黃芪顆粒治療咳嗽變異性哮喘臨床研究

陳 倫,祁 佳,張宇鋒

(1.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院,上海 200092;2.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬江陰市中醫(yī)院,江蘇 江陰 214400)

論 著

黃芪顆粒治療咳嗽變異性哮喘臨床研究

陳 倫1,祁 佳1,張宇鋒2

(1.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院,上海 200092;2.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬江陰市中醫(yī)院,江蘇 江陰 214400)

目的 觀察黃芪顆粒聯(lián)合沙美特羅替卡松治療咳嗽變異性哮喘(CVA)的臨床療效及對患者誘導(dǎo)痰白細(xì)胞介素(IL)-10和IL-6的表達(dá)影響。方法 將120例CVA患者隨機(jī)分為2組，治療組60例給予黃芪顆粒聯(lián)合沙美特羅替卡松治療,對照組60例給予沙美特羅替卡松治療。另選健康體檢者50例作為正常組。采用ELISA法測定各組誘導(dǎo)痰中IL-10和IL-6表達(dá)水平。結(jié)果 治療組和對照組治療前IL-10表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但均顯著低于正常組(P均<0.01)。治療28 d后治療組和對照組IL-10表達(dá)水平均顯著高于治療前(P均<0.01)，且治療組顯著高于對照組(P<0.05)。治療組和對照組治療前IL-6表達(dá)水平比較差異統(tǒng)計學(xué)意義，但均顯著高于正常組(P均<0.01)。治療28 d后治療組和對照組IL-6表達(dá)水平均顯著低于治療前(P均<0.01)，且治療組顯著低于對照組(P<0.05)。治療組愈顯率明顯高于對照組(P<0.05)。治療組與對照組不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 黃芪顆粒聯(lián)合沙美特羅替卡松可顯著升高CVA患者IL-10表達(dá)水平，降低IL-6表達(dá)水平，臨床療效較好。

黃芪顆粒;咳嗽變異性哮喘;白細(xì)胞介素-10；白細(xì)胞介素-6

咳嗽變異性哮喘(cough variant asthma，CVA)是以慢性咳嗽為主要或唯一臨床表現(xiàn)的一種特殊類型的哮喘,任何年齡均可發(fā)病,在慢性咳嗽中的構(gòu)成比較高[1]。CVA 患者的肺功能氣道反應(yīng)性及運(yùn)動性誘發(fā)哮喘均存在著與典型哮喘相同或相似的異常變化, 研究表明CVA 的發(fā)病機(jī)制與哮喘相同, 其病理生理改變都是以持續(xù)氣道慢性炎癥與氣道高反應(yīng)性為特點, 其發(fā)病原因目前尚不完全明了[2]。在對典型哮喘的研究中發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞以及其調(diào)控Foxp3基因減低[3]。黃芪作為傳統(tǒng)中藥，含有氨基酸類、微量元素、黃酮及黃酮類似物、黃芪皂甙類、多糖等，生用可益衛(wèi)固表、利水消腫、托毒生肌，炙用可補(bǔ)中益氣[4]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明黃芪類藥物具有提高免疫功能、調(diào)節(jié)T細(xì)胞的活性以及T細(xì)胞亞群失衡的作用[5-7]。本研究通過檢測CVA患者誘導(dǎo)痰中白細(xì)胞介素-10(IL-10)和IL-6的表達(dá)水平，觀察黃芪顆粒聯(lián)合沙美特羅氟替卡松對CVA患者的免疫調(diào)節(jié)作用以及臨床療效，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2013年1月—2014年7月在上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院門診治療的CVA患者120例，CVA診斷符合2009年中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘學(xué)組修訂的《咳嗽的診斷與治療指南》[8]。排除嚴(yán)重心、腦、肝、腎等重要臟器功能障礙者，合并其他呼吸系統(tǒng)疾病者，不能配合治療者。將患者隨機(jī)分為2組:治療組60例，男30例，女30例；年齡20～40(28.3±9.6)歲；病程(8.36±2.02)年。對照組60例，男31例，女29例；年齡21～40(29.0±10.3)歲；病程(8.54±1.97)年。2組年齡、性別、病程等比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)，具有可比性。另取同時期同院體檢中心健康體檢者50例作為正常組,男25例，女25例；年齡18～40(28.0±10.1)歲。

