦塔仙人掌果膠；慢性不可預知溫和應激； 絕望癥狀；小鼠

抑郁癥是一種以持久的心境低落為主要特征的精神疾病，目前全世界約有4 億人受其影響，且發(fā)病率逐年增加[1]。慢性應激誘導的氧化應激損傷介導抑郁癥是抑郁癥的發(fā)病機制之一，慢性不可預知溫和應激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)模型能很好地模擬人類抑郁癥中慢性、低水平應激源促進疾病發(fā)生，加速疾病發(fā)展的機制[1]。研究顯示植物果膠有較好的抗氧化、抗炎、抗?jié)儭⒖拱┖驼{(diào)節(jié)免疫的作用[2-3]。米邦塔仙人掌富含果膠成分，然而關(guān)于米邦塔仙人掌果膠(milpa alta cactus pectin，MCP)在神經(jīng)和精神系統(tǒng)疾病特別是抑郁癥方面的作用尚少見報道。本實驗采用小鼠懸尾實驗和強迫游泳實驗探討了MCP對小鼠CUMS模型抑郁樣絕望癥狀是否有改善作用，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 實驗資料

1.1藥品與試劑 MCP(棕色粉末)由華中科技大學同濟醫(yī)學院藥理學系提取，用雙蒸水溶解配置成低(5 mg/mL)、中(10 mg/mL)、高(20 mg/mL)3種濃度，調(diào)節(jié)pH值至中性。

1.2 實驗動物與分組 清潔級健康雄性昆明種小鼠50只，體質(zhì)量15～20 g，由華中科技大學同濟醫(yī)學院實驗動物中心提供，許可證號：SCXK(鄂) 2008-0007，合格證號：00020736；飼養(yǎng)條件：12 h晝夜交替，室溫(24±2)℃，空氣濕度(50±10)%，除造模及必要的斷水斷食外，小鼠均可自由進水進食。將50只小鼠隨機分為空白對照組、模型組、MCP低劑量組(50 mg/kg)、MCP中劑量組(100 mg/kg)、MCP高劑量組(200 mg/kg)，每組10只。

1.3 模型制備及干預方法 空白對照組不進行任何應激處理，正常條件飼養(yǎng)；其余組給予CUMS造模，造模過程包括斷水16 h、斷食16 h、45°傾斜鼠籠4 h、潮濕墊料24 h、通宵照明、2 h/2 h晝夜交替、晝夜顛倒、陌生氣味4 h、4 ℃冷水游泳、陌生氣味4 h、活動限制2 h共11種應激因子。每天隨機給予(讓動物不可預知)以上2種刺激因子，同一種應激因子間隔時間至少48 h，持續(xù)6周。各MCP組均在進行應激處理期間每天9:00—10:00灌胃相應劑量MCP，灌胃體積為0.1 mL/10 g，模型組給予同等體積的雙蒸水。

1.4 懸尾實驗 CUMS造模結(jié)束24 h后進行小鼠懸尾實驗。在離小鼠尾部尖端約1 cm處，用膠帶將其倒置懸掛于空中，使其頭部離實驗平臺約5 cm，檢測小鼠在5 min內(nèi)的潛伏期(從掙扎到第一次完全靜止不動的時間，不動指小鼠沒有任何的肢體和身體運動)和累計不動時間。采用雙盲測試法檢測。

1.5 強迫游泳實驗 懸尾實驗完成24 h后，進行小鼠強迫游泳實驗。主要設備為一個高20 cm、直徑為15 cm的圓柱形透明容器。向容器內(nèi)加入溫度為(24±2)℃，深15 cm的自來水。放入小鼠，實驗者以秒表計時，記錄其在5 min內(nèi)的潛伏期(從掙扎到第一次完全靜止不動的時間，不動指小鼠在水中停止掙扎，呈漂浮狀態(tài)，或僅有微小的肢體運動，以保證其頭部浮于水面上)和累計不動時間。采用雙盲測試法檢測。

