2型糖尿病腎病患者血清VEGF、IL-6及TNF-α水平的檢測(cè)與意義

吳瓊皎

[摘要]目的 探討2型糖尿?。═2DM）患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和腫瘤壞死因子（TNF-α）水平的變化及其臨床意義。 方法 應(yīng)用放射免疫法對(duì)40例2型糖尿病腎病患者、36例2型糖尿病非腎病患者及38例健康人（健康對(duì)照組）進(jìn)行血清VEGF、IL-6及TNF-α水平的檢測(cè)。 結(jié)果 2型糖尿病腎病組血清VEGF、IL-6及TNF-α水平顯著高于健康對(duì)照組（P<0.01）及2型糖尿病非腎病組（P<0.01）。 結(jié)論 VEGF、IL-6及TNF-α是2型糖尿病腎病發(fā)生的重要炎癥反應(yīng)介質(zhì)，提示高水平的VEGF、 IL-6及TNF-α可能在T2DM及其腎病并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起到一定作用，檢測(cè)其水平變化可作為2型糖尿病腎病臨床診斷的參考依據(jù)。

[關(guān)鍵詞]2型糖尿病腎病；VEGF；IL-6；TNF-α

[中圖分類(lèi)號(hào)]R587.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B [文章編號(hào)]2095-0616（2014）20-136-03

Detection of the level and its significance of VEGF， IL 6 and TNF-α in patients with type 2 diabetic nephropathy

WU Qiongjiao

Department of Nephrology， Sanmenxia Central Hospital， Sanmenxia Central Hospital Affiliated to Henan University of Science and Technology， Sanmenxia 472000， China

[Abstract]Objective To study the detection of the level and its clinical significance of vascular endothelial growth factor（VEGF）. interleukin-6（IL-6） and tumor necrosis factor-a（TNF-α） in patients with type 2 diabetic nephropathy（DN）. Methods The levels of VEGF， IL-6and TNF-α in 40 patients with DN， 36 patients diagnosed simply type 2 diabetes mellitus（DM） and 38 healthy persons （healthy controls） were radioimmunologically examined. Results The level of VEGF， IL-6 and TNF-α in the DN group were markedly lower than those in the healthy group（P<0.01） and the simply type 2 DM group（P<0.01）. Conclusion The VEGF， IL-6 and TNF-α were important inflammatory mediators in the development of the DN， high levels of VEGF， IL-6 and TNF-α may play important roles in the occurrence and development of the type 2 diabetes mellitus and diabetic complications， detecting the level changes can be used as references for clinical diagnosis of type 2 diabetic nephropathy.

[Key words]Type 2 diabetic nephropathy； VEGF； IL-6； TNF-α

糖尿病腎?。╠iabetes nephropathy， DN）是糖尿病微血管病變的主要并發(fā)癥之一[1]。目前多認(rèn)為DN屬于一種以蛋白尿?yàn)榕R床特點(diǎn)的腎小球疾病，但其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確[2]。目前關(guān)于糖尿病及其并發(fā)癥發(fā)生、發(fā)展的炎癥學(xué)說(shuō)受到廣泛關(guān)注[3-4]。免疫功能的變化是其主要機(jī)制之一，VEGF是一種促血管生長(zhǎng)因子，可促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子分化、增生及腔管形成，增強(qiáng)血管通透性，維持血管穩(wěn)定[5]。IL-6是由機(jī)體單核-巨噬細(xì)胞等多種免疫參與細(xì)胞所產(chǎn)生的重要的生物活性細(xì)胞因子，TNF-α可以激活中性粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞，刺激其合成IL-1、IL-6、IL-8等炎性細(xì)胞因子，促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。本研究通過(guò)對(duì)三組患者檢測(cè)其體內(nèi)VEGF、IL-6及TNF-α水平變化，探討其在2型糖尿病發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本組所有患者均來(lái)自2013年2月～2014年2月我院腎內(nèi)科就診患者。糖尿病腎病組均為2型糖尿?、蟆羝诨颊撸?0例2型糖尿病腎病患者，其中男、女各20例，年齡38～75歲，平均（45.6±4.2）歲，2型糖尿病腎病患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)為：尿白蛋白排泄率（UAER）持續(xù)在20～199μg/min，或尿白蛋白排出量>300mg/h，相當(dāng)于尿蛋白總量>0.5g/24h，并且排除無(wú)其他病癥所致腎損傷者。糖尿病非腎病組：36例患者均為2型糖尿病患者，其中男19例，女17例，年齡39～73歲，平均（46.8±3.7）歲，尿白蛋白定量<30mg/24h，并且腎及其他器官無(wú)嚴(yán)重合并癥者。所有患者均符合1999年WHO提出的糖尿病診斷和分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)[6]。正常對(duì)照組38例，其中男、女各19例，年齡38～74歲，平均（46.1±4.8）歲，經(jīng)檢查為各項(xiàng)指標(biāo)均正常的健康者，且肝、腎功能正常，無(wú)糖尿病家族史。

