高危HPV檢測聯(lián)合TCT在宮頸癌篩查中的應(yīng)用

臧元怡

(江蘇省無錫市婦幼保健院，江蘇 無錫 214002)

高危HPV檢測聯(lián)合TCT在宮頸癌篩查中的應(yīng)用

臧元怡

(江蘇省無錫市婦幼保健院，江蘇 無錫 214002)

目的 評價高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)檢測聯(lián)合宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)在宮頸癌和癌前病變篩查中的應(yīng)用價值。方法 對2 140例門診宮頸標(biāo)本同時行HR-HPV檢測和TCT檢查，以陰道鏡活檢病理組織學(xué)結(jié)果作為確診金標(biāo)準(zhǔn)，對檢測結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 TCT診斷陽性率32.29%，CIN Ⅰ～Ⅲ級及SCC組TCT陽性率均顯著高于正?；蜓装Y組(P<0.01)。 CIN Ⅰ～Ⅲ級及SCC組HR-HPV多重感染均顯著高于正常或炎癥組(P<0.05)，且CIN Ⅰ～Ⅲ級及SCC組HR-HPV感染與正?；蜓装Y組比較HR-HPV檢出陽性率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.01)。HR-HPV DNA檢測與TCT兩種方法聯(lián)合檢測靈敏度(95.64%)，正確診斷指數(shù)(0.72)、陽性預(yù)測值(43.07%)及陰性預(yù)測值(98.75%)與單獨檢查比較均有不同程度的提高(P均<0.05)。結(jié)論 HR-HPV感染是宮頸癌的危險因素，TCT和HR-HPV DNA檢測是目前常用的篩查方法，HR-HPV檢測聯(lián)合TCT對宮頸癌篩查，對病情、臨床處理、患者顧慮和臨床治療等都具有重要的意義。

人乳頭瘤病毒；液基細(xì)胞學(xué)；宮頸癌；癌前病變篩查

子宮頸癌是婦科常見惡性腫瘤之一，目前宮頸癌前病變的篩查仍是降低宮頸癌發(fā)病率的關(guān)鍵。研究表明，人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染，尤其高危型HPV(HR-HPV)感染是導(dǎo)致宮頸癌及其癌前病變的重要因素[1]。近年隨著液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(TCT)和HPV檢測技術(shù)的成熟和推廣，TCT和HR-HPV檢測對提高宮頸癌的早期診斷率發(fā)揮了重要作用，并逐漸成為該病必不可少的篩查方法[2-3]。本研究采用TCT、HR-HPV和電子陰道鏡對我院婦保門診2 140例患者進(jìn)行檢查并分析結(jié)果，以探討TCT聯(lián)合高危HPV檢測在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價值。

1 臨床資料

1.1一般資料 選擇我院婦保門診就診的2 140例婦科患者，年齡25～57(31.2±6.2)歲；其中肉眼可見宮頸糜爛(宮頸上皮異位)者190例，均出現(xiàn)外陰瘙癢、分泌物增多或接觸性出血。患者均有性生活史，首次接受篩查，知情同意，排除伴有急性生殖道炎癥，宮頸錐切與子宮切除病史及盆腔放射治療史患者。

1.2 方法 對所有患者同時行TCT 和HR-HPV檢測，對檢查結(jié)果陽性的病例均通過電子陰道鏡下行病理活檢，以宮頸病理學(xué)所得到的診斷結(jié)果為判別標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.1 宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)

受檢者在檢查前24 h內(nèi)禁止性生活、陰道沖洗和陰道內(nèi)用藥。采用美國新柏氏Thinprep 2000液基細(xì)胞學(xué)制片檢查技術(shù)(TCT薄層法)，依照TBS細(xì)胞學(xué)分級系統(tǒng)分為無上皮內(nèi)病變或惡性病變(NILM)，無明確診斷意義的不典型鱗狀細(xì)胞(ASCUS)，不能排除高級別鱗狀上皮內(nèi)病變不典型鱗狀細(xì)胞(ASCUS-H)[4]，低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)和高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)，鱗狀細(xì)胞癌(SCC)，腺上皮不正常包括不典型腺上皮細(xì)胞(AGC)和腺癌(AC)[5]。TCT診斷為無明確診斷意義的不典型鱗狀細(xì)胞(ASCUS)及以上者為陽性，宮頸高度病變標(biāo)準(zhǔn)為LSIL及以上[6]。根據(jù)TBS系統(tǒng)，LSIL包括HPV感染引起的細(xì)胞病理改變和宮頸上皮內(nèi)瘤變1級(CIN Ⅰ)，HSIL包括CIN Ⅱ級和CIN Ⅲ級[7]。

