蛋白酶、IL-8與未足月胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎及妊娠結(jié)局的關(guān)系

王妙英，焦朋增，趙媛媛

(1.河北省邯鄲市中心醫(yī)院，河北 邯鄲 056001；2.河北省邯鄲市第一醫(yī)院，河北 邯鄲 056001)

蛋白酶、IL-8與未足月胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎及妊娠結(jié)局的關(guān)系

王妙英1，焦朋增2，趙媛媛1

(1.河北省邯鄲市中心醫(yī)院，河北 邯鄲 056001；2.河北省邯鄲市第一醫(yī)院，河北 邯鄲 056001)

目的 探討蛋白酶、白細(xì)胞介素-8(IL-8)與未足月胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎及妊娠結(jié)局的關(guān)系。方法 選擇住院分娩的未足月胎膜早破孕婦53例，根據(jù)有無發(fā)生絨毛膜羊膜炎(HCA)分為HCA組22例和無HCA組31例。比較2組孕婦血清及其新生兒臍帶血中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)、氧化型α1-抗胰蛋白酶(Ox-AT)及IL-8、C反應(yīng)蛋白(CRP)、WBC水平,比較HCA組不同嚴(yán)重程度HCA時(shí)新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、CRP、WBC水平。記錄2組妊娠結(jié)局情況。結(jié)果 2組孕婦血清、新生兒臍帶血中WBC、CRP水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，HCA組NE、Ox-AT、IL-8水平均明顯高于無HCA組(P均<0.05)。重度HCA孕婦的新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平明顯高于輕中度者(P均<0.05)。孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8水平與新生兒臍帶血NE、Ox-AT、IL-8水平呈顯著正相關(guān)性(P均<0.01)。新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平與WBC、CRP水平呈弱相關(guān)性(P均<0.05)。新生兒臍帶血中NE水平與Ox-AT、IL-8水平呈正相關(guān)性(P均<0.05)，Ox-AT水平與IL-8水平呈正相關(guān)性(P均<0.05)。HCA組剖宮產(chǎn)率、產(chǎn)褥病率、新生兒窒息率、肺炎率明顯高于無HCA組(P<0.05或P<0.05)，HCA組母體并發(fā)癥及新生兒并發(fā)癥發(fā)生率均明顯高于無HCA組(P均<0.05)。結(jié)論 動(dòng)態(tài)監(jiān)測孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8水平變化，有利于盡早預(yù)測未足月胎膜早破合并HCA的發(fā)生及妊娠結(jié)局，以盡早采取干預(yù)措施，降低母兒并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

蛋白酶; 白細(xì)胞介素-8;未足月胎膜早破;絨毛膜羊膜炎

未足月胎膜早破(pPROM)是指妊娠<37周胎膜在臨產(chǎn)前發(fā)生破裂。其與感染互為因果，常表現(xiàn)為組織學(xué)絨毛膜羊膜炎(HCA)[1]，而HCA多無典型臨床癥狀，產(chǎn)前診斷困難。pPROM合并HCA可致產(chǎn)婦胎盤早剝、產(chǎn)后出血及新生兒肺炎、腦白質(zhì)損傷等[2]。可見，盡早預(yù)測HCA的發(fā)生對改善母兒結(jié)局有著積極意義。蛋白酶如中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)、氧化型α1-抗胰蛋白酶(Ox-AT)及細(xì)胞因子中白細(xì)胞介素-8(IL-8)與HCA的發(fā)生有著密切的關(guān)系，它們在炎癥級聯(lián)反應(yīng)過程中起著重要作用。本研究對pPROM孕婦血清及其新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8含量進(jìn)行了檢測，并探討了各指標(biāo)與pPROM合并HCA的相關(guān)性及與妊娠結(jié)局的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2012年5月—2013年12月在邯鄲市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩的pPROM孕婦53例，均為單胎妊娠。pPROM診斷符合《婦產(chǎn)科學(xué)》[3]中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，排除合并有臨床感染癥狀、肝炎、腎炎、上呼吸道感染疾病者。根據(jù)有無發(fā)生HCA分為2組：HCA組22例，年齡18～40(27.1±3.1)歲；孕周30+6～37(32.4±0.8)周；孕次0～3(1.3±0.2)次;破膜至胎兒娩出時(shí)間46～112(78.5±19.7) h。無HCA組31例，年齡19～41(27.4±3.2)歲；孕周30+4～37(32.1±0.7)周；孕次0～3(1.2±0.3)次;破膜至胎兒娩出時(shí)間48～110 (78.0±19.2)h。HCA診斷參考相關(guān)資料[4]:胎膜病理切片鏡檢中性粒細(xì)胞中重度浸潤，根據(jù)高倍鏡視野下中性粒細(xì)胞個(gè)數(shù)分為輕度(5～10個(gè))、中度(11～30個(gè))、重度(>30個(gè))。

