正交試驗優(yōu)化伸筋草袋泡劑制備工藝

陳華張志勇黃偉芹葉建新楊小瑩

（1新興縣人民醫(yī)院，廣東 云浮527400；2廣東省新興中藥學校）

正交試驗優(yōu)化伸筋草袋泡劑制備工藝

陳華1張志勇2黃偉芹1葉建新2楊小瑩2

（1新興縣人民醫(yī)院，廣東 云浮527400；2廣東省新興中藥學校）

目的：對伸筋草袋泡劑制備工藝進行優(yōu)化。方法：以加醇量、乙醇濃度及藥粉與清膏質(zhì)量比3個因素，伸筋草袋泡劑色澤、均勻性、溶化性、口感與總生物堿的溶出百分率為考察指標，采用正交試驗，優(yōu)化伸筋草袋泡劑制備工藝。結(jié)果：最佳制備工藝為伸筋草粗粉加10倍量30%乙醇，回流提取3次，藥粉與濃縮清膏按質(zhì)量比2.5倍混合制粒裝袋。結(jié)論：該提取工藝穩(wěn)定、合理、可行。

伸筋草袋泡劑；生物堿；醇提工藝；正交試驗

伸筋草制備成半生型袋泡劑較湯劑更方便服用，有一定的特色和優(yōu)勢[1]，但其有效成分復雜，可溶性成分溶出低、口感與溶化性差[2-4]，為克服這些缺點，本文采用正交試驗設計，以總生物堿的溶出百分率與綜合評價為考查指標，對伸筋草袋泡劑制備工藝進行優(yōu)化，提高有效成分溶出率。

1 儀器與材料

UV-2550型紫外分光光度計（日本島津公司），766B-2遠紅外線輻射干燥箱（上海浦東榮豐科學儀器有限公司），SF100型多功能粉碎機（上海凱旋中藥機械制造有限公司），8411型電動振篩機（浙江杭州三思儀器有限公司），DCH-160自動包裝機 （天津市永創(chuàng)偉業(yè)包裝機械有限公司），HH-S11-4-Z電熱恒溫水浴箱（上海醫(yī)用恒溫設備廠），F(xiàn)A1004電子天平（上海舜宇恒平科學儀器有限公司）。伸筋草藥材購于廣州清平藥材市場，經(jīng)中藥學高級實驗師鑒定為正品，并符合《中國藥典》2010年版一部規(guī)定[5]。蔗糖粉、乙醇為分析純，水為自制蒸餾水。

2 方法

2.1 制備工藝的優(yōu)化設計

2.1.1 因素水平的確定根據(jù)相關(guān)文獻[6-10]，影響伸筋草袋泡劑質(zhì)量的因素有乙醇濃度、加醇量、提取次數(shù)和時間、藥粉與清膏質(zhì)量比等，本研究結(jié)合預試與前期單因素考察情況，選取3個主要因素，采用3因素3水平正交設計進行了優(yōu)化，將單因素考察的最佳參數(shù)定為水平2，比其低與高者分別作為1與3水平，各因素水平見表1。

表1 正交試驗因素水平

2.1.2 袋泡劑的制備將伸筋草藥材凈選、剔除雜質(zhì)，于60℃下干燥烘干[5]，在多功能粉碎機上粉碎，并用電動振篩機過 2號篩（10～ 24目）[1]分等，得到粒度均勻粗粉。取伸筋草粗粉各50 g，共9份，按正交試驗表1選擇的條件進行9組試驗，藥材加乙醇加熱提取3次[6]，分別為1.5，1，0.5 h，合并提取液，過濾，濃縮制成清膏。將上述藥材粉碎通過2號篩，伸筋草粗粉作為吸汁顆粒，與清膏、適量蔗糖粉按質(zhì)量比例混合均勻，制軟材，手工制粒，60℃以下烘干，整粒。將上述顆粒以無菌濾紙袋在袋泡茶自動包裝機上包裝，參考《中國藥典》2010年版用量用法[5]，制成每小包 5克袋泡劑，并做好相應標記，密封于塑料袋中備用。