1.2 治療方法 對照組給予沙美特羅替卡松粉吸入劑(Glaxo Operations UK Limited，50 μg沙美特羅和250 μg丙酸氟替卡松,批準(zhǔn)文號:H20090242)吸入治療，1吸/次，2次/d。治療組在對照組的基礎(chǔ)上加用黃芪顆粒(貴州漢方制藥有限公司,國藥準(zhǔn)字Z19993254，15 g/袋)開水沖服，1袋/次，2次/d。2組均連續(xù)治療28 d后觀察療效。

1.3 誘導(dǎo)痰中IL-10和IL-6表達(dá)水平檢測 參照趙瑩等[9]的方法制備誘導(dǎo)痰。超聲霧化吸入3%高滲鹽水15 min后,用力咳痰至培養(yǎng)皿中。若患者無痰或痰量不足, 則換用4%高滲鹽水繼續(xù)霧化吸入7 min, 仍無痰或痰量不足時, 換用5%高滲鹽水繼續(xù)霧化吸入,7 min后終止誘導(dǎo)程序。收集合格痰1 mL中加入4 mL的0.1%二硫蘇糖醇充分混合,將痰液置37 ℃水浴10 min,用48 μm的尼龍網(wǎng)過濾掉黏液和碎片, 以1 000 r/min離心10 min。分離上清液儲存于-70 ℃冰箱中留做檢測。采用日立HICTHI-7080全自動生化分析儀以ELISA法測定IL-10和IL-6表達(dá)水平,試劑盒購自上海晶天生物科技有限公司，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

1.4 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 所有患者治療前后根據(jù)咳嗽癥狀評分表(表1)進(jìn)行評分。痊愈：癥狀明顯緩解，治療后評分≤1分;顯效：治療后評分較治療前減少3 分及以上;有效：治療后評分較治療前減少1～2分;無效：治療后評分較治療前無減少或反而增加。愈顯效率=(痊愈人數(shù)+顯效人數(shù))/總?cè)藬?shù)×100%。

表1 CVA患者的咳嗽癥狀評分表

2 結(jié) 果

2.1 3組IL-10和IL-6表達(dá)水平比較 治療組和對照組治療前IL-10表達(dá)水平均顯著低于正常組 (P均<0.01)；治療后治療組和對照組IL-10表達(dá)水平均顯著高于治療前(P均<0.01)，治療組明顯高于對照組(P<0.05)。治療組和對照組治療前IL-6表達(dá)水平均顯著高于正常組(P均<0.01)；治療后治療組和對照組IL-6表達(dá)水平均顯著低于治療前(P均<0.01)，且治療組明顯低于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 3組IL-10和IL-6表達(dá)水平比較

注：①與正常組比較,P<0.01；②與治療前比較,P<0.01；③與對照組比較，P<0.05。

2.2 治療組和對照組臨床療效比較 治療組愈顯效率高于對照組(P<0.05)。見表3。

2.3 不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 治療組出現(xiàn)口腔潰瘍1例,惡心2例,嘔吐1例，不良反應(yīng)發(fā)生率為7%；對照組出現(xiàn)口腔潰瘍1例，惡心例，不良反應(yīng)發(fā)生率為3%。2組不良反應(yīng)均無需臨床處理，不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表3 治療組和對照組療效比較 例(%)

注：①與對照組比較，P<0.05。

3 討 論

CVA的發(fā)病機(jī)制與哮喘相同, 其病理生理改變都是以持續(xù)氣道慢性炎癥與氣道高反應(yīng)性為特點,以局部炎性細(xì)胞和炎性因子聚集為主要原因[2，10-11]，其中調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞亞群調(diào)節(jié)紊亂參與哮喘的致病過程。調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞靠分泌IL-10因子發(fā)揮免疫抑制活性，而IL-10因子發(fā)揮免疫抑制活性是通過抑制一系列致炎因子實現(xiàn)的，IL-6是已知體內(nèi)高活性的致炎因子。本研究顯示CVA患者IL-10表達(dá)水平顯著低于正常組，而IL-6表達(dá)水平顯著高于正常組，說明調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞亞群調(diào)節(jié)紊亂確實參與CVA的致病過程。