1.2 方法

采集標(biāo)本：觀察組和對(duì)照組于清晨空腹采集血液6mL，血液進(jìn)行離心處理，血清置于-20℃冰箱保存待測(cè)，測(cè)定前于28℃室溫復(fù)溫10min，再于5℃4000r/min離心5min，取上清液進(jìn)行測(cè)定。VEGF、IL-6和TNF-α檢測(cè)免疫試劑盒（上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司），BIO-RAD xMark全自動(dòng)酶標(biāo)儀、前自動(dòng)生化分析儀（拜耳ADVIA-1650型）等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，各組數(shù)據(jù)均以（x±s）表示，組間比較采用ANOVA方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

各組間血清VEGF、IL-6及TNF-α水平。見(jiàn)表1。

三組VEGF、IL-6和TNF-α經(jīng)方差分析比較，F(xiàn)值分別為34.928、50.685、110.231，P值均為0.000（P<0.01），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且三組之間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

近年來(lái)，免疫調(diào)節(jié)因子在糖尿病尤其是糖尿病并發(fā)癥發(fā)病機(jī)制中所起到的作用正逐漸被人們所重視[5]。正常腎組織表達(dá)的某些因子對(duì)于維持腎臟的生理功能具有重要的作用和意義。病理情況下，白三烯、IL-6、TNF-α等炎癥因子的釋放過(guò)度，造成了腎小球病理變化加劇，其組織功能和結(jié)構(gòu)也發(fā)生了異常變化[7]。外在主要病理表現(xiàn)為誘發(fā)和加重腎小球增生和肥大，出現(xiàn)細(xì)胞脫顆?，F(xiàn)象，基質(zhì)蛋白沉積，系膜區(qū)擴(kuò)展，基膜加厚，進(jìn)而呈現(xiàn)糖尿病腎病典型的腎小球硬化征。通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病腎病患者VEGF、IL-6、TNF-α水平顯著高于正常人（P<0.01），從而確定2型糖尿病腎病患者出現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的紊亂，炎癥細(xì)胞因子可能與腎小球病理變化存在相關(guān)性。

糖尿病患者在高糖狀態(tài)下體內(nèi)代謝出現(xiàn)功能性紊亂，導(dǎo)致細(xì)胞炎癥因子分泌失調(diào)，引起局部組織的缺血和缺氧，刺激了巨噬細(xì)胞、脂肪細(xì)胞以及血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放大量細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子通過(guò)與相應(yīng)受體相結(jié)合，構(gòu)成了信號(hào)傳導(dǎo)通路，引起了胰島素抵抗，從而間接的參與了2型糖尿病的發(fā)生與發(fā)展[8]。

VEGF可使得毛細(xì)血管毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、分裂，刺激內(nèi)皮細(xì)胞釋放纖溶酶原和膠原酶等血管活性物質(zhì)，同時(shí)，VEGF可以增加血管通透性，促進(jìn)一氧化氮、血管內(nèi)皮素等的產(chǎn)生，薛菲等[5]認(rèn)為VEGF與尿白蛋白的排泄率呈正相關(guān)，表明了高水平VEGF會(huì)有道蛋白尿的產(chǎn)生，促進(jìn)腎臟組織損傷。且由本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，2型糖尿病患者血清VEGF水平顯著高于健康人，并且合并腎病組患者較非腎病組患者血清VEGF水平也顯著升高，與文獻(xiàn)[5，9-10]報(bào)道一致。最近研究顯示，在代謝紊亂與血流動(dòng)力學(xué)機(jī)制的基礎(chǔ)上，炎癥機(jī)制是糖尿病腎病發(fā)生、持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵因素[11-12]，免疫調(diào)節(jié)因子在糖尿病尤其是糖尿病并發(fā)癥發(fā)病機(jī)制中所起的作用也逐漸為人們所重視[13-14]。IL-6主要是由巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，分子量21～26kD。IL-6與其受體相結(jié)合有促使分化成熟的B細(xì)胞分泌抗體，促進(jìn)TC、TD細(xì)胞增殖分化等生物學(xué)效應(yīng)。IL-6主要通過(guò)降低胰島素受體和IRS-1的蛋白表達(dá)，通過(guò)細(xì)胞因子信號(hào)抑制因子（SOCS）抑制胰島素信號(hào)傳導(dǎo)，同時(shí)也可抑制瘦素信號(hào)傳導(dǎo)，從而產(chǎn)生IR和瘦素抵抗。本研究結(jié)果顯示2型糖尿病腎病患者IL-6水平顯著高于其余兩組（P<0.01），這表明IL-6在腎病的發(fā)病過(guò)程中的作用。TNF-α可以通過(guò)肝細(xì)胞膜上的TNF-α受體影響肝臟脂質(zhì)代謝，進(jìn)而降低胰島素受體絡(luò)氨酸激酶的活性，從而加重脂肪細(xì)胞分泌瘦素引起的胰島素抵抗。正常情況下，TNF-α具有抗腫瘤、抗感染的作用，但如果持續(xù)大量釋放或者與其他免疫調(diào)節(jié)因子的關(guān)系失調(diào)，則會(huì)引起機(jī)體的發(fā)熱等而參與2型糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制。本研究結(jié)果表明，2型糖尿病腎病患者血清TNF-α水平顯著的高于其余兩組水平（P<0.01）。其原因可能與TNF-α引起腎臟固有細(xì)胞增殖，進(jìn)而刺激其表達(dá)粘附分子和過(guò)多的細(xì)胞外基質(zhì)和其他炎癥介質(zhì)直接導(dǎo)致對(duì)腎臟系膜細(xì)胞的損傷。