1.2.2 高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV DNA)檢測

標(biāo)本采集均采用一次性取樣器，采用HPV DNAⅡ代雜交捕獲法試驗(HC-2) 檢測13種HR-HPV DNA(16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68)。依據(jù)標(biāo)本的熒光光度值與陽性定標(biāo)的比值判定結(jié)果，HPV-DNA≥1.0 pg/mL定為檢測陽性[8]。擴(kuò)增目的基因片段，結(jié)合基因芯片對HPV進(jìn)行分型檢測，樣品廣譜擴(kuò)增雜交顯色后，以各型別信號位置灰度值與背景灰度值差>4，判斷為陽性。

1.2.3 病理組織學(xué)檢查

針對TCT和HPV陽性者行陰道鏡活檢，未見明顯異常者常規(guī)行3，6，9及12多點活檢及宮頸管搔刮術(shù)，送組織病理學(xué)檢查。根據(jù)病變的嚴(yán)重程度劃分為慢性宮頸炎，宮頸濕疣，宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN Ⅰ級，CIN Ⅱ級，CIN Ⅲ級)，宮頸癌。CIN Ⅰ級及以上為陽性。

1.3 觀察項目

記錄HR-HPV、TCT及組織病理學(xué)結(jié)果，計算其診斷價值指標(biāo)。靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%；特異度=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%；正確診斷指數(shù)=(靈敏度 +特異度)-1；陰性預(yù)測值=真陰性/(真陰性+假陰性)×100%；陽性預(yù)測值= 真陽性/(真陽性+假陽性)×100%。聯(lián)合應(yīng)用時有任一種方法檢查結(jié)果為陽性即判斷為陽性，兩種方法均顯示陰性可判斷為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 13.00軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理和統(tǒng)計分析。計數(shù)資料行2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1TCT與組織病理學(xué)檢查結(jié)果

2140例受檢者組織病理學(xué)結(jié)果：正?；蜓装Y1 864例，CIN Ⅰ級132例，CIN Ⅱ級86例，CIN Ⅲ級45例，SCC 13例。TCT診斷結(jié)果：NILM 1 449例(67.71%)，ASCUS 348例(16.26%)，ASCUS-H 85例(3.97)，LSIL 169例(7.90%)，HSIL 76例(3.55%)，SCC細(xì)胞13例(0.61%)，TCT診斷陽性率32.29%。其中CIN Ⅰ～Ⅲ型及SCC組TCT陽性率均顯著高于正?；蜓装Y組(P<0.01)。見表1。

2.2 HR-HPV檢測與組織病理學(xué)檢查結(jié)果 2140例受檢者HR-HPV檢測單一型HPV感染404例(18.88%)，HR-HPV多重感染262例(12.24%)，陽性率31.12%。CIN Ⅰ～Ⅲ級及SCC組的高危型HPV感染均顯著高于正?；蜓装Y組(P<0.05)，并且CIN Ⅰ～Ⅲ級及SCC組HR-HPV多重感染與正?；蜓装Y組HR-HPV檢出陽性率比較(P均<0.01)。見表2。

表1 組織病理學(xué)檢查結(jié)果與TCT檢測結(jié)果比較 例(%)

注：①與正常或炎癥組比較，P<0.01。

2.3 HR-HPV DNA檢測聯(lián)合TCT對宮頸高度病變的診斷價值 HR-HPV DNA檢測聯(lián)合TCT敏感度、正確診斷指數(shù)、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值與單獨檢查比較均有顯著提高(P均<0.05)。見表3。

3 討 論

宮頸癌為女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，發(fā)病率僅次于乳腺癌，HR-HPV感染是其根本性致病因子。宮頸癌的發(fā)病、發(fā)展過程長，從CIN發(fā)展到最終的宮頸癌需要10～15年[9]，若能在早期階段得到治療，就能預(yù)防宮頸癌的發(fā)生，經(jīng)早期診斷、早期治療，其5年治愈率為80%～90%[10]。但是由于宮頸癌早期癥狀特異性低，患者容易忽略，因此通過宮頸癌篩查提早發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞就顯得尤為重要。目前采用TCT或HPV檢測等方法篩查宮頸癌，以便更早準(zhǔn)確診斷和及時治療，明顯降低宮頸癌的發(fā)生率及病死率。臨床上應(yīng)用較為常用的宮頸癌篩查方法為TCT及HR-HPV DNA檢查。

表2 組織病理學(xué)檢查與HR-HPV檢測結(jié)果比較 例(%)