沙美特羅替卡松吸入劑是一種長效β2腎上腺素受體激動劑與糖皮質(zhì)激素聯(lián)合吸入劑，抗炎解痙作用好[12]。本研究對照組單用沙美特羅替卡松吸入劑治療后較治療前IL-10表達(dá)水平升高，IL-6表達(dá)水平降低，說明沙美特羅替卡松吸入劑對CVA患者白細(xì)胞介素表達(dá)有調(diào)節(jié)作用，與文獻(xiàn)[13-14]報道一致。

黃芪主要含黃芪多糖、黃芪皂苷、黃芪黃酮類化合物等有效化學(xué)成分，黃芪的藥理作用是由其所含的有效成分所決定的，而這些活性成分均具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用。黃芪多糖能夠促進(jìn)B細(xì)胞、T細(xì)胞的活化增殖以及巨噬細(xì)胞活化；黃芪皂苷對細(xì)胞和體液免疫有較強(qiáng)地促進(jìn)作用；黃芪莖葉總黃酮及黃芪水溶性黃酮類有免疫增強(qiáng)及免疫調(diào)節(jié)作用；黃芪總黃酮能夠重建免疫功能低下機(jī)體正常的免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能[15-17]。許鵬飛等[18]實驗表明黃芪顆粒能明顯促進(jìn)小鼠非特異性和特異性免疫(包括體液免疫、細(xì)胞免疫)功能，對環(huán)磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠的免疫功能具有一定調(diào)節(jié)改善作用。

本研究結(jié)果顯示, 黃芪顆粒聯(lián)合沙美特羅替卡松可顯著升高CVA患者IL-10表達(dá)水平，降低IL-6表達(dá)水平，臨床療效較好，提示黃芪顆粒聯(lián)合沙美特羅替卡松可以更好地調(diào)節(jié)CVA患者免疫狀態(tài)。其機(jī)制可能與黃芪顆粒可有效改善調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞更好地分泌IL-10因子發(fā)揮免疫抑制活性、抑制IL-6等一系列致炎因子有關(guān)。本研究只是初步探討和研究，黃芪顆粒對CVA患者調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞功能及其所分泌的細(xì)胞因子間的具體作用和機(jī)制還有待積累更多資料加以證明。

[1] Johnson D,Osborn LM.Cough variant asthma areview of clinical literature[J].Asthma,1991,28:85

[2] Wasserman SI.Basic mechanism in asthma[J].Ann allergy,1980,60:477

[3] Kinoshita T,Baatjes A,Smith SG,et al.Natural regulatory T cells in isolated early responders compared with dual responders with allergic asthma[J].Allergy Clin Immunol，2014,133(3):696-703

[4] 劉星階,哈正坤.黃芪成分和藥理活性研究進(jìn)展[J].上海醫(yī)藥,1995(2):23-28

[5] Qu LL,Su YL,Li CX,et al.Astragalus membranaceus injection delayed allograft survival related with CD4+CD25+regulatory T cells[J].Transplant Proc，2010,42(9):3793-3797

[6] 李清,石來軍,趙旸.黃芪顆粒佐治兒童支氣管哮喘T細(xì)胞亞群分析[J].鄖陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2006,25(5):303-304

[7] 高維新,潘春瑩,徐勇勝,等.黃芪顆粒劑對兒童哮喘T細(xì)胞亞群改善的臨床觀察[J].天津醫(yī)藥,2005,33(4):245-246

[8] 中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘學(xué)組.咳嗽的診斷與治療指南(2009版)[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2009,32(2):407-413

[9] 趙瑩,孔靈菲.誘導(dǎo)痰檢測技術(shù)及其臨床應(yīng)用[J].中國實用內(nèi)科雜志,2007,27(13):1070

[10] 黃英,張儒誼.咳嗽變異型哮喘免疫實驗檢測與臨床防治觀察[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,1998,23(4):398