綜上所述，血清中VEGF、IL-6、TNF-α水平可反映患者2型糖尿病腎病的嚴(yán)重程度，而VEGF、IL-6、TNF-α對(duì)于2型糖尿病腎病的發(fā)展和預(yù)后的評(píng)估有著極為重要的參考意義，同時(shí)炎癥因子釋放的過(guò)度釋放和浸潤(rùn)可能是2型糖尿病腎病發(fā)生與發(fā)展的重要機(jī)制，臨床檢測(cè)以上細(xì)胞因子水平對(duì)于了解患者病情，指導(dǎo)用藥和觀察預(yù)后具有十分重要的參考價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1]許曼音，陸廣華，陳名道，等.糖尿病學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2003：423-434.

[2]Dronavalli S，Duka I，Bakris GL. The pathogenesis of diabetic nephropathy[J].Nat Clint Pact Endocrinal Metal，2008，4（8）：444-452.

[3]Navarro JF，Mora C. Diabetes inflammation，proinflammatory cytokines，and diabetic nephropathy[J]. Sci World J，2006，6（10）：908-917.

[4]Ray A，Heisman MV，Amsma JT，et al. The role of inflammation on atherosclerosis，intermediate and clinical cardiovascular endpoints in type 2 diabetes mellitus[J].Tur J Intern Med，2009，20（3）：253-260.

[5]薛菲，劉惠蘭，王銀娜.血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子水平及其基因多態(tài)性與2型糖尿病腎病的關(guān)系[J].中華腎臟雜志，2007，23（12）：813-814.

[6]陸再英，鐘南山，謝毅，等.內(nèi)科學(xué)[M].第7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：778-780.

[7]秦文敬.糖尿病腎病患者與相關(guān)細(xì)胞因子水平的變化[J].免疫學(xué)雜志，2005，18（3）：190-191.

[8]JIANG L，LV HB. Recent progress in the investigation of cy-token and diabetes retinopathy[J].Chinese Ophthalmic Research，2009，27（12）：1165-1168.

[9]閆朝春.ET，VEGF，IL-6，TNF-α在DM2中作用機(jī)制的臨床分析[J].放射免疫學(xué)雜志，2010，23（2）：148-150.

[10]張翠，田陳，郭煥，等.糖尿病大鼠腎小管VEGF表達(dá)的動(dòng)態(tài)觀察及其與NagⅡ，PKC，ERK關(guān)系的研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2008，18（3）：313-317.

[11]Yamagishi S，F(xiàn)ukami K，Ueda S et a1.Molecular mechanisms of diabetic nephrophathy and its therapeutic intervention[J]. Curr Drug Targets，2007，8（8）：952-959.

[12]Fornoni A，IjazA，Tejada T，et a1.Role of inflammation in diabetic nephropathy[J]. Curt Diabetes Rev，2008，4（1）：10-17.

[13]王勇軍，黃干.2型糖尿病腎病患者血清白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑，白細(xì)胞介素-1β和超敏C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2008，18（7）：972-974.

[14]楊華，曾娟花.血清TNF與2型糖尿病腎病及其中醫(yī)證型關(guān)系的臨床研究[J].西部中醫(yī)藥，2014，27（1）：11-13.

（收稿日期：2014-07-14）