1.2 方法 采集孕婦產(chǎn)前肘部靜脈血3 mL,3 500 r/min離心10～15 min,取上層血清置于-20 ℃冰箱內(nèi)保存待測。胎兒娩出后、胎盤娩出前采集臍帶靜脈血3 mL，離心取上層血清置于-20 ℃冰箱內(nèi)待測。孕婦血清、新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平采用ELISA法測定，試劑盒購自上海凱博生化試劑有限公司,同時(shí)采用血球計(jì)數(shù)分析儀測定白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)，采用酶標(biāo)免疫法測定C反應(yīng)蛋白(CRP)水平。

1.3 妊娠結(jié)局觀察 記錄2組孕婦分娩方式、產(chǎn)后出血產(chǎn)褥病情況及新生兒窒息、呼吸窘迫(NRDS)、缺氧缺血性腦病(HIE)發(fā)生情況。

2 結(jié) 果

2.1 2組孕婦血清、新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比較 2組孕婦血清、新生兒臍帶血中WBC、CRP水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，NE、Ox-AT、IL-8水平均明顯高于無HCA組(P均<0.01)。見表1及表2。

表1 2組孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比較

表2 2組新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比較

2.2 不同嚴(yán)重程度HCA孕婦的新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平比較 HCA組中病情輕中度10例，重度12例。病情重度者新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平明顯高于病情輕中度者(P均<0.01)。見表3。

表3 不同嚴(yán)重程度HCA孕婦的新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平比較

2.3 孕婦血清及新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平相關(guān)性分析 孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8水平與新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平呈正相關(guān)性(rNE=0.902，P<0.01；rOx-AT=0.921，P<0.01；rIL-8=0.916，P<0.01)。新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平與WBC、CRP水平呈弱的相關(guān)性(r=0.125～0.206,P<0.05)。新生兒臍帶血NE與Ox-AT、IL-8呈正相關(guān)性(r=0.972,0.946,P<0.05)，Ox-AT與IL-8呈正相關(guān)性(r=0.892,P<0.05)。

2.4 妊娠結(jié)局情況 HCA組剖宮產(chǎn)率、產(chǎn)褥病率、新生兒窒息率、肺炎率均明顯高于無HCA組(P<0.05或P<0.01)，見表4。HCA組母體并發(fā)癥(包括胎盤早剝、產(chǎn)后出血、產(chǎn)褥病)、新生兒并發(fā)癥(包括新生兒窒息、肺炎、HIE) 發(fā)生率分別為36%(8/22)、86%(19/22)，無HCA組為3%(1/31)、36%(11/31),2組母體并發(fā)癥及新生兒并發(fā)癥發(fā)生率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。