2.2 綜合評價

綜合評價內(nèi)容包括：①色澤（滿分10分，考察每袋顆粒物料混合是否均勻或顏色一致性，評分越高越好）；②均勻性（考察每袋的質(zhì)量差異，質(zhì)量差異小或顆粒大小均勻無結(jié)塊評分高）；③溶化性（考察每袋顆粒物料溶化速度與程度）；④口感（考察每袋顆粒甜度，入口甜度適宜細膩評分高）。綜合評分結(jié)果見表2。

表2 綜合評分結(jié)果

2.3 溶出度的測定

取按正交試驗表1選擇條件制備的伸筋草半生藥型袋泡劑9份，進行9組試驗，分別置于500m L燒杯中，各加90℃蒸餾水300 m L，分別保溫浸泡20 m in；過濾，取樣1 m L，以苦參生物堿為對照，采用酸性染料比色法測定溶出液中總生物堿的含量，20 m in時總生物堿的溶出百分率：

F20min=溶出液中總生物堿的含量/投料藥材中生物堿理論含量 ×100%。

結(jié)果見表3。

2.4 試驗結(jié)果分析

為使袋泡劑有良好溶化性與口感，并能溶出完全，以袋泡劑的綜合評分與F20min作為優(yōu)化考察指標，正交試驗設計數(shù)據(jù)及結(jié)果見表3～ 4。

由表3～4可以看出，因素A對綜合評分結(jié)果的影響有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），因素A，C對綜合評分、F20min結(jié)果的影響有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；因素B對結(jié)果的影響無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。以盡可能高的綜合評分與F20min為優(yōu)化篩選目標，多重比較同時兼顧生產(chǎn)成本，綜合得出最佳工藝條件為A2B1C2，即藥材粗粉加10倍量30%乙醇，提取3次，藥粉與濃縮清膏按質(zhì)量比2.5倍混合，制粒裝袋。

表3 正交試驗設計及結(jié)果

表4 方差分析

2.5制備工藝驗證

按優(yōu)選出的工藝條件A2B1C2，重復進行3批樣品試驗，進一步驗證次優(yōu)化工藝合理性，結(jié)果見表5。驗證結(jié)果表明，3批樣品按優(yōu)選工藝試驗，F(xiàn)20min都接近正交試驗中的最大值，綜合評價好，表明此優(yōu)化工藝合理、穩(wěn)定、可行，可作為批量生產(chǎn)的工藝參數(shù)。

表5 驗證試驗

3 討論

3.1試驗中，采用90℃蒸餾水300 m L，分別浸泡20 m in，是為了更符合人們使用袋泡劑的實際情況。民間群眾風濕關(guān)節(jié)腫痛等癥用藥時，將伸筋草制劑置于杯內(nèi)，用沸水 150～ 200 m L，加蓋浸泡10～ 20 m in左右即可飲用，每次用1～ 2袋，每日2～ 3次。伸筋草是常用的抗風濕類中藥，對筋脈拘急、關(guān)節(jié)屈曲、類風濕關(guān)節(jié)腫痛等療效確切，且袋泡劑價格低廉、使用簡單方便。

3.2伸筋草藥材中總生物堿的提取也可采用酸水提取法[7]和超臨界萃取法[9]，但酸水提取法工藝pH值過低，影響口感，提取工藝復雜、時間長、提取率低，其工藝不適用于工業(yè)化大生產(chǎn)；超臨界萃取法對設備要求較高。故本試驗采用了工藝相對簡單、時間短、轉(zhuǎn)化率高的醇提法。

3.3伸筋草中含有石松堿、伸筋草堿等多種生物堿成分，由于無市售石松堿或伸筋草堿，故以與這2種生物堿結(jié)構(gòu)相近的苦參生物堿為對照，采用酸性染料比色法測定溶出液中生物堿的含量，以F20min粗略反應使用中總生物堿的溶出程度。