[11] 樊東升,崔麗英,劉曉華.咳嗽變異型哮喘的研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志,2006,38(2):145-147

[12] Paggiaro P,Patel S,Nicolini G,et al.Stepping down from high dose fluticasone/salmeterol to extrafine BDP/F in asthma is cost-effective[J].Respir Med，2013,107(10):1531-1537

[13] 賈社軍.氟替卡松聯(lián)合沙美特羅對小兒哮喘血清白介素的表達(dá)及氣道重塑的調(diào)控作用[J].四川醫(yī)學(xué),2009,30(7):1071-1073

[14] 李麗,王亞婷,蔣軼文,等.長效β2激動劑合用激素與單用激素對支氣管哮喘患者誘導(dǎo)痰白細(xì)胞介素10和嗜酸粒細(xì)胞數(shù)導(dǎo)的影響[C].中華醫(yī)學(xué)會第五次全國哮喘學(xué)術(shù)會議暨中國哮喘聯(lián)盟第一次大會論文匯編，2006

[15] 湯召峰,梁曉美,徐美華.黃芪有效成分提高機(jī)體免疫功能的研究進(jìn)展[J].中國中醫(yī)藥科技,2014,21(3):341-344

[16] Ko JK,Chik CW.The protective action of radix Astragalus membranaceus against hapten-induced colitis through modulation of cytokines[J].Cytokine，2009，47(2)：85-90

[17] 顏培宇，于曉紅，張德山，等.黃芪總黃酮對免疫功能低下小鼠T細(xì)胞極化的影響[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2008，32(2)：163

[18] 許鵬飛，孫京惠，高福云，等.黃芪顆粒對小鼠免疫調(diào)節(jié)功能的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2007,14(4):27-28

Clinical study on Astragalus Granule in the treatment of cough variant asthma

CHEN Lun1, QI Jia1, ZHANG Yufeng2

(1.Xin Hua Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200092, China; 2.Jiangyin Hospital of Traditional Chinese Medicine Affiliated to Nanjing University of Chinese Medicine, Jiangyin 214400, Jiangsu, China)

Objective It is to observe the clinical effect of Astragalus Granule in treatment of patients with cough variant asthma (CVA) combined with Salmeterol Xinafoate and Fluticasone Propionate and its influence on the expression of interleukin (IL)-10 and IL-6.Methods 120 patients with CVA were randomly divided into two groups, 60 cases in treatment group were treated with Astragalus Granule combined with Salmeterol Xinafoate and Fluticasone Propionate, and 60 cases in control group were treated with Salmeterol Xinafoate and Fluticasone Propionate.50 cases of healthy people were used as normal control group.The ELISA method was used for the detection of IL-10 and IL-6 expression.Results There was no significant difference in the expression level of IL-10 between two groups before treatment (P>0.05), but they were significantly lower than that in normal control group (P<0.01).The expression level of IL-10 in treatment group and control group after treatment for 28 days were significantly higher than that before treatment (allP<0.01), and that in treatment group was higher than that control group (P<0.05).There was no significant difference in the expression level of IL-6 in treatment group and control group before treatment (P>0.05), they were significantly higher than that in normal control group (allP<0.01).The expression level of IL-6 in treatment group and control group after treatment for 28 days, they were significantly lower than that before treatment (allP<0.01), and that in treatment group was lower than the control group (P<0.05).The significantly effective rate of clinical effect in treatment group was superior to control group (P<0.05).There was no significant difference between the two groups in adverse reaction (P>0.05).Conclusion Astragalus Granule combined with Salmeterol Xinafoate and Fluticasone Propionate can significantly increase the expression level of IL-10, decrease the expression level of IL-6 in patients with CVA, and have a better clinical efficacy.

Astragalus Granule; cough variant asthma; interleukin-10; interleukin-6

陳倫，男，醫(yī)學(xué)碩士，藥師，主要研究方向為中、西藥藥動學(xué)新方法及其關(guān)鍵技術(shù)研究。

張宇鋒，E-mail:zyfjytcm@163.com

國家自然科學(xué)基金資助項目(81302768)

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.15.001

R562.25

A

1008-8849(2015)15-1597-03

2015-01-05