3 討 論

pPROM是產(chǎn)科常見的并發(fā)癥，其病因病機(jī)尚不明確。有研究報(bào)道，pPROM與感染相關(guān)，pPROM可致陰道內(nèi)細(xì)菌上行，誘發(fā)或加重宮內(nèi)感染[5]。HCA是一種宮內(nèi)感染，也是pPROM的并發(fā)癥之一，其可增加母兒并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。因此，在pPROM進(jìn)行期待治療過程中，如何盡早預(yù)測HCA并采取防治措施，對降低母兒并發(fā)癥的發(fā)生率，改善妊娠結(jié)局有著重要意義。

表4 2組妊娠結(jié)局情況比較 例(%)

NE是一種絲氨酸中性蛋白水解酶，主要由中性粒細(xì)胞分泌。正常機(jī)體內(nèi)NE表達(dá)極低，且能與-AT和-MG等抗蛋白酶結(jié)合而被中性粒細(xì)胞清除[6]。當(dāng)感染如HCA發(fā)生時(shí)，中性粒細(xì)胞會(huì)在感染病灶局部聚集、活化、脫顆粒并釋放NE，NE是一種炎癥損傷因子，可降解細(xì)胞外基質(zhì)，釋放IL-6、IL-8等炎性因子，進(jìn)一步促進(jìn)中性粒細(xì)胞的趨化、遷移，加重組織的損傷[7]。因此，組織或體液中NE含量能較好地反映該組織損傷程度，可作為組織損傷及預(yù)后的評估指標(biāo)。

周琴等[8]研究表明，pPROM孕婦胎盤組織中NE表達(dá)水平較無pPROM孕婦明顯增加，而合并HCA孕婦其表達(dá)值進(jìn)一步升高，同時(shí)發(fā)現(xiàn)孕婦血清中的NE水平也存在這種現(xiàn)象。Tsiartas等[9]研究亦發(fā)現(xiàn)，當(dāng)pPROM孕婦羊水存在細(xì)菌感染時(shí)，羊水中NE含量明顯增加。本研究結(jié)果顯示，HCA組孕婦血清及其新生兒臍帶血中NE水平明顯高于無HCA組，且隨著HCA嚴(yán)重程度加重而升高，說明NE對pPROM合并HCA的發(fā)生具有一定的預(yù)測作用。

α1-AT是一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，主要在肝臟中合成，其對彈性蛋白酶、胰蛋白酶、膠原酶等具有競爭抑制作用，同時(shí)具有抗炎、抗感染等作用[10]。正常生理?xiàng)l件下，α1-AT與NE處于相對平衡狀態(tài)，可防止組織被降解損傷。局部炎癥可促使α1-AT被氧化為無活性的Ox-AT，而失去了對NE和炎癥反應(yīng)的抑制作用。α1-AT在胎盤組織中高表達(dá)可抑制胎盤組織中彈性蛋白酶的活性，保護(hù)胎盤組織不受彈性蛋白酶的酶解損傷[11]。α1-AT減少，Ox-AT增加可能是pPROM產(chǎn)生的原因。據(jù)研究證實(shí)，pPROM孕婦血清中Ox-AT含量明顯高于無pPROM孕婦，且伴宮內(nèi)感染者Ox-AT含量更高，說明Ox-AT表達(dá)增加可能會(huì)導(dǎo)致HCA發(fā)生或加重[12]。另有研究表明，pPROM孕婦羊膜組織高表達(dá)Ox-AT與羊膜腔感染密切相關(guān)[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，pPROM合并HCA孕婦血清及其新生兒臍帶血中Ox-AT水平明顯高于無合并HCA孕婦，同時(shí)與HCA的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，這可能是由于胎膜早破過程中，HCA致使大量炎性因子釋放，這些因子的氧化物質(zhì)將α1-AT氧化成無活性的Ox-AT，后者通過激活絲裂原激活蛋白激酶(JNK)促進(jìn)細(xì)胞因子IL-8的分泌，IL-8含量增加可促進(jìn)炎癥細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的分泌，這些炎癥細(xì)胞釋放的氧化物反過來促進(jìn)Ox-AT的生成，致使孕婦血清和胎兒臍帶血Ox-AT含量明顯升高。Ox-AT含量增加表明活性α1-AT降低，致使其抗炎、抑制基質(zhì)降解作用減弱，引起胎膜破裂并募集炎癥細(xì)胞至炎癥部位，同時(shí)也增加了細(xì)菌感染的風(fēng)險(xiǎn)。