注：①與正?；蜓装Y組比較，P<0.01；②與正?；蜓装Y組比較，P<0.05。

表3 HR-HPV DNA檢測、TCT及聯(lián)合對宮頸高度病變的診斷價值比較

注：①與HR-HPV+TCT比較，P<0.05。

美國FDA認(rèn)為TCT檢測具有較高敏感度和特異性，其改善了細(xì)胞學(xué)制片質(zhì)量，提高了LSIL、HSIL的檢出率，主要與其標(biāo)本的采集、玻片的制備過程有關(guān)，同時可發(fā)現(xiàn)部分癌前病變和微生物感染。與HR-HPV DNA檢測比較具有較好的敏感度與正確診斷指數(shù)。一般來說TCT診斷與組織病理學(xué)檢查診斷宮頸病變程度有相當(dāng)好的一致性，并隨著細(xì)胞學(xué)病變程度的增高而增高。本資料中TCT與病理組織結(jié)果對比，CIN Ⅰ～Ⅲ級及SCC病變具有較高陽性率，可見細(xì)胞學(xué)級別越高，TCT篩查假陽性率越低，篩查意義越大。但由于TCT檢查受制片質(zhì)量和閱片者技術(shù)等限制，也會出現(xiàn)一定程度的假陽性，ASCUS患者比較明顯，這類涂片多為血液多、黏液多的標(biāo)本，染色過深或鱗狀細(xì)胞數(shù)量少，少數(shù)為用藥期間細(xì)胞學(xué)改變。所以TCT取樣需注意：盡量錯過經(jīng)期，取材前24 h內(nèi)不用藥、不沖洗、不過性生活、不做婦科檢查，不用潤滑劑(潤滑劑會影響標(biāo)本的后期制備效果)；妊娠期婦女應(yīng)在妊娠中期取樣；接受激素替代治療不影響篩查；分泌物較多先用棉簽輕輕擦拭干凈；取材時宮頸明顯出血，停止；3個月內(nèi)不重復(fù)取材，防止假陰性。 由于TCT檢查會出現(xiàn)一定的假陽性率，為了提高篩查的準(zhǔn)確性，減少有創(chuàng)的陰道鏡病理檢測，有必要將HPV列入宮頸防癌的篩查工作中。HR-HPV持續(xù)感染是宮頸癌的危險因素，是病變演變?yōu)閷m頸癌的必要條件，同時HPV檢測也可分流ASCUS患者。HC2是目前唯一被FDA批準(zhǔn)的宮頸癌篩查HPV檢測法，具有敏感度高、陰性預(yù)測值高的特點。本組資料中HR-HPV DNA檢查結(jié)果大于CIN Ⅰ級患者中，HR-HPV檢查陽性率均高于正常及炎癥組，并隨CIN Ⅰ級到SCC各階段，HR-HPV感染由單一型別感染趨向多重感染。

TCT與HR-HPV檢測都能發(fā)現(xiàn)早期宮頸病變，其中TCT只能篩查出已發(fā)生細(xì)胞學(xué)改變的宮頸病變，不能篩查高風(fēng)險女性，HR-HPV只能明確HR-HPV感染，卻無法判斷是否存在宮頸病變。國內(nèi)研究表明HR-HPV檢測對篩查CIN Ⅰ級、CIN Ⅱ級和早期宮頸癌敏感度較高，能夠把高風(fēng)險人群篩查出來，縮短隨訪時間，全面預(yù)防宮頸惡性病變的發(fā)生。因此主張在對宮頸病變的篩查中，應(yīng)同時進(jìn)行HPV和TCT檢測[11]。

TCT和HR-HPV聯(lián)合檢測提高了篩查靈敏度，本研究中，TCT的靈敏度明顯低于聯(lián)合檢測，提示單純HPV感染引起的早期CIN并不一定伴隨細(xì)胞學(xué)的改變；且TCT的陰性預(yù)測值明顯低于聯(lián)合檢測，漏診率極低。對于TCT與HR-HPV均陽性者，立即行陰道鏡下病理組織學(xué)檢查，可早發(fā)現(xiàn)，早治療；TCT陽性而HR-HPV陰性者，應(yīng)定期隨訪，或直接行病理組織學(xué)檢查，以病理組織學(xué)為金標(biāo)準(zhǔn)，排除假陽性。

綜上所述，宮頸癌及宮頸癌前病變是可以預(yù)防、可以早期發(fā)現(xiàn)并治療的，所以進(jìn)行篩查依然很重要。高危型HPV感染是宮頸癌的危險因素，TCT和HR-HPV DNA檢測是目前常用的篩查方法，聯(lián)合高危型HPV檢測與TCT對宮頸癌的篩查，對病情、臨床處理、患者顧慮和臨床治療等都具有重要的意義。

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10.3969/j.issn.1008-8849.2015.11.015

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1008-8849(2015)11-1184-03

2014-06-05