3.4如果考慮到糖尿病人服用，可采用甜菊苷、三氯蔗糖、阿斯巴甜或者蛋白糖代替糖粉進行試驗，或者制備成無蔗糖型顆粒裝袋。

3.5伸筋草袋泡劑繼承了其湯劑原有的吸收快、價格低廉、方便服用的優(yōu)勢，又能減少原藥材中揮發(fā)性成分及不耐熱物質(zhì)的散失、破壞，并具有較高浸出率與溶出速度，其體積小、便于運輸和攜帶，并改善了口感、易于分劑量，更適合民間群眾風濕關(guān)節(jié)腫痛等癥的長期飲用，其制備簡易，適宜批量生產(chǎn)。

[1] 張志勇，陳華，楊小瑩，等.伸筋草袋泡劑的制備方法研制[J].中國民族民間醫(yī)藥，2014，18（12）：5.

[2] 史利利，何永志.伸筋草石松三萜化學成分[J].中國實驗方劑學雜志，2012，18（9）：90-92.

[3] Wang XJ，Zhang GJ，Zhuang PY，et al.Lycojaponicumins A-C，Three alkaloids w ith an unprecedented skeleton from Lycopodi-um japonicum[J].Org Lett，2012，14（10）：2614-2617.

[4] 張志勇，陳華，楊小瑩，等.伸筋草及其制劑研究進展[J].中國藥師，2014，17（3）：474-477.

[5] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：165-166.

[6] 何凡，劉威，徐秋陽，等.伸筋草醇提工藝研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報，2011，13（7）：145-146.

[7] 何凡，劉威，徐秋陽，等.伸筋草總生物堿提取工藝[J].中國試驗方劑學雜志，2011，17（7）：25-27.

[8] 廖仰平，葉建新，區(qū)偉雄，等.田基黃袋泡劑的制作方法研究[J].中國民族民間醫(yī)藥，2012，10（20）：13-14.

[9] 潘利明，韓亮.伸筋草超臨界萃取物工藝參數(shù)優(yōu)化及藥效驗證[J].時珍國醫(yī)國藥，2007，18（8）：1944-1995.

[10] 林志云，潘利明.伸筋草超臨界提取精油的β-環(huán)糊精包合工藝研究[J].中藥材，2007，30（8）：1030-1031.

Preparation Technology of Common Clubmoss Straw Bag Bubble Agent Optim ized by Orthogonal Test

Chen Hua1，Zhang Zhiyong2，Huang Weiqin1，Ye Jianxin2，Yang Xiaoying2（1 The People’s Hospital of Xinxing County，Guangdong Yunfu 527400，China；2 Xinxing Traditional Chinese Medicine School of Guangdong Province）

Objective：To optim ize the preparation technology of common clubmoss straw bag bubble agent.M ethods：The orthogonal test was conduced to optim ize the preparation technology of common clubmoss bag bubble agent using three factors including the amount of alcohol，ethanol concentration and the mass ratio of powder and paste，and the follow ing indexes were used for investigation such as the colour and luster of common clubmoss straw bag bubble agent，color uniformity，melting，taste and dissolution percentage of total alkaloids.Results：As the optimal preparation process，10 times amount of 30%ethanol was added to common clubmoss herb coarse powder，circum fluence extracting for 3 times，2.5 times of mass ratio of powder and concentrated paste for mixing，granule making and packaging.Conclusion：The extraction process was stable，reasonable and feasible.

Common Clubmoss Bag Bubble Agent；Alkaloids；Alcohol Extraction Process；Orthogonal Test

10.3969/j.issn.1672-5433.2015.06.005

2015-03-03）

廣東省中醫(yī)藥局科研課題（20132066）

陳華，女，主管藥師。研究方向：藥劑學與臨床藥學。E-mail：46220732@qq.com

張志勇，男，高級講師。研究方向：藥劑學。通訊作者E-mail：zhiyong502@qq.com