pPROM合并HCA無典型臨床癥狀，早期難以診斷。傳統(tǒng)的CRP檢測雖能較好地反映細(xì)菌感染情況，但特異性較低，另外患者入院后通常使用地塞米松促胎肺成熟，這一定程度影響CRP的改變[14]，因此不能真實(shí)反應(yīng)感染是否存在。本研究結(jié)果顯示，pPROM合并HCA孕婦血清CRP與無HCA孕婦比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但NE、Ox-AT水平均比無HCA組高，說明NE、Ox-AT對HCA的預(yù)測價(jià)值高于CRP，兩者存在明顯的正相關(guān)性，其原因可能是炎癥反應(yīng)促進(jìn)了降解細(xì)胞外基質(zhì)的細(xì)胞因子金屬基質(zhì)蛋白酶9和NE的釋放，進(jìn)而引起Ox-AT生成增加。IL-8是炎癥介導(dǎo)因子，本研究結(jié)果顯示其與NE、Ox-AT在pPROM合并HCA孕婦血清及其新生兒臍帶血中有著相似的變化，且呈明顯正相關(guān)，說明IL-8水平檢測亦可較好地反映pPROM孕婦的HCA發(fā)生情況及嚴(yán)重程度。

HCA無特異臨床表現(xiàn)，無有效預(yù)測方法，因此一旦發(fā)生極易誘發(fā)母兒并發(fā)癥。本研究結(jié)果顯示，HCA組母體并發(fā)癥及新生兒并發(fā)癥發(fā)生率均明顯高于無HCA組，同時(shí)HCA組剖宮產(chǎn)率也明顯升高，這可能與pPROM并發(fā)HCA可能增加了子宮收縮、感染有關(guān)。

綜上所述，孕婦血清和新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平變化與pPROM合并HCA及母兒并發(fā)癥的發(fā)生密切相關(guān)。因此，動(dòng)態(tài)監(jiān)測孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8水平變化，有利于盡早預(yù)測pPROM合并HCA的發(fā)生及妊娠結(jié)局，從而及時(shí)采取干預(yù)措施，降低母兒并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

[1] 謝愛蘭,狄小丹,陳小鳴,等.未足月胎膜早破患者發(fā)生組織學(xué)絨毛膜羊膜炎的影響因素及新生兒結(jié)局[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2012，47(2):105-108

[2] Been JV,Rours IG,Kornelisse RF.Histologic chorioamnionitis,fetal involvement,and antenatal steroids:effects on neonatal outcome in preterm infants[J].Am J Obstet Gynecol,2009，201(6)：587-594

[3] 樂杰.婦產(chǎn)科學(xué)[M].8版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：112

[4] 張文瑛,朱梅英.絨毛膜羊膜炎與早產(chǎn)兒并發(fā)癥的關(guān)系探討[J].中國新生兒科雜志，2012，27(6):390-393

[5] Popowski T,Goffinet F,Maillard F，et al.Maternal markers for detecting early-onset neonatal infection and chorioamnionitis in cases of premature rupture of membranes at or after 34 weeks of gestation:a two-center prospective study[J].BMC Pregnancy Childbirth,2011,11:26

[6] 崔丹,楊春雨.中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶在子宮脫垂患者血清和陰道前壁中的表達(dá)[J].廣東醫(yī)學(xué)，2012，33(3):356-358

[7] 譚育青.羊水中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶、IL-6檢測對絨毛膜羊膜炎和臍帶炎的診斷價(jià)值[J].山東醫(yī)藥，2013，53(43):66-68

