CD38基因缺失對小鼠缺血再灌注損傷心肌的保護(hù)作用

管小卉，洪　軒，趙　寧，劉曉紅，肖云飛，陳廷濤，韓小建，鄧柯玉，辛洪波(南昌大學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院，江西南昌330031)

CD38基因缺失對小鼠缺血再灌注損傷心肌的保護(hù)作用

管小卉，洪軒，趙寧，劉曉紅，肖云飛，陳廷濤，韓小建，鄧柯玉，辛洪波△
(南昌大學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院，江西南昌330031)

目的:探討CD38基因缺失對小鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法:利用CD38基因敲除及野生型小鼠進(jìn)行在體小鼠心臟左前降支結(jié)扎，缺血30 min后復(fù)灌24 h取心臟，1 mm切片進(jìn)行TTC染色確定其梗死面積差異。利用shRNA干擾系統(tǒng)構(gòu)建的CD38穩(wěn)定干擾H9c2細(xì)胞系模擬體外缺氧復(fù)氧損傷。用CCK-8法確定最佳缺氧復(fù)氧損傷時間，再利用流式細(xì)胞術(shù)對缺氧復(fù)氧后氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的活性氧含量進(jìn)行檢測，利用Hoechst 33258染色法檢測損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。分離提取細(xì)胞核漿蛋白，Western blot檢測缺氧復(fù)氧后FOXO3的核定位及抗氧化蛋白catalase、凋亡信號通路相關(guān)蛋白P53-Bax表達(dá)。結(jié)果: CD38基因缺失可以減少小鼠心肌缺血再灌注損傷中心肌梗死面積。細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型中，缺4小時復(fù)氧不同時間(3 h，6 h，10 h，24 h)誘導(dǎo)細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷模型中，CD38干擾組細(xì)胞活性均明顯高于對照組。損傷誘導(dǎo)后CD38干擾組H9c2細(xì)胞中氧自由基含量及其誘導(dǎo)的凋亡均明顯低于對照組(P＜0. 05)。Western blot檢測發(fā)現(xiàn)缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)細(xì)胞損傷后，CD38干擾組FOXO3明顯入核，其下游蛋白抗氧化蛋白catalase表達(dá)也明顯增加，抗凋亡蛋白P53乙?；捌湎掠未俚蛲龅鞍譈ax明顯增加。結(jié)論: CD38基因缺失可以通過FOXO3-catalase介導(dǎo)的抗氧化應(yīng)激信號通路和P53-Bax介導(dǎo)的抗凋亡信號通路減輕小鼠心肌缺血再灌注損傷。

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