2 結(jié) 果

2.1懸尾實驗 模型組潛伏期明顯短于空白對照組(P<0.01)；MCP高劑量組潛伏期明顯高于模型組(P<0.05)；MCP低、中劑量組潛伏期與模型組比較差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。模型組累計不動時間顯著高于空白對照組(P<0.01)；MCP中、高劑量組累計不動時間明顯短于模型組(P均<0.01)，MCP低劑量組與模型組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 懸尾實驗中各組潛伏期與累計不動時間比較

注：①與空白對照組比較，P<0.01；②與模型組比較,P<0.05;③與模型組比較,P<0.01。

2.2 強迫游泳實驗 模型組潛伏期明顯短于空白對照組(P<0.01)； 而MCP低劑量組和MCP中劑量組潛伏期明顯低于模型組(P<0.01和P<0.05)。模型組累計不動時間顯著高于空白對照組(P<0.01)；MCP高劑量組累計不動時間明顯短于模型組(P<0.05)，MCP低劑量組累計不動時間顯著高于模型組(P<0.01)。見表2。

表2 強迫游泳實驗中各組潛伏期與累計不動時間比較

注：①與空白對照組比較，P<0.01；②與模型組比較,P<0.01;③與模型組比較,P<0.05。

3 討 論

懸尾實驗和強迫游泳實驗被廣泛用于抑郁動物行為絕望的評價。有研究比較了C57BL/6J、BALB/cJ、DBA/2J3個不同種系的小鼠CUMS造模后在懸尾實驗和強迫游泳試驗中的反應，發(fā)現(xiàn)以上3種動物在這2項試驗中的表現(xiàn)明顯不同[4]；李騰飛等[5]探討7BL/6、BALB/c、ICR和昆明小鼠在懸尾實驗和強迫游泳實驗懸尾實驗中的行為學差異，發(fā)現(xiàn)C57BL/6小鼠的不動時間顯著長于其他3種品系小鼠，但是4種品系小鼠在強迫游泳實驗中的不動時間差異無顯著性。本實驗中CUMS顯著縮短小鼠懸尾實驗和強迫游泳實驗的潛伏期并增加其累計不動時間，與文獻[6-7]報道一致。而MCP對CUMS小鼠在懸尾實驗和強迫游泳實驗中行為絕望的改善效應不盡相同：①在懸尾實驗中，MCP高劑量能顯著增加CUMS小鼠潛伏期，MCP中、高劑量可顯著降低CUMS小鼠累計不動時間；在強迫游泳試驗中，雖然MCP高劑量明顯降低CUMS小鼠累計不動時間，但是MCP高劑量并未使?jié)摲陲@著增加。②在強迫游泳實驗中，MCP低、中劑量可降低CUMS小鼠潛伏期，增加累計不動時間。分析認為使用的小鼠鼠種可能是導致以上現(xiàn)象的一個原因。另外Cryan等[8]回顧了二十年來使用2個實驗的部分文獻認為懸尾實驗比強迫游泳試驗能更好地反映抗抑郁藥的療效，懸尾實驗檢測靈敏度相對較低可能是出現(xiàn)上述不一致現(xiàn)象的另一個原因。在懸尾實驗中龍須菜提取物10mg/kg能表現(xiàn)出良好的抗抑郁效應，但是在強迫游泳試驗中100mg/kg才能顯現(xiàn)出良好的抗抑郁效果。這與本研究觀察到在懸尾實驗中MCP中、高劑量能表現(xiàn)出良好的抗抑郁效應，但在強迫游泳試驗中只有MCP高劑量才能表現(xiàn)出良好的抗抑郁效果的結(jié)果一致。

雖然MCP對CUMS小鼠在2個試驗中潛伏期和累計不動時間的影響不太一致，但是MCP高劑量可明顯縮短CUMS小鼠在這2項實驗中的累計不動時間；另外懸尾實驗檢測靈敏度高于強迫游泳試驗，MCP可明顯增加CUMS小鼠在懸尾實驗中的潛伏期，降低累計不動時間；故認為MCP能較好地緩解CUMS小鼠的行為絕望癥狀。