[8] 周琴,趙敏,張高.蛋白酶在胎膜早破合并羊膜炎中的表達(dá)及對妊娠結(jié)局的影響[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24(22):5657-5659

[9]TsiartasP，KacerovskyM，MusilovaI，etal.Theassociationbetweenhistologicalchorioamnionitis，funisitisandneonataloutcomeinwomenwithpretermprelaborruptureofmembranes[J].JMaternFetalNeonatalMed,2013,26(13):1332-1336

[10] 秦莉.α1抗胰蛋白酶缺乏癥的研究進(jìn)展[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34(9):1111-1114

[11]Izumi-YonedaN，TodaA，OkabeM,etal.Alpha1antitrypsinactivityisdecreasedinhumanamnioninprematurereptureofthefetalmembrance[J].MolHumReprod,2009,15(1):49-57

[12]BaronJ，SheinerE,AbecassisA，etal.α1-antitrpsininsufficiencyisapossiblecontributortoprtermpremetureruptureofmembranes[J].JMeternFetalNeonatalMed,2012,25(7):934-937

[13]MiravitllesM.Alpha-1-antitrypsinandotherproteinaseinhibitors[J].CurrOpinPharmacol,2012,12(3):309-314

[14] 張穎,劉曉橋.地塞米松干預(yù)對不同數(shù)目冠狀動(dòng)脈支架植入后高敏C反應(yīng)蛋白水平的影響[J].臨床薈萃，2010，25(5):386-389

The relationship between protease, IL-8 and preterm premature rupture of membranes with chorioamnionitis, pregnancy outcome

WANG Miaoying1，JIAO Pengzeng2，ZHAO Yuanyuan1

(1.Handan Central Hospital, Handan 056001, Hebei, China；2.The First Hospital of Handan,Handan 056001,Hebei,China)

Objective It is to investigate the relationship between protease, IL-8 and preterm premature rupture of membranes (pPROM) with chorioamnionitis (HCA) and pregnancy outcome.Methods 53 pregnant?women with pPROM who delivered in our hospital were selected and were divided into HCA group(n=22) and non HCA group(n=31) according to whether HCA occurring.The levels of NE, Ox-AT, IL-8, CRP, WBC in serum of pregnant women and neonatal umbilical cord blood were compared between two groups.The levels of NE,Ox-AT,IL-8,CRP,WBC in neonatal umbilical cord blood were compared between different severity of HCA in HCA group.Pregnancy outcome was recorded in both groups.Results The levels of WBC, CRP in serum of pregnant women and newborn's cord blood had no obvious difference between both groups.The levels of NE, Ox-AT, IL-8 in HCA group were significantly higher than those in non HCA group (P<0.05); the levels of NE, Ox-AT, IL-8, CRP, WBC in neonatal umbilical cord blood of pregnant women with severe HCA were significantly higher than those of ones with mild or moderate HCA.There were positive correlations between maternal serum NE, Ox-AT, IL-8 and those of neonatal umbilical cord blood (P<0.01).There were weak correlation between NE, Ox-AT, IL-8 and WBC, CRP (P<0.05).There was positive correlation between NE and IL-8, Ox-AT, or between Ox-AT and IL-8(P<0.05).The rate of cesarean section, neonatal asphyxia, puerperal morbidity ,pneumonia in HCA group were significantly higher than those in non HCA group, the rate of maternal complications, neonatal complications in HCA group were higher than those in non HCA group (P<0.05).Conclusion Dynamic monitoring the changes of serum NE, Ox-AT, IL-8 level of pregnant women is beneficial to early forecast the occurrence of pPROM with HCA and pregnancy outcome, thus to take intervention measure, and to reduce risk of maternal and neonatal complications.

protease; interleukin-8；preterm premature rupture of the membrane; chorioamnionitis

王妙英，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事產(chǎn)科并發(fā)癥的診治工作。

焦朋增，E-mail：13931000564@163.com

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.20.007

R0714.433

A

1008-8849(2015)20-2188-04

2015-01-15