[1] 謝正，李恒芬，代娟，等. 抑郁癥動物模型的建立及評價[J]. 國際神經(jīng)病學雜,2007,23(4):212-215

[2]WongTW,ColomboG,SonvicoF.Pectinmatrixasoraldrugdeliveryvehicleforcoloncancertreatment[J].AAPSPharmSciTech，2011,12(1):201-214

[3]AlimiH,HfaiedhN,BouoniZ,etal.AntioxidantandantiulcerogenicactivitiesofOpuntiaficusindicaf.inermisrootextractinrats[J].Phytomedicine，2010,17(14):1120-1126

[4]MaoQQ,IpSP,TsaiSH,etal.Antidepressant-likeeffectofpeonyglycosidesinmice[J].JEthnopharmacol，2008,119(2):272-275

[5] 李騰飛,孫秀萍,石哲,等. 不同品系小鼠在三種常見抑郁監(jiān)測方法中的行為學表現(xiàn)[J]. 中國比較醫(yī)學雜志,2011,21(8):20-23

[6]MaoQQ,IpSP,KoKM,etal.Peonyglycosidesproduceantidepressant-likeactioninmiceexposedtochronicunpredictablemildstress:effectsonhypothalamic-pituitary-adrenalfunctionandbrain-derivedneurotrophicfactor[J].ProgNeuropsychopharmacolBiolPsychiatry，2009,33(7):1211-1216

[7]BessaJM,MesquitaAR,OliveiraM,etal.Atrans-dimensionalapproachtothebehavioralaspectsofdepression[J].FrontBehavNeurosci，2009,3:1

[8]CryanJF,MombereauC,VassoutA.Thetailsuspensiontestasamodelforassessingantidepressantactivity:reviewofpharmacologicalandgeneticstudiesinmice[J].NeurosciBiobehavRev，2005,29(4/5):571-625

Study on the improvement of milpa alta cactus pectin on desperate symptoms in mice exposed to chronic unpredictable mild stress

XIAO Tongchu1, HUANG Chaoming1, YANG Xing’e1, ZHAN Jinjin2, GUO Lianjun2

(1. Yichang City Yiling District Maternal and Child Health Hospital, Yichang 443100, Hubei, China; 2.Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, Hubei, China)

Objective It is to investigate the effect of milpa alta cactus pectin (MCP) on desperate symptoms in mice exposed to chronic unpredictable mild stress (CUMS). Methods The male Kunming mice were randomly divided into 5 groups such as control group, CUMS+Vehicle group, CUMS+MCP 50 mg/kg group, CUMS+MCP 100 mg/kg group, and CUMS+MCP 200 mg/kg group. Except the control group, the other groups were exposed to CUMS for 6 weeks. And during this period, the animals were treated with corresponding drug by intragastric administration. While the ends of the model, the tail suspension test (TST) was carried out after 24 hours, and the forced swimming test (FST) were conducted after 48 hours. Results In TST, the latency of the CUMS+Vehicle group was significantly shorter (P<0.01), and the immobility time was significantly longer than that of the control group (P<0.01); the latency of the CUMS+MCP 200 mg/kg group was significantly longer than that of the CUMS+Vehicle group (P<0.05), and the immobility time of the CUMS+MCP 200 mg/kg and 100 mg/kg groups was significantly shorter than that of the COMS+Vehicle group (allP<0.01). In FST, the latency of the CUMS+Vehicle was significantly shorter (P<0.01), and the immobility time was significantly longer than that of control group (P<0.01); the latency of the MCP groups was no significant difference compared with the control group (allP>0.05), and the immobility time of the CUMS+MCP 200 mg/kg groups was significantly short than that of the CUMS+Vehicle group (P<0.05). Conclusion MCP can improve the desperate symptoms in mice exposed to CUMS.

milpa alta cactus pectin; chronic unpredictable mild stress; desperate symptoms; mice

肖同楚，男，主治醫(yī)師，主要研究方向為慢性病防治。

郭蓮軍，E-mail:gljy2008@126.com

中央高?；究蒲袠I(yè)務費專項資金資助項目(2011TS073)；國家重大創(chuàng)新平臺重點資助新藥研發(fā)項目(2009ZX09301-014)

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.24.003

R-332

A

1008-8849(2015)24-2630-03

2015-01-10